Научная статья на тему 'Использование современного аналитического оборудования в микробиологических исследованиях'

Использование современного аналитического оборудования в микробиологических исследованиях Текст научной статьи по специальности «Науки о здоровье»

CC BY
264
38
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
АВТОМАТИЗИРОВАННАЯ ЭКСПРЕСС-СИСТЕМА / AUTOMATED EXPRESS SYSTEM / ИМПЕДАНСНЫЙ МЕТОД / IMPEDANCE METHOD / МУЛЬТИПАРАМЕТРИЧЕСКИЙ АВТОМАТИЧЕСКИЙ ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗАТОР / MULTIPARAMETER AUTOMATED IMMUNOASSAY ANALYZER / ЭЛЕКТРИЧЕСКИЙ ИМПЕДАНС / ELECTRIC IMPEDANCE / СЕЛЕКТИВНЫЕ СРЕДЫ / SELECTIVE ENVIRONMENT / МЕТАБОЛИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ МИКРООРГАНИЗМОВ / THE METABOLIC ACTIVITY OF MICROORGANISMS / ТВЕРДОФАЗНЫЙ ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ МЕТОД / ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT METHOD / МИКРОБНАЯ КОНТАМИНАЦИЯ / MICROBIAL CONTAMINATION / ЭКСПРЕССМЕТОД / EXPRESS METHOD / РОТАВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ / ROTAVIRUS INFECTION

Аннотация научной статьи по наукам о здоровье, автор научной работы — Пруссова Валентина Николаевна, Столбун Ольга Александровна, Кива Марина Сергеевна, Клименко Василий Викторович

В статье описан опыт микробиологических исследований продовольственного сырья, пищевых продуктов, биологического материала от людей с использованием современного аналитического оборудования и экспресс-методов в микробиологической лаборатории испытательного лабораторного центра (ИЛЦ) филиала. При написании работы использованы результаты лабораторных исследований, выполненные за 2010-2013 гг. Отражены преимущества исследований с использованием приборов: высокая чувствительность определения показателей, быстрота (в течение нескольких часов), надежность результатов для большого числа одновременно исследуемых образцов. Высокая достоверность результатов, возможность быстрого и своевременного проведения комплекса санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий преимущества работы на аналитическом оборудовании. Приведены результаты работы на вспышке пищевого характера с расшифровкой методом фермент-связанного флуоресцентного анализа.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по наукам о здоровье , автор научной работы — Пруссова Валентина Николаевна, Столбун Ольга Александровна, Кива Марина Сергеевна, Клименко Василий Викторович

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

The use of modern analytical equipment in microbiological research

The article describes the experience of the microbiological testing of food raw materials, food, biological material from people using modern analytical equipment and rapid methods in Microbiology laboratory test laboratory center (DIC) branch. When writing a work used the results of laboratory tests performed during 2010-2013 Reflected the benefits of research using instruments: high sensitivity indicators, quick (within a few hours), the reliability of the results for a large number of samples simultaneously. High reliability of the results, the possibility of rapid and timely implementation of complex sanitary-anti-epidemic (preventive) measures the advantages of working on the analytical equipment. The results of the work on the outbreak of food in nature with decoding method enzyme-linked fluorescent assay.

Текст научной работы на тему «Использование современного аналитического оборудования в микробиологических исследованиях»

6. Радченко Л.П., Захарова Г.А., Бурухина Е.Г. и со- щевого энцефалита в Приморском крае // Здоровье. авт. Эколого-эпидемиологическая характеристика кле- Медицинская экология. Наука. 2009. № 3(38). С. 79-81.

Nesterova Yu.v., Radchenko L.P., Buruhina E.G.

the epidemiological situation of tick-borne infections in primorsky region

FBuz «center of hygiene and epidemiology in the Primorsky region, vladivostok.

The actual problem in the Primorsky region in 2013. continue to be the infection, transmitted through tick bites. In 2013. officially recorded as in previous years, tick-borne encephalitis (TBE), Lyme disease (tick-borne borreliosis and tick-borne typhus (rickettsiosis). In the region proved Ixodes ticks as traditionally identified pathogens (tickborne encephalitis and tick-borne borreliosis), and new for the region pathogens MACH (monocytic arlais person) and GAC (the granulocytic anaplasmosis human), and mixed infection of ticks in natural and anthropurgic foci. For the first time on the territory of Primorsky Krai registered monocytic arlais person.

Keywords: tick-borne viral encephalitis tick-borne borreliosis (Lyme disease), tick-borne typhus fever (tickborne rickettsiosis), monocytic arlais person, Primorsky territory, Vladivostok.

