CC BY
5
В1СНИК Украгнська медична стоматологгчна академхя
DOI 10.31718/2077-1096.20.2.182 УДК: 615.33/28:615.281:582.282.23 Фаустова М.О.
ЧУТЛИВ1СТЬ КЛ1Н1ЧНОГО 1ЗОЛЯТУ STREPTOCOCCUS PLURANIMALIUM ДО АНТИСЕПТИК1В
Украшська медична стоматологiчна академiя, Полтава
Останн'ш часом у свШ рееструють пдвищення iдентифiкацi'У нових збудник'т, не характерних для MiKpo6iomu людини, та суттевi змни мiкробного складу рiзних б'ютоп'т УУ органзму. Метою даного досл'дження було вивчити чутливсть клiнiчного 'золяту S. pluranimalium до антисептике. Матерi-али та методи. Клiнiчний 'золят S. pluranimalium був видлений з ротово'У порожнини патента. Вид-лення та культивування мiкроорганiзму здшснювали за загальноприйнятими методами. Заключну 1'дентиф1'кац1'ю проводили за допомогою автоматичного бактер'юлог'чного анал'затора. Чутливють досл'джуваного золяту S. pluranimalium до антисептик'т визначали методом двократних се-р1'йних розведень у р'дкому поживному середовищi, в'дпов'дно до наказу Мiнiстерства охорони здо-ров'я Укра'Уни №167 в'д 05.04.2007 «Про затвердження методичних вказ'ток «Визначення чутливос-т'1 мiкроорганiзмiв до антибактерiальних препарат'т». Чутливсть оцнювали за мiнiмальною 1нг'1-буючою та мiнiмальною бактерицидною концентра^ями у мкг/мл. Чутливсть досл'джуваного ключного золяту визначали до хлоргексидину бглюконату 0,05%, декасану 0,02%, екстракту хлоро-фiлiпту 2,0%. Результати та Ух обговорення. За результатами досл'джень клiнiчний 'золят S. pluranimalium виявився чутливим до д'УУ антисептик'т в рiзнiй м'\р'\. Антисептики групи четвертин-них амонiевих сполук мали бльш виражену протимiкробну дю щодо досл'джуваного мiкроорганiзму, у пор1внянн1 з екстрактом хлорофiлiпту. Висновки. Серед означених антисептик'т досл'джуваний штам стрептококу був найбльш чутливим до декасану, порiвняно з хлоргексидиом та природним екстрактом хлорофлпту, мiнiмальнi '1нг'1буюч'1 та мiнiмальнi бактерицидн!' концентрацИ яких пере-вищували дан показники декасану.
Ключов1 слова: S. pluranimalium, антисептик, хлоргексидин, декасан, хлороф1л1пт
Робота виконана в рамках НДР кафедри мкробюлогп, вiрусологii' та iмунологп УМСА «Вивчення ролi умовно-патогенних та патогенних нфекцШних агентiв з р!зною чутливстю до антимкробних i противiрусних препаратiв у патологи людини», № ДР 0118u004456
Рщ Streptococcus нараховуе понад 60 видiв мiкроорганiзмiв, при чому таксономiчне поло-ження деяких з них до сьогодн залишаеться не-визначеним [1]. Поряд 3i значною фтогенетич-ною диверсифка^ею, стрептококи заселяють велику ктькють еколопчних нш, складаючи основу номофлори багатьох бютошв оргашзму людини. Проте, деяк представники цього роду вiдомi як провщн патогени людей чи тварин [2,3,4]. Останым часом у свт рееструють пщви-щення щентифкаци нових збуднимв, не характерних для мiкробiоти людини, та суттевi змши мiкробного складу рiзних бютотв и оргашзму [5, 6]. Пщтвердженням цьому е випадки тяжких ш-фекцшних процеав у людей, етюлопчним чин-ником яких були патогены для риб, курей та велико! рогатоТ худоби стрептококи [7].
