Научная статья на тему 'Геногеографические исследования вируса лейкоза крупного рогатого скота'

Геногеографические исследования вируса лейкоза крупного рогатого скота Текст научной статьи по специальности «Животноводство и молочное дело»

CC BY
654
127
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ВИРУС ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА (ВЛКРС) / МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕТОДЫ / ГЕНОГЕОГРАФИЯ / ПОЛИМОРФИЗМ / BOVINE LEUKEMIA VIRUS (BVL) / MOLECULAR METHODS / GENE GEOGRAPHY / POLYMORPHISM

Аннотация научной статьи по животноводству и молочному делу, автор научной работы — Виноградова И. В., Гладырь Е. А., Ковалюк Н. В., Петропавловский М. В., Донник И. М.

С использованием тест-системы для генодиагностики вируса лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) дана характеристика его типов, персистирующих в различных регионах России. Объект исследований коровы (n=100), диагностированные как носители ВЛКРС по результатам реакции иммунодиффузии (РИД). У части животных (n=18) наличие лейкоза было подтверждено гематологическим анализом. Исследования проводили на животных черно-пестрой, голштинской и айрширской пород, разводимых в семи популяциях Московской (МО), Челябинской (Урал 1, Урал 2) областей и Краснодарского края (Юг 1, Юг 2, Юг 3, Юг 4). Амплификация фрагмента гена env ВЛКРС длиной 444 п.о. показала наличие провирусной ДНК ВЛКРС у 85 % животных, положительных по РИД. По результатам последующего анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ) установлено, что в изученных региональных популяциях циркулируют две генетические разновидности вируса, относящиеся по международной классификации к «австралийской» и «бельгийской» подгруппам. Доля коров, инфицированных бельгийским типом вируса, варьировала от 36,7 до 92,3 % от общего числа животных-носителей, диагностированных методом ПЦР, и в среднем составила 65,3 %. У коров, находящихся на гематологической стадии заболевания лейкозом, установлено наличие обоих изучаемых типов ВЛКРС (как австралийского, так и бельгийского типов). Проведенные исследования позволили получить дополнительные сведения о региональной филогении участка гена env вируса лейкоза крупного рогатого скота.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по животноводству и молочному делу , автор научной работы — Виноградова И. В., Гладырь Е. А., Ковалюк Н. В., Петропавловский М. В., Донник И. М.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

GENOGEOGRAPHY STUDY OF BOVINE LEUKEMIA VIRUS

The characteristic of the test-system for genodiagnostics of bovine leukemia virus (BLV) persisted in different regions in Russia was done. The objects of our study were cows (n=100) diagnosed as BLV carriers based on results of immunodiffusion (ID) reaction. In some animals (n=18) the presence of BLV was confirmed by hematological analysis. The study was performed on black and white, Holstein and airshire cattle breeds from seven different populations of Moscow region (population Mr), Chelyabinsk region (populations Ural 1 and Ural 2) and Krasnodar krai (populations South 1, South 2, South 3 and South 4). The amplification of the 444 bp fragment of env gene showed the presence of provirus DNA of BLV in 85 per cent of ID-positive animals. The subsequent restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis showed the persistence of two genetic variety of BLV classified according World classification to Australian and Belgian subgroups. The number of cows infected of Belgian type of BLV is varied of 36.7 to 92.3 per cent from the overall number of BLV carriers diagnosed by PCR and was in average 65.3 per cent. The presence of both BLV types analyzed (as the Australian as Belgian types) in cows having the hematological stage of disease. Thus, carrying study allowed producing the additional information about regional phylogeny of env gene fragment of bovine leukemia virus.

Текст научной работы на тему «Геногеографические исследования вируса лейкоза крупного рогатого скота»

кг, Р>0,99 и +31,5 кг, Р>0,95, Таблица 3. Молочная продуктивность коров черно-пестрой породы в за-соответственно) над живот- висимости от комплексного генотипа по РйАТ1 и ВйН

ными с генотипом АА / АА. Кроме того, коров с генотипом АА / ВВ можно охарактеризовать как животных с более высоким количеством молочного жира за лактацию, по сравнению с группой АА / АА (+ 23,8 кг,

Р>0,99). При этом следует отметить, что большее количество молочного жира и белка в молоке коров в группе с генотипом АА / ВВ связано с повышенным удоем.

