CC BY
14
УДК: 616:314 - 089:579.86 - 026.569 Фаустова М.О., Назарчук О.А.
ВПЛИВ СУЧАСНИХ АНТИСЕПТИЧНИХ ЗАСОБ1В НА ФОРМУВАННЯ Б1ОПЛ1ВОК ГРАМНЕГАТИВНИМИ ЗБУДНИКАМИ 1НФЕКЦ1ЙНО-ЗАПАЛЬНИХ 1МПЛАНТАЦ1ЙНИХ УСКЛАДНЕНЬ
ВДНЗ УкраГни «Украшська медична стоматологiчна академiя», м. Полтава ВЫницький нацiональний медичний унiверситет iм. М.1. Пирогова
Грамнегативн/ неферментуючi мкроорган/зми пос/дають вагоме м/сце серед б1'опл!вкоутворюючих мкроорган/зм/в, як приймають участь у розвитку тяжких захворювань пац/ент/в з ¡мунодефцитни-ми станами. 1нфекцП, викликан/ даними збудниками, характеризуються хpонiчним довготривалим пе-ребгом та суттевими труднощами Ух ет/отропно)' терап'УУ у зв'язку з набуттям додатково'У резис-тентностi до д'УУ протимкробних засоб/в. Мета - досл/дження впливу сучасних антисептичних засо-б/в на б/опл/вкоутворення клiнiчних штам/в грамнегативних мiкpооpганiзмiв, що видленi за умов ¡н-фекцшно-запальних ускладнень одонто'/мплантацИ. Матер/али та методи досл/дження. В/д обсте-жених хворих було вид/лено та ¡дентиф/ковано 25 штам/в грамнегативних мiкpооpганiзмiв. Серед них ¡дентифковано бактерУУ роду Pseudomonas spp. (n=13) та Acinetobacter spp. (n=12). Чутлив/сть отриманих клiнiчних 1золят1в до антисептикв (декасану, горостену, хлоргексидину б/глюконату) ви-значали кльксним методом двократних сеpiйних розведень за стандартною методикою в/дпов/дно до наказу МОЗ Укра'Уни №167 в/д 05.04.2007 р. «Про затвердження методичних вказ/вок «Визначення чутливост/ мiкpооpганiзмiв до антибактеpiальних препарат/в». Вивчення б'юпл'шоутворюючих вла-стивостей клiнiчних ¡золят/в визначали за допомогою спектрофотометричного методу за G.D. Christensen (MtP-test «microtiter plate test"). Властивост/ мкроорган/зм/в утворювати бiоплiвки оц/ню-вали за ступенем поглинання барвника у одиницях щiльностi (ОЩ). Результати досл/дження. Дека-сан в суббактер/остатичн/й концентрацИ' пригн/чуе утворення бiоплiвок клiнiчними штамами P. aeruginosa протягом перших 24 год. культивування. Клн/чн/ iзоляти P. aeruginosa, як знаходяться у сформованш бiоплiвковiй фоpмi, виявляють високу чутливсть до суббактер/остатичних концент-рацш антисептик'в на основ/ декаметоксину (декасан, горостен). Присутнсть антисептичних за-соб/в не впливае на процес утворення бiоплiвок кл/н/чними штамами A. baumannii. в першу добу культивування, проте суббактер/остатичнi концентрацИ' декасану, горостену та хлоргексидину сутте-во пригн/чують сформованi дводобовi б/опл/вковi форми A. baumannii. Висновок. Гоамнегативнi нефе-рментуючi бактерИ, що колон/зують пери/мплантатну длянку за умов ускладнень дентально'У ¡м-плантацИ, волод/ють високими б/опл/вкоутворюючими властивостями. Сучаснi антисептичнi засоби впливають на процес утворення бопл/вок на р/зних етапах Ух формування. Ключов1 слова: бюпл1вка, чутливють до антисептиив, грамнегативж бактерп, одонто1мплантац1я
Дана робота виконана в рамках НДР «Вивчення багатовекторностi властивостей лкарського антимкробного препарату декаметоксину», № державно)' реестрацИ' 0115U006000.
