Антигенні властивості моновакцин проти високопатогенного грипу птиці та ньюкаслської хвороби при одночасному застосуванні при щепленні курчат Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

УДК 619:615.371:616.98:578.831.1

Музика Д.В. кандидат ветеринарних наук, denis@vet.kharkov.ua

Стегнш А.Б. молодший науковий сшвроб^ник admin@vet.kharkov.ua

Пальваль А.В. бюлог © Нацюнальний науковий центр «1нститут експериментальног i клШчног ветеринарног медицини», м. Харюв, Украгна

АНТИГЕНН1 ВЛАСТИВОСП МОНОВАКЦИН ПРОТИ ВИСОКОПАТОГЕННОГО ГРИПУ ПТИЦ1 ТА НЬЮКАСЛСЬКО1 ХВОРОБИ ПРИ ОДНОЧАСНОМУ ЗАСТОСУВАНН1 ПРИ ЩЕПЛЕНН1 КУРЧАТ

В статтi представлен результати дослiджень динамжи формування iмунiтету у добових курчат тсля одночасног вакцинацп моновакцинами проти високопатогенного грипу птиц та ньюкаслськог хвороби, вивчеш антигенн властивостi цих бiопрепаратiв. Обтрунтована доцыьтсть подальших до^джень по розробц асоцтованог вакцини проти високпатогенного грипу птиц та ньюкаслськог хвороби.

Ключовi слова: високопатогенний грип птищ, ньюкаслська хвороба, шактивована асоцтована вакцина, моно вакцина.

Вступ. Високопатогенний грип птищ та ньюкаслська хвороба вщносяться до найбшьш небезпечних вiрусних хвороб птищ. За даними М^жнародного етзоотичного бюро, в 2007 рощ високопатогенний грип птищ (H5N1) було зареестровано в 42 кра!нах св^, ньюкаслська хворобу - в 16 [1]. Ефективними заходами боротьби та попередження виникненнях цих хвороб е специфiчна профшактика i3 застосуванням шактивованих вакцин. У свт юнуе величезна кшькють шактивованих вакцин проти цих захворювань як моновалентих, так i бiвалентних. Але для формування у птищ напруженого стшкого iмунiтету, який здатен захищати птицю вщ польового етзоотичного збудника, необхщною умовою при виробнищв вакцин е використання актуальних етзоотичних штамiв. Перспективним напрямком е розробка асоцшованих засобiв специфiчно! профiлактики цих захворювань, яю одночасно будуть включати iнактивований антиген високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби.

З метою створення засобiв специфiчно! профiлактики цих небезпечних захворювань в ННЦ «1ЕКВМ» були розпочатi науковi дослiдження щодо розробки технологи промислового виготовлення асоцшовано! шактивовано! емульсовано! вакцини проти високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби. Перший етап дослщжень - це визначення антигенних властивостей моновакцин проти грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби при одночасному застосуванш.

© Музика Д.В., Стегнш А.Б., Пальваль А.В., 2008

244

Матер1али та методи. У робой було використано шактивовану емульсовану вакцину проти високопатогенного грипу птищ «АвiФлуВак-1ЕКВМ» та шактивовану емульсовану вакцину проти ньюкаслсько! хвороби. Вакцину вводили добовим курчатам внутршньом'язево в стегна в дозi 0,15 та 0,25 см3. Для проведення дослщу було сформовано 4 групи курчат три дослщш та одна контрольна. Птищ першо! групи вводили моновакцину проти висопатогенного грипу птищ, друго! групи - моновакцину проти ньюкаслсько! хвороби, третьо! групи - одночасно моновакцину проти ньюкаслсько! хвороби та моновакцину проти високопатогенного грипу птищ, птиця четверто! (контрольно!) групи - залишалась не вакцинованою. Ревакцинацш курчат проводили через три тижш в тих самих дозах. Рiвень антитш до вiрусу високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби визначали через 2 та 4 тижш тсля однократного введення вакцини, а поим кожш два тижш тсля ревакцинаци. Проби кровi у птищ брали з пщкрильцево! вени. Отримання сироватки кровi, !! пiдготовку для дослщжень та дослiдження на наявшсть антитiл до вiрусу високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби проводили в РЗГА за загальноприйнятими методиками [2, 3, 4]. В дослщженнях було використано тест-систему для виявлення антитш до вiрусу високопатогенного грипу птищ «АвiФлуТест Н5Ш» виробництва ННЦ «1ЕКВМ».

