CC BY
11Минздравсоцразвития России
Российский регистр потенциально опасных химических и биологических веществ Роспотребнадзора
НОВЫЕ СВЕДЕНИЯ О ТОКСИЧНОСТИ И ОПАСНОСТИ ХИМИЧЕСКИХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ
УДК 615.285
Н.И.Шеина1, Э.Г.Скрябина1, Е.В.Буданова2, Л.И.Мялина1, В.В.Колесникова1
'РГМУ, 2ММА им. И.М.Сеченова, Москва
ИНСЕКТИЦИДНЫИ ПРЕПАРАТ БАТОЛИМ
«Батолим» является оригинальным микробиологическим препаратом пролонгированного действия, который предназначен для борьбы с личинками двукрылых насекомых всех возрастов.
Препарат «Батолим» представляет собой водную суспензию микрогранул (0,1—0,3 мм) природного биополимера — альгината кальция с заключенными внутри микроорганизмами и субстратом для их питания. Оболочка микрогранул из природного биополимера надежно защищает микроорганизмы от негативных факторов окружающей среды. Состав гранул: альгинат кальция, рафинированное подсолнечное масло, микроорганизмы в соотношении 10:1:1.
Действующим началом препарата «Батолим» является равная смесь (1,0-106 кл/г) микроорганизмов Bacillus thuringiensis v. israelensis (далее B. thuringiensis) и Tolypocladium cylindrosporum CMPPB-345 (далее T. cylindrosporum), обладающих специфической ларвицидной активностью в отношении насекомых отряда двукрылых.
В процессе экспериментальных исследований были изучены патогенные свойства микроорганизмов, входящих в препарат, и чувствительность их к антибиотикам. При длительном инт-раназальном введении (1 мес.) оценивали влияние препарата «Батолим» на интегральные показатели состояния организма экспериментальных животных и микрофлору кишечника, имму-нотропные свойства и возможность диссемина-ции его во внутренние органы с целью установления лимитирующего критерия вредного действия (ЛКВД) и обоснования ПДКр.з. и ПДКа.в..
Для характеристики патогенных свойств штаммов в экспериментах на мышах были определены следующие параметры: средневирулент-ная доза, пороговая доза, токсигенность, токсич-
ность и способность к диссеминации штамма в кровь и внутренние органы в течение 30 дней.
Показано, что при однократном внутрибрю-шинном введении высоких доз штаммы B. ringiensis и T. cylindrosporum не проявляли вирулентных свойств > 3-1011 кл/жив.).
Пороговая доза для B. thuringiensis составила 3-109 кл/жив., а для T. cylindrosporum — 3-1010 кл/жив., что свидетельствует о низкой способности изученных штаммов к инвазивности в кровяное русло из брюшной полости и не превышает допустимых значений, представленных в нормативных документах. Токсигенные и токсичные свойства штаммов не были выявлены.
Результаты исследования способности изучаемых штаммов к диссеминации показали, что B. thuringiensis и T. cylindrosporum обладали способностью к кратковременному персистирова-нию в организме теплокровных животных в течение 2 дней при однократном внутрибрюшин-ном введении в дозе 3-1011 кл/жив. Способность микроорганизмов к диссеминации в крови и во внутренних органах не обнаружена.
На основании результатов проведенных исследований можно сделать вывод об отсутствии патогенных свойств B. thuringiensis и T. cylindro-sporum. Они не являются вирулентными, не обладают токсигенностью, не диссеминируют во внутренние органы животных и могут быть квалифицированы как промышленные микроорганизмы.
Обследование животных в хроническом эксперименте показало, что воздействие препарата «Батолим» в концентрациях 2-103 и 2-104 кл/м3 в течение 1 мес. не приводило к изменению интегральных показателей состояния организма экспериментальных животных, которое оценивалось по динамике массы тела в процессе эксперимента, а также по величине коэффициентов массы внутренних органов.
В результате исследований по изучению им-мунотропных свойств препарата установлено, что коэффициенты масс иммунокомпетентных органов (тимус, селезенка) экспериментальных
животных не отличались от таковых у животных контрольной группы.
В лейкограмме периферической крови подопытных животных наблюдали увеличение содержания эозинофилов у животных при воздействии препарата в концентрации 2-104 кл/м3. Отмечено также изменение баланса иммунокомпе-тентных клеток в сторону значимого снижения Т-лимфоцитов и увеличения В-лимфоцитов.
