CC BY
85
разцом изокверцетина не дало депрессии температуры плавления и ориентировочно было идентифицировано как изокверцитрин.
Результаты исследований показали, что флавоноид-
ный комплекс золотарника даурского представлен как агликонами (кверцетин, кемпферол, лютеолин), так и гликозидами, производными кверцетина (рутин, гипе-розид) и лютеолина (лютеолин-7-глюкозид).
ЛИТЕРАТУРА
1. Гринкевич Н.И., Сафронович Л.М. Химический анализ лекарственных растений. — М., 1983. — 176 с.
2. Ковалёв И.П., Титов Е.В. Инфракрасные спектры поглощения некоторых групп природных соединений (Атлас спектров). — Харьков, 1966. — 266 с.
3. Максютина Н.П., Литвиненко В.И. Методы выделения и исследования флавоноидных соединений //Фенольные соединения и их биологические функции. — М., 1968. — С. 7-26.
4. Мирович В.М. Фармакогностическое изучение родов Origanum L. и Rhododendrum L. флоры Восточной Сибири: Автореф. дисс. ... д-ра фарм. наук. — Улан-Удэ, 2010. — 40 с.
5. Наканиси К. Инфракрасные спектры и строение органических соединений. — М.: Мир, 1965. — 216 с.
6. Тюкавкина Г.А., Литвиненко В.И., Шостаковский М.Ф. Хроматография на полиамидных сорбентах в органической химии. — Новосибирск: Наука, 1973. — 176 с.
Информация об авторах: Горячкина Елена Геннадьевна — доцент, к.ф.н., 664003 г. Иркутск ул. Красного Восстания, 1, ИГМУ, кафедра фармакогнозии и ботаники, тел. (3952) 243447, e-mail: rosforest@mail.ru; Буинов Максим Владимирович — аспирант; Федосеева Галина Михайловна — профессор, д.ф.н.
© СМАГУЛОВА Т.Б., ХОБРАКОВА В.Б. — 2013 УДК: 615.322
ФАРМАКОТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ РАСТИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА «ФИТОТОН» ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ИММУНОДЕФИЦИТЕ
Туяна Базаржаповна Смагулова1, Валентина Бимбаевна Хобракова2 ^Бурятский государственный университет г. Улан-Удэ, ректор — чл.-корр. РАО, проф. С.В. Калмыков;
2Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор — д.б.н., проф. Л.Л. Убугунов)
Резюме. В опытах на мышах линии F1 (CBAxC57Bl/6) установлена фармакотерапевтическая эффективность растительного средства «Фитотон» при азатиоприновой иммуносупрессии. Показано, что испытуемое средство способно ослаблять супрессивное действие цитостатика азатиоприна на антителогенез, клеточноопосредованную иммунную реакцию гиперчувствительности замедленного типа и фагоцитоз макрофагов, что выражается в повышении иммунологических показателей.
Ключевые слова: растительное средство «Фитотон», иммунитет, иммуномодулятор, иммунодефицит, азатиоприн, антителообразование, гиперчувствительность замедленного типа, фагоцитоз.
PHARMACOTHERAPEUTIC EFFICIENCY OF THE PLANT REMEDY "PHYTOTON" IN EXPERIMENTAL IMMUNODEFICIENCY
T.B. Smagulova1, V.B.Khobrakova2 (1Buryat State University, Ulan-Ude; 2Institute of General and Experimental Biology,
Siberian Division, Russian Academy of Sciences, Ulan-Ude, Russia)
Summary. The pharmacotherapeutic efficiency of the plant remedy «Phytoton» in azatioprin immunosupression has been established in experiments on the F1 (СВАхС57В1/6) mice. The remedy «Phytoton» is capable to decrease suppressive effect of cytostatic azatioprin on antibody genesis, cellularindirect immune reaction — hypersensitivity of slow type and phagocytosis of macrophages, what is expressed by the increasing the immune indices.
Key words: plant remedy «Phytoton», immunity, immunomodulator, immunodeficiency, azatioprin, antibody genesis, hypersensitivity of slow type, phagocytosis.
