CC BY
32
<0 ДАШИНАМЖИЛОВ Ж.Б., ДИЛЬ А.А., НИКОЛАЕВ С.М, -
ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ ФИТОСРЕДСТВА "АЛКОФОБ" ПРИ АЛКОГОЛЬНОМ ГЕПАТИТЕ
Ж.Б. Дашиштжилов, А.А. Диль, С.М. Николаев.
(Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г.Улан-Удэ, директор - проф, В,М, Кор-еунов)
Резюме. Результаты экспериментальных исследований показали, что фитосредство "алкофоб" при экспериментальном алкогольном гепатите оказывает выраженное гепатопротекторное действие, обеспечивая стабилизацию мембранных структур гепатоцитов и предупреждая развитие синдромов цитолиза и холестаза.
Ключевые слова: экспериментальный гепатит алкогольный, фитосредство "алкофоб".
Этиловый спирт (этанол) является веществом седаТИВНО-1'ИIIнотическо! о действия, своеобразным "социальным" лекарством. Злоупотребление алкоголем (алкоголизм) - сложное заболевание, природа и причины которого окончательно не выявлены. Алкоголизм создает серьезные медицинские и общественные проблемы для многих стран.
Этанол и многие другие спирты с потенциально токсическими эффектами использую гея в промышленности, иногда в огромных количествах. Несмотря на большие успехи в области изучения его кинетики и токсикологии, многие аспекты этой важнейшей социальной, биологической и медицинской проблемы остаются еще мало изученными. В частности, весьма важным является изучение действия этанола на печень, как орган, принимающий непосредственное участие в метаболизме и утилизации этилового спирта, а также в компенсации нарушений, вызванных им [2].
По современным представлениям активация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) является одним из общих звеньев патогенеза огромного множества заболеваний, сопровождающихся развитием стресса, воспаления, интоксикации, травматического повреждения и опухолевого перерождения тканей, а также ряда других типовых патологических состояний, относящихся к "свободнорадикальной патологии" [1,2,8,12].
Известно, что алкогольная интоксикация организма сопровождав гея выраженной активацией свободнорадикального окисления липидов в биологических мембранах клеток печени и на этом фоне снижением функциональных возможное гей органа [8].
В связи с этим актуальным представляется поиск и создание эффективных средств, обладающих гепа-то п роте к горным действием.
Цель настоящего исследования заключалась в определении генатопротекгорного действия комплексного растительного фитосредства "алкофоб", полученного из травы тысячелистника обыкновенного (Achillea millefolium L.), содержащей эфирное масло, алкалоиды, смолы, органические кислоты, холин, каротин, микроэлементы; полыни горькой (Artemisia absinthium L.), содержащей эфирное масло, в состав которого входит туйол, туйон, пинен и
другие, кроме того, найдены дактоны, гликозиды абсинтин и анабсинтин, фловон артемизетин; корней аира обыкновенного (Acorus calamus L.) и других видов сырья.
Эксперименты проведены на модели острого алкогольного гепатита у белых крыс обоего пола с исходной массой тела 150-160 г. Токсическое повреждение печени у животных вызывали путем внутри-желудочного введения 40%-ного этилового спирта по 0,7 мл на 100 г массы животных 1 раз в сутки в течение 14 дней [6]. Опытной группе животных вводили фитосредство "алкофоб" в виде отвара. Отвар готовили по ГФ XI изд. [5], исходя из соотношения сырье: вода - 1:10 и вводили в желудок белым крысам в объеме 1 мл на 100 г массы животных 1 раз в сутки на протяжении 14 дней. Интервал между введениями этанола и лекарственного средства соответствовал 5-6 ч. Животным другой группы по аналогичной схеме вводили препарат сравнения -водный раствор сиропа холосаса в объеме 1,0 мл на 100 г массы животного (доза, проявляющая оптимальный фармакотерапевтический эффект, установленный опытным путем). Животные контрольной группы получали в соответствующем объеме дистиллированную воду по аналогичной схеме. Исследования проводили на 7 и 14 сутки с начала экспериментов.
