CC BY
25
Х+рурггчна стоматология
УДК: 616. 314. 17-008. 1+616. 314. 18-002. 4-089 М. М. !лыав, В. 1. Герелюк
АВТОГЕДЬ Ф1БРИНУ, ЗБАГАЧЕНИЙ ТРОМБОЦИТАМИ, ЯК ЕФЕКТИВНИЙ ПРОТИЗАПААЬНИЙ ЗАС1Б У Х1РУРГ1ЧНОМУ А1КУВАНЖ ХВОРИХ НА ГЕНЕРАА130ВАНИЙ ПАРОДОНТИТ
ДВНЗ 1вано-ФранК1вський нацюнальний медичний университет
Актуальнкть теми
У сучасиому науковому свт посилену уеасу привертас завер-шальна стад1я запального проце-су. Було доведено, що завершения запалення - це активний процес, керований багэтьма ендогенними регуляторами, а порушення про-цеав завершения запалення е головною причиною виникнення хрошчних запальних захворювань. На 6аз1 цих достджень була сфор-мульована нова стратепя лкуван-ня запальних захворювань {фар-маколопчне регулювання стади завершения запального процесу) i запропонована стратепя пошуку та розробки протизапальних препарате нового поколЫня. Запалення - це типовий патолопчний процес, у якому беруть участь ба-гато титв о ¡тин, який регулюеться великою юлькктю мед1атор!в, як низькомолекулярних, так i високо-молекулярних. В1домо, що продук-ти розпаду самоспйно виступають стимуляторами запалення, тому стад!я запалення може тривати не-скжченно i запалення перейде в хрожчну форму. Для запоб1гання такому сцен a pi ю на стади розвитку запалення в оргажзм1 вщбуваеться переключения синтезу мед1атор!в ¡з прозапальних на протизапзльш, або мед1атори завершения [8]. До MefliaTopis завершения належать noxiflHi арах1доновоТ кислоти: л1-поксини, ресольвши, простаглан-
т| запропонували нову стратепю л!кування запальних захворювань вгдпов1дно страгепю пошуку / розробки протизапальних препарате нового поколшня, Устх лкування запальних захворювань буде значною м!рою визначэтися ефективн!стю фармаколопчного регулювання процеав завершения запалення. Тому актуальним е вивчення можливоТ рол1 автогелю ф|брину, збагзченого тромбоцитами (ГКР), у синтез! лтоксижв як препарату, що нормалЬуе \ поси-люе процеси завершения запального процесу, а не пригшчуе його розвиток у хворих на генерал1зо-взний пародонтит [5].
Важливим показником ¡нтенсив-ност) запального процесу, актив-нооп переб1гу генералвованого пародонтиту е С-реактивний б!лок (С-РБ), С-РБ належить до «головних бишв» гостроТ фази: його концен-трац!я при бактер!альн!Й ¡нфекцГГ, уижодженж тканин, некроз1 стр1м-ко {в перил 6-8 год.) ] значно (в 20-100, а ¡иод! в 1000 разт) зростае, тод| як у здоровоУ людини р(вень С-РБ у плазм! кров! м(шмзльний. Зг[дно з традиц|йним уявленням синтез С-РБ ¡н!ц1юють численж чинники: антигени бзктер1альноТ, в1русноТ, грибковой паразитарно!' та ¡н. природи, ¡мунж комплекси, продукти ушкодження тканин, ток-сини та ¡н. Таким чином, С-РБ € не тиьки чутливим маркером запа-
ди:! D2 тз ¡н. 3 б!ЛК1в регулятор!в у л$кня, a i В!д1грЭ£ вэжливу роль у
першу чергу треба вид)лити транс-формуючий фактор росту (ТСР-Р) , що в1д?грас важливу роль у розвитку завершальноТ стадм запального процесу. Саме на баз? цих дошджень Чарлз Сьохан, Дерек Плрой, Сью Брайн, Мауро Перрет-
патогенез! та прогресуванж процес! в судинного ураження при ге-нзралЬованому пародонтит!. Здат-Н1сть С-РБ чутливо реагувати на травму тканин, зокрема xipypriw-нйго походження, зумовила широ-ке використання цого показника як
маркера ефективносл х!рурпчних втручань у загальжй xipyprii [3]. На re пер а('дсутня ('нформац|'я щодо ефективносл визначення С-РБ як маркера можторингу мрургмного лкування в стоматологи взагал! та зокрема у хворих на генералво-ваний пародонтит [3]. Особливо актуальним € вивчення впливу ф1-брину, збагзченого тромбоцитами (FRP), у xipypri4HOMy лжуванж генерал(30ваного пародонтиту на bmict С-РБ.
