EVALUAREA PREZENȚEI ANTICORPILOR ANTI SARS-COV-2 LA DONATORII DE PLASMĂ CONVALESCENTĂ CU SCOPUL DE A ARGUMENTA UTILIZAREA LOR ÎN TRATAMENTUL COVID-19 Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

ORRM

'MEDICAL SCIENCES

Qaccess^^^

OPEN ACCESS

EVALUAREA PREZENTEI ANTICORPILOR ANTI SARS-COV-2 LA DONATORII DE PLASMÁ CONVALESCENT! CU SCOPUL DE A ARGUMENTA UTILIZAREA LOR IN TRATAMENTUL COVID-19

Constantin SPÍNU1, Svetlana CEBOTARI2, Octavian SAJIN1, Igor SPÍNU2, Ala DONOS3, Ana VOLNEANSCHI1, Igor GOSTEV1, Iurie DOPIRA4

1Agentia Nationala pentru Sanatate Publica, República Moldova 2Centrul National de Transfuzie a Sángelui, República Moldova

3Universitatea de Stat de Medicina si Farmacie „Nicolae Testemitanu", Republica Moldova 4 SC Balkan Pharmaceuticals SRL, Chisinau, Republica Moldova

Autor corespondent: Octavian Sajin, e-mail: [email protected] DOI: 10/38045/ohrm.2021.2.08 CZU: 616.98:578.834.1-078

Keywords: COVID-19 treatment, plasma donors, anti SARS-CoV-2, IgG class antibodies.

Cuvinte cheie: trata-mentul COVID-19, plasma donatorilor, anti SARS-CoV-2, an-ticorpi IgG.

ASSESSMENT OF ANTI SARS-COV-2 ANTIBODIES PRESENT IN CONVALESCENT PLASMA DONORS AIMED AT BEING USED IN COVID-19 TREATMENT Introduction. Currently, COVID-19 treatment includes several options, including the use of convalescent plasma. Therefore, the presence of anti-SARS-CoV-2 in blood donors after the clinical recovery of COVID-19, depending on their place of residence, age and the clinical manifestation of the disease is of scientific-practical interest.

Material and methods. A total of 119 donors among patients were examined, namely males aged 18-60 years, having a past history of COVID-19 disease, being confirmed by PCR and treated, showing a negative PCR-based test result, which was performed at least 14 days after clinical recovery. The presence/absence of anti-SARS-CoV-2 was assessed by enzyme-linked immunosorbent assay.

Results. The obtained data showed that 87.4% of plasma donors responded to COVID-19 infection by anti-SARS-CoV-2 IgG expression, being predominantly found in the 26-35 age group. Most donors experienced mild and medium clinical forms. It is important to note that all severe clinical manifestations of the infection were followed by formation of anti-SARS-CoV-2 IgG. Urban living environment was predominantly found in convalescent donors (75.0%), which indicates that they are better informed by medical institutions. Conclusions. The study shows that male blood donors aged 18-60 years, subsequently cured and being positive to anti-SARS-CoV-2 IgG can serve as a source of fresh plasma used for the treatment of COVID-19 patients.

Introducere. Tratamentul COVID-19 include mai multe optiuni, inclusiv utilizarea plasmei convalescente. Astfel, prezinta un interes stiintifico-practic existenta anticorpilor anti SARS-CoV-2 la donatorii de sange dupa recuperarea clinica de COVID-19, in functie de mediul de trai, de varsta si de forma de manifestare clinica a bolii.

Material si metode. Au fost examinati 119 donatori din randul pacientilor, persoane de sex masculin, cu varsta de 18-60 ani, cu istoric de boala COVID-19, caz confirmatprin PCR, vindecati, cu rezultat negativ pentru COVID-19, confirmat de testul PCR, la cel putin 14 zile de la recuperarea clinica. Prezenta/absenta anti SARS-CoV-2 a fost apreciata prin analiza imunoenzimatica.

