CC BY
11
и статистического анализа. Полученные производные окрашивались митотрекером и потенциал-зависимым красителем TMRM. Статистический анализ показал, что в полученной клеточной модели количество активных митохондрий в нейральных производных ИПСК пациента с мутацией достоверно (p-value < 0,05) ниже, чем в контрольных линиях
Таким образом, мы показали, что мутация в гене GLUD2, вероятно, приводит к снижению количества активных митохондрий в астроцитах и дофаминергических нейронах, это может быть связано с перенасыщением цикла Кребса и образованием большого количества АФК. В результате усиленной работы фермента митохондрии разрушаются, что является одной из основных причин развития болезни Паркинсона [2]. Работа поддержана грантом РНФ № 19-75-20063.
Литература:
1. Plaitakis A. et al. Eur. J. Hum. Genet. 2010 183. 2009. Vol. 18.
№ 3. P. 336-341.
2. Malkus K.A., Tsika E., Ischiropoulos H. Mol. Neurodegener.
2009. Vol. 4. № 1.
ИЗУЧЕНИЕ ВЗАИМОСВЯЗЕЙ МЕЖДУ БИОМАРКЕРАМИ НАКОПЛЕНИЯ СЕНЕСЦЕНТНЫХ КЛЕТОК НА СИСТЕМНОМ, ТКАНЕВОМ И КЛЕТОЧНОМ УРОВНЯХ ПРИ СТАРЕНИИ
А.Г. Сорокина1, Я.А. Орлова1, 2, О.А. Григорьева1,
Е.С. Новоселецкая1, Н.А. Басалова1,
Н.А. Александрушкина1, М.А. Виговский1, 2,
К.И. Кириллова1, А.В. Балацкий1,
Л.М. Самоходская1, 2, Н.В. Данилова1, 2,
У.Д. Дьячкова2, В.В. Какоткин2, Д.А. Асратян1,
Ж.А. Акопян1, 2, А.Ю. Ефименко1, 2
1 Медицинский научно-образовательный центр МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
2 Факультет фундаментальной медицины МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
e-mail: drsorokinaag@gmail.com
Ключевые слова: сенесцентные клетки, старение, биомаркер, p16INK4a, скорость пульсовой волны, возраст-ассоци-ированные заболевания, секреторный фенотип, ассоциированный со старением.
Понимание биологических механизмов процессов старения необходимо для предупреждения и замедления развития возраст-ассоциированных заболеваний (ВАЗ). Одной из ведущих причин старения организма считается накопление в различных тканях т. н. сенесцентных, или стареющих, клеток (СК). Клеточное старение является необходимым для обновления тканей и их регенерации, но избыточное накопление СК приводит к активации хронического асептического воспаления, дисфункции тканей и развитию ВАЗ. В настоящее время активно разрабатываются подходы к селективной элиминации СК, контролю их активности и реверсии сенесцентного состояния[1].
Для оценки вклада СК в развитие старения и патогенез ВАЗ необходимы релевантные и надежные биомаркеры таких клеток. В качестве такого биомаркера часто используется экспрессия ингибиторов клеточного цикла (например, р16/INK4a). В клинической практике маркерами ВАЗ являются жесткость сосудистой стенки, некоторые гемодинамические и метаболические параметры, а также содержание отдельных цитокинов и факторов
роста в крови. В данной работе мы изучали взаимосвязи между установленными клиническими системными биомаркерами старения и развития ВАЗ и биомаркерами СК на тканевом и клеточном уровнях.
В исследование было включено 38 пациентов старше 65 лет (средний возраст 70 ± 4,9лет), у которых проводили оценку традиционных факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний, жесткости артериальной стенки, а также получали биоматериалы (периферическая кровь, кожа, подкожная жировая клетчатка), из которых затем выделяли различные типы клеток (мононуклеарные клетки крови (МНК), фибробласты (ФБ) и мезенхимные стромальные клетки (МСК)), а также проводили гистологический анализ биоптатов с целью оценки различных маркеров СК.