Анализ зависимости молочной продуктивности коров от комплексного генотипа по

Гэнотип n Удой за 305 дней, кг Содержание жира, % Количество молочного жира, кг Содержание белка, % Количество молочного белка, кг

DGAT1 BBGH

Продуктивность за 1-ю лактацию

АК LL 40 6003±146 4,12±0,05 246,9±6,3 3,00±0,03 181,7±5,5

KK LL 20 5769±174** 4,14±0,08** 238,0±7,2* 2,94±0,04 174,5±5,1*,**

AA LV З 6229±219 4,49±0,10** 279,9±16,0* 3,10±0,29 194,4±7,72*

AK LV 21 5982±254 3,95±0,07 235,5±10,0 2,97±0,04 185,5±7,2

KK LV 13 6784±227** 4,05±0,10 275,1±12,1* 3,03±0,08 206,9±10,32**

AK VV 4 5850±361 4,10±0,13 241,3±21,9 3,00±0,05 174,8±8,7

Продуктивность за 2-ю лактацию

АК LL 39 7065±190,5** 4,17±0,06 292,8±7,6* 3,00±0,02 212,0±6,2**

KK LL 20 6272±302*,** 4,29±0,06* 267,4±11,5* 3,05±0,03 188,9±9,4*,**

AA LV З 7555±692 4,30±0,25 325,1±37,4 3,18±0,10 238,8±15,8**

AK LV 21 7386±288** 4,07±0,05* 300,7±12,0* 3,01±0,05 231,2±11,5**

KK LV 13 7069±319* 4,16±0,10 295,8±17,3 3,10±0,08 222,3±14,3*

AK VV 4 7429±541 4,21±0,07 313,5±26,8 3,00±0,08 223,5±20,5

* Р>0,95; ** Р>0,99; *** генам DGAT1 и ВОН (табл. 3) показал наименьший уровень удоя, а также самое низкое количество молочного жира и белка за лактацию в группе коров с генотипом КК / LL, как по результатам 1-й, так и 2-й лактации.

В целом, следует отметить, что большее содержание жира в молоке характерно коровам с аллелем К по DGAT1 в генотипе, а повышенный уровень удоя - при наличии в генотипе коров аллеля V по гену ВОН.

Выводы. Таким образом, мы установили наличие зависимости параметров молочной продуктивности коров от комплексных генотипов по ДНК-маркерам каппа-казеина (CSN3) и альфа-лактальбумина (LALBA),

Р>0,999

а также гормона роста (ВОН) и диацилглицерол О-ацилтрансферазы фОАТ1).

Животные с генотипами АА / ВВ и АВ / АВ по генам CSN3 и LALBA достоверно превосходили коров с генотипом АА / АА по уровню удоя и количеству молочного белка. Наименьший уровень удоя и минимальные количества молочного жира и белка характерны для коров с комплексным генотипом КК / LL по генам DGAT1 и ВОН.

Результаты проведенных исследований свидетельствуют о целесообразности использования генетических маркеров в качестве критерия при отборе и подборе животных.

Литература.

1. Калашникова ЛЛ., Bозможности использования ДНК-маркеров продуктивных качеств животных в практической селекционной работе // Сб. тр. 3-й международной научной конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», 2003, с. 33-39.

2. Зиновьева H.A., Костюнина O.B., Гладырь E.A., Банникова AM., Харзинова B.P., Ларионова n.B., Шавырина К.М., Эрнст Л.К. Pоль ДНК - маркеров признаков продуктивности сельскохозяйственных животных // Зоотехния - 2010. - №1. - С. 8-10.

3. Зиновьева НЛ., Гладырь E.A., Эрнст Л.К., Брем Г. Bведение в молекулярную генную диагностику сельскохозяйственных животных. - Дубровицы, 2002, 112 с.

