Вивчення імунної відповіді у курей після щеплення інактивованою асоційованою вакциною проти високопатогенного грипу птиці та ньюкаслської хвороби Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

УДК 619

Стегнш А.Б., © молодший науковий сшвроб^ник ([email protected])

Нацюнальний науковий центр «1нститут експериментальног I клШчног ветеринарног медицини», м. Хартв

ВИВЧЕННЯ 1МУННО1 ВЩПОВЩ1 У КУРЕЙ П1СЛЯ ЩЕПЛЕННЯ

1НАКТИВОВАНОЮ АСОЦ1ЙОВАНОЮ ВАКЦИНОЮ ПРОТИ ВИСОКОПАТОГЕННОГО ГРИПУ ПТИЦ1 ТА НЬЮКАСЛСЬКО1

ХВОРОБИ

В статт1 представленI результати вивчення ¡мунног вгдповгдг у курей тсля щеплення вакциною проти високопатогенного грипу птиц та ньюкаслськог хвороби, вивчет антигент властивост1 цього препарату.

Ключовi слова: високопатогенний грип птищ, ньюкаслська хвороба, шактивована асоцтована вакцина.

Вступ. Високопатогенний грип птищ та ньюкаслська хвороба вщносяться до найбшьш небезпечних вiрусних хвороб птищ. За останш декшька роюв спалахи високопатогенного грипу птищ, за даними Мiжнародного етзоотичного бюро, були зареестроват в багатьох кра!нах Сврази, спалахи ньюкаслсько! хвороби постшно рееструються у птахiвничих господарствах рiзних кра!н свiту, i тому щ захворювання е актуальними для птахiвництва [1]. Ефективними заходами боротьби та попередження виникнення цих хвороб е специфiчна профiлактика iз застосуванням шактивованих вакцин. У свiтi юнуе величезна кiлькiсть iнактивованих вакцин проти цих захворювань)як моновалентних, так i бiвалентних). Але для формування у птищ напруженого стшкого iмунiтету, який здатен захищати И вiд польового етзоотичного збудника, необхщною умовою при виробництвi вакцин е використання актуальних епiзоотичних штамiв. Перспективним напрямком е розробка асоцшованих засобiв специфiчно! профилактики цих захворювань, якi одночасно будуть включати iнактивований антиген високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби.

З метою створення засобiв специфiчно! профилактики цих небезпечних захворювань в ННЦ «1ЕКВМ» були розпочатi науковi дослщження щодо розробки технологи промислового виготовлення асоцшовано! шактивовано! емульсовано! вакцини проти високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби.

Матер1али та методи. Для виготовлення експериментально! серi! асоцiйовано! вакцини були використат виробничi штами вiрусу грипу А/курка/Сиваш/02/05 та ньюкаслсько! хвороби ЛГ-85. У роботi була використана вiрусна сировина з титром гамма-глютинiнiв не нижче тж 9 log2. 1нактиващю проводили за загальноприйнятими методиками, рекомендованими МЕБ. Для створення експериментального зразка вакцини використали

© Стегнш А.Б., 2009 306

сшввщношення антигешв Bipycy грипу та Bipycy ньюкаслсько! хвороби 1:1 та сшввщношення сумiшi антигешв i ад'юванту Монтанiд ISA-70 - 30:70. Вакцину вводили курчатам внутршньом'язово в стегна в дозi 0,5 см3. PiBeHb антитiл до Bipycy високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби визначали через 21 добу тсля одноразового введення та через 30 дiб пicля ревакцинаци. Отримання сироватки кров^ li пiдготовкy та дослщження на наявнicть антитiл до вipycy високопатогенного грипу птицi та ньюкаслсько! хвороби проводили в РЗГА за загальноприйнятими методиками [2, 3, 4]. В дослщженнях було використано тест-систему для виявлення антитш до вipycy високопатогенного грипу птищ «АвiФлyТеcт H5N1» виробництва ННЦ «1ЕКВМ».

