CC BY
131
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МЕДИЦИНА
УДК: 616-092.9-089.22: 612.017.2:612.397: [612.111+612.825]
ИЗМЕНЕНИЯ ФОСФОЛИПИДНОГО СОСТАВА ПРЕФРОНТАЛЬНОЙ КОРЫ ГОЛОВНОГО МОЗГА И ЭРИТРОЦИТОВ КРЫС ПРИ ДЛИТЕЛЬНОЙ ПОВТОРНОЙ ИММОБИЛИЗАЦИИ
Анатолий Анатольевич Цыгвинцев Ижевская государственная медицинская академия
Реферат
На нелинейных белых крысах-самцах, предварительно тестированных по методу «открытое поле», была исследована зависимость между изменением фосфолипидного состава префронтальной коры и эритроцитов у разноустойчивых к стрессу животных. Под воздействием эмоционального стресса наблюдались выраженные изменения содержания основных классов фосфолипидов в мембранах эритроцитов и лобных долях больших полушарий крыс. Предположено наличие связей между изменениями липидного состава префронтальной коры и клеток красной крови в условиях эмоционального стресса в зависимости от индивидуальной стресс-устойчивости животных.
Ключевые слова: стресс, фосфолипиды, эритроциты, головной мозг.
CHANGES IN PHOSPHOLIPID COMPOSITION OF THE PREFRONTAL BRAIN CORTEX OF HEAD AND ERYTHROCYTES OF RATS DURING PROLONGED REPEATED IMMOBILIZATION
A. A. Tsygvintsev Izhevsk State Medical Academy
Summary
Nonlinear white male rats, previously tested by the method of "open field", were investigated to reveal the relationship between changes in phospholipid composition of the prefrontal cortex and erythrocytes in animals with different tolerance to stress. Under the influence of emotional stress, there were marked changes in the content of the major classes of phospholipids in erythrocyte membranes and frontal cortex of rats. Suggested was the presence of a relationship between the changes in lipid composition of the prefrontal cortex and the red blood cells under conditions of emotional stress, depending on the individual stress resistance of animals.
Key words: stress, phospholipids, erythrocytes, brain.
Устойчивость организма к действию эмоционального и физического стресса в значительной степени определяется индивидуальным набором антистрессовых защитных механизмов [1, 3, 8, 9]. Согласно концепции об адаптационной роли липидов, "биохимическая адаптация" характеризуется перестройкой в обмене липидов на уровне клеточных мембран, является "последней линией защиты", после которой наступают поведенческие и физиологические реакции [5]. В соответствии с литературными данными, закономерности изменений структуры и функции мембраны эритроцитов с определенной долей коррекции при различных патологических состояниях могут быть частично экстраполированы на иные мембранные системы [6].
Автор для переписки: [email protected]
Целью настоящего исследования являлось выявление и изучение динамических взаимосвязей между изменениями липидного состава префронтальной коры головного мозга и эритроцитов при воздействии эмоционального стресса на крыс с различной стресс-устойчивостью.