4. Меркурьева E.A., Aбрамова З.B., Бакай A.B. и др. Генетика. - М.: Aгропромиздат, 1991.

the effect of dna marker genotypes on the milk productive traits of black

and white cattle

o.V. Kostunina, A.M. Bakai, G.A. Bushova, T.V. Lepechina, E.A. Gladyr

summary. The polymorphism of kappa-casein (CSN3), alpha-lactalbumin (LALBA), diacyl-O-acyltransferase (DGAT1) and growth hormone (BGH) in black and white cattle breed was detected. The effect of complex genotypes of CSN3 I LALBA and DGAT1 I BGH on the milk productive traits of cows was studied. The significant increase of the milk yield (+973 kg, P>0.999), the milk fat quantity (+23.8 kg, P>0.99) and the milk protein quantity (+20.3 kg, P>0.99) in cows with the АА I BB genotype for CSN3 I LALBA and the increase of the milk yield (+969 kg, P>0.999) and milk protein quantity (+31.5 kg, P>0.95) in cows with AB I AB genotype comparing to AA I AA genotype was observed. The minimal levels of the milk yield, the milk fat quantity and the milk protein quantity in cows carrying the KK I LL genotype for DGAT1 I BGH were detected.

Key words: DNA-markers, milk productivity, black and white cattle breed.

УДК 574.9:578.2:636.2

ГЕНОГЕОГРАФИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ВИРУСА ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА*

И.В. ВИНОГРАДОВА, аспирант Е.А. ГЛАДЫРЬ, кандидат биологических наук, зав. лабораторией

ВИЖ Россельхозакадемии

Н.В. КОВАЛЮК, доктор биологических наук, зав. лабораторией

СКНИИЖ Россельхозакадемии М.В. ПЕТРОПАВЛОВСКИЙ, кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник

УРНИВИ Россельхозакадемии И.М. ДОННИК, академик Россельхозакадемии, ректор

Уральская ГСХА

Л.К. ЭРНСТ, академик Россельхозакадемии

Н.А. ЗИНОВЬЕВА, член-корреспондент Россельхо-закадемии, зам. директора ВИЖ Россельхозакадемии E-mail: n zinovieva@mail.ru

Резюме. С использованием тест-системы для генодиагностики вируса лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) дана характеристика его типов, персистирующих в различных регионах России. Объект исследований - коровы (п=100), диагностированные как носители ВЛКРС по результатам реакции иммунодиффузии (РИД). У части животных (п=18) наличие лейкоза было подтверждено гематологическим анализом. Исследования проводили на животных черно-пестрой, голштинской и айрширской пород, разводимых в семи популяциях Московской (МО), Челябинской (Урал 1, Урал 2) областей и Краснодарского края (Юг 1, Юг 2, Юг 3, Юг 4). Амплификация фрагмента гена env ВЛКРС длиной 444 п.о. показала наличие провирусной ДНК ВЛКРС у 85 % животных, положительных по РИД. По результатам последующего анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ) установлено, что в изученных региональных популяциях циркулируют две генетические разновидности вируса, относящиеся по международной классификации к «австралийской» и «бельгийской» подгруппам. Доля коров, инфицированных бельгийским типом вируса, варьировала от 3б,7 до 92,3 % от общего числа животных-носителей, диагностированных методом ПЦР, и в среднем составила 65,3 %. У коров, находящихся на гематологической стадии заболевания лейкозом, установлено наличие обоих изучаемых типов ВЛКРС (как австралийского, так и бельгийского типов). Проведенные исследования позволили получить дополнительные сведения о региональной филогении участка гена env вируса лейкоза крупного рогатого скота.

Ключевые слова: вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС), молекулярные методы, геногеография, полиморфизм

Проблема распространения вируса лейкоза крупного рогатого скота в Российской Федерации стоит очень остро, так как эпидемическое состояние популяции по этому заболеванию неблагополучно. По данным Департамента ветеринарии Минсельхоза РФ [1] ежегодно по РИД в России исследуют более 50 % списочного поголовья, из них до 10 % оценивают как положительные по результатам гематологического исследования (неопластические изменения и изменение лейкоформулы), но только около 5 % от числа положительных особей выбраковывают. За весь 2010 г, методом РИД было исследовано 13,5 млн голов крупного рогатого скота, из которых положительно реагировали

1,01 млн голов [1]. В гематологическом исследовании 3,69 млн протестированных животных было выявлено 60,4 тыс. положительно реагирующих особей. Фактически в хозяйствах остаются не только вирусоносители (РИД-положительные особи), но и животные с субклиническими и клиническими признаками заболевания. На июль 2011 г. в 12 субъектах Российской Федерации зарегистрировано 2205 неблагополучных пунктов.