Ухудшение экологической обстановки, нарушение питания, изменение темпа жизни в условиях повышенного потока информации, особенно в городах, на фоне гиподинамии, а также при злоупотреблении алкоголем, курении могут привести к ослаблению защитных механизмов организма. Необходимость повышения адаптации организма человека обусловливает актуальность поиска новых эффективных растительных средств, повышающих иммунологическую реактивность организма. Применяемые в качестве иммуномодуляторов лекарственные растения отличаются от синтетических иммуностимуляторов мягким действием, низкой токсичностью, отсутствием побочных эффектов. Их действие определяется разнообразием биологически активных веществ (флаво-ноидов, полисахаридов, дубильных веществ, витаминов и т.д.) [1,3]. Объектом настоящего исследования явилось многокомпонентное растительное адаптогенное средство «Фитотон» — сухой экстракт из надземной части лабазника вязолистного Filipendula ulmaria (L.) Maxim, мяты перечной Mentha piperita L, корней бадана толстолистного Bergenia crassifolia (L.). Ранее для этого средства в экспериментальных работа была продемонстрированы адапто-
генные свойства [] и нейропротекторная активность [8].
Целью настоящего исследования явилось определение иммуномодулирующих свойств многокомпонентного растительного адаптогенного средства «Фитотон» в реакциях клеточного, гуморального и макрофагального звеньев иммунного ответа.
Материалы и методы
Эксперименты проведены на мышах-самцах линии Б1 (СВА хС57В1/6) массой 18-20г. Эксперименты проводили в соответствии с «Правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных и научных целях». Иммунодефицитное состояние у мышей контрольной и опытной групп воспроизводили путем внутрижелудочного введения азатиоприна в дозе 50м/кг 1раз в сутки в течение 5 дней [2]. Животным опытной группы на фоне азатиприновой иммуносупрессии внутрижелудочно вводили «Фитотон» в экспериментально-терапевтической дозе 300 мг/кг. Первое введение осуществляли по окончании введения азатиоприна, на 6 день эксперимента и далее в течение 14 дней 1 раз в сутки.
Примечание: здесь и далее п — количество животных в группе, ет, что разница существенна (р<0,05) по сравнению с контролем.
Интактная группа животных получала воду, очищенную по аналогичной схеме.
Действие испытуемого средства на состояние клеточного звена иммунного ответа оценивали в реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) согласно стандартной методике локальной ГЗТ [5]. Мышей сенсибилизировали внутрибрюшинным введением 0,1%-ной взвеси эритроцитов барана (ЭБ) в физиологическом растворе.
Таблица 2
Влияние «Фитотона» на выраженность реакции гиперчувствительности замедленного типа при азатиоприновой супрессии у мышей
№ п/п Группы животных Индекс реакции ГЗТ,%
1 Интактная (очищенная вода), п=10 38,96±3,12
2 Контрольная (азатиоприн+ очищенная вода), п=10 18,46±1,65
3 Опытная (азатиоприн+ «Фитотон»), п=10 33,02±3,10*
На 4-е сутки под подошвенный апоневроз задней лапки вводили разрешающую дозу антигена — 50мкл 50%-ной взвеси ЭБ. В контрлатеральную лапку вводили физиологический раствор в том же объеме. Оценку реакции ГЗТ проводили через 24 часа по разнице массы опытной и контрольной лапок.
Состояние гуморального иммунитета оценивали по количеству антителообразующих клеток (АОК), определяемых методом локального гемолиза по A.J. Cunningham (1965) [11]. Мышей иммунизировали внутрибрюшинно ЭБ в дозе 2х108 клеток/мышь. Величину иммунного ответа оценивали по числу антителообразующих клеток (АОК) на селезенку и на 106 клеток с ядрами на 5-е сутки после иммунизации.
Состояние макрофагального звена иммунного ответа оценивали в реакции фагоцитоза перитонеальных макрофагов в отношении частиц коллоидной туши. Оптическую плотность лизата клеток перитонеального экссудата, отражающую количество туши, поглощенной перитонеальными макрофагами, определяли при длине волны 620 нм [5].