Результати дослщжень. Для розробки втизняно! iнактивовано!' асоцiйовано!' вакцини проти високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби використовували виробничий штам вiрусу грипу птицi А/курка/Сиваш/02/05(Н5Ш) та виробничий штам «ЛГ-85» вiрусу ньюкаслсько! хвороби. Ц виробничi штами були обраш не випадково. Обидва виробничi штами отриманi з епiзоотичних штамiв, iзольованих вiд хворих курей на територп Укра!ни. Весь комплекс дослiджень щодо iдентифiкацi! вiрусiв провели спiвробiтники ННЦ «1ЕКВМ». Були ретельно вивченi бюлопчш та молекулярно-бiологiчнi характеристики цих штамiв. Проведено секвенування геному вiрусiв, визначено патогеншсть вiрусу для курчат. Проведено електронно-мшроскотчш дослiдження, вивчено культуральнi та антигенш властивостi, здатнiсть зберiгатися в умовах низьких та наднизьких температур. Ц вiруси вже добре зарекомендували себе як компоненти iнактивованих моновакцин проти високопатогенного грипу птищ та ньюкаслсько! хвороби. Так, шактивована емульсована вакцина проти високопатогенного грипу птищ «АвiФлуВак-IЕКВМ», до складу яко! входить шактивований антиген вiрусу грипу птищ А/курка/Сиваш/02/05 (Н5Ш), викликае у щеплено! птицi утворення антитiл у високому титрi. Вже через 21 добу тсля одноразового щеплення титр антитш у курей до вiрусу становив 6,30±0,42 - 6,80±1,88 log2 в реакцп затримки гемаглютинацi!, а тсля ревакцинаци з штервалом 3 тижш середнш титр антитiл досягав 9,25-11,40 log2. Рiвень антитiл у качок, гусей та iндикiв пiсля ревакцинаци становив вщповщно 6,6±2,06; 6,4±0,89 та 7,5±0,57 log2 [5]. 1нактивована вакцина проти ньюкаслсько! хвороби, до яко! входить штам «ЛГ-85», викликае у птищ утворення специфiчних антитш в титрах 1:512-1:2048 [6].

245

Результати вивчення динамжи формування iмунiтету у курчат тсля щеплення представлеш в таблицi 1 та 2.

Таблиця 1.

Динамика накопичення антитш у сироватц кров1 курчат пiсля

Вакцина Доза вакцин и, см П1сля одноразового введення

Через 2 тижш Через 3 тижш

Н5 НХ Н5 НХ

«Ав1ФлуВак » 0,15 Середнш титр, 1о§2 3,1 6,5 8,0 0

0,25 Середнш титр, 1о§2 _* _ 9,0 0

Ньюкасла 0,25 Середнш титр, 1о§2 0 6,5 0 1,8

0,15 Середнш титр, 1о§2 0 5,0 0 0

«Ав1ФлуВак » + Ньюкасла 0,25 Середнш титр, 1о§2 0 5,2 0 1,1

0,15 Середнш титр, 1о§2 0 7,6 0 0,6

Таблиця 2.

Динамика накопичення антитiл у сироватц кров1 курчат пiсля _дворазового щеплення_

Вакцина Доза вакци ни, см П1сля двократного введення

Через 3 тижш Через 5 тижшв Через 7 тижшв

Н5 НХ Н5 НХ Н5 Н Х

«Ав1ФлуВа к» 0,15 Середнш титр, 1о§2 7,7 0 _ 0 7,9 0

0,25 Середнш титр, 1о§2 _* 0 8,4 0 6,5 0

Ньюкасла 0,25 Середнш титр, 1о§2 0 1,2 _ _ 0 2, 0

0,15 Середн1й титр, 1о§2 0 0,9 _ _ 0 2?

