Идентификация освобождения 5-фторурацила из пролонгированной лекарственной формы для локорегионарной химиотерапии рака яичников в эксперименте in vivo Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК 615.28.45:618.11-006.6-092.4

ИДЕНТИФИКАЦИЯ ОСВОБОЖДЕНИЯ 5-ФТОРУРАЦИЛА ИЗ ПРОЛОНГИРОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ДЛЯ ЛОКОРЕГИОНАРНОЙ ХИМИОТЕРАПИИ РАКА ЯИЧНИКОВ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Ш V™

Г. В. Хамитова

Актуальность. В структуре онкогинеко-логической смертности женского населения Российской Федерации первое место занимает рак яичников. Дополнение системной химиотерапии локальными методами длительного направленного воздействия депонированных химиопрепаратов с использованием новых лекарственных форм является перспективным направлением в комплексном лечении больных раком яичников. В последние годы многие исследователи обратились к внутрибрюшной химиотерапии при раке яичников, для создания максимального накопления химиопрепарата в опухолевой ткани и снижения системной токсичности [1]. Однако существенным недостатком этого метода, ограничивающим его применение, является то, что эффект внутрибрюшной химиотерапии проявляется в результате диффузии химиопрепара-та только в поверхностном слое опухоли и достигается при размерах образования, не превышающих 1 см [2, 3]. С этой целью считаем перспективной разработку комплексной технологии инъекционной пролонгированной лекарственной формы на основе современных вспомогательных веществ для локальной химиотерапии рака яичников в комплексном лечении.

Целью исследования явилась идентификация освобождения 5-фторурацила из пролонгированной инъекционной лекарственной формы в эксперименте in vivo.

Материалы и методы исследований

Исследования проводили на белых крысах массой 270±10 г. 1 мл крови из хвостовой вены крысы, которой был введен фторура-цил в виде пролонгированной формы в дозе 0,96 мг/270 г, помещали в сухую химическую круглодонную колбу объемом 25 мл и прибавляли воду очищенную, перемешивали стеклянной палочкой и проводили экстракцию на водяной бане при температуре 80°С в течение 60 минут. Экстракт охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через бумажный фильтр «синяя лента» в сухую мерную пробирку, устанавливали объем, который должен быть не менее 4,5 мл. Фильтрат пропускали через подготовленные хроматографические колонки диаметром 0,7 см, высотой 5 см, заполненные окисью алюминия, и элюировали. Ультрафиолетовый спектр полученного элюата в области от 200 до 350 нм имел максимум поглощения при длине волны 266 нм, что соответствует раствору стандартного обраца 5-фторурацила. Контролем служила вода очищенная. Время экстракции фторурацила из крови определяли по максимальному значению оптической плотности.

Полученные результаты. Применение модельных веществ в экспериментах in vitro позволило доказать, что разработанные

БИОЛОГИЯ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МЕДИЦИНА

матрицы способны обеспечить пролонгированное высвобождение и хорошую динамику процесса. На следующем этапе, в эксперименте in vivo, мы использовали вместо модельного вещества препарат 5-фторурацил, который входит в схемы II линии химиотерапии рака яичников. Нами был проведен эксперимент по определению лекарственного вещества в крови. В качестве изучаемой матрицы in vivo использовали состав: НМПЭ — 4,0; эмульгатор Т-2 — 1,0; желатин — 0,4; 5-фторурацил 5% — 0,11 мл; масло оливковое — 0,45 мл.

Технология приготовления композиции состояла в следующем: эмульгатор Т-2 расплавляли на водяной бане при температуре 70°С в выпарительной чашке. К сплаву добавляли 0,11 мл 5% водного раствора 5-фторурацила. Водную фазу эмульгировали. К полученному составу добавляли рассчитанное количество предварительно расплавленного НМПЭ. Смесь тщательно перемешивали. К полученной смеси добавляли предварительно измельченный желатин и масло оливковое. Полученную композицию тщательно перемешивали и охлаждали до комнатной температуры. Технология проведения эксперимента на крысах состояла в следующем: готовые образцы матриц вводили в подмышечную область крысам (самцам) весом 250—300 г в количестве 1 мл. Наблюдали за животными в течение того времени, пока 5-фторурацил не перестанет определяться в крови. По окончании каждой недели забирали кровь в количестве 1 мл из хвостовой вены крыс и добавляли к ней гепарин в количестве 0,1 мл. Расчет концентрации 5%-ного раствора 5-фторурацила для крысы массой 270 г (0,27 кг) производили следующим образом. В инструкции по применению инъекционного раствора препарата дается указание, что препарат следует вводить больному из расчета 5 мл на 70 кг массы тела. Рассчитано, если в 5 мл содержится 250 мг 5-ФУ, в 250 мг —