Полученные результаты обработаны статистическим методом с помощью критерия Стьюдента. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез р=0,05 [4].
Результаты и обсуждение
Введение азатиоприна сопровождалось развитием иммунодефицитного состояния, характеризующегося угнетением всех звеньев иммунного ответа организма мышей. Исследование гуморального иммунитета, оцениваемого по количеству АОК, показало у мышей контрольной группы уменьшение как абсолютного, так и относительного их числа на 39% и 47%, соответственно, по сравнению с теми же показателями в интактной группе (табл.1).
При введении исследуемого средства на фоне азатиоприновой иммуносупрессии наблюдали статистически значимое увеличение количества АОК как в абсолютных значениях, так и при расчете на 106 спленоцитов; при этом первый показатель превышал уровень азатиоприновой супрессии в 1,8 раза, второй — в 1,3 раза.
Исследование клеточного звена иммунного ответа при азатиоприновой супрессии у мышей показало снижение реакции ГЗТ на 53% по сравнению с тем же показателем в интактной группе (табл. 2).
Курсовое введение испытуемого средства на фоне азати-оприна сопровождалось повышением индекса реакции ГЗТ в 1,8 раза по сравнению с таковым в контрольной группе.
Как следует из данных, приведенных в таблице 3, при азатиоприновой супрессии отмечается снижение фагоцитарного индекса на 33%. Курсовое введение фитосредства оказывает имуно стимулирующее действие, о чем свидетельствует увеличение фагоцитарного индекса в 1,6 раза по сравнению с таковым в контрольной группе.
Таблица 3
Влияние «Фитотона» на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов при азатиоприновой супрессии
№ п/п Группы животных Фагоцитарный индекс, оптическая плотность, усл.ед.
1 Интактная (очищенная вода), п=10 0,369±0,012
2 Контрольная (азатиоприн + очищенная вода), п=10 0,249±0,026
3 Опытная (азатиоприн+ «Фитотон»), п=10 0,407±0,040*
Эффективность исследуемого средства обусловлена совокупным действием комплекса биологически активных веществ, преимущественно, флавоноидами, дубильными веществами, полисахаридами, каротиноидами, эфирными маслами, обладающими выраженными иммуномодулирующими свойствами [1, 3, 7]. Кроме того, наши данные согласуются с данными работ Е.Г. Седуновой (2000), А.А. Чурина и соавт. (2005, 2008), в которых установлена выраженная иммуномодулирующая активность сухих экстрактов бадана толстолистного, лабазника вязолистно-го, входящих в состав испытуемого средства [6, 9, 10].
Таким образом, полученные данные позволяют заключить, что курсовое введение растительного адаптогенного средства «Фитотон» на фоне азатиоприновой иммуносупрессии оказывает выраженное протективное действие, предотвращая развитие иммунодефицитного состояния. При этом установлено, что испытуемое средство способствует активации всех звеньев иммунного ответа: гуморального, клеточного и макрофагального.
Таблица 1
Влияние «Фитотона» на антителообразование у мышей при азатиприновой супрессии
№ п/п Группы животных Абсолютное число АОК на селезенку Число АОК на 106 спленоцитов
1 Интактная (очищенная вода), п=10 40673 ±2104 348 ±28
2 Контрольная (азатиоприн), п=10 24802 ±1393 183 ±10
3 Опытная (азатиоприн+ «Фитотон»), п=10 44742 ±3334* 235±22*
* — означа-
ЛИТЕРАТУРА
1. Бакуридзе А.Д., Курцикидзе М.Ш., Писарев В.М. и др. Иммуномодуляторы растительного происхождения // Химико-фармацевтический журнал. —1993. — № 8. — С. 43-47.
2. Лазарева Д.Н., Алехин Е.К. Стимуляторы иммунитета. — М.,1985. — 256 с.
