CC BY
50
УДК 615.322:616.36-002
Ж.Б. Дашинамжилов, П.Б. Лубсандоржиева, А. А. Диль, С.М. Николаев
ВЛИЯНИЕ СОЧЕТАННОГО НАЗНАЧЕНИЯ ФИТОСРЕДСТВ НА ТЕЧЕНИЕ ЭТАНОЛОВОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ ПЕЧЕНИ У БЕЛЫХ КРЫС
Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (Улан-Удэ) Республиканский наркологический диспансер МЗ РБ (Улан-Удэ)
Экспериментально установлено, что сочетанное курсовое введение «наркофита» и «алкофоба» при алкогольном, гепатите у крыс линии Вистар, ингибирует, процессы, перекисного окисления липидов, стимулирует. желчеобразовательную и. желчевыделительную функции печени, способствует, активации внутриклеточных регенераторных процессов и. нормализует функциональное состояние печени. Ключевые слова: алкофоб, наркофит, алкогольный гепатит, перекисное окисление липидов
EFFECT OF COMBINED PRESCRIPTION OF PHYTOREMEDIES ON THE COURSE OF ETHANOL INJURY TO WHITE RAT LIVER
Zh.B. Dashinamzhilov, P.B. Lubsandorjeva, A.A. Dil', S.M. Nikolayev
The Institute of General and Experimental Biology SB RAS, Ulan-Ude Republican Narcological Dispensary of Ministry of Health, Republic Buryatia, Ulan-Ude
It has been established, experimentally that combined course administration of «Narcophyte» and «Alkophob» in alcohol hepatitis in Albino Wistar rats inhibits lipid, peroxidation, activates chologenic and. cholagogic function of the liver, promotes activation, of intracellular regeneration, and normalizes functional condition of the liver.
Key words: Alkophob, Narcophyte, alcohol hepatitis, lipid peroxidation
Известно, что этанол существенным образом влияет на течение биохимических и биофизических процессов в организме, активно вмешивается в процессы биотрансформации эндо- и экзоген-
ных соединений, оказывая повреждающее действие на гепатобилиарную систему [9, 14]. С учетом указанного действия этилового спирта проведены исследования по определению фармакотера-
певтической эффективности сочетанного применения фитосредств «наркофита» [5] и «алкофоба» [6] при этаноловом повреждении печени.
Задачей настоящих исследований явилось определение гепатозащитного действия сочетанного применения фитосредств «наркофита» и «алкофоба» при этаноловом повреждении печени.
МЕТОДИКА
Эксперименты проведены на 270 крысах линии Вистар обоего пола с исходной массой 140— 160 г. Алкогольный гепатит вызывали у животных введением в желудок 40% этилового спирта по 0,7 мл на 100 г массы животных один раз в сутки в течение 21 дня [1, 7]. Животным 1-й опытной группы внут-рижелудочно вводили фитосредства «алкофоб» и «наркофит» в виде отвара по схеме: в первой половине дня — «наркофит», во второй половине — «алкофоб». Отвар готовили по ГФ XI (1990) [13], исходя из соотношения сырье: вода 1:10, и вводили в желудок белым крысам в объеме 1 мл на 100 г массы животных на протяжении 21 дня.
В качестве сравнения животным 2-й опытной группы по аналогичной схеме вводили: в первой половине дня — водный раствор сиропа холосаса, во второй — отвар фитосредства «Петрович» (антиалкогольный фиточай производства ТОО «Галактика», ТУ 9197-001-2891 5443-97).
