УДК: 619:616.98:578.826.1-076
Ткаченко С.В. , мол. наук. ств., E-mail: [email protected] © Стегшй Б.Т. , док. вет наук, проф., академик, E-mail: [email protected]
Стегн1й А.Б., мол. наук. ств., Зандарян С.Ю.| канд. вет. наук
*Нацюнальний науковий центр
«1нститут експериментальног i клШчног ветеринарног медицини», **ТОВ «Украгнська ветеринарна компатя», м. Харюв, Украгна
В1ДТВОРЮВАН1СТЬ РЕЗУЛЬТАТ1В СЕРОЛОГ1ЧНИХ ДОСЛ1ДЖЕНЬ СИНДРОМУ ЗНИЖЕННЯ НЕСУЧОСТ1-76
В статтi наведено дат щодо серологiчного мотторингу синдрому зниження несучост^76 в господарствi Харювськог областi трьома серологiчними методами в порiвняльному аспектi.
Ключоei слова: вiрус, серологiчнiреакцИ, синдром зниження несучост^76.
Вступ. Реакци iмунодифузil (Р1Д) [1], затримки гемаглютинацп (РЗГА) [2] та iмуноферментний ан^з (1ФА) [3,4,5] являються найбшьш доступними i широко розповсюдженими методами визначення рiвня антитiл до вiрусу синдрому зниження несучостi-76 (СЗН-76). При порiвняннi Р1Д та РЗГА з метою виявлення антитiл в сироватщ кровi було показано, що вже через 6 дiб тсля зараження птицi цим вiрусом антитша виявляли в обох реакцiях [6]. Як правило, шфекщя на СЗН-76 у курей-несучок вiрулентним польовим вiрусом буде стимулювати прирiст титрiв антитш у вiддаленi днi пiсля вакцинацп. При цьому цей прирiст спостер^аеться в усiх випадках, незалежно вщ вихiдних показникiв титрiв.
Оцiнка сероконверсп дае змогу визначити взаемозв'язок мiж величиною титрiв та резистентнiстю до хвороби. Це використовують для визначення початку вакцинацп, а також ощнки ефективност вакцинацп'.
Вказанi серологiчнi методи дозволяють виявити прирiст титрiв антитш вже через 7-8 дiб тсля вакцинацп. Максимальт титри антитiл при використанш iнактивованих вакцин виявляють через 3 тижш пiсля вакцинацп'.
Висновки i коригуючi ди залежать вщ термiну серомонiторингу, який, в свою чергу, залежить вiд прийнято! в даному птахогосподарствi програми вакцинопрофiлактики.
Знання про стввщношення результатiв Р1Д, РЗГА та 1ФА необхiдне для вiрного трактування оцiнки результатiв вакцинацп' на СЗН-76. Тому в цш робой ми поставили за мету визначити корелящю мiж вище приведеними серолопчними реакцiями.
Матер1али i методи. Дослщи проводились в умовах лабораторш етзоотологи хвороб птицi ННЦ «1ЕКВМ» та в лаборатори ТОВ «Украшська ветеринарна компатя».
Вiдбiр сироваток кровi вщ курей проводили через 14 дiб пiсля вакцинацп'. Визначення рiвня антитш до вiрусу СЗН-76 в сироватщ кровi визначали за допомогою Р1Д та РЗГА згiдно методичних вказiвок Мiжнародного
© Ткаченко С.В., Стегнш Б.Т., Стегнш А.Б., Зандарян С.Ю., 2008
369
етзооточного бюро щодо 1х постановок. При цьому використовували «Набiр для дiагностики синдрому зниження несучостi-76 в реакцiях iмунодифузil та затримки гемаглютинаци», який був розроблений в лаборатори ешзоотологи хвороб птищ ННЦ 1ЕКВМ. Постановку 1ФА здшснювали згiдно настанови по застосуванню набору для дiагностики СЗН-76 в 1ФА (фiрма «Biochek»)
Результати дослщжень. В дослвд в Р1Д та РЗГА було протестовано 18 зразюв польових сироваток, отриманих з птахофабрики Харювсько! областi вiд курей-несучок 125 добового вшу. Р1Д та РЗГА ставили триразово через рiвнi промiжки часу (1 доба). У якост компоненив реакци були використанi позитивнi та негативш антигени та сироватки з «Набору для дiагностики синдрому зниження несучость76 в реакцiях iмунодифузil та гемаглютинаци». Розведення сухих антигенiв та сироваток в дослвд виконували на фiзiологiчному розчинi (ФР) рН 7,2 та фосфатно-сольовому буферi (ФСБ) рН 7,1-7,4. Постановку реакцш проводили по загальноприйнятш схемi. Паралельно одноразово щ сироватки було протестовано в 1ФА. Данi цих дослiджень наведенi в таблиц 1.
