CC BY
17
УДК 619:616.98:578.825.15:616.98:578.833.3
Кучерявенко В.В., кандидат ветеринарних наук, e-mail:vir-lab@vetkharkov.ua ННЦ «1нститут експериментальног' i клтгчно! еетеринарног' медицины УААН»,
м. Харте ©
ВИЗНАЧЕННЯ 1МУНВУЮЧО1 ДОЗИ ВАКЦИНИ 1НАКТИВОВАНО1 ЕМУЛЬС1ЙНО1 ПРОТИ ШФЕКЦШНОГО РИНОТРАХЕ1ТУ ТА В1РУСНО1 Д1АРЕ1 ВЕЛИКО1 РОГАТО1 ХУДОБИ
В роботi предстаелеш результати еизначення iмунiзуючоi дози еакцини тактиеоеаног емульсшног проти тфекцтного ринотрахету та еiрусноi дiареi ееликог рогатоi худоби.
Ключовi слова: Ыфекцтний ринотрахет, еiрусна дiарея, еакцина.
Вступ. 1нфекцшний ринотрахе!т (1РТ) та Bipycra дiарея (ВД) поширеш вiруснi хвороби велико! рогато! худоби, яю наносять значш економiчнi збитки галузi тваринництва. Сучасна етзоотична ситуацiя з 1РТ та ВД характеризуемся змiшаним перебiгом цих шфекцш. 1х поширенню сприяе здатшсть вiрусiв 1РТ та ВД до персистенци, внаслiдок чого перехворiлi тварини залишаються довiчними вiрусоносiями й джерелом збудника шфекци. Утримання рiзновiкових тварин одного виду на обмеженш територи при постiйному !х перемiщеннi з одше! технологiчно! групи в другу, формування нових груп, не завжди однорщних за вiком та iмунним статусом, недотримання санiтарних вимог з експлуатаци примiщень, порушення мiкроклiмату призводить до стресового стану та виникнення iмунодефiцитiв у тварин, що впливае на штенсившсть прояву епiзоотичного процесу при змшаному перебiгу 1РТ та ВД [1, 2, 3].
В боротьбi з цими хворобами, а також у попередженш рецидивiв i скороченнi тривалостi !х перебiгу головну роль вдаграе специфiчна профiлактика за допомогою вакцин. В Укра!нi розроблеш живi та iнактивованi вакцини проти 1РТ та ВД. Так, застосовують живу вакцину „IPT-LG" проти 1РТ, та живу вакцину проти ВД з лшополкахаридом Bacillus аlvei [4, 5]. Але внаслщок наявностi в цих вакцинах живих збудниюв !х використання обмежене. З iнактивованих вакцин в Укра!ш застосовують „Рипавак" проти шфекцшного ринотрахе!ту й парагрипу - 3 велико! рогато! худоби та шактивовану вакцину проти вiрусно! дiаре! з ад'ювантом КЕ 10-01 [6, 7]. Ц вакцини iндукують високий рiвень накопичення специфiчних вiрусонейтралiзуючих антитш, проте вони не захищають тварин одночасно проти шфекцшного ринотрахе!ту та вiрусно! дiаре!, а схема !х послiдовного застосування для профiлактики 1РТ та ВД потребуе бiльше часу для створення iмунiтету проти цих хвороб, збшьшуе витрати на профшактичш заходи та в значнiй мiрi ускладнюе працю лiкарiв ветеринарно! медицини.
На пiдставi вищезазначеного розробка технологи виготовлення вакцини емульсшно! iнактивовано! проти 1РТ та ВД представляе науково-практичну
© Кучерявенко В.В., 2008
128
значимкть. У попередтх дослщах ми вщпрацювали методи накопичення бюмаси BipyciB 1РТ та ВД, !х концентрування, iнактивацiю та пдабрали ад'ювант. Наступним етапом розробки технологи виготовлення емульсшно1 шактивовано1 вакцини проти 1РТ та ВД е визначення И iмунiзуючоl дози.
Матер1али i методи. У роботi використовували виробничi штами „Молдавський" i „ВК-1М" вiрусiв iнфекцiйного ринотрахепу та вiрусноl дiареl ВРХ, вiдповiдно, моношаровi культури перещеплюваних клiтин нирки вiвцi (НВ) i коронарних судин теляти (КСТ) та велику рогату худобу.
Накопичення бюмаси вiрусiв проводили за ролерним способом культивування. Отримаш таким чином вiруси мали iнфекцiйну активнiсть: 1РТ-9,0±0,25 lg ТЦД5о/см3 i ВД 8,5±0,25 lg ТЦД5о/см3. Iнактивацiю вiрусiв здшснювали формальдегiдом. В якостi ад'юванту використовували ад'ювант Montanide ISA 70 французько! фiрми „Seppic".