Rezultate. Datele obtinute releva ca 87,4% dintre donatorii de plasma au raspuns la in-fectia COVID-19 prin expresia anti SARS-CoV-2 IgG, cu predominare in grupul de varsta de 26-35 ani. Majoritatea donatorilor au facut forma clinica usoara si medie. Este important de mentionat ca toate formele clinice grave de manifestare a infectiei au fost insotite de producerea de anti SARS-CoV-2 IgG. Donatorii sunt preponderent din mediul urban (75%), fapt ce indica ca acestia sunt mai bine informati de institutiile medicale. Concluzii. Donatorii de sange de genul masculin, cu varsta de 18-60 ani, au avut o imuno-geneza activa in urma infectarii cu SARS-CoV-2, manifestand un nivel inalt de pozitivitate la anticorpii infectiei date.

ORRM

INTRODUCERE

La momentul de fata sunt studiate mai multe optiuni pentru tratamentul COVID-19, printre care se evidentiaza medicamente nou concepute pentru a viza SARS-CoV-2, dar si unele variante terapeutice deja existente si implementate în tratamentul altor maladii. Optiunile terapeutice investigate pentru COVID-19 pot fi clasificate dupa cum urmeaza: tratamente cu rezultate bune (Dexametazona, Remdesivir) (1, 2, 3, 4, 5); tratamente promitatoare (plasma convalescenta, anti-corpi monoclonali, Famipirovir, interferon) (6, 7, 8, 9, 10); tratamente în fazele initiale de studiu (Ivermectina, MK-4482, proteina ACE, epurarea sângelui, anticoagulante) (3, 5, 11, 12).

Concomitent, mentionam ca OMS a prezentat in-formatii ca produsele medicamentoase: Remdesi-vir, Lopinavir/Ritonovir, Hidroxiclorixin si inter-feronii, nu demonstreaza, în conditii de spital, un efect evident asupra reducerii mortalitatii.

Cel mai vechi tratament, dintre cele mentionate mai sus si testat deja de mai bine de 100 de ani în cazul altor boli infectioase, este plasma convalescenta. Acesta consta în utilizarea plasmei sanguine, recoltate de la persoanele care s-au vinde-cat de COVID-19 si administrarea acesteia per-soanelor infectate cu noul coronavirus. Plasma, transfuzata pacientilor care se afla în stare grava si extrem de grava, ofera un impuls sistemului imunitar, astfel favorizând accelerarea procesului de recuperare. Utilizarea plasmei convalescente implica transferul de anticorpi de la bolnavii care deja au un raspuns imun, oferind astfel protectie individuala (dar tranzitorie) destinatarului (6, 7, 8). Concluzia unui studiu timpuriu, cu 39 pacienti având COVID-19, este ca plasma convalescenta poate fi un tratament eficient, mai ales pentru pa-cientii ne intubati (7). Un studiu a 136 pacienti cu COVID-19 a demonstrat o reducere a mortalitatii (comparativ cu cei carora nu li s-a administrat plasma), daca tratamentul e initiat devreme si ni-velul de anticorpi e mai ridicat (8). Pe de alta parte, un studiu olandez a fost sistat în faze initiale, atunci când s-a observat ca nu exista vreo ame-liorare a starii celor care primesc plasma si s-a constatat ca, oricum, pacientii au dezvoltat anti-corpi si fara acest tratament (13).

Exista însa probleme majore în a stabili eficienta acestui tratament: recoltarea de plasma de la cei care au avut COVID-19 este o procedura anevo-

ioasa si nivelul de anticorpi difera de la pacient la pacient.