О степени антиоксидантной активности указанных средств судили по следующим показа гелям: активность ПОЛ контролировали по содержанию малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови по методике Р.А. Темирбулатова и Е.И. Селезнева [10], а в гомогенате печени - по методике И.Д. Стальной и Г.Г. Гаришвили [9]. В основе метода лежит свойство малонового диальдегида при высокой температуре в кислой среде реагировать с 2-тиобарбиту-ровой кислотой, в результате чего образуется окрашенный гриметиповым комплекс с максимумом поглощения при 532 нм. Молярный коэффициент экс-тинции этого комплекса І^б-Ю^СМ'1- М4. Каталаз-ную активность сыворотки крови крыс определяли методом Г.А. Бобенко, М.Н. Гайнацкого [4], активность супероксидисмугазы (СОД) определяли по методу С. Чевари и соавт, [111-
Статистическая обработка полученных данных проведена е использованием критерия Стыодента.
Таблица 4.
Влияние "алкофоба" на содержание МДА, активность СОД и катализы у белых крыс
при повреждении печени этанолом
Показатель Интактные животные Контроль (этанол) Этанол+ "алкофоб" Этанол+ Холосас
7 сутки
МДА, нмоль/г ткани 2,48*0,11 4,48+0,14 2,98*0,28* 3,22*0,09*
МДА сывортки крови, нмоль/мл 1,22+0,17 2,11+0,18 1,65*0,12* 1,94*0,15
Каталазная активность сыворотки крови, мг Н202 3,36±0,22 2,17*0,16 2,87+0,22* 2,71*0,13*
СОД, мкмоль/л 8,46+0,24 5,12*0,36 6,44*0,28* 6,14*0,48*
14 сутки
МДА, нмоль/г ткани 2,28+0,11 3,18*0,12 3,00+0,11 3,14*0,16
МДА сывортки крови, нмоль/мл 1,22*0,17 2,63*0,21 1,88+0,16* 1,90*0,14*
Каталазная активность сыворотки крови, мг П202 3,360,22 1,75*0,18 3,50*0,28* 2,70*0,24*
СОД, мкмоль/л 8,46*0,24 4,22*0,28 5,84*0,16* 5,12*0,38*
Примечание: * - означает, что различия достоверны по отношению к контролю при Р<().()5.
Результаты н обсуждение
Результаты проведенных исследований показали (табл.1), что введение животным этанола в указанной дозе сопровождается усилением процессов ПОЛ в гомогенате ткани печени. Так, на 7 сутки эксперимента у животных контрольной группы по сравнению с данными у ннтактных животных, в сыворотке крови н гомогенате ткани печени отмечается повышение содержания МДА в 1,8 раза, а на 14 сутки 2 и 1,4 раза, соответственно. Ускорение процессов 1 ЮЛ в печени крыс, вероятно, связано с трансформацией этанола энзимами, локализованными на эндоплаз-матическом ретнкулуме гепатоцнтов, с образованием высокореакцнонноспособных и токсичных производных. Образовавшиеся агрессивные метаболиты инициируют процессы ПОЛ, нарушают проницаемость клеточных н субклеточных мембран, в результате чего происходит дезориентация ферментных систем, ухудшение метаболических процессов в печени [3,8]. Интенсификация ПОЛ в клеточных мембранах печени животных сопровождается снижением эндогенной системы антнокнелнтельной защиты, на что указывает снижение СОД и каталаз-ной активности сыворотки крови на 7 и 14 сутки наблюдения на 39%, 50% н 35%, 48% соответственно.