Спектр методов, используемых для выявления ви-русоносителей, широк - от официального серологического РИД [2], ИФА, до молекулярно-биологических методов (ПЦР), гематологических, клинических, патоморфологических исследований и биопробы [1].

Инфицирование лейкозом высокопродуктивных коров представляет собой значительную угрозу генофонду крупного рогатого скота страны, что в свою очередь приводит как к снижению биоразнообразия, так и к повышению рисков различного уровня для человека и животных. На начальном этапе инфицирования ВЛКРС

*Исследования выполнены при финансовой поддержке Минобрнауки РФ, проекты № 16.М04.11.0018 и № 14.740.12.0821.

внедряется в хромосомную ДНК лимфоцитов в форме провируса в количестве 1...3 копий на диплоидный геном [3, 4], и животное становится вирусоносителем на всю жизнь. В этой связи актуальны работы по созданию высокочувствительных тест-систем и диагностикумов, способных эффективно выявлять вирусоносителей методом ПЦР [5, 6], а также исследования по изучению генетической устойчивости скота к ВЛКРС [7.9]. Поиск методических подходов, позволяющих наиболее полно выявлять вирусоносителей, а также типировать вирус с использованием базового метода ПЦР, активно проводится во многих лабораториях России [10.18].

Цель нашего исследования - сравнительное изучение региональных особенностей распространения разных генетических типов вируса лейкоза крупного рогатого скота, для характеристика географии его пер-систирования на территории Российской Федерации.

Условия, материалы и методы. Исследования проводили на базе Центра коллективного пользования научным оборудованием «Биоресурсы и биоинженерия сельскохозяйственных животных» ВИЖ Россельхо-закадемии. Предмет исследований - вирус лейкоза крупного рогатого скота, провирусную ДНК которого выделяли из крови животных черно-пестрой, голштинской и айрширской пород, разводимых в семи хозяйствах трех регионов России: Московской (МО) и Челябинской (Урал 1-2) областей, а также Краснодарского края (Юг 1-4). Материал исследований - пробы крови РИД-положительных и гематологически больных коров.

ДНК выделяли с помощью набора реагентов DIAtomTM DNA Prep100. Анализ ДНК и постановку ПЦР проводили согласно «Методическим рекомендациям» [19].

Молекулярно-генетические свойства провирусной ДНК гена env определяли с помощью методов «nested» - ПЦР [11], ПДРФ анализа (RFLP) [20] и по методикам Центра биотехнологии и молекулярной диагностики ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии [21]. Статистическую обработку данных проводили с использованием программного обеспечения MSA_WIN 4.05 (2003) и Past.

Результаты и обсуждение. Для характеристики генетических особенностей вируса лейкоза крупного рогатого скота, персистирующего в разных территориально удаленных регионах России был сформирован Банк проб крови и ДНК животных, РИД позитивных по ВЛКРС (см. таблицу).

Результаты ПЦР-анализа свидетельствуют, что из РИД-положительных животных носителями вируса лейкоза, детектируемого методом ПЦР оказались только 85 %. Как было установлено ранее [21], такой факт может быть связан с тем, что животные либо находятся в стойкой алимфатической стадии, либо в начальной стадии персистирующего лимфоцитоза, чем и обусловлено низкое содержание провирусной ДНК в их крови. Хронически персистирующий вирус может претерпевать мутационные изменения, направленные на увеличение патогенности и преодоление более эффективных защитных механизмов хозяина [18].

Таблица. Характеристика анализируемого материала

Регион Порода Число голов, n Статус по ВЛКРС ПЦР+, %

РИД+ |в том числе гематология «+»

МО Черно-пестрая 30 30 8 100,00

Урал 1 Черно-пестрая 20 20 - 65,00

Урал 2 Черно-пестрая 10 10 10 90,00

Юг 1 Айрширская 10 10 - 80,00

Юг 2 Голштинская 10 10 - 80,00

Юг 3 Голштинская 10 10 - 90,00

Юг 4 Айширская 10 10 - 80,00

Итого 100 100 18 85,00

До конца 2010 г. штаммы ВЛКРС, выделенные во гена env, показали, что все изученное поголовье жи-

всем мире, классифицировали на семь различных генотипов [22, 23]. Сегодня выделяют, по крайней мере, восемь эволюционных генотипов вируса лейкоза [24].