Un studiu efectuat in SUA, la Mayo Clinic, a urmarit evolutia a peste 35.000 subiecti care au primit plasma convalescenta, majoritatea dintre ei fiind in fazele critice ale bolii (6). Concluzia ob-servatiei a fost ca pacientii carora li se admi-nistreaza tratamentul cu plasma convalescenta la 72 ore de la diagnostic prezinta un risc mai scazut de deces (21,7% dupa 30 zile) fata de cei carora li se face transfuzia de plasma la 96 ore sau mai mult (26,7%). Totusi in acest studiu a lipsit un lot de control, ceea ce reduce din relevanta acestor concluzii, iar plasma rämäne la stadiul de „tratament experimental", cel putin in SUA (2).

Bazändu-ne pe abordarile din diferite tari, mentionate mai sus si pe faptul ca in Republica Moldova plasma convalescenta este aprobata si reco-mandata pacientilor care dezvolta forme clinice severe de COVID-19 (14), am considerat ca stabi-lirea nivelului de decelare a anticorpilor anti SARS-CoV-2 in plasma donatorilor convalescenti, cu scopul de a argumenta utilizarea sau exclude-rea acestui tip de terapie in tratamentul COVID-19 prezinta un interes stiintific evident.

Ipoteza studiului: Cea mai mare parte a conveles-centilor de COVID-19 au avut o imunogeneza activa, manifestata printr-un nivel inalt de sero-pozitivitate a anticorpilor anti SARS-CoV-2, fapt care recomanda utilizarea plasmei acestora in tratamentul formelor medii si grave ale maladiei.

MATERIAL SI METODE

Studiul a inclus 119 donatori din rändul pacientilor (prezumtiv testati la absenta markerilor infectiilor hemotransmisibile: hepatitele virale B, C si D si virusul HIV), din diferite teritorii administrative ale Republicii Moldova (15, 16, 17), de gen masculin, cu värsta cuprinsa intre 18-60 ani, cu istoric de boala COVID-19, caz confirmat, vin-decati (rezolvarea completa a simptomelor) si re-zultat negativ pentru COVID-19, confirmat prin test PCR, la cel putin 14 zile de la recuperarea clinica. Testul PCR a fost realizat prin utilizarea echi-pamentului Applied Biosystems, SUA si a consu-mabilelor, dupa cum urmeaza: RIBO, Rusia (kit pentru extractie) si N-CoV (China) kit pentru amplificare. Analiza imunoenzimatica ELISA pentru identificarea anti SARS-CoV-2 IgG a fost realizata prin utilizarea ELISA, Generic Assays GmbH (Germania). Procesarea statistica a rezultatelor obti-

ORRM

nute a fost realizata cu ajutorul Microsoft Excel 2019.

REZULTATE

Lotul de 119 donatori de plasma convalescenta a fost repartizat în functie de vârsta în urmatorul mod: au prevalat persoanele cu vârsta cuprinsa între 26 si 45 ani, într-un numar mai redus au fost donatorii de 18-25 ani si 46-60 ani. Din numarul total de donatori, 104 (87,4%) au demonstrat prezenta anti SARS-CoV-2, clasa IgG, iar la 15 (12,6%) a fost constatata absenta anticorpilor. Donatorii identificati pozitiv la prezenta anti SARS-CoV-2 s-au repartizat astfel, conform vârstei: 18-25 ani (12,5%), 26-35 ani (37,5%), 3645 ani (28,8%) si 46-60 ani (21,2%) (tab.1).

Anticorpii nominalizati au fost identificati mai des la grupul de varsta 26-45 ani (p=0,01), fenomen ce poate fi explicat prin imunogeneza mai activa la acest contingent, cu formarea de anti SARS-CoV-2, comparativ cu persoanele cu varsta >60 ani (17).

Analiza absentei anti SARS-CoV-2 IgG in grupurile de varsta demonstreaza ca acesti indicatori, dupa valoare, statistic nu se deosebesc (p>0,05), cu toate ca la grupul de 46-60 ani se atesta o tendinta de reducere a acestui indicator, dar pentru argu-mentarea acestei constatari se cere prezenta unor studii suplimentare, cu un numar mai mare de donatori de plasma.