Вступ
Починаючи з 80-х рош минулого стол^тя, питання бiоплiвкоутворення рiзними мiкроорганi-змами та його вплив на розвиток патолопчних процеав привертае все бтьше уваги як науков-^в, так i лiкарiв-практикiв. Адже вщомо, що утворення мiкроорганiзмами бiоплiвок на повер-хнях медичного обладнання, iмплантатiв та вла-сне тканин оргашзму людини призводить до бю-плiвко-асоцiйованих шфекцш, як досить важко пщдаються лкуванню [2;4;6;8;12].
Останшм часом з'являеться все бтьше даних про роль бiоплiвкоутворюючих мiкроорганiзмiв у розвитку тяжких захворювань па^ен^в з iмуно-дефщитними станами. Грамнегативж неферме-нтуючi мiкроорганiзми посщають вагоме мюце серед них. Здатнють Pseudomonas spp. та Acinetobacter spp. юнувати в умовах середовища лкувальних закладiв, прикртлюватися до рiзних поверхонь та протистояти зовшшым факторам агресп свщчить про Тх провщне значення серед вщомих збудниш шфекцшних ускладнень, пов'язаних з наданням медичноТ допомоги. 1н-фекци, викликан даними збудниками, характе-
ризуються хроычним довготривалим переб^ом та суттевими труднощами Гх етютропнш терапп. Адже у складi бiоплiвок збудники набувають до-датковоГ резистентност до дй' протимiкробних засобiв [1;7;9;10].
Враховуючи дат особливосп, актуальним залишаеться необхiднiсть пошуку альтернатив-них ефективних засобiв, якi володiють протимк-робною дiею як щодо планктонних форм антибн отикорезистентних збудникiв шфекцшно-запальних ускладнень одонтоiмплантацiГ, так i у формi бiоплiвок. Це обумовлюе науковий штерес до вивчення процесу бiоплiвкоутворення в кпшь чно значимих збудниш безпосередньо та за умов наявност рiзних протимiкробних засобiв [3;5].
Мета
Дослiдження впливу сучасних антисептичних засобiв на бiоплiвкоутворення клiнiчних штамiв грамнегативних мiкроорганiзмiв, що видiленi за умов шфекцшно-запальних ускладнень одонтон мплантацп.
АктуальН проблеми сучасно! медицины
Матерiали та методи дослщження
У дослiдженнi було обстежено 46 пацieнтiв середньо'Т вково'Т групи за ВООЗ (середнiй BiK 47±5,32 рош) з включеними дефектами зубних рядiв у боковiй дтянщ яким було встановлено вiд 1 до 4 розбiрних титанових iмплантатiв, за результатами клiнiчних i рентгенолопчних мето-дiв дiагностовано периiмплантатний мукозит та першмплантит. Для видiлення, дослщження бю-логiчних властивостей аеробно'Т та факультати-вно-анаеробно'Т мiкрофлори виконували забiр матерiалу з периiмплантатних кишень стериль-ним паперовим ендодонтичним штифтом стандартного розмiру (№30) шляхом просочування, з подальшим культивуванням на елективних, се-лективних середовищах та щентифка^ею мк-роорганiзмiв стандартними мiкробiологiчними методами.
Вщ обстежених хворих було видтено та ще-нтифiковано 25 штамiв грамнегативних мiкроор-ганiзмiв. Серед них щентифковано бактерп роду Pseudomonas spp. (n=13) та Acinetobacter spp. (n=12). Чутливiсть отриманих клiнiчних iзолятiв до антисептиш (декасану, горостену, хлоргек-сидину бклюконату) визначали кiлькiсним методом двократних сершних розведень за стандартною методикою вщповщно до наказу МОЗ Укра-'Тни №167 вщ 05.04.2007 р. «Про затвердження методичних вказiвок «Визначення чутливостi мн кроорганiзмiв до антибактерiальних препара^в». Кiлькiснi характеристики протимiкробноТ дi' ан-тисептиш у мкг/мл визначали за м^мальною ш-
Чутливсть öo^iö^yeaHux
гiбуючою концентра^ею (М1К) препаратiв у рщ-кому поживному середовищi та Т'х м^мальною бактерицидною концентрацiею (МБцК) шляхом поаву на чашки Петрi зi щтьним поживним се-редовищем. Антисептичнi лкарськ препарати закупляли в аптеках.