При оценке сенсибилизирующей активности препарата в эксперименте на мышах выявлено формирование клеточной реакции замедленного типа (ГЗТ). Полученные результаты показали, что в формирование сенсибилизирующей активности препарата по типу ГЗТ ощутимый вклад вносли бактерии B. thuringiensis.
Одновременно наблюдали дегрануляцию тучных клеток перитонеального экссудата in vitro у подопытных животных при воздействии большей концентрации (2-104 кл/м3) препарата, что свидетельствует о формировании у них гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ).
Изучаемый препарат не вызывал образования специфических гуморальных антител (агглютининов) в сыворотке подопытных животных при воздействии обеих концентраций препарата.
Бактериологические исследования микрофлоры кишечника не выявили выраженных изменений в составе микрофлоры, что может свидетельствовать о безопасности препарата «Бато-лим» для микроэкологии кишечника при интра-назальном введении минимально эффективных доз. Напротив, некоторое снижение количества стафилококков являлось весьма позитивным эффектом препарата на указанных уровнях воздействия. В восстановительном периоде микрофлора кишечника крыс, подвергшихся воздействию препарата, по качественным и количественным показателям не отличалась от таковых контрольных животных.
Микроорганизмы B. thuringiensis и T. cylindro-spo rum, входящие в препарат, при хроническом воздействии также не обладали способностью к диссеминации в кровь и внутренние органы (легкие, печень, почки, селезенка) экспериментальных животных ни через 1 мес. введения микроорганизма, ни через 2 недели восстановительного периода.
Изучение антибиотикорезистентности B. thuringiensis показало, что штамм устойчив к бета-лактамным антибиотикам, неомицину и поли-миксину, а также некоторым сульфаниламидам (ко-тримоксазол). Полученные данные можно расценивать как «маркерную устойчивость» штамма и в дальнейшем использовать для их идентификации в объектах окружающей среды. Для приготовления селективной питатель-
ной среды для выделения B. thuringiensis целесообразно добавлять temporo антибиотики этих групп.
На основании полученных данных установлено, что лимитирующим критерием вредного действия препарата «Батолим» на организм теплокровных животных являются иммунотроп-ные, в том числе сенсибилизирующие свойства штаммов, входящих в препарат «Батолим», а минимально эффективная концентрация составляет 2-104 кл/м3.
В результате проведенных исследований обоснованы ПДКрз. препарата «Батолим» на уровне 2-103 кл/м3, пометка А и ПДКав. на уровне 2-102 кл/м3, пометка А. Разработан количественный микробиологический метод контроля содержания штамма в воздухе рабочей зоны и атмосфере населенных мест, основанный на аспирации воздуха на поверхность агаризованной среды и подсчета выросших колоний одного из штаммов thuringiensis).
Материал поступил в редакцию 20.05.08.
УДК 615.281
В.А.Пройновa, Г.И.Рожнов, Ю.Б.Шaфиров
ОАО «Всероссийский научный центр по безопасности биологически активных веществ», Старая Купавна, Московская обл.
СУЛЬФАМОНОМЕТОКСИН (синонимы: Daimeton, Duphadin) 4-(пaрa-aминобензолcульфaмидо)-6-метоксипиримидин
SO,—NH-(\ N
NH.
о—сн3
CAS №: 1220-83-3. CnH12N4O3S. М.м. 280,31.
Белый или белый с кремоватым оттенком кристаллический порошок. Тпл. 203—208°C. Очень мало растворим в воде, мало — в спирте, легко растворим в разведённой соляной кислоте.
Антибактериальный сульфаниламидный препарат длительного действия (у человека период полувыведения из крови — 30 ч). Назначают внутрь в таблетках 1 раз в сутки. Максимальная суточная доза взрослым в 1-й приём 1—2 г, поддерживающая доза 0,5—1 г. Длительность курса лечения 5—14 дней (до 1 мес.).
Побочное действие: головная боль, диспепсия, аллергические реакции, лейкопения, снижение уровня гемоглобина, нарушение функции почек и ЦНС и др.
-зз-
По данным литературы сульфамонометоксин при повторном введении накапливается в крови и внутренних органах. По характеру распределения в организме животных после однократного введения сходен с сульфаниламидами сверхдлительного действия.
По данным литературы БЬ50 для белых мышей составляет: в/ж — свыше 8000 мг/кг, в/б — 2800 мг/кг.