Tabelul 1. Rezultatele investigarii donatorilor de plasma la anti SARS-CoV-2 IgG prin ELISA.

Vârsta (ani) Prezenta anti SARS-CoV-2 IgG Absenta anti SARS-CoV-2 IgG

din numarul total din numarul celor din numarul total din numarul de donatori pozitivi de donatori celor negativi

Ani abs. P±ES abs. P±ES abs. P±ES abs. P±ES abs. %

18-25 18 15,1±3,3 13 10,9±2,9 13 12,5±3,2 5 4,2±1,8 5 33,3

26-35 44 37,0±4,4 39 32,8±4,3 39 37,5±4,7 5 4,2±1,8 5 33,3

36-45 33 27,7±4,1 30 25,2±4,0 30 28,8±4,4 3 2,5±1,4 3 20,0

46-60 24 20,2±3,7 22 18,5±3,6 22 21,2±4,0 2 1,7±1,2 2 13,4

18-60 119 100,0 119 87,4±3,0 104 100,0 15 12,6 15 100,0

In functie de mediul de trai, donatorii s-au pre-zentat astfel: urban - 90 (75,6%) si rural - 29 (24,4%) (p=0,001). Probabil, aceasta diferenta poate fi explicata prin nivelul mai inalt de informare al celor din mediul urban de catre insti-tutiile medico-sanitare, prin accesul la diferite surse mass-media si la transportul public pentru a se deplasa la punctele de donare. Mai mult, ma-joritatea bolnavilor, respectiv a donatorilor, care au contractat boala si s-au recuperat, provin din localitatile urbane (18). Ponderea donatorilor, in

functie de forma de manifestare clínica a infectiei COVID-19, a fost urmatoarea: forme clinice usoare (infectii respiratorii virale acute) - 73 (61,3%), forma clinica medie (laringotraheita acuta, bronsita acuta, rinofaringita acuta) - 36 (30,3%) si forme grave (pneumonie bilaterala, forma grava) - 10 (8,4%). Este necesar de mentio-nat ca dintre donatorii de plasma, testati negativ la prezenta anti SARS-CoV-2 IgG, nu s-au regasit cei cu forme grave de manifestare clinica a bolii (tab. 2).

Tabelul 2. Distribuirea donatorilor de plasma convalescenta conform mediului de trai, formei clinice a

COVID-19, rezultatului la anti SARS-CoV-2.

Mediul de trai

Forma clinica a COVID-19

Anti SARS-CoV-2

urban

rural

ugoara

medie

grava

pozitiv

negativ

abs. P±ES abs. P±ES abs.

P±ES abs.

P±ES abs. P±ES abs.

P±ES abs.

P±ES

90 95,6±3,9 29 24,4±3,9 73 61,3±4,5 36 30,3±4,2 10 8,4±2,5 104 87,4±3,0 15 12,6±3,0

Prezinta interes stiintifico-practic datele privind repartizarea donatorilor de plasma convalescenta cu anti SARS-CoV-2 dupa vârsta, mediul de trai si forma de manifestare clinica a infectiei re-

flectate în Tabelul 3.

În functie de vârsta, donatorii de plasma convalescenta s-au repartizat astfel: 18-25 ani (12,5%); 26-35 (37,5%); 36-45(28,8%); 46-60 ani - 21,2%.

ORRM

Tabelul 3. Distribuirea donatorilor de plasma convalescenta pozitivi la anti SARS-CoV-2 dupa vârsta,

mediul de trai forma clinica a COVID-19.