Вивчення бiоплiвкоутворюючих властивостей клiнiчних iзолятiв визначали за допомогою спек-трофотометричного методу за G.D. Christensen (MtP-test «microtiter plate test"). Бiоплiвки вщтво-рювали в лунках стерильного плоскодонного 96-лункового полiстеролового планшету (Corning, США) з додаванням суббактерюстатичних кон-центрацш та М1К антисептикiв та забарвлювали 1%-м розчином кристалiчного фiолетового. Вла-стивостi мiкроорганiзмiв утворювати бiоплiвки оцшювали за ступенем поглинання барвника у одиницях щшьносп (ОЩ) спектрофотометрично (570 нм). 1нтерпретацш результатiв проводили вщповщно до вщомо'Т методики. Так, здатнiсть мiкроорганiзмiв до утворення бiоплiвок оцшювали як низьку (0Щ<0,120), середню (ОЩ = 0,1210,239) та високу (0Щ>0,240) [11 ;13].
Результати та 1х обговорення
Останшм часом на вiтчизняному фармаколо-пчному ринку добре себе зарекомендували антисептики з групи четвертинних амошевих спо-лук на основi декаметоксину (декасан, горостен). Проведенi дослiдження довели Т'х протимiкробну дiю щодо кл^чних штамiв Pseudomonas spp. та Acinetobacter spp. (табл. 1).
Таблиця 1
ччних штам'в м'жрооргашзм'в до антисептике, мкг/мл, M±m
Мiкроорганiзми n Декасан Горостен Хлоргексидин бглюконат
МБцК М1К МБцК М1К МБцК М1К
P. aeruginosa 13 79,96±29,6 39,42±19,08 61,30±30,32 41,47±22,56 115,38±50,3 73,32±31,80
A. baumannii 12 28,13 ±19,3 13,28 ±5,9 23,43 ±16,9 12,04 ±6,2 37,11 ±27,3 18,55 ±11,6
Так, МБцК декасану та горостену щодо кпшь чних iзолятiв P. aeruginosa становили 79,96±29,6 мкг/мл та 61,30±30,32 вщповщно. У свою чергу, МБцК хлоргексидину бклюконату щодо означе-них збудниш визначали дещо вищими (115,38±5о,3 мкг/мл). Кл^чы штами A. baumannii проявили найбтьшу чутливiсть до дм горостену, МБцК якого щодо даних штамiв не перевищували 23,43±16,9 мкг/мл. МБцК горостену та хлоргексидину бклюконату щодо A. baumannii незначно перевищували МБцК де-касану i становили 28,13 ±19,3 мкг/мл та 37,11 ±27,3 мкг/мл вщповщно.
Доведено, що М1К декасану (39,42±19,08 мкг/мл) щодо ктычних штамiв P. aeruginosa, у 1,9 разiв нижча за М1К хлоргексидину бклюкона-ту (73,32±31,80 мкг/мл) щодо даних мiкроорганi-змiв. Дослiджуванi антисептичн засоби чинили iнгiбуючу дiю щодо штамiв A. baumannii у конце-нтрацiях 13,28±5,9 мкг/мл декасану, 12,04±6,2 мкг/мл горостену та 18,55±11,6 мкг/мл хлоргексидину бклюконату.
За результатами проведених дослщжень встановлено меншу ефективнють хлоргексидину
бiглюконату вiдносно грамнегативних неферме-нтуючих бактерiй, якi колонiзували першмплан-татну дiлянку за умов шфекцшно-запальних ускладнень одонтоiмплантацiТ, порiвняно з антисептиками на основi декаметоксину. Однак дос-товiрноТ рiзницi мiж даними показниками не ви-явлено.