Для определения пороговой дозы (ПД) в по-достром эксперименте сульфамонометоксин вводили внутрь крысам самцам в течение 40 дней в дозах 15, 1,5 и 0,15 мг/кг. Регистрировали в динамике показатели функционального состояния печени и почек, картину периферической крови.
Препарат в дозе 0,15 мг/кг не влиял на состояние животных в течение эксперимента, а в дозах 15 и 1,5 мг/кг вызывал однонаправленные отклонения большинства изученных показателей с практически одинаковой степенью выраженности (изменение в крови содержания мочевины, креатинина и мочевой кислоты, снижение активности лактатдегидрогеназы, лейкопения, возрастание относительной массы семенников). Совокупность полученных данных позволила сделать вывод, что ПД общетоксического действия для сульфамонометоксина находится между 1,5 и 0,15 мг/кг. Расчет среднегеометрической величины даёт значение 0,47 мг/кг; вероятно, прогнозируемая ПД близка к величине 0,5 мг/кг
При введении внутрь неинбредным белым крысам в дозе 750 мг/кг на 8-16-й день беременности сульфамонометоксин оказывал выраженное токсическое действие на беременных самок (снижение в 2 раза величины прибавки массы тела за период 1- 20-й день беременности, возрастание относительной массы почек, печени, надпочечников, головного мозга и селезёнки). В упомянутой дозе препарат проявил эмбриоток-сическую и тератогенную активность. Выявили резкое снижение массы тела и длины 20-дневных плодов, значительное возрастание общей эмбриональной смертности (до 42,9% при 18,6% в контроле). Обнаружили статистически значимое (критерий «хи-квадрат») возрастание частоты плодов с аномалиями развития: расщепление верхнего нёба, макроглоссия и микрогнатия (83, 18 и 7% плодов соответственно).
Пороговая концентрация сульфамонометок-сина по влиянию на общий санитарный режим водоёма — 25 мг/л (угнетение БПК в 20-суточ-ных опытах).
Недействующая концентрация в 20-суточных опытах по влиянию на интенсивность развития и отмирания сапрофитной микрофлоры в воде — 3,5 мг/л.
В максимально достижимой концентрации 10 мг/л при 60°С не обнаружили влияния суль-фамонометоксина на запах, привкус, окраску воды, склонность к пенообразованию и опалес-ценции.
Утверждена в установленном порядке величина ОДУ сульфамонометоксина в воде водных объектов хозяйственно-питьевого и культурно-бытового водопользования — 0,2 мг/л, санитарно-ток-сикологический лимитирующий признак вредности, класс опасности — 2 (ГН 2.1.5.2307-07).
Материал поступил в редакцию 26.05.08.
УДК 615.211
В.А.Пройнова1, Г.И.Рожнов1, М.Г.Плешаков1, В.П.Котегов2
'ОАО «Всероссийский научный центр по безопасности биологически активных веществ», Старая Купавна, Московская обл. 2Пермская государственная медицинская академия
ГЛИДИФЕН
Гуанидиниевая соль 2,4-дихлор-5-карбокси-бензолсульфокислоты, диафен
ли
С8И9М3058С12. М.м. 330,14.
Белый или белый с кремоватым оттенком кристаллический порошок без запаха, с горьковатым привкусом. Тпл. 267—273°С. Умеренно растворим в воде и 95%-ом спирте (допускается слабая опалесценция растворов), практически нерастворим в хлороформе. рИ 1%-го водного раствора 1,8—2,8.
Пероральное антидиабетическое средство. Объединяет в составе своей молекулы активные центры двух групп сахароснижающих препаратов — производных бигуанида и сульфонилмоче-вины. Разовая терапевтическая доза — 0,25 г, суточная доза — 0,75 г, высшая суточная доза — 1,5 г.
Получены следующие значения БЬ50 (мг/кг): при в/ж введении мышам, крысам и морским свинкам — 1925, 2260 и 1335 соответственно; при в/б введении мышам, крысам, морским свинкам и кроликам — 980, 1650, 650 и 900 соответственно.
Острая токсичность глидифена у интакт-ных животных (крыс и кроликов) и у животных с экспериментальным аллоксановым диабетом была практически одинакова, однако у последних клиническая картина интоксикации (одышка, тремор, судороги) развивалась значительно медленнее.