Рис. 1. Распределение коров-носителей различных типов гатого скота в популяционном (а) и региональном (б) аспекте, -й- - бельгийский тип.

Мы провели ПЦР-ПДРФ анализ фрагмента гена env ВЛКРС длиной 444 п.о., результаты которого показали, что в изученных региональных популяциях циркулируют две генетические разновидности вируса лейкоза, относящиеся по международной классификации к «австралийской» и «бельгийской» подгруппам.

Причем только в двух из семи хозяйств преобладала инфицированность животных австралийским типом ВЛКРС (рис. 1). Во всех остальных предприятиях инфицированность бельгийским типом вируса варьировала от 75,00 % (Юг 1) до 92,31 % (Урал 1). При этом в среднем австралийским генетическим типом ВЛКРС было инфицировано 36,47 % всего изученного поголовья, бельгийским - 63,5 %. Только в хозяйстве МО выявлено преобладание по частоте встречаемости австралийского типа ВЛКРС над бельгийским (65,33 против 36,67 %).

У животных из популяции МО, у которых была детектирована гематологическая стадия ВЛКРС, выявленный вирус относился в равной степени к обоим генетическим типам, а у коров из хозяйства Урал 2 это соотношение было 1 :3,5 с преобладанием бельгийского типа. Это свидетельствует о способности обоих типов вируса приводить к гематологической стадии заболевания.

Филогенетические исследования популяций, основанные на анализе рестрикционных полиморфизмов

вотных можно сгруппировать в два кластера (рис. 2).

В первый из них входят два хозяйства Уральского региона и два - юга России (Юг 1 и Юг 3). Второй кластер образован животными хозяйств Юг 2 и Юг 3, к которому примыкают коровы из хозяйства МО.

Выводы. Таким образом, результаты проведенных исследований региональной филогении участка гена env вируса лейкоза крупного рогатого скота показали наличие двух типов вируса(бельгийского и австралийского) во всех семи изученных популяциях Краснодарского края, Московской и Челябинской областей. Знание особенностей строения и функционирования генома вируса (провируса) расширит фундаментальные данные о генетике возбудителя заболевания, позволит в будущем не только понимать, но и управлять течением инфекционного процесса [25] и возможно, откроет пути

вируса лейкоза крупного ро-%: -о— австралийский тип

Рис. 2. Филогенетический анализ популяций

для создания вакцин к различным типам вируса лейкоза крупного рогатого скота, что позволит оздоровить российское скотоводство.

Литература.

1. Эпизоотическая ситуация на территории Pоссийской Федерации // Доклад Департамента ветеринарии МСХ Pоссии, 2011. URL: www.mcx.ru/documents/file_document/show/16283.77.htm, (дата обращения 19.10.2011).

2. Методические указания по диагностике лейкоза крупного рогатого скота (Утв. Минсельхозом PФ 23.08.2000 N13-7-2/2130).

3. Rice N. R., Stephens R.M., Couez D., Deschamps J., Keltmann R.. BurnyA., Gilden R.V. The nucleotide sequence of the env gene and the post-env region of bovine leukemia virus// Virology. - 1984. - 138, 82-93.

4. Sagata N., Yasunaga T., Tsuziiku-Kawnmurn J., Ohishi K.. Ogawa Y., Ikawa Y. Complete nucleotide sequence of the genome of bovine leukemia virus: It's evolutionary relationship to other retro-viruses. Proc. Natl. Acnd. Sci. USA 82,677-681.

5. Kuckleburg C.J., Chase C.C., Nelson E.A., Marras S.A.E., Dammen M.A., Christopher-Hennings J. Detection of bovine leukemia virus in blood and milk by nested and real-time polymerase chain reactions // Vet Diagn Invest. - 2003. - 15. - P. 72-76.

6. Тест-система «Лейкоз» для выявления лейкоза крупного рогатого скота (^С) методом полимеразной цепной реакции //ФГУН ЦНИИЭ Pоспотребнадзора, № nBP-1-4.6/01808 от 29.12.2006до 29.12.2011.

7. Сулимова Г.Е., Удина И.Г., Шайхаев Г.О., Захаров И.A. ДНК-полиморфизм гена BoLA-DRB3 у крупного рогатого скота в связи с устойчивостью и восприимчивостью к лейкозу // Генетика. - 1995. - Т. 31. №9. - С.1294-1299.