Так, Streptococcus pluranimalium - нетиповий для людини мiкроорганiзм, що колошзуе сечо-статеву систему, вим'я та мигдалики ссав^в, шр'я, дихальн шляхи птахiв [8]. S. pluranimalium викликае мастити у дшних корiв, септицеми та ендокардити у курей та вапшти та аборти у велико! рогато! худоби [9]. Проте, останн 7 рош у свт щорiчно рееструють один-два кл^чш випадки захворювань у людей, розвиток яких викли-кав саме цей представник стрептокош [10]. S. pluranimalium був видтений як збудник абсцеав головного мозку, септицемш i ендокарди^в як у iмуноскомпрометованих, так i здорових па^етчв [9,10,11,12].
Незначна ктькють описаних шшчних випад-
мв у свт та обмежений обсяг шформаци не роз-кривають повнютю бюлопчн властивост нового для людини патогена, його фактори патогенност та чутливють до хiмiотерапевтичних препара^в, що суттево ускладнюе дiагностику та лкування хвороб, викликаних 5. pluranimalium.
Мета дослщження
Вивчити чутливють ключного iзоляту 5. pluranimalium до антисептиш.
Матерiали та методи
Кл^чний iзолят 5. pluranimalium був видтений з пародонтально''' кишен патента з гострим гншним перикоронитом. Матерiал заавали на 5% кров'яний агар з додаванням дрiжцжового п-дролiзату, як стимулятор росту мiкроорганiзмiв, та наступним видтенням чисто'' культури. Мк-рооргашзми культивували 24 години при 37°С в присутностi 8-10% СО2. Заключну щентифкацш проводили за допомогою автоматичного бакте-рiологiчного аналiзатора Vitec - 2сотраС bioMërieux (Францiя), згiдно шструкцп виробника.
Чутливiсть дослiджуваного iзоляту 5. pluranimalium до антисептиш визначали методом двократних сершних розведень у рщкому поживному середовищi, вiдповiдно до наказу МОЗ Укра'ни №167 вiд 05.04.2007 «Про затвердження методичних вказiвок «Визначення чут-ливостi мiкроорганiзмiв до антибактерiальних препара^в» [13]. За допомогою мiкропiпетки зi стерильним кшцевиком 1,0 мл антисептика вно-
сили в першу npo6ipKy з 1,0 мл поживного буль-йону. Пiсля ретельного змшування переносили 1,0 мл розчину, що утворився, в наступну пробн рку, в якш мiстилося 1,0 мл поживного бульйону. Дану процедуру повторювали доки не був приго-тований необхщний ряд розведень, але не мен-ше 10 пробiрок. 1з останньо''' пробiрки кiнцевиком 1,0 мл розчину видаляли. Таким чином, отриму-вали ряд пробiрок з розчинами антисептика, концентрацп яких в^знялися в сусiднiх пробiр-ках у 2 рази.
В якост шокулюма використовували мiкробну суспензiю S. pluranimalium ешвалентну 1,0 за стандартом МакФарланда, розведену в 100 ра-зiв у фiзiологiчному розчинi, пiсля чого концент-рацiя мiкроорганiзмiв в нш становила 3х1010 КУО/см3. В кожну пробiрку з готовим подвiйним розведенням розчину антисептика i в одну про-бiрку з 1,0 мл поживного бульйону («негатив-ний» контроль) кшцевиком вносили по 1,0 мл шокулюма, приготованого ex tempore. Вс пробн рки, окрiм «негативного» контролю, шкубували у звичайнiй атмосферi при температурi 35°С про-тягом одые''' доби. Пробiрку з «негативним» контролем збер^али при температурi 4°С до облiку результатiв.
Мiнiмальну шпбуючу концентрацiю (М1К) ви-значали в мкг/мл за найменшою концентрацiею розчину антисептика, що була здатна пригшчу-вати видимий рют дослщжувано''' культури мк-роорганiзму, наявнiсть якого оцшювали шляхом огляду пробiрки у прохщному свiтлi, порiвнюючи з «негативним» контролем. М^мальну бактери-цидну концентрацiю (МБцК) антисептикiв визна-чали в мкг/мл за найменшою концентра^ею антисептика,
терш, шляхом nociBy MiKpoopraHi3MiB з поживного бульйону, де вщбулася затримка росту мiкро-органiзму, на поживний агар.