3. Лазарева Д.Н., Плечев В.В., Моругова Т.В., Самигуллина Л.И. Растения, стимулирующие иммунитет. — Уфа, 2005. — 96 с.
4. Лакин Г.Ф. Биометрия. — М., 1990. — 352 с.
5. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред.
Р.У. Хабриева. — М., 2005. — С. 80.
6. Седунова Е.Г. Влияние экстракта бадана толстолистного на состояние иммунной системы организма в эксперименте: Автореф. дисс.... канд. мед. наук. — Улан-Удэ, 2000. — 25 с.
7. Толкачев О.Н., Шипулина Л.Д., Шейченко О.П. Новые растительные полифенолы — активные противовирусные агенты и иммуномодуляторы // М. 1. 1шшипогеЬаЬП. — 1999. — №14. — С. 9.
8. Смагулова Т.Б., Разуваева Я.Г., Николаев С.М. Исследование нейропротективной активности растительного средства «Фитотон». // Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра СО РАМН. — 2012. — №6. — С. 80-84.
9. Смагулова Т.Б., Тэн Н.В., Николаев С.М. Адаптогенное действие комплексного растительного средства «Фитотон» в условиях эксперимента // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). — 2008. — Т. 79. №4. — С. 80-82.
10. Чурин А.А., Масная Н.В., Шерстобоев Е.Ю., Суслов Н.И. Влияние экстракта Bergenia crassifolia на показатели специфического иммунного ответа в условиях экстремальных воздействий // Экспериментальная и клиническая фармаколо-
гия. — 2005. — Т.68. №5. — С. 51-54.
11. Чурин А.А., Масная H.B., Шерстобоев Е.Ю., Шилова ИМ. Влияние экстракта Filipendula ulmaria на иммунную систему мышей CBA/CaLac и C57Bl/6 // Экспериментальная и клиническая фармакология. — 2008. — Т.71, №5. — С. 32-36.
12. Cunningham A.J. A method of increased sensitivity for detecting single antibodyforming cells // Nature. — 1965. — Vol.207. — № 5001. — P.1106-1107.
Информация об авторах: Смагулова Туяна Базаржаповна — аспирант, 670000, г. Улан-Удэ, ул. Октябрьская, 36а, тел. (3012) 448255; Хобракова Валентина Бимбаевна — с.н.с., к.б.н., доцент, 670047, г.Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6, Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, тел. (3012) 434743, факс (3012) 433034, e-mail: val0808@mail.ru
© УСТЮЖИНА Т.В, ГОРОХОВА А.В., ИВАНОВА О.Н. — 2013 УДК 616.345-008.87-053.4
ПРИМЕНЕНИЕ ПРЕПАРАТА ЭКСТРАКТА РОДИОЛЫ РОЗОВОЙ У ДЕТЕЙ С ИНФЕКЦИЯМИ МОЧЕВЫВОДЯЩИХ ПУТЕЙ
Татьяна Вячеславовна Устюжина, Ольга Николаевна Иванова (Северо-Восточного федерального университета имени М.К. Аммосова, Якутск, ректор — д.п.н., проф. Е.И. Михайлова, кафедрой педиатрии и детской хирургии, зав. — д.м.н. О.Н. Иванова)
Резюме. Данная статья посвящена изучению эффективности иммунотропной терапии у детей с инфекциями мочевыводящей системы. Исследование включает определение бактериального спектра инфекций мочевых путей и изучению особенностей иммунного статуса у больных. У детей с инфекциями мочевых путей снижены показатели клеточного иммунитета (CD3+, CD 4+, CD8+, CD16+, CD22+). У детей с инфекциями мочевых путей отмечено снижение уровня содержания цитокинов (IFN-y, FNO-a), что свидетельствует о снижении защиты и о риске формирования затяжного течения ИМВС. Использование препарата экстракта родиолы розовой позволило коррекцию сниженных показателей иммунного статуса.
Ключевые слова: дети, инфекция, заболеваемость, иммунология, распространенность, бактериальный спектр, ро-диола розовая.