Citation: Nesterova Yu.V., Radchenko L.P., Buruhina E.G. The epidemiological situation of tick-borne infections in Primorsky krai. Health. Medical ecology. Science. 2014; 4(58): 163-169. URL: https://yadi.sk/i/UE-LOGI1ZKuwt

Сведения об авторах

Нестерова Юлия Вячеславовна - и.о. заведующей отделением особо опасных и паразитарных заболеваний ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологи в Приморском крае»; тел.:8(423)265-00-48; e-mail: [email protected];

Радченко Людмила Петровна - врач-эпидемиолог отделения особо опасных и паразитарных заболеваний ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологи в Приморском крае»; тел.:8(423)265-00-48; e-mail: [email protected];

Бурухина Елена Георгиевна - начальник группы эпизоотологических исследований ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологи в Приморском крае»; тел.:8(423)265-00-47; e-mail: [email protected].

© Коллектив авторов, 2014 г УДК 551.481.1

В.Н. Пруссова, О.А. Столбун, М.С. Кива, В.В. Клименко

использование современного аналитического оборудования в микробиологических исследованиях

Филиал Федерального Бюджетного Учреждения Здравоохранения «Центр гигиены и эпидемиологии в Приморском крае в г. Уссурийск».

В статье описан опыт микробиологических исследований продовольственного сырья, пищевых продуктов, биологического материала от людей с использованием современного аналитического оборудования и экспресс-методик в микробиологической лаборатории испытательного лабораторного центра (ИЛЦ) филиала. При написании работы использованы результаты лабораторных исследований, выполненные за 2010-2013 гг. Отражены преимущества исследований с использованием приборов: высокая чувствительность определения показателей, быстрота (в течение нескольких часов), надежность результатов для большого числа одновременно исследуемых образцов. Высокая достоверность результатов, возможность быстрого и своевременного проведения комплекса санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий - преимущества работы на аналитическом оборудовании. Приведены результаты работы на вспышке пищевого характера с расшифровкой методом фермент-связанного флуоресцентного анализа.

Ключевые слова: автоматизированная экспресс-система, импедансный метод, мультипараметрический автоматический иммуноферментный анализатор, электрический импеданс, селективные среды, метаболическая активность микроорганизмов, твердофазный иммуноферментный метод, микробная контаминация, экспресс- метод, ротавирусная инфекция.

Цитировать: Пруссова В.Н., Столбун О.А., Кива М.С., Клименко В.В. Использование современного аналитического оборудования в микробиологических исследованиях // Здоровье. Медицинская экология. Наука. 2014. №4(58). С. 169-173. URL: https://yadi.sk/i7Y1P9J7j2ZKuwv

В рамках «Программы оптимизации и устойчивого функционирования Испытательного лабораторного центра филиала» реализован курс на техническое переоснащение микробиологической лаборатории. По оснащенности современным оборудованием лаборатория занимает одно из ведущих мест среди филиалов, расширена номенклатура исследований факторов среды обитания, внедрены иммуноферментный, импедансный методы, метод фермент-связанного флуоресцентного анализа, экспресс-методики.

В микробиологической лаборатории с приобретением современного аналитического проводятся исследования на выявление патогенной микрофлоры, листерий моноцитогенес, общей микробной обсемененности, обнаружение колоний мезофиль-ных анаэробных факультативно-анаэробных и ме-зофильных микроорганизмов (КМАФАиМ), выявление бактерий группы кишечной палочки (БГКП), антигенов ротавирусов и др.

Прибор «БакТрак-4300» является автоматизированной экспресс-системой для ускоренной количественной и качественной оценки степени микробной контаминации продовольственного сырья, пищевых продуктов, питьевой воды и других объектов внешней среды. Принцип действия прибора основан на регистрации относительного изменения полного электрического импеданса питательной среды в пробе. Высокая чувствительность определения продуктов метаболизма клеток с возможностью роста на селективных средах, при этом происходит фиксирование сигналов прибором «БакТрак-4300».

Таблица 1

Объемы исследования проб импедансным методом

Годы Количество исследований Удельный вес проб, не соответствующих гигиеническим нормативам, %

2010 6648 6,8

2011 5345 6,2

2012 6635 6,9

2013 7537 5,3

Импедансная микробиология является непрямым культуральным методом обнаружения микроорганизмов с использованием определения электрического импеданса. Изменения импеданса обычно происходят в питательной среде по мере того, как ее химический состав изменяется в результате роста и метаболической активности микроорганизмов. Под действием микроорганизмов заряженные конечные продукты метаболизма выделяются в ростовую среду.

Импедансным методом определялись такие показатели как: КМАФАнМ, БГКП и др.