Оптимальну iмунiзуючу дозу вакцини шактивовано! емульсшно1 проти 1РТ та ВД визначали на великш рогатiй худобi. Для чого пщдослщт групи корiв щепили вакциною у дозi 5, 7 i 10 см3, а телят - 3, 5 i 7 см3. Оптимальну щепну дозу визначали за показниками титру вiрусонейтралiзуючих антитш проти 1РТ та ВД в реакци нейтралiзацil в динамiцi iмунноl вiдповiдi.
Результати дослщжень. У зв'язку з тим, що господарство, в якому проводили дослщи, стацiонарно неблагополучне щодо 1РТ та ВД, у телят i корiв виявляли початковий титр вiрусонейтралiзуючих антитiл (ВН-антитiл) проти цих вiрусiв. Пiсля iмунiзацil телят вакциною шактивованою емульсiйною проти 1РТ та ВД спостер^али iндукцiю ВН-антитiл проти цих вiрусiв вже на 7 добу на рiвнi 3,44-3,77 log2 до 1РТ та 6,83- 7,33 log2 до ВД в порiвняннi з контролем - 2 i 3,33 log2, вiдповiдно (рис. 1, 2). Як видно, на початку щеплення доза суттево не впливала на приркт антитiл проти цих вiрусiв, але на 25 добу тсля вакцинаци спостерiгали збiльшення титру вiрусонейтралiзуючих антитiл в залежностi вiд дози введеного препарату. Так, титр антитш до вiрусу 1РТ становив на рiвнi 5; 6 i 6,5 log2 та 7,8; 7,8 i 8 log2 до ВД при щепленш вакциною вiдповiдно в дозi 3, 5 та 7 см3. На 45 добу рiвень ВН-антитш проти 1РТ значно збiльшився тд впливом дози щеплення 5 см3 i досягнув 7,6 log2, з послщуючою стабiлiзацiею цього показника на 60 та 120 добу тсля вакцинаци (7,5 log2). Пiд впливом дози щеплення 3 см3 титр ВН-антитш до 1РТ на 45 добу тдвищився на 1,4 log2 (6,4log2), а у телят, щеплених вакциною в дозi 7 см3, в цей час рiвень антитш зменшився на 0,5log2 (6 log2). На 60 та 120 добу тсля iмунiзацil при застосуваннi препарату в дозах 7 см3 i 3 см3 спостер^али плавне зниження рiвня антитiл проти вiрусу 1РТ вщповщно до 4,75- 4,54log2 та 4,6 - 4,8 log2. Вивчення динамжи ВН-антитiл до вiрусу дiареl свщчить, що на 45 добу максимальт титри накопичення антитiл на рiвнi 9,5 - 9,33 log2 виявлеш у телят, щеплених вакциною в дозах 3 та 5 см3, вщповщно. Проте на 60 добу тд впливом цих доз спостер^али зниження титру антитш до 8,18 - 8,33 log2, вщповщно. В подальших дослщженнях на 120 добу тсля щеплення максимальний титр ВН-антитш до ВД збер^ався при дозi щеплення 5 см3 i становив 8,14 log2. Доза вакцини об'емом 7 см3 шдукувала менший прирiст антитiл до ВД на 45 добу тсля щеплення (8,66 log2). До того ж, у подальшому вiдмiчалось зниження цього показника на 60 та 120 добу. Таким чином, аналiзуючи дат з пщбору
129
оптимальное' дози щеплення телят вакциною шактивованою емульсшною проти 1РТ та ВД, можна зробити висновок, що щепна доза об'емом 5 см3 забезпечуе максимальний рiвень накопичення нейтралiзуючих антитш до цих вiрусiв.
8 1
0 -I-1-1-1-1-1-
до 7 25 45 60 120
щеплення
термш спостереження (ii6)
Рис. 1 Титр вiрусоиейтралiзуючих антитсл проти 1РТ у телят при щепленш рiзиими дозами вакцини, в РН (n=4)
до 7 25 45 60 120
щеплення
термш спостереження (д1б)
Рис. 2 Титр в1русонейтрал1зуючих антитш проти ВД у телят, щеплених р1зиими дозами вакцини, в РН (n=4)
На рисунку 3 та 4 наведена динамжа ВН-антитш проти 1РТ та ВД у корiв тсля iмунiзацiï вакциною шактивованою емульсшною проти 1РТ та ВД. Так, через 7 дiб тсля щеплення корiв спостер^али пщйом ВН-антитiл до 6,0 - 6,5
130
проти вiрусу 1РТ, який суттево не залежав вщ щепно! дози. Подальше зростання титру ВН-антитш до вiрусу 1РТ спостерiгали до 45 доби, причому, його максимальний рiвень накопичення рееструвався тд впливом дози вакцини об'емом 10 та 7 см3. Титр антитш до вiрусу 1РТ при щепленш корiв дозою 10 та 7 см3 на 25 добу становив вщповщно 7,4 та 7,33 на 45 добу - 7,25 Максимальний тдйом титру ВН-антитш до вiрусу дiареl спостер^али також на 45 добу на рiвнi 7,25 - 7,75 у корiв щеплених дозою 10 та 7 см3, вщповщно. В цей промiжок часу ми реестрували менший титр антитiл до ВД, шдукований дозою 5 см3 (6 ^2). Починаючи з 60 доби, вiдмiчали залежно вiд дози зниження титрiв антитiл до вiрусiв 1РТ та дiареl. Так, титр антитш до вiрусу 1РТ на 60 та 120 добу становив 6,42 - 6,0 (10 см3); 6,1 - 6,0 (7 см3) та 6,0 -5,5 (5 см3). Титри антитш до ВД на 60 та 120 добу були на рiвнi 6,12 - 5,8 (10 см3); 6,12 - 6,0 (7 см3) та 5,5 - 5,4 (5 см3). За результатами цих дослщжень встановлено, що оптимальна доза щеплення корiв вакциною шактивованою емульсшною проти 1РТ та ВД становить 7 см3.