Визначали чутливють дослщжуваного кл^ч-ного iзоляту до хлоргексидину бiглюконату 0,05% (Хлоргексидин-Вiола, Вiола ФФ ЗАТ, За-порiжжя, УкраТна, р/н UA/14616/01/01), декасану 0,02% (Юрiя-Фарм ТОВ, КиТв, УкраТна, р/н UA/5364/01/01), екстракту хлорофiлiпту 2,0% ( Хлорофттт, Галичфарм АТ, Львiв, УкраТна, р/н UA/4551/01/01).
Статистичний аналiз отриманих результат здiйснювали за допомогою стандартних паке™ програм "STATISTICA+" та "Microsoft Excel 2010". Наявнють вiдмiнностей мiж дослiджуваними по-казниками оцiнювали за t-критерieм Стьюдента. Результати вважали достовiрними при значен-нях р<0,05.
Результати та 1х обговорення
За результатами дослщжень клiнiчний iзолят S. pluranimalium виявився чутливим до дм анти-септикiв в рiзнiй мiрi (Рис.1). Досить закономiр-но, що антисептики групи четвертинних амоше-вих сполук мали бтьш виражену бактерюстати-чну дш щодо дослiджуваного мiкроорганiзму, у порiвняннi з екстрактом хлорофiлiпту. Так, MlK останнього у 2,4 рази достовiрно перевищувала даний показник декасану та у 1,2 рази - хлоргексидину (р<0,05). Варто зауважити, що повне знищення S. pluranimalium спостер^али в сере-дньому у присутност однакових МБцК хлорофн лтту та хлоргексидину, що, iмовiрно, могло бути наслщком частого використання останнього при лкуваны iнфекцiйних захворювань рiзноТ локалн
що noBHic™ знищував культуру бак- зацм.
6
5
Хлоргексидин Декасан Хлорофйппт
ЯМЕК > МБцК
Рис. 1. Чутливють кл1н1чного ¡золяту S.
Однак, найбтьшу чутливють серед означе-них антисептикiв клiнiчний iзолят S. pluranimalium виявляв до декасану. Його МБцК щодо дослщжуваноТ' чистоТ культури стрептококу була нижчою у 2,0 рази, порiвняно з МБцК хлоргексидину та екстракту хлорофттту (р<0,05).
Екстракт хлорофiлiпту вiдомий потужною протимiкробною дieю щодо грампозитивних мк-
animalium до антисептике, n=5, М±т. роорганiзмiв, включаючи представникiв роду Staphylococcus та дрiжцжоподiбних грибiв Candida spp. Його широко використовують при лку-ваннi запальних захворювань слизових оболо-нок порожнини рота, обробки хiрургiчних ран для профiлактики контамшацп золотистим стафто-коком. Проте, науково обфунтований механiзм впливу екстракту хпорофттту на бактерiальну
В1СНИК Украхнська медична стоматологгчна академхя
кл^ину та його прот^кробно'Г дм до сьогодн не описаний. Поряд з цим, антисептики групи чет-вертинних амошевих сполук (хлоргексидин та декасан) давно зарекомендували себе на фар-мацевтичному ринку та ктыц як потужн антисептики, що володшть вираженою активнiстю щодо широкого спектру патогешв. Вони пору-шують цтюнють клiтинних оболонок мiкроорга-нiзмiв шляхом зменшення Тх поверхневого натягу, з наступним осмотичним лiзисом. lмовiрно, саме тому, дослiджуваний клiнiчний iзолят S. pluranimalium виявляв бiльшу чутливють до хло-ргексидину та декасану.
Однак, хлоргексидин використовують в меди-чнiй практицi вже понад 40 рош, при чому останшм часом це першочерговий препарат ви-бору для антисептично!' обробки шфекцшних уражень рiзноï локалiзацiï. Тому, закономiрним може бути зниження чутливост мiкроорганiзмiв до його дм. Однак, мехашзм розвитку резистент-ностi бактерш до хлоргексидину остаточно не з'ясований i потребуе подальшого вивчення.