Базуючись на отриманих результатах чутли-вост дослщжуваних клiнiчних штамiв мiкроорга-нiзмiв до антисептичних засобiв, були обранi су-ббактерiостатичнi концентрацiТ препаратiв для оцшки Т'х впливу на бiоплiвкоутворення збудни-ками родiв Pseudomonas spp. та Acinetobacter spp. Здатнють формувати бiоплiвки P. aeruginosa дослiджували у присутност 25 мкг/мл декасану, 31,25 мкг/мл горостену та 62,5 мкг/мл хлоргексидину бклюконату. Вплив антисептиш на бiоплiвкоутворення клiнiчними штамами A. baumannii дослщжували в присутностi суббактерюстатичних концентрацiй декасану (12,5 мкг/мл), горостену (7,81 мкг/мл) та хлоргексидину (15,63 мкг/мл).
Встановлено, що дослщжуваш ктычы iзоля-ти володiли високою здатнютю до бiоплiвкоут-
ворення. Так, ступшь поглинання барвника бюп-лiвками, як продукували штами P. aeruginosa, як в першi 24 години культивування, так i на 2 добу в середньому складав 0,674±0,17 ОЩ та 0,709±0,15 ОЩ вiдповiдно. Данi показники для кл^чних штамiв A. baumannii знаходилися в межах 0,51 ±0,19 ОЩ на першу добу та 0,553±0,14 ОЩ через 48 годин.
Доведено, що Bei дослщжуваы антисептичш ощ0'8
0,7
0,6
0,5
0.4
03
0,2
0,709
засоби впливали на процес формування бюпль вок кл^чними iзолятами роду Pseudomonas spp. протягом перших 24 годин. Культивування шта-мiв P. aeruginosa з розчином декасану у суббак-терюстатичнш концентрацп пригнiчувало утво-рення бiоплiвок, ступшь поглинання барвника якими складав 0,463±0,10 ОЩ. Проте, достовiр-ноТ рiзницi, порiвняно з контролем, не виявлено (рис. 1).
0,544 0,538
Контроль
Дека сан
Горостен
Хлоргексидину бмюконат
О 24 год □ 48 год
Рис. 1. Характеристика б'юпл'вкоутворюючих властивостей клiHi4Hux штам'в P. aeruginosa (n=13); *- достовiрнiсть вiдмiнностей показника ОЩ бiоплiвок у присутнот декасану до показника ОЩ бiоплiвок без антисептичного препарату через 24 год, р<0,05; ** - достовiрнiсть вiдмiнностей показниюв Ощ бiоплiвок у присутностi горостену та декасану до показника ОЩ бiоплiвок без антисептичного препарату через 48 год, р<0,05.
ОЩ
0,6
0,553
0,50(1
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0,378
0,406
0,322
Контроль
Декасан
Горостен
Хлоргексиди б1глюкокат
24 год □ 48 год
Рис. 2. Характеристика бiоплiвкоутворюючиx властивостей клiнiчниx штамiв A. baumannii; *- достовiрнiсть вiдмiнностей показниюв ОЩ бiоплiвок у присутнот горостену, декасану та хлоргексидину до показника ОЩ бiоплiвок без антисептичного препарату через 48 годин, р<0,05.
Суббактерюстатичш концентрацп горостену та хлоргексидину бклюконату суттево не впливали на процес бiоплiвкоутворення кл^чними iзолятами P.aeruginosa у першi 24 години культивування (0,485±0,13 ОЩ та 0,544±0,15 оЩ вн дповщно), осктьки результати виявилися недо-стовiрними порiвняно з контролем.
Важливим завданням сучасноТ медицини е
створення препара^в, що окрiм запобкання утворенню бiоплiвок здатн руйнувати вже сфо-рмованк З ^ею метою проведено дослiдження впливу антисептичних засобiв на 2 добу культивування збуднимв. В результатi встановлено, що антисептичш засоби групи четвертинних амошевих сполук на основi декаметоксину у су-
АктуальН проблеми сучасно!' медицины
ббактерюсатичних концентра^ях виражено впливали на процес вщтворення бiоплiвок шта-MiB P. aeruginosa. Присутнють розчину декасану достовiрно пригшчувала бiоплiвкоутворення через 48 годин даними кл^чними iзолятами у 1,4 рази (0,509±0,13 ОЩ), порiвняно з контролем, що культивувався 2 доби. Достовiрне зменшен-ня сформованих бiоплiвок P. aeruginosa також виявили при додаванш суббактерюстатичноГ концентраци горостену через 48 годин вщтворення експерименту, у порiвняннi з контролем. Так, ступшь поглинання барвника дводобовими бiоплiвками штамiв P. aeruginosa. при дм горостену зменшився у 1,3 рази (0,532±0,14 ОЩ).