«Ав1ФлуВа к» + 0,25 Середн1й титр, 1о§2 8,1 0,4 8,3 3,0 7,6 3, 5

246

Ньюкасла 0,15 Середнш титр, log2 5,3 0 7,4 2,7 7,8 4

Примтка: *- не досл1джуеали.

Було встановлено, що тсля одноразового щеплення двома вакцинами у курчат антитша в дiагностичних титрах до вiрусу грипу не виявлялися протягом 4 тижнiв. Вони з'явилися тiльки пiсля ревакцинацiï, досягли рiвня 8,1 log2 та трималися на цьому рiвнi протягом 7 тижшв спостереження. Що стосуеться ньюкаслськоï хвороби, то через 2 тижш тсля одноразового введення вакцин рiвень антитш до цього вiрусу становив 5,2-7,6 log2, а через 4 тижш вш iстотно зменшився до 0,6-1,1 log2. Повторне введення вакцин привело до тимчасового зниження рiвня антитш з подальшим збiльшенням до рiвня 3,03,5 log2. У птищ контрольноï групи (невакцинованоï) антитiл до вiрусу грипу та ньюкаслськоï хвороби встановлено не було. Невисокий рiвень антитш до вiрусу ньюкаслськоï хвороби, порiвняно з рiвнем антитiл до вiрусу грипу, можна пояснити двома факторами: рiзними антигенними властивостями вiрусiв, а також рiзними ад'ювантами що використаш при виробництвi вакцин проти грипу та ньюкаслсько1' хвороби. Висновки.

1. Введення птицi вакцин в невеликих дозах 0,15 та 0,25 см3 викликало утворення специфiчних антитш, що свщчить про високий антигенний потенщал виробничих штамiв вiрусу високопатогенного грипу птищ А/курка/Сиваш/02/05 та ньюкаслськох' хвороби «ЛГ-85». За результатами цих дослщжень вважаемо за доцiльне подальше використання цих штамiв при розробщ технологiï виготовлення iнактивованоï асоцiйованоï вакцини проти високопатогенного грипу та ньюкаслькох' хвороби.

2. Одночасне застосування моновакцин проти грипу птищ та ньюкаслськоï хвороби не може забезпечити високий рiвень антитш до збудниюв цих хвороб, тому перспективним напрямком дослщжень е розробка асоцшованих вакцин з використанням мшцевих епiзоотичних штамiв.

Л1тература

1. Державний комiтет ветеринарноï медицини [Електор. ресурс] / Споаб доступу: http://www.vet.org.ua - Заголовок з екрану

2. OIE Manual for Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals [Електр. ресурс] / Споаб доступу: http://www.oie.int.- Заголовок з екрану

3. Диагностика вирусных болезней животных: Справочник / В.Н. Сюрин, Р.В. Белоусова, Н.В. Фомина. - М.: Агропромиздат, 1991. - 528 с.

4. Методы лабораторной диагностики вирусных болезней животных: Справочник / В.Н. Сюрин, Р.В.Белоусова, Б.В. Соловьев, Н.В. Фомина.-М.: Агропромиздат, 1986. - 351 с.

5. 1ванов Г.Б., Стегнш Б.Т., Музика Д.В., Бузун А.1., Гершович А.П., Головко А.М., Олшник Л.В., Абрамов А.В., Стегнш М.Ю. Розробка втизняних засобiв специфiчноï профiлактики та дiагностики високопатогенного грипу птицi в Укра1ш // Ветеринарна медицина Украши, №11, 2007, С.27-31

247

6. Скачина В., Герман В., Голуб Ю., Короленко Л., Богдан Т., Зорш Я., Косолап Л. Перша в^чизняна шактивована вакцина проти ньюкаслсько! хвороби птищ// Ветеринарна медицина Украши, №1, 2003, С.33-35

Summary.

The results of investigations of dynamics of immunity forming in day chickens after simultaneous vaccination by monovalent vaccines against highly pathogenic avian influenza and Newcastle disease are presented in the article. Antigenic characteristics of these biological preparations have been studied. Relevancy of further investigations at the development of associate vaccine against highly pathogenic avian influenza and Newcastle disease has been generalized.

Стаття надшшла до редакцИ 26.03.2008

248