8. Ковалюк Н.B. Молекулярно-генетические аспекты в селекции и ранней диагностике лейкоза крупного рогатого скота. автореф. дис... д-ра биол. Наук. - Северо-Кавказский НИИЖ. - Дубровицы, 2008. - 32 с.

9. Быкова A.С., Зиновьева Н.A., Гладырь E.A. Экспресс-диагностика аллелей BOLA-DRB3, ассоциированных с устойчивостью крупного рогатого скота к лейкозу // Проблемы биологии продуктивных животных, 2011, Т. 1. - С. 12-15.

10. Beier D., Blankenstein P., Marquardt O., Kuzmak J. Identification of different BLVprovirus isolates by PCR, RFLPA and DNA sequencing. Berl. MUnch. TierSrzll. Wsclir. 2001.114, 252-256.

11. Гладырь E.A., Зиновьева Н.A., Ермилов A.A., Bиноградов B.Н., ЭрнстЛ.К. Создание и экспериментальная апробация высокочувствительной тест-системы диагностики вируса лейкоза крупного рогатого скота// Bет.патология. - 2006. - N 3. - С. 87-89.

12. Гладырь Е.А., Зиновьева Н.А., ЭрнстЛ.К., Костюнина О.В., Банникова А.Д., Кудина Е.П., Брем Г. Молекулярные методы в диагностике заболеваний и наследственныхдефектов у сельскохозяйственныхживотных//Зоотехния. - 2010. - № 8. - С. 26-27.

13. Смирнова П.Н. Болезнь века: лейкоз крупного рогатого скота. - Новосибирск, 2007. - 301с.

14. Дробот Е.А. Результаты изучения генотипического разнообразия вируса лейкоза крупного рогатого скота и особенности эпизоотологического и гематологического проявления лейкоза: автореф. дис... канд. биол. нау. - Новосибирский ГАУ: Новосибирск, 2007. - 20 с.

15. Двоеглазов Н.Г. Оценка эффективности различных методов диагностики инфекции вируса лейкоза крупного рогатого скота: Дисс. канд. вет. наук. - Новосибирск, 2010. - 126 с.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

16. Ломакина Н.Ф., Гулюкин М.И. Генотипирование вирусов лейкоза КРС, циркулирующих в хозяйствах Московской, Калужской и Ростоовской областей //Молекулярная диагностика. - 2010. - 2(8). - С. 140-142.

17. Ковалюк Н., Сацук В., Мачульская Е. Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2011. - № 9. - С. 16-19.

18. Петропавловский М.В. Эффективность диагностических тестов в выявлении вируса лейкоза крупного рогатого скота в оздоравливаемых от лейкоза стадах: автореф. дис. канд. вет. наук. - Екатеринбург, 2010. - 26 с.

19. Зиновьева Н.А., Попов А.Н., Эрнст Л.К., Морзанов Н.С., Бочкарев В.В., Стрекозов Н.И., Брем Г. Методические рекомендации по использованию метода полимеразной цепной реакции в животноводстве // Дубровицы. ВИЖ, 1998, - 47 с.

20. Beier D., Blankenstein P., Marquardt O., Kuzmak J.Identification of different BLVprovirus isolates by PCR, RFLPA and DNA sequencing//Berl. Munch Tierarztl Wochenschr. - 2001. - Jul-Aug. - 114(7-8):252-6.

21. Виноградова И.В., Гладырь Е.А., Зиновьева Н.А. Сравнительная оценка результативности РИД и ДНК-диагностики вируса лейкоза крупного рогатого скота // Проблемы биологии продуктивных животных. - 2011. - Т. 1. - С. 15-16.

22. Rodriguez S.M., Golemba M.D., Campos R.H., Trono K., Jones L.R. Bovine leukemia virus can be classified into seven genotypes: evidence for the existence of two novel clades.// J Gen Virol. - 2010. - No. - 90(Pt 11):2788-97.

23. Moratorio G. Obal, A. Dubra, A. Correa, S. Bianchi, A. Buschiazzo, J. Cristina and O. Pritsch, Phylogenetic analysis of bovine leukemia viruses isolated in South America reveals diversification in seven distinct genotypes. Arch. Virol., 155, 2010, pp. 481-489.