В присутност хлоргексидину бiглюконату да-ний показник був наближеним до показниш бю-плiвкоутворення у присутностi горостену, однак при порiвняннi ОЩ бiоплiвок P. aeruginosa через 48 годин культивування в присутност суббакте-рюстатично'Г концентраци хлоргексидину та дво-добовим контролем достовiрноï рiзницi не виявили. Одержат дан засвiдчили вщсутнють ефективноï протимiкробноï дiï антисептичного засобу хлоргексидину на сформован бiоплiвки кл^чних штамiв P. aeruginosa.
Встановлено, що ва антисептичнi засоби, що були використаш у дослiдженнях, не мали сут-тевого впливу на формування бiоплiвок кл^ч-ними iзолятами A. baumannii протягом першо'1 доби, осктьки порiвняно з контролем результа-ти виявилися недостовiрними (рис. 2). Однак, при додаванш суббактерюстатичних концентра-цш антисептикiв на другу добу вщтворення бюп-лiвок, останнi виявилися чутливими до дм вико-ристаних засобiв. Найбiльшу чутливiсть дводо-бових бiоплiвок A. baumannii було встановлено до дм суббактерiостатичних концентрацiй декасану. При цьому спостер^али зниження утворення бiоплiвок у 2,7 разiв (0,207±0,10 ОЩ), в порiвняннi з дводобовими бiоплiвками даних штамiв без антисептиш.
Встановлено суттеве пригнiчення утворення бiоплiвок через 48 годин експерименту в присут-ностi горостену та хлоргексидину б^люконату. Щiльнiсть бiоплiвок при додаванш горостену (0,243±0,11 ОЩ) була в 2,3 рази меншою вщ ОЩ бiоплiвок, утворених клiнiчними штамами A. baumannii без антисептиш. Суббактерюстатич-на концентрацiя хлоргексидину бiглюконату зменшувала утворення бiоплiвок у 2,0 разiв. Це пiдтверджуе ефективнiсть препаратiв, що вико-ристовували у дослiдженнях при лкуваны шфе-кцiй на етап уже сформованих бiоплiвок.
Висновки
1. Грамнегативш неферментуючi збудники родiв Pseudomonas spp. та Acinetobacter spp., що колошзують першмплантатну дiлянку за умов ускладнень одонтамплантацп, володiють висо-кими бiоплiвкоутворюючими властивостями.
2. Декасан в суббактерюстатичнш концент-рацiï пригнiчуе утворення бiоплiвок клiнiчними штамами P. aeruginosa протягом перших 24 год культивування. Кл^чш iзоляти P. aeruginosa, як знаходяться у сформованiй бiоплiвковiй форм^ виявляють високу чутливiсть до суббактерюстатичних концентрацш антисептикiв на основi декаметоксину (декасан, горостен).
3. Присутнють антисептичних засобiв не впливае на процес утворення бiоплiвок шшчни-ми штамами A. baumannii. в першу добу культивування, проте суббактерюстатичш концентрацИ декасану, горостену та хлоргексидину суттево пригшчують сформованi дводобовi бiоплiвковi форми A. baumannii.
Лiтература
1. Балко О. Б. Структуры компоненти i особливост оргашзацп 5Î-оплiвки Pseudomonas aeruginosa / О.Б. Балко, Л.В. Авдеева // 1^кробюлопчний журнал. - 2010. - №. 72,№ 4. - С. 28-33.
2. Лобань Г.А. Мiкробiолоiя, вiрусолопя та iмунологiя порожнини рота / Г.А. Лобань, В.1. Федорченко - Полтава: Верстка, 2003. -123 с.
3. Палш Г.К. Дослщження ефективност антимiкробних препара-тiв у пацiентiв is запальними захворюваннями порожнини рота / Г.К. Палш, О.А. Назарчук, М.О. Фаустова [та ш.] // Вюник проблем бюлогп i медицини. - 2016. - №2 (3). - С. 220-225.