В контроле по аналогичной схеме вводили дистиллированную воду в эквивалентном объеме. Интервалы между введениями этанола, лекарственных средств и дистиллированной воды соответствовал 3 часам. О фармакотерапевти-ческой эффективности лекарственных средств судили по активности ферментов в сыворотке крови: аланинаминотрансферазы (АлТ) и аспар-татаминотрансферазы (АсТ), которые определяли по Райтману и Френкелю, содержанию общего билирубина — по Ендрашику-Клегорну-Гро-фу, р-липопротеидов — по Бурштейну и Самай, активности щелочной фосфатазы (ЩФ) — по Бо-данскому, а также по показателю тимоловой пробы — по Хуэрго и Поппер [4]. Интенсивность пе-рекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали по содержанию малонового диальдегида (МДА) в гомогенате печени [12]. Желчь для исследования получали в условиях острых опытов по методике Н.П. Скакуна и А.Н. Олейник [11]. Оценку желчеобразовательной и желчевыделительной функции печени проводили по скорости секреции и общему количеству выделенной желчи, концентрации желчных кислот [3], а концентрацию холестерина в желчи определяли по методу С.М. Дроговоз [2], билирубина — по методу Ван ден Берга в модификации Н.П. Скакуна [10]. Статистическая обработка полученных данных проведена с использованием коэффициента Молденгаура [8].
РЕЗУЛЬТАТЫ
Курсовое сочетанное введение белым крысам «наркофита» и «алкофоба» в экспериментально
терапевтических дозах с лечебно-профилактической целью значительно снижает токсическое действие этанола. Уже на 7 сутки эксперимента наблюдается снижение интенсивности ПОЛ: содержание МДА в гомогенате печени животных, получавших «наркофит» и «алкофоб», было ниже на 27 %, чем у крыс в контроле. Активность АлТ снижалась на 56 %, АсТ — на 41 %. Наиболее выраженное фармакотерапевтическое влияние изучаемые фитосредства оказывали на проявления холеста-тического синдрома и явлений диспротеинемии. На фоне введения указанных средств наблюдается снижение активности ЩФ — в 1,6 раза, концентрации билирубина — на 36 %, уровня холестерина — на 44 %, Ь-липопротеидов — на 26 %, показателей тимоловой пробы — на 31 % раза по сравнению с соответствующими показателями в контроле (табл. 1).
В последующие сроки наблюдения, биохимические показатели свидетельствовали о благоприятной динамике. Так на 14, 21 сутки наблюдения содержание МДА уменьшалось на 40 и 55 %, активность АлТ — на 36 и 39 %, АсТ — на 24 и 56 % соответственно. В указанные сроки также наблюдали отчетливое снижение содержания билирубина в сыворотке крови, уменьшение показателей тимоловой пробы. Кроме того, на фоне терапии «наркофитом» и «алкофобом» устойчиво снижалась концентрация холестерина, активность ЩФ, содержание Я-липопротеидов, что указывает на уменьшение признаков холес-таза у животных, получавших «наркофит» и «алкофоб», чем при использовании холосаса и «Петрович».
При курсовом применении «наркофита» и «алкофоба» на 7 сутки наблюдения скорость секреции желчи у животных во все часы наблюдения была выше, чем в контроле. Под влиянием изучаемых фитосредств суммарное содержание желчных кислот в желчи, по сравнению с контролем, повышалось на 21 %, содержание билирубина — на 28 %, а концентрация холестерина достигала уровня показателей у интактных крыс. Суммарная концентрация желчных кислот повышалась на 18 %, билирубина на — 5 % и холестерина на — 40 % (табл. 2).
Из приведенных данных следует, что сочетанное назначение «наркофита» и «алкофоба» на фоне алкогольной интоксикации стимулирует процессы желчеобразования. На фоне сочетанного введения «наркофита» и «алкофоба» наблюдается благоприятная динамика экскреторно-выделительной функции печени у крыс (рис. 1).
Так скорость выделения БСФ с желчью опытных животных возрастает к 15 минуте эксперимента, в группе сравнения определяется на 25 минуте, а у крыс контрольной группы на 40 — 50 минуте.
У крыс, получавших «наркофит» и «алкофоб», количество БСФ в желчи увеличивается на 15 % по отношению к контролю, тогда как под действием холосаса + «Петрович» только на 10 % (рис. 1).