Висновки.
1. Розроблена вакцина емульсшна шактивована проти 1РТ та ВД iмуногенна, викликае активну iндукцiю ВН-антитiл, яю виявляються з 7 доби i набувають максимального значення на 25 - 45 добу тсля щеплення i утримуються впродовж 120 дiб (термiн спостереження).
2. Вакцина емульсшна шактивована проти шфекцшного ринотрахе!ту та вiрусноl дiареl при щепленнi телят i корiв в дозах 5 i 7 см3, вiдповiдно, забезпечуе створення високого рiвня специфiчного iмунiтету проти збудникiв цих iнфекцiй, що мае важливе протиепiзоотичне значення у боротьбi з цими захворюваннями.
0 -I-1-1-1-1-1-
до 7 25 45 60 120
щеплення
термш спостереження (доб) Рис. 3 Титр вiрусонейтралiзуючих антитш проти 1РТ у корiв, щеплених рiзними дозами вакцини, в РН (п=4)
131
9
1
0 -|-1-1-1-1-1-
до 7 25 45 60 120
щеплення
термш спостереження (ii6) Рис. 4 Титр BipycoHefiTpaii3yro4HX антитш проти ВД у KopiB, щеплених рiзними дозами вакцини, в РН (n=4)
Л^ература
1. Красочко П.А. Моно- и ассоциативные вирусные респираторные инфекции крупного рогатого скота (иммунологическая диагностика, профилактика и терапия): Автореф. дис. ... д-ра вет. наук: 16.00.03 / Академия аграрных наук Республики Беларусь. - Минск, 1997. - 32 с.
2. Распространение вирусных респираторных болезней крупного рогатого скота / А.Г. Глотов, О.Г. Петрова, Т.И. Глотова и др. // Ветеринария. -2002. -№ 3. - С. 17-21.
3. Disease outbreak in caused by a mixed infection with infectious bovine rhinotracheitis virus and bovine virus diarrhea virus / A. Greig, I.R. Gibson, P.F. Nettleton, J.A. Herring // Veter. Rec. - 1981. - Vol. 108, № 22. - P. 480.
4. Фукс П.П., Бочаров О.А. Засоби специфiчно! профилактики шфекцшного ринотрахе!ту, розроблеш в 1ЕКВМ // Вкник Сумського Державного аграрного ушверситету. - Суми, 1999. - Вип. 4. - С. 194-197.
5. Чебанюк 1.В., Стеценко В.1., Тризна Л.П. Корекщя iмунiтету лшополюахаридами Bac. alvei при застосуванш живо! вакцини проти вiрусно! дiаре! велико! рогато! худоби // Вет. медицина: Мiжвiд. темат. наук. зб.- Х., 2004. - Вип. 83. - С. 258-262.
6. Кучерявенко Л.1., Стеценко В.1. Розробка технологи виготовлення шактивовано! вакцини проти шфекцшного ринотрахе!ту та парагрипу-3 велико! рогато! худоби // Вет. медицина: Мiжвiд. темат. наук. зб. - Х., 2000. - Вип. 77. -С. 220-224.
7. Годовский А.В. Оценка иммуногенной активности образцов инактивированной вакцини против вирусной диареи крупного рогатого скота с
132
применением различных адьювантов // Ветеринарна медицина: Мiжвiд. темат. наук. зб. - Х., 2004. - Вип. 83. - С.42-45.
Summary
Kucheryavenko V.V., Cand. Sci. (Vet. Med.)
National Scientific Center «Institute of Experimental and Clinical Veterinary Medicine», Kharkiv
DETERMINATION OF IMMUNIZING DOSE OF INACTIVATED EMULSIVE VACCINE AGAINST BOVINE INFECTIOUS RHINOTRACHEITIS AND VIRAL DIARRHEA
Results of determination of immunizing dose of inactivated emulsive vaccine against bovine infectious rhinotracheitis and viral diarrhea are presented in the paper.
Стаття надшшла до редакцИ 10.09.2008
133