Эксперименты проводились на 139 нелинейных белых крысах-самцах массой 180—230 г, стресс-устойчивость которых была предварительно определена по методу ''открытого поля'' [2]. Проведено 6 серий исследований, в которых животные были подвергнуты воздействию 5, 10, 15, 20, 30, 45-дневного иммобилизационного стресса (длительностью по 2 часа в сутки). Контролем служили интактные стресс-устойчивые и стресс-неустойчивые животные (п=20). Умерщвление производилось под тиопенталовым наркозом кровопусканием, пункционно из правого желудочка сердца забиралась кровь. Эритроциты от-
Таблица 1
Регрессионный анализ содержания лизофосфолипидов и сфингомиелина в префронтальной коре и эритроцитах
стресс-устойчивых и стресс-неустойчивых крыс
Показатели Уравнение регрессии Средняя ошибка коэффициента регрессии критерий
Лизофосфолипиды у стресс-неустойчивых Y= - 2,9984 + 1,0883 * X 0,1795 6,0622
Лизофосфолипиды у стресс-устойчивых Y= - 3,3769 + 1,0209 * X 0,2335 4,3719
Сфингомиелин у стресс-неустойчивых С= 38,4092 - 1,0946 * В 0,1746 -6,2688
Сфингомиелин у стресс-устойчивых С= - 2,50 72 + 0,6689 *В 0,2005 3,3366
Примечания: X — процентное содержание лизофосфолипидов в эритроцитах крыс, Y —лизофосфолипидов в префронтальной коре крыс; В — сфингомиелина в эритроцитах крыс, С — сфингомиелина в префронтальной коре крыс
мывались трехкратным центрифугированием в течение 5 минут при 1500 оборотах в минуту в фосфатно-солевом буфере с удалением лейкотромбоцитарного слоя. Из образцов крови и серого вещества лобных долей больших полушарий головного мозга крыс общие липиды экстрагировались по Фолчу. Для разделения фосфолипидов на классы использовали тонкослойную хроматографию в системе растворителей трихлорметан: метанол: аммиак (13:5:1) [7]. Хроматограммы проявляли парами йода, отдельные фракции идентифицировали методом ''свидетелей''. Процентное содержание отдельных фракций фосфолипидов определяли с помощью денситометра «Сорбфил». Для количественной оценки фосфолипидов использовали ''цветную'' реакцию с образованием молибденовой сини [4]. Данные обрабатывались с использованием параметрических методов статистики.
Под воздействием эмоционального стресса наблюдались выраженные изменения содержания фосфатидилхолина, фосфатидилсерина, фосфатидилэтанола-мина и сфингомиелина в префронталь-ной коре головного мозга и эритроцитах крыс по сравнению с интактными особями. При этом наблюдались достоверные различия в концентрациях вышеуказанных липидных фракций, зависящие как от времени стресс-воздействия, так и от индивидуальной устойчивости организмов к эмоциональному стрессу.
Вне зависимости от стресс-устойчивости животных было выявлено значительное увеличение содержания лизо-фосфолипидов при иммобилизации по сравнению с контролем. Хотя длительное воздействие эмоционального стресса и 102
приводило к постепенному количественному уменьшению концентрации данной фракции фосфолипидов в префронталь-ной коре к 45-му дню стресс-воздействия, наблюдалось достоверное нарастание процентного содержания лизофосфолипидов как в ткани мозга, так и в эритроцитах. При этом в исследуемых образцах тканей мембранный пул лизофосфолипидов у стресс-устойчивых животных был достоверно ниже, чем у неустойчивых, в большинстве серий эксперимента.
По нашим наблюдениям, как у стресс-неустойчивых, так и у стресс-устойчивых крыс имеется корреляция между процентной концентрацией фракций лизофосфо-липидов и сфингомиелина в эритроцитах и ткани мозга (табл. 1). По отношению к концентрации лизофосфолипидов нами было обнаружено наличие прямой сильной связи (коэффициенты корреляции Пирсона — соответственно 0,93 и 0,89 для стресс-неустойчивых и стресс-устойчивых, р<0,01). Корреляция «эритроцитарного» и «мозгового» пула сфингомиелина была обратной: сильной у неустойчивых к стрессу и прямой сильной у устойчивых к стрессу животных (коэффициенты Пирсона — 0,94, р<0,01; 0,83, р<0,05). После решения систем нормальных уравнений для определения парной линейной регрессии были получены искомые уравнения регрессии зависимости пула сфингомиели-на и лизофосфолипидов префронтальной коры от концентраций данных фракций фосфолипидов.
Таким образом, существует корреляция между изменениями липидного состава префронтальной коры и клеток красной крови в условиях эмоционального стресса, находящихся в зависимости
от индивидуальной стресс-устойчивости животного. Дальнейшие работы по уточнению данных закономерностей, по нашему мнению, позволят с помощью малоинвазивных методик динамически оценивать структурно-функциональное состояние нервных клеток и ЦНС в целом в условиях стресса различного генеза и при использовании фармакологических препаратов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Апчел В.Я., Цыган В.Н. Стресс и стрессустойчи-вость человека-СПб.: ВМА, 1999. - 86 с.