Результати дослщжень. Для розробки вiтчизняно! iнактивовано! аcоцiйовано! вакцини проти високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби використовували виробничий штам вipycy грипу птищ А/курка/Сиваш/02/05(Н5Ш) та виробничий штам «ЛГ-85» вipycy ньюкаслсько! хвороби. Обидва виpобничi штами отpиманi з епiзоотичних штамiв, iзольованих вiд хворих курей на територи Укра!ни. Весь комплекс дослщжень щодо iдентифiкацi! вipyciв провели сшвроб^ники ННЦ «1ЕКВМ». Цi вipycи вже добре зарекомендували себе як компоненти шактивованих моновакцин проти високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби. Так, шактивована емульсована вакцина проти високопатогенного грипу птищ «АвiФлyВак-1ЕКВМ», до складу яко! входить iнактивований антиген вipycy грипу птицi А/курка/Сиваш/02/05 (H5N1), викликае у щеплено! птицi утворення антитш у високому титр1 Вже через 21 добу тсля одноразового щеплення титр антитш у курей до вipycy становив 6,30±0,42 - 6,80±1,88 log2 в реакци затримки гемаглютинаци, а пicля ревакцинаци з штервалом 3 тижнi cеpеднiй титр антитш досягав 9,25-11,40 log2. Рiвень антитiл у качок, гусей та шдиюв пicля ревакцинаци становив вщповщно 6,6±2,06; 6,4±0,89 та 7,5±0,57 log2 [5]. 1нактивована вакцина проти ньюкаслсько! хвороби, до яко! входить штам «ЛГ-85», викликае у птищ утворення cпецифiчних антитш в титрах 1:512-1:2048 [6]. Попередньо нами також було проведено дослщ щодо одночасно! вакцинаци проти грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби моновакцинами. Було встановлено, що тсля одноразового щеплення двома вакцинами у курчат антитша в дiагноcтичних титрах до вipycy грипу не виявлялися впродовж 4 тижшв. Вони з'явилися тшьки тсля ревакцинаци, досягли piвня 8,1 log2 та трималися на цьому piвнi впродовж 7 тижшв спостереження. Що стосуеться ньюкаслсько! хвороби, то через 2 тижш тсля одноразового введення вакцин piвень антитш до цього вipycy становив 5,2-7,6 log2, а через 4 тижш вш ютотно зменшився до 0,61,1 log2. Повторне введення вакцин призвело до тимчасового зниження piвня антитш з подальшим збшьшенням до piвня 3,0-3,5 log2 [7]. Враховуючи такi результати, була виготовлена експериментальна cеpiя аcоцiйовано! шактивовано! вакцини проти високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби та проведено щеплення курей. Результати визначення piвня cпецифiчних антитш наведет в таблиц 1.

307

Як свщчать отримаш експериментальш даш, у курей тсля одноразового введення асоцшовано! вакцини рiвень специфiчних антитiл до вiрусу грипу Н5 становив 7,45±0,96 log2, а специфiчних антитiл до вiрусу ньюкаслсько! хвороби - 5,9±1,06 log2. При порiвняннi гуморально! вiдповiдi у курей, вакцинованих асоцшованою вакциною, та у курей, щеплених моновакцинами проти грипу та ньюкаслсько! хвороби, рiвень специфiчних антитiл до вiрусу ньюкаслсько! хвороби був практично однаковим.