Таблиця 1
Вщтворювашсть результатiв Р1Д, РЗГА та 1ФА в залежностi вiд часу та
умов постановки реакцш
№ сиров атки Титр в Р1Д Титр в РЗГА Тит р в 1ФА
перша повторшсть друга повторшсть третя повторшсть перша повторшсть друга повторшсть третя повторшсть
ФР ФСБ ФР ФСБ ФР ФСБ ФР ФСБ ФР ФСБ ФР ФСБ
1 1:2 1:2 1:2 1:2 0 0 1:16 1:16 1:16 1:16 1:16 1:16 5510
2 0 0 0 0 0 0 1:16 1:16 1:16 1:16 1:8 1:8 5223
3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 89
4 0 0 0 0 0 0 0 0 1:2 1:2 1:2 1:2 628
5 1:2 1:4 0 0 0 0 1:16 1:16 1:16 1:16 1:16 1:16 6089
6 0 0 0 0 0 0 1:4 1:4 1:2 1:2 1:4 1:4 2919
7 1:8 1:8 1:8 1:8 1:2 1:2 1:32 1:32 1:16 1:16 1:16 1:16 6014
8 0 0 0 0 0 0 1:4 1:4 1:4 1:4 1:2 1:2 2489
9 0 0 0 0 0 0 1:8 1:8 1:16 1:16 1:16 1:16 3121
10 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 356
11 1:4 1:4 1:2 1:2 1:2 1:2 1:8 1:8 1:16 1:16 1:8 1:8 3293
12 1:4 1:4 1:2 1:2 1:2 1:2 1:8 1:8 1:8 1:8 1:16 1:16 2817
13 0 0 0 0 0 0 0 0 1:2 0 0 0 200
14 1:2 1:2 1:2 1:2 0 0 1:4 1:4 1:4 1:4 1:4 1:4 2291
15 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 541
16 0 0 0 0 0 0 1:8 1:8 1:16 1:16 1:8 1:8 3761
17 0 0 0 0 0 0 1:4 1:4 1:4 1:4 1:4 1:4 2817
18 1:8 1:8 1:8 1:8 1:8 1:8 1:128 1:128 1:128 1:128 1:128 1:128 8010
370
позит
ивна сиров атка 1:8 1:8 1:8 1:8 1:8 1:8 1:256 1:256 1:256 1:256 1:256 1:256 8080
негат
ивна сиров атка 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 141
серед иш титр 0,72 log2 0,77 log2 0,55 log2 0,55 log2 0,33 log2 0,33 log2 2,44 log2 2,44 log2 2,6 log2 2,55 log2 2,44 log2 2,44 log2 3120
M+m 1,07+ 0,6 1,11+ 0,3 0,99+ 0,2 0,99+ 0,2 0,99+ 0,2 0,99+ 0,2 1,98+ 0,5 1,98+ 0,5 1,99+ 0,4 1,95+ 0,5 1,92+ 0,5 1,92+ 0,5
Наведеш в таблиц даш свщчать про наявшсть в сироватщ строкатих титрiв: коливання TrnpiB в Р1Д вiд 0 до 1:8 (0-3 log2), в РЗГА - вщ 0 до 1:128 (07 log2), в 1ФА - вiд 89 до 8010. Середнш титр в Р1Д коливався вщ 0,77 log2 (перша повторшсть, використання ФСБ) до 0,33 log2 (третя повторнiсть, використання ФСБ та ФР), в РЗГА вiд 2,44 log2 (перша та третя повторноси, використання ФСБ та ФР) до 2,6 log2 (друга повторнiсть, використання ФР), в 1ФА - 3120.
Висновки. Таким чином, в ходi проведених дослiджень були отриманi даш щодо специфiчностi та вiдтворюваностi Р1Д та РЗГА, визначена доцiльнiсть використання ФР та ФБР для розведення компоненив реакцп. Результати Р1Д та РЗГА, отримаш з використанням ФР та ФБР для розведення люфшьно висушених компонентiв, корелюють з результатами 1ФА.
Л1тература
1. Фомина Н.В., Осидзе С.Д., Хилько С.Н., Кирасова М.А. 1988. Иммуноферментный метод определения антител к вирусу синдрома яйценоскости-76. Труды ВИЭВ, 66, 37-41.
2. Van Eck J.H.H., F.G. Davelaar, T.A.M. Van den Heuvel, N. Van Kol, B. Kouwenhoven, F.H.M. Guldie. 1976. Dropped egg production, soft shelled and shell-less eggs associated with appearance of precipitins to adenovirus in flocks of laying fowl. Avian Pathol 5:261-272.
3. Baxendale W. 1979. Proceeding meeting Italian avian pathologist.
4. Baxendale W. 1980. Convencion annal de la asociacion Nacional de espesialistas on cicucias Avicolas. Recent research on egg drop syndrome76 (EDS-76). 206211.
5. Yamaguchi S., Imada T., Kawamura H. 1981. Pathogenicity and distribution off egg drop syndrome-76 virus (JPA I) in inoculated laying hens. Avian Dis, 25, 3:642-650.
Summary
Tkachenko S.V., junior researcher, E-mail: [email protected] Stegniy B.T., DVM, prof., Academician, E-mail: ^[email protected]
Stegniy A.B., junior researcher, Zandaryan S.Y.| Cand. Sc. (Vet. Med.)
National Scientific Center «Institute of Experimental and Clinical Veterinary Medicine», «Ukrainian veterinary company» LTD, 371
Kharkiv, Ukraine
RESULTS OF SEROLOGICAL INVESTIGETIONS OF THE EGG DROP
SYNDROME-76
Data concerning serological monitoring of the egg drop syndrome-76 in the poultry farm of Kharkiv region by three serological methods in comparative aspect is presented in the article.
Cmammx nadiumna do peda^ii 9.04.2008
372