Vârsta Mediu de trai Forma clinica a COVID-19

urban rural usoara medie grava

ani abs. P±ES abs. P±ES abs. P±ES abs. P±ES abs. P±ES abs. P±ES

18-25 13 12,5±3,2

26-35 39 37,5±4,7 78 75,0±4,2 26 25,0±4,2 63 60,6±4,8 31 29,8±4,5 10 9,6±2,9

36-45 30 28,8±4,4

46-60 22 21,2±4,0

Dátele prezentate demonstreaza ca ponderea donatorilor cu anti SARS-CoV-2 care au donat plasma convalescenta a fost mai ínalta ín grupurile de vársta de 26-35 ani (37,5%) si de 36-45 ani (28,8%), comparativ cu grupul de vársta 18-25 ani (12,5%) (p=0,01).Aceasta diferenta poate fi explicata partial prin faptul ca incidenta COVID-19 ín Republica Moldova este sporita ín rándul persoanelor de 26-45 ani (18).

Ponderea donatorilor de plasma cu anti SARS-CoV-2 IgG ín functie de forma clinica de manifestare a bolii s-a prezentat astfel: usoara (infectii respiratorii virale acute) - 63 (60,6%); medie (la-ringotraheita acuta, bronsita acuta, rinofaringita acuta) - 31 (29,8%) si grava (pneumonie bilate-rala, forma grava) - 10 (9,6%). Analizánd rezul-tatele prezentate ín Tabelul 3, constatam ca la do-natorii de plasma, pozitivi la prezenta anti SARS-CoV-2 IgG, a dominat forma usoara de manifestare clinica a bolii (60,6%), urmata fiind de forma

medie - 29,8%. Forma grava de manifestare a infectiei COVID-19 la donatorii de plasma a consti-tuit 9,6%, fapt care poate fi explicat partial prin incidenta mai joasa a acestei forme, comparativ cu cele medii si grave.

Repartizarea donatorilor de plasma convalescenta negativi la prezenta anti SARS-CoV-2 dupa vârsta, mediul de trai si forma de manifestare clinica a infectiei COVID-19, releva urmatoarele: dupa vârsta nu se atesta o diferenta statistica semnificativa între grupuri (p>0,05); dupa mediul de trai, ponderea donatorilor din mediul urban este mai mare, decât a celor din mediul rural, fapt explicabil prin dominarea absoluta a donatorilor din spatiul urban, dar pentru concluzii relevante se cer studii suplimentare. Prezinta interes pon-derea donatorilor la care anticorpii anti SARS-CoV-2 nu au fost detectati în plasma, în functie de forma de manifestare clinica a infectiei COVID-19 (tab. 4).

Tabelul 4. Distribuirea donatorilor de plasma convalescenta negativi la anti SARS-CoV-2 dupa vârsta,

mediu de trai forma clinica a COVID-19.

Vârsta

Mediu de trai

Forma clinica a COVID-19

urban rural uçoara medie grava

ani abs. P±ES abs. P±ES abs. P±ES abs. P±ES abs. P±ES abs. P±ES

18-25 5 33,3±12,2

26-35 5 33,3±12,2 12 80,0±10,3 3 20,0±10,3 10 66,7±12,1 5 33,3±12,2

36-45 3 20,0±10,3

46-61 2 13,3±8,7

Forma clínica usoarâ a fost identificatâ la 10 donatori, iar forma clinicâ medie - la 5 donatori, este important de mentionat câ forma gravâ de manifestare a COVID-19 nu a fost depistatâ la donatorii testati negativ la prezenta anti SARS-CoV-2. Probabil, aceste date ne sugereazâ ideea câ formele grave de boalâ induc producerea de anti SARS-CoV-2 într-un procent mult mai sporit, compa-ra-tiv cu formele usoare si medii, dar si în aceastâ si

tuatie se cer efectúate studii suplimentare (17). DISCUTII

Merita atentie dátele care demonstreaza ca la 40 donatori de plasma convalescenta, care au donat repetat dupa 8-25 zile, indicii de referinta a pro-belor de plasma, testate in dinamica (repetat), exprimate prin valoarea cut-off, rezultat negativ, echivoc si pozitiv in ELISA, practic nu se deose-

ORRM

besc, ceea ce demonstreaza ca la pacientii cu CO-VID-19, dupa recuperare, anti SARS-CoV-2 IgG se pastreaza, însa, pentru stabilirea termenului limita de identificare a anticorpilor nominalizati, se cere monitorizarea acestui fenomen în continuare (19).