Новггжм кроком у xipypri4Ho-му лжуванж пародонтиту е засто-сування аетотрансплантацмно-го матер1алу - автогелю ф1брину, збагаченого тромбоцитами (FRP) , - цЫного джерела фактор! в росту. Це природж пептиди, як| напроти-вагу гормонам не ¡снують у вкпьжй форм1 в кров1, а д1ють м1сцево. Дже-релом отримання факторш росту е тромбоцити. У людському оргажз-м! нараховуються 3 велию групп фактор1в росту, ЯК1 беруть активну участь у регенерац!У тканин пзро-донта, а саме: ¡нсулшопод1бний фактор росту {Insulin Like Growth Factor) - стимулятор росту кктко-воТтканини; тромбоцитарний фактор росту (Platelet Derived Grown Factor) - еволюцмно часовий фактор росту, волод1е хемотактичною i м1тогенною д1ею та е ¡н1ц1атором загоення ран; трансформуючий фактор росту {Transforming Grown Factor Beta) - остеошдуктор, забез-печу? стимуляцию синтезу ДНК та протеТжв у ф(бробластах; ф|брин е протеТном , отриманим ¡з ф!бри-ногену плазми, сприяе клггинжй мобЫьност! в paHi. Роль ф1брину полягае не лльки в ззбезпеченж кл1тинно'| Mirpanii, a t в захоплен-Hi тромбоците та мкцевому ви-
втьненж фактор^ росту [1]. Цей матер1ал ниж усшшно використо-вуеться в загальнш xipyprii, стоматологи, дентальжй ¡мплантологи та косметологи - створюе kow6i-нований стимулюючий ефект на клггини твердих i м'яких тканин па-родонта. За даними вчених (Whitman, Berry) , адгезивж властивос-Ti гелю покращують гемостаз та адаптац1ю слизово-оюсного клап-тя. У раз! вивтьнення в д!лянку ракового дефекту фактори росту
як(, взаемод1ючи 3i специфтними рецепторами, сприяють ефектив-ному загоенню тканин. Протиза-пальна ефективжсть гелю ф!брину, збагаченого тромбоцитами (FRP) , та мехашзми и забезпечення за умови х1рурпчного лкування та xi-рурпчних мантуляцй у хворих на генералвований пародонтит зали-шаеться не вивченим.
Мета роботи- вивчення проти-запальноТ ефективносп автогелю ф1брину, збагаченого тромбоцитами (FRP) , у хворих на генерал1-зований пародонтит за кл!жчними та лабораторними показниками nepe6iry захзорювання, вмктом маркера системно!' запальноТ Bifl-noeifli С-РБ та здатжстю до синтезу лтоксижв.
Матергал та методи досль дження. Кл1н1чн] обстеження проведен! в 51 хворого на генера-
Рисунок 1. Автогель ф1брину, збагачений тромбоцитами (FRP)
лЬований пародонтит И-Ш ст. роз-витку bîkom В1д 36 до 54 рок!в. Для досл!дження вщбиралися xBOpi на генерал13оааний пародонтит без установлено'! системно'!' супутньоТ пато/ioriï, гострих рестраторних захворювань, без захворювань слизовоТ оболонки порожнини рота, слинних залоз. Стан тканин пародонта оцшювали за величиною ¡ндексу РМА [2], визначення кровоточивосп ясен PBI [2], визначення рухомосп зубш за Ентшим [2], рентгенолопчно. Лабораторно визнэчали м!грац1ю лейкоцитш у порожнину рота за Ясиновським. Визначення С-РБ проводили за до-помогою латексного д(агностику-му «С-РБ - латекс тест» TOB HB/] «Гранум», м. Харюв. Державний реестрацмний номер №1248/2002. Л1поксин, зокрема лтоксин A4 (LxA4) , визначали ¡мунофермент-ним методом. Для отримання ав-
тогелю ф!брину, збагаченого тромбоцитами, використовуеться таке обладнання: центрифуга ЕВА-20 \ спецшьж проб1рки. У центрифу-З! МОЖутЬ ОброблЯТИСЯ Б1Д 2 до 8 лроб1рок на швидкост! в1д 100 до 6000 об / хв; крщ того, в жй усу-нута в1брац5я, що € необхщною умовою для отримання гелю фЬ брину, збагаченого тромбоцитами в мембранжй форм!. На в1дмшу в1д ¡нших методик кров не шдлягае обробц1 антикоагулянтами, з нею не проводять будь-яких ¡нших ма-жпуляцш - немае жяких перешкод до и використання [6].