Таблица 1
Влияние сочетанного назначения «наркофита» и «алкофоба» на биохимические показатели у белых крыс при этаноловом повреждении печени
№№ п/п Показатели Интактные животные Контроль (этанол) Этанол + «наркофит» + «алкофоб» Этанол + холосас + «Петрович»
7 сутки
1 Общий билирубин, мкМ/л 11,0 ± 1,12 17,72 ± 0,61 11,48 ± 0,64* 12,60 ± 0,92*
2 АсТ, мкМ/мл.ч 0,28 ± 0,11 1,31 ± 0,13 0,78 ± 0,02* 0,92 ± 0,06*
3 АлТ, мкМ/мл.ч 0,54 ± 0,11 2,46 ± 0,08 1,10 ± 0,08* 1,80 ± 0,12
4 Холестерин, ММ/л 1,68 ± 0,08 2,78 ± 0,15 1,56 ± 0,09* 1,99 ± 0,10*
5 Щелочная фосфатаза, Ед. Бод 7,40 ± 0,68 16,73 ± 1,40 10,12 ± 1,03* 10,66 ± 1,01*
6 р-липопротеиды, усл. ед. 1,60 ± 0,10 5,00 ± 0,50 3,70 ± 0,20* 3,90 ± 0,20*
7 Тимоловая проба, ед.помутнения 1,28 ± 0,31 5,50 ± 0,57 3,80 ± 0,64* 3,80 ± 0,52*
8 МДА, Ммоль/г ткани 1,22 ± 0,17 2,11 ± 0,18 1,55 ± 0,11* 1,84 ± 0,12
14 сутки
1 Общий билирубин, МкМ/л 11,0 ± 1,12 22,8 ± 0,18 18,20 ± 0,34* 19,20 ± 0,44*
2 АсТ, мкМ/мл.ч 0,28 ± 0,11 0,86 ± 0,10 0,66 ± 0,04 0,50 ± 0,05*
3 АлТ, мкМ/мл.ч 0,54 ± 0,11 1,86 ± 0,13 1,20 ± 0,11* 1,40 ± 0,12*
4 Холестерин, мМ/л 1,68 ± 0,08 2,34 ± 0,09 1,80 ± 0,04* 1,90 ± 0,06*
5 Щелочная фосфатаза, ед. Бод 7,40 ± 0,68 11,57 ± 0,31 8,52 ± 0,40* 10,32 ± 0,65
6 р-липопротеиды, усл. ед. 1,60 ± 0,10 2,60 ± 0,21 2,10 ± 0,10 2,50 ± 0,10
7 Тимоловая проба, ед.помутнения 1,28 ± 0,31 1,54 ± 0,28 1,00 ± 0,01* 1,02 ± 0,01*
8 МДА, ммоль/г ткани 1,22 ± 0,17 2,63 ± 0,21 1,60 ± 0,12* 1,70 ± 0,12*
21 сутки
1 Общий билирубин, мкМ/л 11,0 ± 1,12 16,28 ± 1,44 11,50 ± 0,26* 12,40 ± 0,54
2 АсТ, МкМ/мл.ч 0,28 ± 0,11 0,76 ± 0,11 0,34 ± 0,12* 0,40 ± 0,11*
3 АлТ, мкМ/мл.ч 0,54 ± 0,11 0,95 ± 0,04 0,58 ± 0,01 0,64 ± 0,10
4 Холестерин, мМ/л 1,68 ± 0,08 2,74 ± 0,24 1,69 ± 0,06* 1,74 ± 0,06*
5 Щелочная фосфатаза, Ед.Бод 7,40 ± 0,68 12,70 ± 0,40 8,12 ± 0,36* 8,54 ± 0,14*
6 В-липопротеиды, усл. ед. 1,60 ± 0,10 2,90 ± 0,20 1,00 ± 0,01* 1,50 ± 0,10*
7 Тимоловая проба, ед.помутнения 1,28 ± 0,31 1,78 ± 0,18 1,30 ± 0,16 1,34 ± 0,18
8 МДА, ммоль/г ткани 1,22 ± 0,17 2,71 ± 0,21 1,24 ± 0,18* 1,50 ± 0,14*
Примечание: * - Здесь и далее означает, что различия по сравнению с данными в контроле достоверны при Р< 0,05.