Rezultate similare au fost obtinute si de alti cer-cetatori (20, 21, 22), de exemplu, de Ibarrondo si colaboratorii, care au demonstrat, pe un lot de 34 pacienti (initial confirmati la prezenta SARS-CoV-2 prin PCR) ca majoritatea dintre ei (20 femei si 14 barbati) cu vârsta medie de 43 ani (interval 21-68) au avut o forma clinica usoara. Un total de 31 din cei 34 de participanti au avut doua masurari repetate ale nivelurilor de IgG, iar restul (3 participanti) au avut trei masurari seriale. Pro-bele de sânge la prezenta anti SARS-CoV-2 au fost analizate prin testul ELISA, capabil sa identifice si concentratia anticorpilor. Astfel, prima masurare a fost obtinuta la o medie de 37 zile dupa aparitia simptomelor, iar ultima masurare dupa 86 zile de la debutul simptomelor. Nivelul mediu initial de IgG a fost de 3,48 log 10 ng per mililitru (interval 2,52-4,41).

Ulterior, pe baza unui model de regresie liniara, care a inclus vârsta si sexul participantilor, zilele de la debutul simptomelor pâna la prima masu-rare si primul nivel de anticorpi detectat, a fost demonstrat ca modificarea medie estimata (panta) a fost de 0,0062, ceea ce corespunde unei perioade de înjumatatire de aproximativ 36 zile, în perioada de observatie de pâna la 100 zile. Comparativ cu titrul anticorpilor dezvoltat de vi-rusul SARS-CoV-1, el este mai redus, probabil, si perioada de identificare a IgG în sânge pentru SARS-CoV-2 este mai mica, fapt constatat de auto-rii în cauza, ca urmare a unei evaluari

exponentiale comparabile a dinamicii de redu-cere a concentratiei de anticorpi clasa IgG. Aceste circumstante sporesc ingrijorarea cu privire la faptul ca imunitatea umorala dezvoltata impo-triva infectiei cu virusul SARS-CoV-2 poate sa nu fie de durata la persoanele cu forme clinice usoare de COVID-19. Rezultatele obtinute necesita o interpretare prudenta in ceea ce priveste identifi-carea perioadei de pastrare ai anticorpilor IgG in plasma, a pragului de protectie si a duratei imu-nitatii.

Studiile efectuate de alti savanti (23), pe un lot de 750 pacienti, au demonstrat ca anti SARS-CoV-2 IgG rämän in organism mai mult de 100 zile dupa ce apar. Acest tip de anticorpi au fost masurati la fostii bolnavi de COVID-19, la niveluri stabile, pana la 105 zile, fata de IgM si IgA, a caror concen-tratie incepe sa scada dupa 30 zile. Autorii atentioneaza ca nu exista informatii certe despre nivelul de protectie fata de o potentiala reinfec-tare, insa concluzioneaza ca un vaccin eficient ar asigura un raspuns imunitar de durata. Unii dintre cercetatori, cum ar fi MacMullan M.A si co-laboratorii incearca sa demonstreze ca nivelul an-ticorpilor din saliva ar corela cu cel din sänge, ceea ce ofera posibilitatea utilizarii unor teste de alternativa (24). Analiza si evaluarea informatiei prezentate demonstreaza ca sunt necesare studii suplimentare pentru a stabili durata aflarii anti SARS-CoV-2 IgG in plasma, pragul de protectie, rata de declin (de semiviata) a anticorpilor in ser, concentratia lor in functie de formele clinice de manifestare a bolii, date extrem de importante nu numai pentru serviciul de sänge, dar si pentru for-tificarea masurilor de control si de raspuns la in-fectia COVID-19, inclusiv prin identificarea indi-catorilor de seroprevalenta, a duratei imunitatii, a pragului de protectie etc.