С помощью корреляционного анализа была подтверждена сильная значимая связь экспрессии р16 в тканях с возрастом (г=0,6, р<0,001), что соответствует литературным данным [2], на организменном уровне выявлена его связь со скоростью пульсовой волны (г=0,394, р=0,015), уровнем УСАМ-1 (г=0,312, р=0,006) в системном кровотоке и уровнем мРНК р16 в МНК (г=0,380, р=0,046). Статистически значимые корреляции были выявлены с показателями пролиферации ФБ и МСК в культуре и приобретением клетками секреторного фенотипа, ассоциированного со старением (БАБР): так, уровень р16 значимо коррелировал с уровнем 11_-6 (сильная связь) и МСР-1 (слабая связь) в секретоме клеток. Результаты многофакторного линейного регрессионного анализа подтвердили, что независимо от возраста с экспрессией р16 связаны показатели пролиферации выделенных клеток и 1_-6 в составе БАБР.
Таким образом, мы установили наличие взаимосвязей между биомаркерами накопления СК в тканях и в клетках, выделенных из этих тканей в культуру, а также выраженностью клинических биомаркеров старения. Полученные данные необходимы для успешной трансляции в клинику подходов, направленных на регуляцию содержания СК в различных тканях. Исследование выполнено в рамках государственного задания МНОЦ МГУ им. М.В. Ломоносова.
ФИБРОБЛАСТЫ, ТУЧНЫЕ КЛЕТКИ, МАКРОФАГИ ДЕСНЫ У БОЛЬНЫХ ПАРОДОНТИТОМ ПОСЛЕ ЛАЗЕРНОЙ ТЕРАПИИ
Е.М. Сперанская
ФГБОУ ВО Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова, Чебоксары, Россия
e-mail: ne28@bk.ru
Ключевые слова: фибробласты, макрофаги, тучные клетки, CD68, пародонтит, диодный лазер.
Фибробласты десны участвуют в воспалительных реакциях и ремоделировании структур пародонта за счет продукции цитокинов, которые активируют миграцию тучных клеток и макрофагов, способствуя восстановлению тканей [1, 2, 3, 4].
Целью исследования стало изучение механизмов, направленных на регуляцию численности десневых фибро-бластов, тучных клеток и макрофагов при хроническом воспалении у людей молодого возраста (20-40 лет).
Материалы и методы. Проанализированы 32 образца десны человека 20-40 лет, полученных при биопсии. Все пациенты были разделены на 3 группы: контрольная
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
группа — пациенты без воспаления пародонта, группа с воспалением пародонта — пациенты с хроническим пародонтитом легкой/средней степени тяжести, группа после лазеротерапии — пациенты с хроническим пародонтитом после терапии диодным лазером. В исследовании использовали окраску гематоксилином-эозином для выявления фибробластов, окраска полихромным толуи-диновым синим по методу Унна для определения тучных клеток. Иммуногистохимическое исследование проводили с использованием моноклональных мышиных антител против антигена CD68 (Dako) в разведении 1:100, для подсчета численности макрофагов.
В результате исследования установлено, что тучные клетки и макрофаги располагались по ходу кровеносных сосудов собственной пластинки десны в образцах всех групп. При хроническом воспалении тучные клетки секретировали незрелый гепарин, после лазерного облучения происходило торможение секреторной активности данных клеток. Фибробласты располагались в собственной пластинке десны равномерно.
При хроническом воспалении число фибробла-стов, тучных клеток, макрофагов было выше, по сравнению с контрольной группой. Воздействие диодного лазера способствовало уменьшению численности фи-бробластов и увеличению численности тучных клеток и макрофагов.
Заключение. Применение диодного лазера у пациентов 20-40 лет с хроническим воспалением пародонта связано с восстановлением численности фибробластов десны и увеличением числа макрофагов, тучных клеток. Лазерное облучение снижает секреторную активность тучных клеток, способствуя созреванию в них гепарина.
Литература:
1. Bostróm E.A., Kindstedt E., Sulniute R. et al. PLoS One. 2015.
№ 10(8). P. e0134608.
2. Ribeiro L.S.F., Dos Santos J.N., Rocha C.A.G. et al. J Histochem
Cytochem. 2018. V. 66(6), P. 467-475.
3. Saglam M, Kóseoglu S, Pekbagriyanik T. et al. J Cosmet Laser
Ther. 2017. V. 19(8). P. 469-474.