2. Владимиров Ю.А. Дизрегуляция мембран митохондрий, некроз и апоптоз. //Дизрегуляционная патология. Под ред. Г.Н. Крыжановского. — М.: Медицина, 2002. — С. 127—157.
3. Исмайлова Х.Ю., Агаев Т.М., Семенова Т.П. Индивидуальные особенности поведения (моноаминерги-
УДК 618.11 -006.6: 615.277.3
ческие механизмы). — Баку :Нурлан, 2007. — 228 с.
4. Комаров Ф.И., Коровкин В.Ф., Меньшиков В.В. Биохимические исследования в клинике. Элиста: Джан-гар, 1999. - 249 с.
5. Курашвили Л.В., Васильков В.Г. Липидный обмен при неотложных состояниях. — Пенза, 2003. — 198 с.
6. Новицкий В.В., Рязанцева Н.В., Степовая Е.А и др. Молекулярные нарушения мембраны эритроцитов при патологии разного генеза являются типовой реакцией организма: контуры проблемы. //Бюлл. Сибирск. мед. — 2006. — №2. — С. 62-69.
7. Покровский Е.А., Каргаполов А.В. Модификация метода тонкослойной хроматографии фосфолипидов // Лаб. дело. — 1971. — №6. — С. 337—341.
8. Пшенникова М.Г. Стресс: регуляторные системы и устойчивость к стрессорным повреждениям. /Дизре-гуляционная патология. Под ред. Г.Н. Крыжановско-го.— М.: Медицина, 2002. — С. 307—329.
9. Судаков К.В. Индивидуальная устойчивость к эмоциональному стрессу.— М.: Горизонт, 1998. — 267 с.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ОСНОВЫ РЕГИОНАРНОЙ ХИМИОТЕРАПИИ
ПРИ РАКЕ ЯИЧНИКОВ
Виталий Алексеевич Лиходед1, Гульшат Валиевна Хамитова2, Феликс Шамилевич Зайнуллин1 *, Шамиль Масгутович Хуснутдинов1
башкирский государственный медицинский университет, г. Уфа, Казанский государственный медицинский университет
Реферат
Изучен морфогенез перевивной опухоли меланомы В16 на мышах при локальном воздействии пролонгированного химиопрепарата 5-фторурацила. В подопытной группе животных при раннем введении данной лекарственной формы выявлена ее существенная противоопухолевая активность. Полученные результаты могут явиться предпосылкой для апробации лекарственной формы в клинике онкологии у больных раком яичников.
Ключевые слова: 5-фторурацил, рак, локорегионарная химиотерапия, пролонгированная лекарственная форма.
EXPERIMENTAL BASIS OF REGIONAL CHEMOTHERAPY FOR OVARIAN
CANCER
V. A. Likhoded', G. V. Khamitova2, F. Sh. Zainullin' *, Sh. M. Khusnutdinov' 1 Bashkir State Medical University, Ufa city,2 Kazan State Medical University
Summary
Studied was the morphogenesis of transplanted B16 melanoma tumors in mice by local effects of prolonged chemotherapy drug 5-fluorouracil. In the experimental group of animals with early introduction of this medicine revealed was its significant antitumor activity. The obtained results can be used as a precondition for testing this drug form in the oncology clinic in patients with ovarian cancer.
Key words: 5-fluorouracil, cancer, local chemotherapy, prolonged drug form.
Основной причиной смертности жен- репродуктивной системы. В структуре ского населения России от злокачест- онкогинекологической смертности жен-венных новообразований в последнее ского населения Российской Федерации десятилетие являются опухоли органов первое место занимает рак яичников [1].
В связи с низкой эффективностью резуль-
--татов комбинированного лечения — хи-
* Автор для переписки: [email protected] рургической резекции и адъювантной