Показатели выделенной микрофлоры отражены в табл. 2 микробного пейзажа. Процент положительных находок в 2013 г. снизился в 1,6 раза к 2012 г., при увеличении объемов исследования на 14%, что говорит об улучшении качества обследуемых образцов. Общее время исследования в импедансном анализе редко превышает 24 часа. В большинстве случаев результаты готовы уже через несколько часов. Экспресс-методики дают возможность быстро и своевременно принимать оперативные решения по результатам анализов. Быстрое выявление этиологического агента или микробной обсемененности в исследуемой пробе способствует своевременному проведению мероприятий в отношении качества продукции (табл. 2)

Таблица 2

Микробный пейзаж культур, выделенных из продовольственного сырья и пищевых продуктов

Наименование культур 2011 г. 2012 г. 2013 г.

Всего Уд. вес Всего. Уд. вес Всего. Уд. вес

S.enteritidis 2 0,5 1 0,3

L.monocytogenes 2 0,5

E.coli 34 8,0 40 8,3 10 2,9

S.aureus 13 3,1 22 4,5 27 7,9

КМАФАиМ 137 32,4 146 30,2 91 26,5

БГКП 215 50,8 275 56,8 205 59,8

Плесневые грибы, дрожжи 7 1,7 9 2,6

V.paraheemoliticus 1 0,2

Enterobacter aerogenes 10 2,4

Enterobacter cloacae 1 0,2

Cittrobakter diversus 1 0,2

B.cereus 1 0,2

Всего 423 100 484 100 343 100

Количество проб продукции, исследованных на на- от общего числа исследований составляет - 96,8%. личие патогенной микрофлоры, в отчетный период Патогенная микрофлора выделялась из продоволь-

ственного сырья и пищевых продуктов в 2011-2013 гг. Процент патогенной микрофлоры от общего числа выделенных микроорганизмов составил 0,4%. В 2011-2013 гг. патогенная микрофлора выделялась из проб мяса и мясных продуктов (2 - S. enteritidis) и из проб птицы и птицеводческая продукция (1 -S. enteritidis), и выделены 2 - L. monocytogenes из тех же наименований продуктов.

Первое ранговое место в структуре выделенной микрофлоры - бактерии группы кишечной палочки (БГКП) - 55,6%. Второе ранговое место занимают исследования КМАФАиМ - 29,9%. На третьем ранговом месте - кишечная палочка (E.coli) - 6,7%, прочая микрофлора и патогенная в т.ч. составляет 7,8%.

Прибор «mini VIDAS» - мультипараметриче-ский автоматический иммуноферментный анализатор предназначен для качественного определения микроорганизмов в пищевых и прочих образцах методом фермент-связанного флуоресцентного анализа (табл. 3).

Таблица 3

Объемы исследования проб методом фермент-связанного флуоресцентного анализа

Годы Количество исследованных проб Удельный вес проб, не соответствующих нормативам

2010 598 1,3

2011 605 0,7

2012 721 0,4

2013 751 0,2

Исследования выполнялись на обнаружение в пробах продовольственного сырья и пищевых продуктов бактерий рода Salmonella и бактерий Listeria monocytogenes и др. На конечном этапе исследования прибор автоматически анализирует значение, сравнивает их с внутренними контрольными значениями и выдает результат, который выводится на принтер. Все несоответствующие пробы подтверждены классическим методом. Качество доставляемых образцов на исследование ежегодно улучшается.

Самый высокий процент положительных находок в 2010 г., когда была зарегистрирована вспышка пищевого характера. Имеется опыт работы на вспышке с применением метода фермент-связанного флуоресцентного анализа в 2010 г. Из проб пищевых продуктов, выявлен возбудитель S. enteritidis с плазмидным типом 38:4,4 Mda (мега дальтон), в количестве 12 культур. Все культуры были подтверждены в лаборатории молекулярной эпидемиологии НИИЭМ СО РАМН г. Владивосток при выполнении плазмидного анализа штаммов.

Вспышка была связана с употреблением в пищу пирожных (заварные кольца и заварные трубочки с взбитыми сливками), инфицированных в процессе

приготовления в одном из кондитерских цехов на обслуживаемой территории сотрудникам производства. Во вспышку было вовлечено: 61 человек, из них 22 ребенка до 17 лет. Весь комплекс противоэпидемических мероприятий выполнен в короткие сроки. Прибор позволяет существенно сократить время анализа: при бактериологическом способе исследования в 5 суток, до 45 минут - трех суток, повысить качество, достоверность лабораторных исследований, быстро и оперативно принимать в случае положительных находок.