THE USE OF PREPARATION OF RODIOLA ROSE EXTRACT IN CHILDREN WITH INFECTION OF URINARY TRACTS
T V. Ustugina, O.N. Ivanova (North-East Federal University named after M.K. Ammosov, Yakutsk, Russia)
Summary. The present study is devoted to the problems of prevalence of infections of urinary tracts in children of Republic Sakha (Yakutia) — the region with extreme climatic and geographical conditions. The research included definition of bacterial spectrum of infections of urinary tracts and study of features of immune status in patients. In children with infections of urinary tracts the indicators of cellular immunity (CD3 +, CD4 +, CD8 +, CD16 +, CD 22 +) are lowered. In children with infections of urinary tracts the decrease of level of cytokins content (IFN — y, FNO — a) is noticed, that testifies the decrease of protection and risk of formation of prolonged course of infections of urinary tracts. The use of preparation of rodiola rose extract in the treatment allowed to correct the lowered indices of immune status.
Key words: children, infection, morbidity, immunology, prevalence, immunity, a bacterial spectrum, Rhodiola rosea L.
Инфекции мочеввыводящей системы (ИМС) — это общий термин для обозначения гетерогенной группы инфекционно-воспалительных заболеваний органов мочевой системы без специального указания на локализацию и этиологию.
В структуре заболеваний органов мочевой системы у детей больные микробно-воспалительным поражением почек и мочевых путей составляют 70-80%. Распространенность ИМС у детей в Российской Федерации в среднем 18-22 на 1000 детской популяции [1, 2, 3, 5].
Изучение клинико-иммунологического течения и эффективности иммунокоррегирующих препаратов у детей с ИМС представляет научный интерес [4, 5].
Цель исследования: изучить особенности клинико-иммунологического течения и эффективность иммунотроп-ной терапии экстрактом родиолы розовой (Rhodiola rosea L.) у детей с инфекциями мочевыводящих путей у детей.
Материалы и методы
Всего осмотрено 56 детей в возрасте от 1 до 17 лет с ИМС на базе консультативной поликлиники Республиканской больницы №1 педиатрического центра Национального центра медицины. У всех родителей взято информированное добровольное согласие на медицинское вмешательство в соответствии с правовым законодательством Российской Федерации, лица старше 14 лет также дополнительно самостоятельно подписывали форму информированного согласия.
Диагноз инфекция мочевыводящей системы (ИМС) был выставлен на основании жалоб, данных анамнеза,
клинической картины заболевания и результатов лабораторных и инструментальных исследований. Дети с острым течением заболевания составили 24 (43%) человека, с хроническим — 32 (57%). Возрастной состав детей был следующим: 1-3 года — 10 (18%) детей, 3-6 лет — 12 (22%), 6-12 лет — 21 (37%), 12-17 лет — 13 (23%).
Как видно из таблицы 1, сравниваемые группы детей сопоставимы по возрасту и полу.
Препарат экстракта родиолы розовой давался 56 детям основной группы 2 раза в сутки из расчета 1 капля на год жизни ребенка. Препарат производится институтом биологии СО РАН г. Якутск из местного сырья, имеет регистрацию фармацевтического комитета Российской Федерации.
Всем детям проведено клиническое обследование с проведением общего анализа мочи, крови, пробы Зим-ницкого и Нечипоренко, дальнейшее наблюдение проводилось в катамнезе последующего года после проведенной терапии. Контрольная группа детей — 100 здоровых детей в возрасте от 1 года до 17 лет.
Определение субпопуляций Т- и В-лимфоцитов производилось методом иммунофлюорисцентного анализа с помощью моноклональных антител и лимфоцитотоксическим тестом с моноклональными антителами. Нормативы разработаны коллективом иммунологической лаборатории Диагностического центра Минздрава РС (Я) совместно с Институтом здоровья РС (Я) (в табл. 1 представлен возраст детей от 1 года до 17 лет). Все исследования проводились в период низких температур (зимнее время года). Уровень 1Ь-1, 1Ь-13, №N-7, FNO-a в сыворотке определяли