Висновки
Отже, ктшчний iзолят S. pluranimalium ви-явився чутливим до дм декасану, хлоргексидину та екстракту хлорофттту. Серед означених ан-тисептикiв дослщжуваний штам стрептококу найбiльш чутливий до декасану, порiвняно з хлоргексидином та природним екстрактом хлорофттту, М1К та МБцК яких перевищують дат показники декасану.
Лтература
1. Dhotre S, Suryawanshi N, Nagoba B, Selkar S. Rare and unusual isolates of viridans streptococci from the human oral cavity. Indian J Pathol Microbiol 2016;59:47-9
10.
11.
12.
13.
Pontigo F, Moraga M, Flores SV. Molecular phylogeny and a taxonomic proposal for the genus Streptococcus. Genet Mol Res. 2015 Sep 21 ;14(3):10905-18.
Faustova MO, Ananieva MM, Basarab YO, Dobrobolska OV, Vovk IM. Bacterial factors of cariogenicity (literature review). Wiadomosci lekarskie (Warsaw, Poland: 1960). 2018; 71(2 pt 2): 378-382.
Faustova MO, Ananieva MM, Basarab YO, Loban GA. Neutrophil bactericidal activity through the stages of placement of different dental implants depending on their chemical composition. Wiadomosci lekarskie (Warsaw, Poland: 1960). 2017; 70(5): 921.
Ananieva MM, Faustova MO, Basarab IO, Loban GA. Kocuria rosea, kocuria kristinae, leuconostoc mesenteroides as caries-causing representatives of oral microflora. Wiadomosci lekarskie (Warsaw, Poland: 1960). 2017; 70(2 pt 2): 296. Ananieva ММ, Nazarchuk OA, Faustova MO, Basarab YaO, Loban' GA. Pathogenicity Factors of Kocuria kristinae Contributing to the Development of Peri-Implant Mucositis. Mal J Med Health Sci. 2018; 14(3): 34-38.
Kamelia M. Osman, Khalid S. Al-Maary, Aymen S. Mubarak, Turki M. Dawoud, Ihab M. I. Moussa, Mai D. S. Ibrahim, Ashgan M. Hessain, Ahmed Orabi, Nehal M. Fawzy. Characterization and susceptibility of streptococci and enterococci isolated from Nile tilapia (Oreochromis niloticus) showing septicaemia in aquaculture and wild sites in Egypt. BMC Vet Res. 2017; 13: 357. Devriese LA, Vandamme P, Collins MD, et al. Streptococcus pluranimalium sp. nov., from cattle and other animals. Int J Syst Evol Microbiol. 1999; 49( 3): 1221 - 1226.
Aryasinghe L, Sabbar S, Kazim Y, Awan LM, Khan HK. Streptococcus pluranimalium: a novel human pathogen? Inter J Surg Case Rep. 2014;5:1242-1246. doi: 10.1016/j.ijscr.2014.11.029.
Ghazvini K, Karbalaei M, Kianifar H, Keikha M. The first report of Streptococcus pluranimalium infection from Iran: A case report and literature review. Clin Case Rep. 2019;7(10):1858-1862. doi:10.1002/ccr3.2374
Maher G, Beniwal M, Bahubali V, Biswas S, Bevinahalli N, Srinivas D, Siddaiah N. Streptococcus pluranimalium: Emerging Animal Streptococcal Species as Causative Agent of Human Brain Abscess. World Neurosurg. 2018 Jul;115:208-212. doi: 10.1016/j.wneu.2018.04.099.
Vardhana J, Mohanraj K. Brain abscess caused by an unusual organism, Streptococcus pluranimalium in a child with congenital cyanotic heart disease. University Journal of Medicine and Medical Specialities. 2015;1(1):39-45.