Курсовое введение белым крысам фнтосредства "алкофоб" в указанной дозе значительно снижало токсическое действие этанола, о чем свидетельствовало достоверное снижение интенсивности ПОЛ в печени. В частности, содержание МДА на 7 и 14 сутки уменьшалось в гомогенате ткани печени и сыворотке крови у белых крыс, получавших наряду с этанолом, отвар "алкофоба", на 33% и 22%, 28% по сравнению с аналогичными показателями у крыс контрольной группы (табл. 1).
Наряду с этим, на 7-14 сутки на фоне введения данного фнтосредства отмечалось восстановление активности сыворотки крови СОД на 25%, 38% соответственно н повышение активности каталазы на 32% н 50% соответственно, что свидетельствует об
увеличении потенциала ант и кислител ьной активности сыворотки крови.
Таким образом, полученные ..анные свидетельствуют, что фитосредство "алкофоб"' обладает гепа-топротекторным действием, и ке :• ступает по действию препарату сравнения холосас;,. а в некоторых случаях превосходит его по эффективности. С выявленным свойством, очевидно, связана его эффективность при многих заболеваниях Свойство исследуемого средства предотвраш-ть :ако.товое повреждение печени реализуется гармоничным сочетанием в нем действующих биололгчески активных веществ, способных подавлять ПОЛ и предупреждать деструкцию мембран.
Мембранозащитный *::~кт фитосбора "алкофоб", на наш взгляд, об:. : непосредственным
влиянием флавоноиднг: х соединений данного лекарственного средства, и м _ :-:ст быть объяснен характером метаболичес ч зпштных реакций фенольных соединений Гак. при взаимодействии свободных радикалов с флаэоноодами образуются радикалы, неспособные продолжать свободнорадикальный процесс [1.3.8.'.".] Кроме того, фенольные соединения растительного происхождения способны не только нейтралнзоБывать свободные радикалы, но и одновременно взаимодействовать с другими ингибиторами и восстанавливать активность более сильного ингибитора Вследствие этого уменьшается «расход» эндогенных антиоксидантов в организме, что способствует более рациональному использованию внутренних резервов антиоксидантов [2,7, 11].
Таким образом, можно полагать, что гепатопро-текторное действие фнтосредства "алкофоб" обеспечивает стабилизацию мембранных структур гепа-тоцитов, создает условия для проявления фармакологического действия для других биологически активных веществ и тем самым предупреждает, очевидно, развитие синдромов цитолиза и холестаза при этаноловом повреждении печени.
PH ARM AC OTHER APE UTTC EFFECTIVENESS OF THE COMPLEX VEGETABLE PHTTOMEANS
"ALCOPHOB" TN ETHANOL-TNJURED LTVER
Zh.B. Dashinamzhilov, A.A. Oil, S.M. Nikolaev
(Institute of General and Experimental Biology, Siberian Division, Russian Academy of Sciences, Ulan-Ude)
The hepatoproteetive and antioxidant action of the complex vegetable phitomeans "aleophob" is experimentally shown in hepatitis, caused by ethanol. It is revealed, that the course introduction of decoction of "aleophob" inhibites processes of lipid peroxidation, stimulates ehologenie and eholagogie functions of liver, contributes to activation of intracellular regenerative processes and normalizes morphofunetional status of the liver.
Литература
1. Барабой В.Л. Биологическое действие растительных фенольных соединений. - Киев, 1976. - 260 с.
2. Барабой В.Л. Антиоксиданты и здоровье // Валео-логия: диагностика, средства и Практика обеспечен ния здоровья. -СПб., 1993. -С.107-1 14,
3. Блюгер Л.Ф., Майоре Л.Я. Современное состояние проблемы клеточной и субклеточной тксперимен-тальной патологии печени // Клеточная и субклеточная ■экспериментальная патология печени, - Рига, 1982. -С.5-7.
4. Бобенко Г.Л., Гайнадкий М.Н. Определение активности каталазы в тритроцитах и сыворотке крови йодметрическим методом //Лаб. дело. - 1976. -№3. - С. 157-158.