4. Петрушанко Т. А. Скрининговая диагностика микроэкологических нарушений полости рта / Т.А. Петрушанко, В.В. Череда, Г.А. Лобань // Клиническая лабораторная диагностика. - 2014.
- №6. - С.48-50
5. Фаустова M. O. Етюлопчна структура, бюлопчш властивост домшуючих збудниюв першмплантатного мукозиту / M. O. Фаустова, О. А. Назарчук, M. M. Ананьева // Запорожский медицинский журнал. — 2017. — Т. 19, № 5 (104). — С. 652—657.
6. Фаустова М. О. Протистрептококова активнють антибютиюв i антисептиюв / М.О. Фаустова, О.А. Назарчук, М.М. Ананьева // Актуальш проблеми сучасноТ медицини: Вюник украТнськоТ медичноТ стоматолопчноУ академм. - 2017. - Т. 17. - №. 2 (58).
- С. 58-60.
7. Череда В.В. Скриншгова оцшка колошзацшноУ резистентностi слизовоУ оболонки порожнини рота / В.В. Череда, Т.О. Петрушанко, Г.А. Лобань // Вюник стоматолош. - 2011. - №2 (75). - С. 33-35.
8. Alhede M. Pseudomonas aeruginosa biofilms: mechanisms of immune evasion / M. Alhede, T. Bjarnsholt, M. Givskov [et al.] // Adv. Appl. Microbiol. - 2014. - Т. 86. - №. 1. - С. 40.
9. Alipour N. Outbreak of hospital infection from biofilm-embedded pan drug-resistant Pseudomonas aeroginosa, due to a contaminated bronchoscope / N. Alipour, A. Karaqoz, A. Taner [et al.] // Tap Chi Y Hoc Du Phong. - 2017. - №2(2). - P. 54-83.
10. Al-Kadmy I.M.S. Molecular characterization of Acinetobacter baumannii isolated from Iraqi hospital environment / I.M.S. AL-Kadmy, A.N.M. Ali, I.M.A. Salman [et al.] // New Microbes and New Infections. - 2018. - №21. - Р. 51-57.
11. Christensen G.D. Adherence of Coagulase-Negative Staphylococci to Plastic Tissue Culture Plates: a Quantitative Model for the Adherence of Staphylococci to Medical Devices / G. D. Christensen, W.A. Simpson, J.J. Younger [et. al] // Journal of clinical microbiology. - 1985. - Vol. 22(No. 6). - P. 996-1006.
12. Rybtke M. Pseudomonas aeruginosa biofilm infections: community structure, antimicrobial tolerance and immune response / M. Rybtke, L.D. Hultqvist, M. Givskov [et al.] // Journal of molecular biology. - 2015. - Т. 427. - №. 23. - С. 3628-3645.
13. Vasanthi R. Study of biofilm production and antimicrobial resistance pattern of the bacterial isolates from invasive devices / R. Vasanthi, D. Karthikeyan, M. Jeya // International Journal of Research in Health Sciences. - 2014. - V. 2 (1). - P. 274-280.
Реферат
ВЛИЯНИЕ СОВРЕМЕННЫХ АНТИСЕПТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ НА ФОРМИРОВАНИЕ БИОПЛЕНОК ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫМИ ВОЗБУДИТЕЛЯМИ ИНФЕКЦИОННО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ ОДОНТОИМПЛАНТАЦИИ Фаустова М.А., Назарчук А.А.