Nakaz Ministerstva okhorony zdorovia Ukrayiny «Pro zatverdzhennia metodychnykh vkazivok «Vyznachennia chutlyvosti mikroorhanizmiv do antybakterialnykh preparativ» vid 05.04.2007 r. №167 [Order №167 of the Ministry of Public Health of Ukraine on "On Approval of Training Guidance" Assessment of the sensitivity of microorganisms to antibiotics", April, 5, 2007]. Retrieved from: http//www.moz.gov.ua. [Ukrainian].
Реферат
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ КЛИНИЧЕСКОГО ИЗОЛЯТА STREPTOCOCCUS PLURANIMALIUM К АНТИСЕПТИКАМ Фаустова М.А.
Ключевые слова: S. pluranimalium, антисептик, хлоргексидин, декасан, хлорофилипт
В последнее время в мире регистрируют повышение идентификации новых возбудителей, не характерных для микробиоты человека, и существенные изменения микробного состава различных биотопов ее организма. Целью данного исследования было изучить чувствительность клинического изолята S. pluranimalium к антисептикам. Материалы и методы. Клинический изолят S. pluranimalium был выделен из ротовой полости пациента. Выделение и культивирование микроорганизма осуществляли согласно общепринятым методам. Заключительную идентификацию проводили с помощью автоматического бактериологического анализатора. Чувствительность исследуемого изолята S. pluranimalium к антисептикам определяли методом двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде, в соответствии с приказом Министерства охраны здоровья Украины №167 от 05.04.2007 «Об утверждении методических указаний «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам». Чувствительность оценивали по минимальной ингибирующей и минимальной бактерицидной концентрациях в мкг / мл. Чувствительность исследуемого клинического изолята определяли к хлоргексидину биглюконату 0,05%, декасану 0,02%, экстракту хлорофиллип-та 2,0%. Результаты и их обсуждение. По результатам исследований клинический изолят S. pluranimalium оказался чувствительным к действию антисептиков в разной степени. Антисептики группы четвертичных аммониевых соединений имели более выраженное противомикробное действие в отношении исследуемого микроорганизма, по сравнению с экстрактом хлорофиллипта. Выводы. Среди указанных антисептиков исследуемый штамм стрептококка был наиболее чувствительным к декасану по сравнению с хлоргексидином и природым экстрактом хлорофиллипта, минимальные ингиби-рующие и минимальные бактерицидные концентрации которых превышали данные показатели дека-сана.
2
3
4
5
6
7
8
9
Summary
SENSITIVITY OF STREPTOCOCCUS PLURANIMALIUM CLINICAL ISOLATE TO ANTISEPTICS Faustova M.O.
Key words: S. pluranimalium, antiseptic, chlorhexidine, decasan, chlorophyllipt
Recent reports have stressed out a global increase in the identification of new pathogens, which are not characteristic for the human microbiota, as well as significant changes in the microbial composition of different biotopes of its body. The purpose of this study was to investigate the sensitivity of S. pluranimalium clinical isolate to antiseptics. Materials and methods. The clinical isolate of S. pluranimalium was taken from the patient's mouth. The isolation and cultivation of the microorganism was carried out by standard techniques. Final identification was performed using an automatic bacteriological analyzer. The sensitivity of the studied S. pluranimalium isolate to antiseptics was determined by the method of double serial dilutions in liquid nutrient medium, in accordance with the Order №167 of the Ministry of Public Health of Ukraine on "On Approval of Training Guidance" Assessment of the sensitivity of microorganisms to antibiotics". The sensitivity was assessed by the minimum inhibitory and minimum bactericidal concentrations in ^g / ml. The sensitivity of the clinical isolate under the study was determined to 0.05% for chlorhexidine, 0.05% for decasan, and 2.0% for chlorophyllipt extract. According to the results obtained, the clinical isolate of S. pluranimalium was sensitive to the action of antiseptics in varying degrees. The antiseptics of the Quaternary ammonium compound group had a more pronounced antimicrobial effect on the test organism compared to the chlorophyllipt extract. Conclusions. Among these antiseptics, the tested strain of streptococcus was the most sensitive to decasan, compared with chlorhexidine and natural extract of chlorophyllipt, the minimum inhibitory and minimum bactericidal concentrations of which exceeded these indicators of decasan.