5. Государственная фармакопея СССР: вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. М.З. СССР. - 11-е изд., доп. - М: Медицина,
1 990.-400 с.
6. Мансурова И.Д., Олимова С.О. Активность микро-сомальной ттанолокисляющей системы при алкогольной интоксикации // Экспериментальная гепа-тология. - Рига: Зинатне, 1985. - С.41.
7. Николаев С.М. Экспериментальная фармакотерапия антиоксидантами повреждений печени // Фар-макол. и токсикол. - 1983. - №1 - С.79-81.
8. Николаев С.М. Растительные лекарственные препараты при повреждениях гепатобилиарной систе= мы. - Новосибирск: Наука, 1992. - 153 с.
9. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарби-туровой кислоты // Современные методы в биохимии. - М„ 1977. - С.66-68.
10. Темирбулатов Р.Л., Селезнев Е.И. Метод повышения интенсивности свободнорадикального окисления липидсодержащих компонентов крови и его диагностическое значение // Лаб. дело. - 1981. -№4, - С.209-21 1.
11. Чевари С., Чаба П., Секей Й. Роль супероксиддис-мутазы в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических материалах // Лаб. дело. - 1985. -№11. -С.678-681 .
12. Sreejayan Nair, Rao Mysore N.A. Free radical scavenging activity of curcuminoids // Arzneim. - Forsch. -1996. - Vol.46, N.2 - P.169-171.
О ЮГДУРОВА Е.Д., НИКОЛАЕВА Г.Г., НАГАСЛАЕВА Л.А., НИКОЛАЕВ С.М., МАРКАРЯН А.А. -
МЕТОДИКА УФ-СИЕКТРОФОТОМЕТРИЯ В КОЛИЧЕСТВЕННОМ ОПРЕДЕЛЕНИИ СУММЫ ФЛАВОНОИДОВ В ЧАЕ " БАЙКАЛ ЬСКИЙ-6"
Е.Д. /Огдурова, Г.Г. Николаева, Л.А. Нагаслаева, С.М. Николаев, А.А. Маркарян.
(Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г.Улан-Удэ, директор - чл.-корр. РАН, проф. В.М. Корсунов)
Резюме. Разработана биологически активная добавка к пище в виде чая, для профилактики заболеваний мочевыводящей системы, в состав которой входят официнальные лекарственные растения. Для стандартизации выбрана методика количественного определения суммы фла-новоидов методом дифференциальной спектрофотометрии.
Ключевые слова: УФ-спектрофотометрия, методика количественного определения суммы флавоноидов,"Байкальский" чай.
Поиск и разработка новых эффективных средств, предназначенных для профилактики и лечения заболеваний ночек, обусловлены широким распространением, особой тяжестью их течения, приводящих к потере трудоспособности населения [3,4,10].
Актуальность разработки лекарственных препаратов из растительного сырья, обладающих малой токсичностью и не оказывающих побочные действия при длительном применении, продиктована многообразием патогенеза заболеваний ночек [3]. Для профилактики и лечения заболеваний ночек нелесообразно создание комплексных фитопрепаратов, обеспечивающих адекватность терапии в соответствии с поливалентным механизмом повреждений ночек [8,10]. Заслуживает вни-
мания опыт зарубежных фирм но выпуску лечебных чаев, представляющих собой легкораетвори-мые в воде комплексы биологически активных соединений из лекарственных растений.
На основании вышеизложенного нами была разработана биологически активная добавка к нище, в виде чая, обладающая противовоспалительной, антимикробной, спазмолитической, диуретической активностью, состоящая из смеси лекарственных растений: травы горна птичьего, листьев брусники обыкновенной, толокнянки обыкновенной и крапивы двудомной, цветков ноготков лекарственных.
В последние годы для вновь создаваемой продукции предъявляется высокая степень стандартизации, как для лекарственных сборов, так и для