CONCLUZII

1. Datele obtinute demonstreaza ca practic 87,4% dintre donatorii de plasma au raspuns la infectia CO-VID-19 prin expresia de anti SARS-CoV-2, IgG cu predominare in grupul de vársta de 26-35 ani.

2. Majoritatea donatorilor au suportat o forma clinica usoara si medie, fara a fi identificata o legatura intre modul de manifestare si prezenta sau absenta anti SARS-CoV-2, pre deosebire de formele clinice grave ale COVID-19, care in toate cazurile au fost insotite de formarea de anti SARS-CoV-2, IgG.

3. Ponderea donatorilor de plasma convalescenta cu anti SARS-CoV-2 a fost mai inalta in grupurile de vársta de 26-35 ani (37,5%) si de 36-45 ani (28,8%), comparativ cu grupul de vársta - 18-25 ani (12,5%). Exponentii din mediul de trai urban (75,0%) predomina printre donatorii de plasma con-valescenta.

ORRM

CONFLICT DE INTERESE

Autorii declara ca nu sunt conflicte de interese.

APROBAREA ETICÄ

Cercetarea nu a necesitat aprobare etica, intrucat

REFERINTE

1. Horby P, Lim WS, et al. Dexamethasone in Hospitalized Patients with Covid-19 - Preliminary Report. N Engl J Med. 2020;NEJMoa2021436. doi:10.1056/NEJMoa2021436

2. Baum A, Ajithdoss D, Copin R, et. al. REGN-COV2 antibodies prevent and treat SARS-CoV-2 infection in rhesus macaques and hamsters. Science. 2020;9:eabe2402. doi: 10.1126/science.abe2402

3. U.S. Food and Drug Administration. CytoSorb ® 300 mL Device Approved by FDA for Emergency Treatment of COVID-19. 2020. Dis-ponibil: https://www.aferetica.com/en/fda-usa-approved-for-emergency-cytosorb-300-ml-de-vice-treatment-of-covid-19/ [Accesat 19 oc-tombrie 2020].

4. Stockmann H, Keller T, Büttner S, et al. CytoResc -"CytoSorb" Rescue for critically ill patients undergoing the COVID-19 Cytokine Storm: A structured summary of a study protocol for a randomized controlled trial. Trials. 2020;21(1):577. doi:10.1186/s13063-020-04501-0

5. Weill Medical College of Cornell University. Anticoagulation in Critically Ill Patients With COVID-19 (The IMPACT Trial). Disponibil: https://clinical-trials.gov/ct2/show/NCT04406389 [Accesat 19 octombrie 2020].

6. Joyner J. M., Senefeld W. J., Klassen S.A et al. Effect of Convalescent Plasma on Mortality among Hospitalized Patients with COVID-19: Initial Three-Month Experience. MedRxiv. 2020.08. 12.20169359. doi: 10.1101/2020.08.12. 20169359

7. Sean T. H. Liu et al. Convalescent plasma treatment of severe COVID-19: A matched control study. MedRxiv 2020.05.20.20102236. doi: 10.1101/2020.05.20.20102236

8. Salazar E, et al. Treatment of Coronavirus Disease 2019 Patients With Convalescent Plasma Reveals a Signal of Significantly Decreased Mortality. The American Journal of Pathology. 2020;190(11): 2290-2303.

9. Cai Q, Yang M, Liu D, et al. Experimental Treatment with Favipiravir for COVID-19: An Open-Label Control Study. Engineering (Beijing). 2020. doi:10.1016/j.eng.2020.03.007

10. Caly L, et al. The FDA-approved Drug Ivermectin Inhibits the Replication of SARS-CoV-2 in Vitro. Antiviral Research. 2020;178:104787.

nu a implicat colectarea de date personale sau alte date, dupa care ar putea fi identificati partici-pantii la studiu. Totodata, datele demografice ale participantilor nu sunt publice.