70 кг, в х мг — 0,27 кг, х=0,9б мг 5-ФУ на крысу массой 0,27 кг. Расчет в мл: в 5 мл содержится 250 мг 5-ФУ, в х — 0,96 мг, х= =0,0192 мл. Масса лекарственной матрицы равна 6,0 г х 0,96=5,76 мл, следовательно: 1 мл — 0,0192 г/мл, а 5,76 мл — х, следовательно, х=0,11 мл.

В матрицу введено 0,11 мл 5%-ного раствора 5-фторурацила, содержащего 50 мг/мл препарата. Еженедельно после введения препарата брали заборы проб крови экспериментальных животных и обрабатывали по вышеприведенной методике. Заборы проб осуществляли в течение четырех недель. Спектры четырехнедельных проб представлены на рисунках 1, 2, 3, 4.

Рис. 1. УФ-спектр 5-фторурацила в крови животных на первой неделе эксперимента. Эталон сравнения — вода очищенная. Макс. 266 нм; оптическая плотность 0,612

200 300 400 500 GOO ТОО 800

дгшна волны

Рис. 2. УФ-спектр 5-фторурацила в крови животных на второй неделе эксперимента. Эталон сравнения — вода очищенная. Макс. 266 нм; оптическая плотность 0,612

Рис. 3. УФ-спектр 5-фторурацила в крови животнъх на третьей неделе эксперимента. Эталон сравнения — вода очищенная. Макс. 266 нм; оптическая плотность 0,612

п щшА ^ ^ ^ гуд. »У , г г t- т • ' ' Т t г ? •; ' I' f t у * j'

200 ЗОС 4D0 5ПО БСО 7« ЭСО

Рис. 4. УФ-спектр 5-фторурацила в крови животных на четвертой неделе эксперимента. Эталон сравнения — вода очищенная. Макс. 266 нм; оптическая плотность 0,612.

На рисунках 1, 2, 3, 4 спектры поглощения в ультрафиолете 5-ФУ в образцах крови подопытных животных в течение четырех недель свидетельствуют о наличии препарата в крови.

Вывод

Разработанная модельная система пролонгированной лекарственной формы обеспечивает постоянный уровень 5-фторурацила в крови экспериментальных животных без значительных его колебаний по мере высвобождения лекарственного вещества из матрицы и оптимальную кон-

центрацию химиопрепарата в течение четырех недель эксперимента.

Библиографический список

1. Piura B. Intraperitoneal chemotherapy in ovarian carcinoma/В. Piura//Harefuah.— 2001 Sep; 140(9):844-9, 894, 893.

2. Onda T. Ovarian cancer/Т. Onda//Gan To Kagaku Ryoho. 2007 Nov; 34(11):1735— 1739.

3. Runowicz C. D. Intraperitoneal chemotherapy in ovarian cancer: an update/C. D. Runowicz// Cancer J. 2008 Jan — Feb; 14(1): 7—9.

G. V. Khamitova

IDENTIFICATION OF 5-FLUOROURACIL RELEASE FROM PROLONGED DRUG FORM FOR LOCOREGIONAL

CHEMOTHERAPY OF OVARIAN CANCER IN IN VIVO EXPERIMENT

In the experiment in vivo, identification of 5-FU release from prolonged injection drug form was performed. The model system of prolonged drug form including low-molecular polyethylene — 4,0, emulsifying agent T-2 — 1,0, gelatin — 0,4, 5-FU — 0,11 ml, olive oil — 0,45 provides constant level of 5-FU in blood of experimental animals without its essential variation while releasing the drug from matrix; it also ensures optimal concentration of chemical preparation within four weeks of experiment.

Keywords: prolonged drug form, chemotherapy, ovarian cancer.

Казанский государственный медицинский

университет

Материал поступил в редакцию 08.09.2008