Анализатор «Униплан» - это малогаборитный вертикальный фотометр для измерения результатов твердофазного иммуноферментного анализа по оптической плотности исследуемого образца в лунках планшета. В лаборатории в целях улучшения расшифровки кишечных и вирусных инфекций от больных людей выполняются исследования клинического материала для обнаружения антигенов ротавирусной инфекции в соответствии с Методическими указаниями 3.1.1.2957-11 «Эпидемиологический надзор, лабораторная диагностика и профилактика ротавирусной инфекции». Выявление этиологического агента на приборе «Униплан», способствует постановке диагноза, своевременному проведению мероприятий в отношении ротавирусной инфекции, увеличению расшифровки острых кишечных инфекций и качественному лечению больных.

Таблица 4

Объемы исследований на выявление антигенов ротавирусов

Годы Всего проб Удельный вес проб с наличием антигенов (%)

2010 360 53,3

2011 719 47,6

2012 679 48,1

2013 511 49,5

Высокий процент положительных находок свидетельствует о регистрации заболеваемости данной инфекцией на обслуживаемой территории и высокой чувствительности метода исследований. Максимальная концентрация возбудителя ротавируса в фекалиях (до 1011-1012 вирионов/мл фекалий) наблюдается в первые 3-5 дней заболевания.

Прослеживается сезонность заболевания с преобладанием выявления положительных находок в осенне-зимний - весенний периоды. Снижение находок с января по август и подъем - с сентября по декабрь. В наблюдаемом периоде только в 2013 г. самый низкий процент положительных находок пришелся на июль, в остальных годах на август. Самые высокие положительные находки определяются в январе, феврале, марте и в ноябре, декабре.

Рис. 1. Процент положительных находок антигенов ротавирусов по месяцам

-♦— 2010 -■— 2011

±2012 -х— 2013

Выводы:

1. Успешно реализован курс на техническое переоснащение лаборатории с приобретением современного оборудования, повысить качество и достоверность исследований позволившим, внедрять экспресс-методы, расширять номенклатуру исследований.

2. Методики используемого аналитического оборудования дают возможность быстро и своевременно принимать оперативные решения по результатам анализов.

3. Метод на основе импедансных технологий позволяет получать быстрые (в течение нескольких часов) и надежные результаты для большого числа одновременного исследуемых образцов.

4. Метод фермент-связанного флуоресцентного анализа позволяет существенно сократить время анализа от 45 минут, максимально до трех судок, при классическом варианте не менее 5 суток, оперативно принимать решения в случае положительных находок.

5. Расшифрована вспышка пищевого характера в 2010 г. с использованием метода фермент-связанного флуоресцентного анализа с выделением возбудителя S. enteritidis с плазмидным типом 38:4,4 Мda, что позволило выполнить комплекс противоэпидемических мероприятий в короткие сроки и в полном объеме.

6. Широкое внедрение в клиническую практику иммуноферментных методов лабораторной диагностики требует от врачей и лаборантов высококвалифицированной подготовки и совершенствования практических навыков при работе и интерпретации результатов исследований.

7. Метод ИФА стал доступен благодаря своей невысокой стоимости и экологической безопасности, данный метод лабораторного исследования перешёл в разряд стандартных анализов. Врач получил в свои руки надежный и точный инструмент для безошибочной диагностики и точной оценки эффективности терапии, другими словами - возможность объективизации лечебно-диагностического процесса.

8. Показатель подтверждения ротавирусной инфекции у больных лиц, обследованных с клиническими признаками инфекции и с отрицательными результатами бактериальных инфекций высокий, в разные периоды составляет от 47,6% до 53,3%, имеет место сезонность заболеваний с преобладание осенне-зимнего-весеннего сезонов.

ЛИТЕРАТУРА

1. Анализы: полный справочник. М.:Эксмо, 2006. 296 с.

2. Кишкун А.А. Иммунологические исследования и методы диагностики инфекционных заболеваний в клинической практике. Медицинское информационное агентство, 2009. 368 с

4. Лабораторная и инструментальная диагностика. М.: Ньюдиамед, 2003. 206 с.

5. Финогеногеев Ю.П., Лобзанс Ю. В. Практика лабораторных исследований при инфекционных заболеваниях. М.: ЭЛБИ, 2005. 268 с.

6. Ферьева Е. Е. Ротавирусная инфекция // Consilium Provisorum.2007. Т.5. №1. С. 12-14.

7. Руководство по лабораторным методам диагностики М.: ГЭО-ТАР- Медиа, 2007. 166 с.

Prusova v.N., Stolbun o.A., Kiva M.S., Klimenko v.v.

the use of modern analytical equipment in microbiological research

Branch of the Federal Health Budget «center of hygiene and epidemiology in Primorsky krai, ussuriisk».