4. Basso F.G., Soares D.G., Pansani TN et al. Braz Oral Res. 2016.
V. 30(1). P. e122.
БИОСОВМЕСТИМОЕ БИОДЕГРАДИРУЕМОЕ
МЕЖТЕЛОВОЕ ШЕЙНОЕ УСТРОЙСТВО ДЛЯ
СТАБИЛИЗАЦИИ ШЕЙНЫХ ПОЗВОНКОВ
О.А. Спирин1, А.Г. Аганесов1, М.М. Алексанян1,
А.Е. Крупнин2, С.А. Макаров1
1 ФГБНУ Российский научный центр хирургии им. акад. Б.В. Петровского, Москва, Россия
2 НИЦ Курчатовский институт, Москва, Россия
e-mail: spirinoleg94@gmail.com
Ключевые слова: грыжи межпозвонковых дисков, шейная
дискэктомия, межпозвонковый кейдж.
Грыжи межпозвоковых дисков шейного отдела позвоночника являются частой причиной боли в шейном отделе позвоночника, верхних конечностях и вызывают связанную с компрессией невральных структур патологическую неврологическую симптоматику — 3,3 случая на 1000 человек. Среди данной группы пациентов приблизительно 8-12% нуждаются в оперативном лечении. Стандартом хирургического лечения пациентов с грыжами межпозвонковых дисков шейного отдела позвоночника является передняя шейная дискэктомия [1].
Для создания спондилодеза после дискэктомии применяются межпозвонковые кейджи. Они производятся из высокотемпературного полукристаллического полимера полиэфирэфиркетона (PEEK) или из металла, преимущественно титана. Использование данных имплантов сопровождается риском развития их нестабильности в позднем послеоперационном периоде. Биодеградируемые импланты в течение 6-12 месяцев после операции замещаются собственной костной тканью и за счёт этого минимизируется риск возникновения нестабильности. На мировом рынке существует единственный межтеловой биодеградируемый кейдж, произведенный во Франции в 2009 г. [2], который не получил распространения в связи с высокой стоимостью производства, тогда как на отечественном рынке аналогов нет.
В отделении хирургии позвоночника РНЦХ им. акад. Б.В. Петровского планируется создание биосовместимого биодеградируемого устройства для стабилизации шейных позвонков при операциях на шейном отделе позвоночника. Разработка данного устройства при операциях на шейном отделе позвоночника позволит улучшить результаты хирургического лечения дегенеративных заболеваний шейного отдела позвоночника и минимизировать риск развития инфекционных осложнений и нестабильности, а именно улучшить показатели формирования корпородеза после операции. Учитывая отсутствие подобных устройств на отечественном рынке, а также лишь один импортный аналог с высокой стоимостью, разработка указанного кейджа является актуальной задачей с позиции импортозамещения. В настоящее время разработан и изготовлен опытный образец кейд-жа с применением аддитивных технологий, проводятся комплексные испытания для изучения свойств материалов для выбора наиболее подходящего.
Литература:
1. В.А. Бывальцев, И.А. Степанов, А.А. Калинин [и др.]. Хирургия позвоночника. 2019. Т. 16. № 1. С. 48-56.
2. Debusscher F, Aunoble S, Alsawad Y, Clement D, Le Huec JC.
Eur Spine J. 2009 Sep;18(9):1314-20.
ПЕПТИДЫ АКТГ(4-7)PGP (СЕМАКС) И АКТГ(6-9)PGP СПОСОБСТВУЮТ УВЕЛИЧЕНИЮ ПРОЛИФЕРАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙРОГЛИИ В ПЕРИИНФАРКТНЫХ ЗОНАХ МОЗГА В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ИШЕМИИ
B.В. Ставчанский1, В.В. Южаков2,
Л.Е. Севанькаева2, Н.К. Фомина2, А.Е. Корецкая2, А.Е. Денисова3, И.Б. Филиппенков1,
C.А. Лимборская1, Л.В. Дергунова1
1 ФГБУ Институт молекулярной генетики НИЦ Курчатовский институт, Москва, Россия
2 Медицинский радиологический научный центр им. А.Ф. Цыба — филиал ФГБУ НМИЦ радиологии Министерства здравоохранения Российской Федерации, Обнинск, Россия
3 ФГАОУ ВО Российский национальный исследовательский медицинский университет
им. Н.И. Пирогова Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, Россия
e-mail: bacbac@yandex.ru
Ключевые слова: ишемия мозга, нейропротекция, АКТГ(4-7)PGP (семакс), AKTr(6-9)PGP, tMCAO, морфометрия, имму-ногистохимия, поликлональные кроличьи антитела к PCNA
Гены & Клетки XVII, №3, 2G22