Таблица 2
Влияние сочетанного введения «наркофита» и «алкофоба» на желчеобразовательную и желчевыделительную функцию печени крыс при этаноловом повреждении печени
Условия опыта Скорость секреции желчи в течение 4 часов, мг/мин на 100 г массы Общее количество желчи за 4 часа Содержание в желчи
Желчных кислот Билиру- бина Холесте- рина
1 ч 2 ч 3 ч 4 ч мг/100 г массы Мг/100 г массы мг %
1 2 3 4 5 6 7 8 9
Интактные 6,7 ± 0,5 6,0 ± 0,5 6,1 ± 0,5 5,8 ± 0,3 1476 ± 96 2499 9,27 45 0,164 36 0,124
7 сутки
Контроль (этанол) 5,9 ± 0,5 5,4 ± 0,5 5,1 ± 0,3 4,7 ± 0,4 1248±64 1944 6,23 35 0,107 32,5 0,120
Этанол + «наркофит» + «алкофоб» 8,8 ± 0,5* 7,6 ± 0,4* 7,9 ± 0,3* 7,2 ± 0,3* 1890 ± 110* 2360 9,42 45 0,163 38,2 0,156
Этанол + Холосас + «Петрович» 6,6 ± 0,5 7,3 ± 0,5 6,7 ± 0,3* 5,2 ± 0,3* 1548 ± 82* 1967 9,22 38 0,153 33 0,126
21 сутки
Контроль (этанол) 5,4 ± 0,1 5,7 ± 0,1 5,0 ± 0,2* 4,5 ± 0,5* 1236±34 1971 6,16 41 0,124 25,5 0,101
Этанол + «наркофит» + «алкофоб» 6,2 ± 0,3 6,2 ± 0,4 6,2 ± 0,1 5,9 ± 0,4 1464 ± 69 2276 8,34 43 0,158 35,7 0,128
Этанол + Холосас + «Петрович» 6,6 ± 0,1 5,2 ± 0,1 5,4 ± 0,5 4,1 ± 0,1 1260±41 1944 6,34 41 0,125 34 0,106
480 -
400 -1дС БСФ
320 -240 -160 -80 -
т-----1----1----1----1----1----'----1----'----1----1----1----1----1----1----1----1----1----1----1
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200
Время (мин.)
Рис. 1. Влияние сочетанного введения «наркофита» и «алкофоба» на скорость выведения бромсульфалеина с желчью у белых крыс при этаноловом повреждении печени.
Рис. 2. Влияние сочетанного назначения «наркофита» и «алкофоба» на длительность гексеналового сна у белых крыс при этаноловом повреждении печени
Одним из существенных проявлений выраженного фармакотерапевтического эффекта сочетанного назначения «наркофита» и «алкофоба» служит улучшение антитоксической функции печени у белых крыс при введении исследуемых фитосредств. При терапии данными средствами продолжительность гексеналового сна у белых крыс на 7 сутки наблюдения сокращается по отношению к контролю на 16%, на 14 и 21 сутки — соответственно на 24 и 20 %. Продолжительность гексеналового сна у крыс получивших комбинированное назначение холосаса и отвара «Петрович» во все сроки наблюдения была выше, чем у животных получивших сочетанное назначение «наркофита» и «алкофоба» (рис. 2).
Установленное гепатозащитное влияние использованных средств объясняется наличием комплекса биологически активных веществ, прежде всего фенольных соединений, витаминов, макро-и микроэлементов, т.к. для них известно антиок-сидантное, холеретическое, детоксикационное, противовоспалительное действие.
Таким образом, курсовое сочетанное введение белым крысам с этаноловым повреждением печени комплексных растительных средств «наркофита» и «алкофоба» сопровождается нормализацией функционального состояния печени, выражающееся уменьшением проявлений основных синдромов: холестаза и цитолиза на фоне стабилизации биомембран гепатоцитов.