DOI 10.31718/2077-1096.20.2.185 УДК 616.65-006
Мед В.В., Бабенко В.1., Филенко Б.М.
ДЕЯК1 МОРФОЛОГ1ЧН1 ПРОГНОСТИЧН1 КРИТЕРП
РАКУ ПЕРЕДМ1ХУРОВО1 ЗАЛОЗИ
Украшська медична стоматолопчна академiя, м. Полтава
Найбльш розповсюдженою г'столог'чною формою раку передм'курово)' залози е ацинарна аденокар-цинома рiзного ступеня диферен^ювання. Основним д'агностичним критерiем, що враховуеться при вибор! методу лкування раку передм'курово)' залози, е морфологiчний атипiзм залоз, який в'до-бражаеться у шкалi Гтссона, а також ступнь експреси 'шуног 'ютох'ш'чних маркерiв, одним з яких е альфа-метилацил-КоА-рацемаза. Проте, залишаеться не повнютю зрозумлою залежнсть вира-женостi експреси р5045 в'д ступеня градаци пухлини за системою Гтссона. Метою досл'дження було встановлення взаемозв'язку мж ступенем диферен^ювання аденокарциноми передм'курово)' залози за шкалою Гт'ссона та ступенем експреси 1ГХ маркеру p504s. Було досл'джено б'юпсшний матер'ал, отриманий в'д 37 пацiентiв з раком передм'курово)' залози. За шкалою Гт'ссона матер'ал розподлили на три групи: перша в'дпов'дала оцнц 1-4 бали, друга - 5-7 бал'т та третя - 8-10 ба-лiв. 1ГХ досл'дження з визначення експреси антигену p504s проводили за допомогою моноклональ-них анти-AMACR/P504s. Анал'з залежност'! мiж ступенем диферен^ювання аденокарциноми пе-редм'курово)' залози за шкалою Гт'ссона та ступенем експреси 1ГХ маркеру p504s, було виявлено чтку законом'рн'сть та встановлено наявнсть сильного кореля^йного зв'язку (г=0,б9) мж даними морфологiчними характеристиками пухлини. Виявлена нами законом'рн'сть при виконанн!' досл-дження говорить про специфiчнiсть даного маркеру при злояюсних пухлинних процесах у передм-хуровш залоз!', що узгоджуеться з даними нших досл'джень, та дае змогу бльш точно диференцю-вати стад^^сть процесу за шкалою Гпссона. Це певною мiрою дае пiдtрунтя для вибору адекват-них метод 'т лкування пацiентiв та удосконалити прогностичнi критери. Ключов1 слова: рак передм1хуровоТ залози, атиглзм, шкала Глюсона, AMACR, прогноз.
Робота е фрагментом НДР: «Закономiрностi морфогенезу органiв, тканин та нервово-судинних утворiв у нормi, при патологи та пiд впливом екзогенних чинниюв», № державноТреестрацп 0118и004457.
тисяч населення у рк [1]. Захворюванють на РПЗ зростае з вком патента, а шк припадае на 70 рош.
Найбтьш розповсюдженою пстолопчною формою РПЗ е ацинарна аденокарцинома рiзно-го ступеня диференцшвання [2, 3]. Основним дiагностичним критерiем, що враховуеться при виборi методу лкування раку передмiхуровоl залози, е морфолопчний атишзм залоз, який вь
Вступ
За даними ВООЗ рак передмiхуровоí залози (РПЗ) займае 4 мюце серед злоякюних пухлин у чоловшв, а смертнють вщ карциноми дано! ло-калiзацil посщае 2 мюце. В УкраТы спостерка-еться тенден^я до постшного зростання захво-рюваносп на рак передмiхуровоl залози. За даними Нацюнального Канцер Реестру, вщзнача-еться в середньому 40 випадш смерт на сто