Ключевые слова: биопленка, чувствительность к антисептикам, грамотрицательные бактерии, одонтоимплантация
Грамотрицательные неферментирующие микроорганизмы занимают важное место среди биопленкообразующих микроорганизмов, участвующих в развитии тяжелых заболеваний пациентов с имму-нодефицитными состояниями. Инфекции, вызванные данными возбудителями, характеризуются хроническим длительным течением и существенными трудностями их этиотропной терапии, в связи с приобретением дополнительной резистентности к действию противомикробных средств. Цель - исследование влияния современных антисептических средств на биопленкообразование клинических штаммов грамотрицательных микроорганизмов, выделенных в условиях инфекционно-воспалительных осложнений одонтоимплантации. Материалы и методы исследования. От обследованных больных было выделено и идентифицировано 25 штаммов грамотрицательных микроорганизмов. Среди них идентифицированы бактерии рода Pseudomonas spp. (n = 13) и Acinetobacter spp. (n = 12). Чувствительность полученных клинических изолятов к антисептикам (декасан, горостен, хлоргексидина биглюконата) определяли количественным методом двукратных серийных разведений по стандартной методике в соответствии с приказом МЗУ Украины №1б7 от 05.04.2007 г. «Об утверждении методических указаний «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам». Изучение биопленкообразующих свойств клинических изолятов определяли с помощью спектрофотометрического метода по G.D. Christensen (MtP-test "microtiter plate test"). Свойства микроорганизмов образовывать биопленки оценивали по степени поглощения красителя в единицах плотности. Результаты исследования. Декасан в суббактериостатической концентрации подавляет образование биопленок клиническими штаммами P. aeruginosa в течение первых 24ч культивирования. Клинические изоляты P. aeruginosa, которые находятся в сформированной биопленочной форме, проявляют высокую чувствительность к суббактериостатической концентрации антисептиков на основе декаметоксина (декасан, горостен). Присутствие антисептических средств не влияет на процесс образования биопленок клиническими штаммами A. baumannii в первые сутки культивирования, однако суббактериостатические концентрации декасана, горостена и хлоргексидина существенно подавляют сформированные двухсуточные биопленочные формы A. baumannii. Вывод. Грамотрицательные неферментирующие бактерии, которые колонизируют периимплантатный участок в условиях осложнений дентальной имплантации, обладают высокими биопленкообразующими свойствами. Современные антисептические средства влияют на процесс образования биопленок на разных этапах их формирования.
Summary
INFLUENCE OF MODERN ANTISEPTICS ON BIOFILM FORMATION BY GRAM-NEGATIVE PATHOGENS DURING INFECTIOUS AND INFLAMMATORY COMPLICATIONS AFTER DENTAL IMPLANTS PLACEMENT Faustova M.O., Nazarchuk O.A.
Key words: biofilm, sensitivity to antibiotics, Gram-negative bacteria, dental implantation
Gram-negative non-fermenting microorganisms occupy a significant place among biofilm-forming microorganisms that take part in the development of severe diseases in patients with immunodeficiency. Infections, which are caused by these pathogens, are characterized by chronic long-term course and significant difficulties of their ethiotropic therapy as they develop additional resistance to antimicrobial agents. The purpose of this study was to investigate the influence of modern antiseptic agents on biofilm formation by clinical strains of gram-negative microorganisms, which were isolated during infectious and inflammatory complications after dental implants placement. Materials and methods. 25 strains of gram-negative microorganisms were isolated from the examined patients there were the bacteria of the genus Pseudomonas spp. (n = 13) and Acinetobacter spp. (n = 12). Evaluation of sensitivity to antiseptics was carried out by means of double serial dilutions method using the standard procedure approved by the Order №167 of the Ministry of Public Health of Ukraine on "On Approval of Training Guidance "Assessment of the sensitivity of microorganisms to antibiotics", dated by April, 5, 2007. Biofilm-forming properties of clinical strains were studied by using the spectrophotometric method of G.D. Christensen (MtP test "microtiter plate test"). The properties of microorganisms to form biofilms were evaluated by the degree of absorption of the dye in units of density (UD). Results. The sub-bacteriostatic concentration of decasan suppresses the formation of biofilms of P. aeruginosa clinical strains during the first 24 hours of cultivation. Clinical isolates of P. aeruginosa, which are in the formed biofilm form, show the high sensitivity to the sub-bacteriostatic concentrations of antiseptics of de-camethoxin (decaetan, hosten). The presence of antiseptic agents does not affect the formation of biofilms by clinical strains A. baumannii in the first day of cultivation, however, the sub-bacteriostatic concentrations of decasan, horosten and chlorhexidine significantly suppress the two-day biofilm forms of A. of A. bauman-nii. Conclusion. Gram-negative non-fermenting bacteria that colonize the peri-implant site in cases of complications following dental implant placement, have high biofilm-forming properties. Modern antiseptic agents influence the formation of biofilms at different stages of this process.