ВЫВОДЫ
1. Сочетанное применение комплексных растительных средств «наркофита» и «алкофоба» в экспериментально-терапевтических дозах характеризуется благоприятным влиянием на течение экспериментального алкогольного повреждения печени у белых крыс, обусловленных их мембраностабилизирующей, дезинтоксикационной и желчегонной активностью.
2. Полученные результаты аргументируют возможность и целесообразность использования указанных фитосредств для лечения и профилактики алкогольных повреждений печени в наркологической практике.
ЛИТЕРАТУРА
1. Дашинамжилов Ж.Б. Экспериментальная фармакотерапия полифитохолом этаноло-вого, тетрациклинового и комбинированного повреждений печени: Автореф. дис. ... канд. мед. наук / Ж.Б. Дашинамжилов. — Улан-Удэ, 1997. - 18 с.
2. Дроговоз С.М. Нарушение интенсивности желчеотделения и химического состава желчи при дистрофии печени, вызванной четыреххлористым углеродом / С.М. Дроговоз. // Вопросы медицинской химии. — 1971. — Вып. 4. — С. 397 — 400.
3. Карбач Я.И. Количественное определение желчных кислот в желчи и крови с применением хроматографического метода / Я.И. Карбач // Биохимия. — 1961. — Т. 26, № 2. — С. 305 — 309.
4. Колб В.Г. Справочник по клинической биохимии / В.Г. Колб, В.С. Камышников. — Минск, 1982. — 366 с.
5. Лекарственный сбор для профилактики и лечения алкогольного абстинентного синдрома и алкогольного гепатита / С.М. Николаев, С.С. Най-данов, Ж.Б. Дашинамжилов, Т.А. Асеева: Патент РФ 2178706. Заявка № 2000106213. Заявлено 13.03.2000. Опубликовано 27.01.2002.
6. Лекарственный сбор для лечения и профилактики патологического влечения к алкоголю / С.М. Николаев, Ц.Н. Базаров, С.С. Найданов, Ж.Б. Дашинамжилов, П.Б. Лубсандоржиева, Е.В. Пинаева, Т.А. Асеева: Патент РФ 2178707. Заявка № 2000106215. Заявлено 13.03.2000. Опубликовано 27.01.2002.
7. Мансурова И.Д. Активность микросомаль-ной этанолокисляющей системы при алкогольной интоксикации / И.Д. Мансурова, С.О. Олимова // Экспериментальная гепатология. — Рига, 1985. — С. 41 — 42.
8. Монцевичюте-Эрингене Е.В. Упрощенные математико-статистические методы в медицинской исследовательской работе / Е.В. Монцевичю-те-Эрингене. // Патол. физиология и эксперим. терапия. — 1964. — №4. — С. 71—78.
9. Николаев С.М. Растительные лекарственные препараты при повреждениях гепатобилиар-ной системы / С.М. Николаев. — Новосибирск, 1992. — 153 с.
10. Скакун Н.П. Нейрогуморальный механизм желчегонного действия инсулина / Н.П. Скакун / / Проблемы эндокринологии. — 1956. — № 6. — С. 75 — 78.
11. Скакун Н.П. Сравнительное действие атропина и метацина на внешнесекреторную функцию печени / Н.П. Скакун, А.Н. Олейник // Современные методы в биохимии. — М.: Медицина, 1967. — С. 66 — 68.
12. Стальная И.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И.Д. Стальная, Г.Г. Гаришвили // Современные методы в биохимии. — М.: Медицина, 1977. — С. 66 — 68.
13. Государственная фармакопея СССР. Вып. 1. Общие методы анализа / МЗ СССР. — 11-е изд., доп. — М., 1987. — 336 с.
14. Олейник А.Н. Поражение печени ксенобиотиками и алкоголем, пути повышения эффективности их фармакотерапии: Автореф. дис. ... д-ра мед. наук / А.Н. Олейник. — М., 1984. — 50 с.