24. Matsumura K., Inoue E., Osawa Y., Okazaki K. Molecular epidemiology of bovine leukemia virus associated with enzootic bovine leukosis in Japan // Virus Research Volume 155. - Issue 1. - January. - 2011. - P. 343-348.

25. Гулюкин М. И., Иванова Л. А., Шишкина Е. А., ШишкинА. В., Прохватилова Л. Б. Экспериментальное заражение кроликов вирусом лейкоза крупного рогатого скота // Ветеринария. - 2008. - N 11. - С. 23-27.

GENOGEOGRAPHY STUDY OF BOViNE LEUKEMiA ViRUS

I.P. Vinogradova, E.A. Gladyr, N.V. Kovaljuk, M.V. Petropavlovskij, I.M. Donnik, L.K. Ernst, N.A. Zinovieva

Summary. The characteristic of the test-system for genodiagnostics of bovine leukemia virus (BLV) persisted in different regions in Russia was done. The objects of our study were cows (n=100) diagnosed as BLV carriers based on results of immunodiffusion (ID) reaction. In some animals (n=18) the presence of BLV was confirmed by hematological analysis. The study was performed on black and white, Holstein and airshire cattle breeds from seven different populations of Moscow region (population Mr), Chelyabinsk region (populations Ural 1 and Ural 2) and Krasnodar krai (populations South 1, South 2, South 3 and South 4). The amplification of the 444 bp fragment of env gene showed the presence of provirus DNA of BLV in 85 per cent of ID-positive animals. The subsequent restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis showed the persistence of two genetic variety of BLV classified according World classification to Australian and Belgian subgroups. The number of cows infected of Belgian type of BLV is varied of 36.7 to 92.3 per cent from the overall number of BLV carriers diagnosed by PCR and was in average 65.3 per cent. The presence of both BLV types analyzed (as the Australian as Belgian types) in cows having the hematological stage of disease. Thus, carrying study allowed producing the additional information about regional phylogeny of env gene fragment of bovine leukemia virus.

Key words: bovine leukemia virus (BVL), molecular methods, gene geography, polymorphism

УДК 636.082.251

ОЦЕНКА ВЕДУЩИХ ГЕНЕАЛОГИЧЕСКИХ ЛИНИЙ СКОТА КРАСНОЙ СТЕПНОЙ ПОРОДЫ

A.С. ДУPОB, кандидат сельскохозяйственных наук, старший научный сотрудник

Сибирский НИИ животноводства Pоссельхозака-демии

E-mail: das75@rambler.ru

Резюме. Проведена оценка генеалогических линий коров-красной степной породы, разводимых в племенном заводе «Шумановский» в условиях Кулундинской зоны Aлтайского края. По удою первотёлки, принадлежащие к генеалогическим линиям Банко 19665, Джинаса 27, Pудне Идеала 9451, Эрлаух-та 17390 превосходят стандарт породы на 38 %, по массовой доле жира - на 12,4 %, по количеству молочного жира - на 55 %. Полновозрастные коровы превосходят стандарт породы по живой массе 18 %, по удою - на 14 %, по массовой доле жира - на 12 %, по количеству молочного жира - на 29 %. Отмечен ряд достоверных отличий между животными генеалогических линий по экстерьерным и продуктивным показателям. По результатам оценки дочерей по молочной продуктивности быков, принадлежащих генеалогическим линиям Джинаса, Эрлаухта 17390 и Банко 19665 можно шире использованы в

стадах региона, для линии Рудне Идеала 9451 необходимо выделить эффективных продолжателей.

Ключевые слова: генеалогическая линия, красная степная порода, генотип

Для всех агроклиматических зон Алтайского края скотоводство - важная отрасль, способная с высокой эффективностью трансформировать дешевые грубые корма с большой долей клетчатки в конечную продукцию [1, 2]. Для эффективного развития скотоводства в условиях рыночной экономики необходимо совершенствовать основной инструмент производства - популяции или породу.

Красная степная порода - одна из наиболее распространённых молочных пород скота, которая хорошо акклиматизировалась во многих природно-экономических зонах стран СНГ [3]. Начало сибирской популяции красной степной породы дал скот, привезенный переселенцами с юга Украины. В 60-70-е гг. прошлого

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.