Таблиця 1

Динамика накопичення антитш у сироватщ кров1 курчат пiсля _дворазового щеплення_

Вакцина Середнш титр, log2

Через 21 добу тсля одноразового введення Через 30 д1б тсля ревакцинаци

Н5 НХ Н5 НХ

Вакцина проти високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько!' хвороби комбшована емульсована НХ (ЛГ-85)+Н5 Експериментальна сер1я 8 7,45±0,96 5,9±1,06 8,14±2,79 8,0±1,83

1нактивована вакцина проти високопатогенного грипу птищ «Ав1ФлуВак-1ЕКВМ», сер1я 1, вигот. 01.2008 3,35±2,65 АТ ввдсутт 7,1±1,20 АТ ввдсутт

Вакцина проти ньюкаслсько! хвороби шактивована емульсована з1 штаму ЛГ-85 АТ ввдсутш 5,13±1,52 АТ ввдсутт 8,15±1,52

Контрольна птиця не вакцинована Антитша ввдсутт

Що стосуеться грипу, то рiвень антитiл до вiрусу грипу Н5 у курей, вакцинованих асоцшованою вакциною, був вищим порiвняно з таким же у курей, щеплених моновакциною. Шсля проведення ревакцинаци через 30 дiб також проводився серолопчний контроль рiвня специфiчних антитiл. Встановлено, що середнiй титр антитш до вiрусу грипу та вiрусу ньюкаслсько! хвороби вирiвнявся та становив вщповщно 7,1±1,20 - 8,14±2,79 log2 ; 8,0±1,83 -8,15±1,52

Таким чином, за результатами проведеного експерименту встановлено, що стввщношення iнактивованих антигенiв в асоцшованш вакцинi мае хорошi антигеннi властивост та забезпечуе формування достатньо високого рiвня специфiчних антитiл проти цих захворювань.

Висновки.

1. 1нактивована емульсована асоцшована вакцина проти високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби на основi штамiв А/курка/Сиваш/02/05 та ЛГ-85 при одноразовому введеннi птицi

308

забезпечуе напрацювання специфiчних антитш до Bipycy грипу Н5 та Bipycy ньюкаслсько! хвороби в титрах 7,45±0,96 log2 та 5,9±1,06 log2 вiдповiдно.

2. Дворазове введення вакцини забезпечуе збшьшення рiвня антитш в сироватщ кровi курей до вiрусу грипу та вiрусу ньюкаслсько! хвороби до титрш 8,14±2,79 та 8,0±1,83 log2.

Л1тература

1. Державний комiтет ветеринарно! медицини [Електрон. ресурс] / СпоЫб доступу: http://www.vet.org.ua - Заголовок з екрану

2. OIE Manual for Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals [Електр. ресурс] / Споаб доступу: http ://www. oie. int.- Заголовок з екрану

3. Сюрин, В.Н. Диагностика вирусных болезней животных [Текст]: Справочник / Сюрин В.Н., Р.В. Белоусова, Н.В. Фомина. - М.: Агропромиздат, 1991. - 528 с.

4. Методы лабораторной диагностики вирусных болезней животных [Текст]: Справочник / В.Н. Сюрин [та ш].- М.: Агропромиздат, 1986. -351 с.

5. Розробка втизняних засобiв специфiчно! профшактики та дiагностики високопатогенного грипу птищ в Укра!ш [Текст] / Г.Б. 1ванов [та iн.] // Ветеринарна медицина Укра!ни. -2007. -№ 11.-С.27-31

6. Перша вiтчизняна шактивована вакцина проти ньюкаслсько! хвороби птищ [Текст] / Сжачина В. [та ш] // Ветеринарна медицина Укра!ни. -2003.- №1. - С.33-35

7. Музика, Д.В. Антигенш властивост моновакцин проти високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби при одночасному застосуванш при щепленш курчат [Текст] / Музика Д.В., Стегнiй А.Б., Пальваль А.В. // Науковий вюник Львiвського нацiонального унiверситету ветеринарно! медицини та бютехнологи iменi С.З.Гжицького. - том 10.- №2 (37). - частина 1. - Львiв, 2008. -С.237-240

Summary

Results of study of immune response in chickens after vaccination by vaccine against highly pathogenic avian influenza and Newcastle disease are presented in the paper. Antigenic characteristics of this preparation have been studied.

Стаття надшшла до редакцИ 10.04.2009

309