The article describes the experience of the microbiological testing of food raw materials, food, biological material from people using modern analytical equipment and rapid methods in Microbiology laboratory test laboratory center (DIC) branch. When writing a work used the results of laboratory tests performed during 2010-2013 Reflected the benefits of

research using instruments: high sensitivity indicators, quick (within a few hours), the reliability of the results for a large number of samples simultaneously. High reliability of the results, the possibility of rapid and timely implementation of complex sanitary-anti-epidemic (preventive) measures - the advantages of working on the analytical equipment. The results of the work on the outbreak of food in nature with decoding method enzyme-linked fluorescent assay.

Keywords: automated Express system, impedance method, multiparameter automated immunoassay analyzer, electric impedance, the selective environment, the metabolic activity of microorganisms, enzyme-linked immunosorbent method, microbial contamination, the Express method, rotavirus infection.

Citation: Prusova V.N., Stolbun O.A., Kiva M.S., Klimenko V.V. The use of modern analytical equipment in microbiological research. Health. Medical ecology. Science. 2014; 4(58): 169-173. URL: https://yadi.sk/imP9J7j2ZKuwv

Сведения об авторах

Пруссова Валентина Николаевна, заведующая микробиологической лабораторией, врач бактериолог, филиала ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Приморском крае в г. Уссурийск», контактный телефон 8-4234-33-57-06; 692525, Приморский край, г. Уссурийск, ул. Комсомольская, 40; e-mail: [email protected];

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Столбун Ольга Александровна, главный врач филиала ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Приморском крае в г. Уссурийск», контактный телефон 8-4234-33-57-06, 692525, Приморский край, г. Уссурийск, ул. Комсомольская, 40; e-mail: [email protected];

Кива Марина Сергеевна, врач бактериолог микробиологической лаборатории филиала ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Приморском крае в г. Уссурийск», контактный телефон 8-4234-33-57-06, 692525, Приморский край, г. Уссурийск, ул. Комсомольская, 40; e-mail: [email protected];

Клименко Василий Викторович врач бактериолог микробиологической лаборатории филиала ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Приморском крае в г. Уссурийск», контактный телефон 8-4234-33-5706, 692525, Приморский край, г. Уссурийск, ул. Комсомольская, 40; e-mail: [email protected].

© Е.П. Терещенко, 2014 г УДК 616.98:579.842.14-036.22.

Е.П. Терещенко

анализ групповой и вспышечной заболеваемости на территории приморского края в 2013 году

Управление Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по Приморскому краю, г. Владивосток.

Представлены результаты эпидемиологического надзора за инфекционными и паразитарными заболеваниями на территории Приморского края. Причинами возникновения групповых очагов являются несоблюдения санитарных норм и правил в учреждениях, низкий уровень гигиенического воспитания населения, работников детских дошкольных учреждений, медицинских организаций, общественного питания, объектов водоснабжения и водоотведения.

Ключевые слова: эпидемиологический надзор, инфекционные заболевания, возбудители, пути и факторы

передачи инфекции, Приморский край.

Цитировать: Терещенко Е.П. Анализ групповой и вспышечной заболеваемости на территории Приморского края в 2013 году // Здоровье. Медицинская экология. Наука. 2014. №4(58). С. 173-177. URL: https://yadi.sk/i/8pbBblcFZKux3.

Эпидемиологическая обстановка по инфекционной и паразитарной заболеваемости в 2013 г. оценивается как обычная, показатель заболеваемости превышает среднемноголетний показатель на 7,4% и выше показателя 2012 г. на 5,0%. Как и ранее преобладали инфекции верхних дыхательных путей множественной и неуточненной локализации (включая грипп), доля которых составила - 81,1% (2012 г. - 82,0%, 2011 г. - 82,7%) [3].

В структуре инфекционной заболеваемости, без учета заболеваемости острыми респираторными вирусными инфекциями и гриппа, наибольший

удельный вес занимают воздушно-капельные инфекции - 39,7%, включая внебольничные пневмонии (без внебольничных пневмоний на воздушно-капельные инфекции пришлось - 21,7%), кишечные инфекции - 37,0%, паразитарные заболевания - 9,7%, гепатиты - 3,5%, внутрибольнич-ные инфекции - 0,3%, природно-очаговые инфекции - 0,6%, социально-обусловленные - 9,1%.

За последние три года уровень суммарной заболеваемости инфекциями, относящимися к группе кишечных, находился в пределах от 1018,5 на 100 тыс. населения в 2011 г. до 1152,3 в 2013 г. В 2013 г.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.