11. Reuters Staff. Merck plans large trials of antiviral COVID-19 drug in September. Disponibil: https://in.reuters.com/article/merck-co-results-antiviral/merck-plans-large-trials-of-antiviral-covid-19-drug-in-september-idINFWN2F212I [Accesat 19 octombrie 2020].

12. Zhang B, Zhou X, Zhu C, et al. Immune Phenotyp-ing Based on the Neutrophil-to-Lymphocyte Ratio and IgG Level Predicts Disease Severity and Outcome for Patients With COVID-19. Front Mol Bi-osci. 2020;7:157. doi:10.3389/fmolb.2020.00157

13. Gharbharan A, et al. Convalescent Plasma for COVID-19. A randomized clinical trial. MedRxiv. 2020.

14. Order of the Ministry of Health, Labor and Social Protection of the Republic of Moldova n 394 of 13.04.2020 "On the strengthening of measures for blood transfusion assistance to patients with COVID-19".

15. Consensus statement on screening blood donations for infectious agents through blood transfusion. Geneva: World Health Organization Global Programme on AIDS/League of Red Cross and Red Crescent Societies; 1991. WHO/LBS/91.1.

16. Dodd RY. Current risk for transfusion-transmitted infections. Current Opinion in Hematology. 2007;14(6):671-676.

17. Furtuna N, Druc A, Sajin O, Spinu C. et al. Epidemiology of the initial period of novel coronavirus (COVID-19) pandemic in the Republic of Moldova. Journal One Health & Risk Management. 2020;2(2):5-16. doi: 10.38045/ohrm.2020.1.11

18. WHO. Screening Donated Blood for Transfusion-Transmissible Infections: Recommendations. Geneva: World Health Organization; 2009.

19. Spinu C, Cebotrari S, Spinu I, Sajin O, Vlneanschi A, Donos A. Abstracts of the first Eurasian Conference The Coronavirus Pandemic and critical ICT infrastrucure. AMIR Technical Services. Tbilisi, Georgia, November 28-30, 2020.

20. Long Q, Tang X, Shi Q. et al. Clinical and immuno-logical assessment of asymptomatic SARS-CoV-2 infections. Nat Med. 2020;26:1200-1204 (2020). doi: 10.1038/s41591-020-0965-6

21. Ibarrondo FJ, Fulcher JA, Goodman-Meza D, et al. Rapid decay of anti-SARS-CoV-2 antibodies in persons with mild Covid-19. N Engl J Med. 2020. doi: 10.1056/NEJMc2025179

22. CIDRP. Center for infectious disease research and

ORRM

policy. Study: COVID-19 antibodies decay quickly after mild illness. Disponibil: https://www. cidrap.umn.edu/news-perspective/2020/07/ study-covid-19-antibodies-decay-quickly-after-mild-illness [Accesat 20 octombrie 2020].

23. Chirathaworn C, Sripramote M, Chalongviriyalert P, Jirajariyavej S, Kiatpanabhikul P, Saiyarin J, et al. SARS-CoV-2 RNA shedding in recovered

COVID-19 cases and the presence of antibodies against SARS-CoV-2 in recovered COVID-19 cases and close contacts. PLoS ONE. 2020;15(10): e0236905. doi: 10.1371/journal.pone.0236905 24. MacMullan, M.A., Ibrayeva, A., Trettner, K. et al. ELISA detection of SARS-CoV-2 antibodies in saliva. Sci Rep 10, 20818 (2020). doi: org/10.1038/s41598-020-77555-4

Date of receipt of the manuscript: 28/01/2021 Date of acceptance for publication: 06/03/2021

Constantin SPÎNU, SCOPUS Author ID: 36091786900

Octavian SAJIN, ORCID ID: 0000-0002-1320-9589, SCOPUS Author ID: 56052377700 Igor SPÎNU, SCOPUS Author ID: 56052450800 Ala DONOS, SCOPUS Author ID: 57189097498