. Беруть кров ¡з вен лктьовоТ ямки в спецгальж вакуумж пробирки - вакулети (рис. 1). Крое цен-трифугують у вакулетах протягом 12 хв. ГИд час центрифугування кров розд1ляеться на ч1тю 3 фрак-ци. У нижжй частиш знаходиться еритроцитарна маса (червона) , у
КлШчна та лабораторий ефективжсть застосування гелю ф1брину, збагаченого тромбоцитами (FRP)
Таблиця 1
РМ А (%) 1ндекскровоточив octî (PBI) (бали) Рухомкть зуб ¡8 (СТуПЖь) М|грацЫ лейко-циТ1в за Ясиновським (КЛ1ТИН/ ммЗ)
I трупа (п=27) До лжування 53,7*4,72 2,7±0,35 2,7±0,32 315±15,31
7-8 день *11,5±1,98 *** - 2,2±0,27 *115±5,28 ***
1 мкяць *4,2+0Д7*** *0,3±0,06*** *0,7±0,15 *** *128±12,31***
11 трупа (п=11) До лкування 47,3 ¿4,18 2,4+0,27 3,0+0,41 367*31,45
/-8 день 23,5*2,05 - 2,5±0,31 175±11,27
1 м|сяць 7,5+0,33 1,2 ±0,19 1,б±0,11 156+7,32
Контрольна грула (п=13) До л'|кування Ъ,Ъ±Ъ,2Ъ 2,Ъ±Ъ,5"± 347 ±12, AS
7-8 день 25,8±3,47 - 2,5 ±0,35 181± 55,62
1 мкяць 8,4i0,26 0,9±0,15 1,7±0,14 167+5,31
Примггки: * - статистично в(ропдна рвниця mî* основною i контрольною трупами; *** - статистично 81ропдна р1зниця м1ж I i II основними трупами.
©УКРАТНСЬШЙ СТОМАТОАОГ1ЧНИЙ АЛЬМАНАХ №3 2010 45
Таблиця 2
Клшчна ефектиетсть застосування гелю ф16рину, збагаченого тромбоцитами (FRP) , у дигянках, де не проводилося xipypeiHHe втручання
РМ А <%) М1грац1я лейкоципв за Ясиновським (КЛГГИН/ММЗ)
I група (п —27) До лкування 50,7±4Д1 315±15,31
7-8 день *9,5+1,98 *** *115±5,28 ***
II група (п=11) До лжуваннч 47,3 ±4,18 367±31,45
7-8 день 21,5±2,05 175±11,27
Контрольна трупа (п=13) До лкування 49,8±2,73 347±12,45
7-8 день 25,8±3,47 181±55,62
Прим ¡тки: * - статистично в|'роп'дна р|'зниця м|'ж основною i контрольною трупами; *** - статистично вфопдна р(зниця м1ж И Носновними трупами.
верхжй частив - плазма, б|дна на бьпки (прозора фракцЫ) , по центру - збагачена ф1брином та тромбоцитами фракц1я, яка стан о вить собою желепод!бну масу (гель) жовтого кольору. ГНсля вилучення згустку з пробфки та в1докремлен-ня червоноТ кров'яноУ фракци матерел можна використовувати в операц1йжй раж (рис. 1).
Результати дослщження та Ух обговорення
Нами було проведено лкуван-ня 51 хворого на генерал!зований пародонтит П-Ш ст. розвитку. В I основжй груп! (27 пацкнлв) засто-совували гель ф1брину, збагачений тромбоцитами (гель та мембрана) , в поеднанж з пдроксиапатитом "Кергап"; у II основшй грут (11 пац1ент'|в) для заповнення юстко-вих дефеклв застосовували т!льки пдроксиапатит "Кергап", у контрольна груп! (13 пац1снт1в) проводили класичну клаптеву операц!ю. Клаптеву операц!ю проводили за класичною методикою. ГНсля ви-далення грануляцмноУ тканини
KÎCTKOBi дефекти виповнювали сум!шшю автогелю фибрину, збагаченого тромбоцитами, та пдро-ксиапатиту "Кергап" i покривали мембраною. Операцш завершу-вали вкладанням на м!сце та фкса-цкю швами в м1жзубних пром!ж-ках слизово-оюсного клаптя.
У1основнм rpyni тсляоперацШ-ний перюд минав без ускладнень. На 2-3 добу сп осте pi галл в!дсут-н!сть вираженого набряку в м!сцях уведення трансплантату, часткову пперем!Ю слизовоУ оболонки, шви були знят! на 6-7 добу. Через 1 mi-сяць установлено в!дсутжсть скарг, бл¡до-рожевий кол1р слизовоУ без ознак запального процесу.
У I основшй rpyni виявлено bî-ропдно нижч1 показники ¡ндексу РМА (4, 2±0, 17) , ¡ндексу крово-точивосп (О, 3±0, Об) , показники pyxoMOCTÎ зуб1в (0, 7±0, 15} та Mi-грацц лейкоцитов за Ясиновським (128 ±12, 31) у nopiBHAHHÎ з дани-ми II основно! та контрольно!' грул (табл. 1). У окремих naqicmÏB II та контрольно!' груп на другу добу
спостер!галися виразний набряк операцмноУ рани, пом)рна болю-ч1сть, пперемт слизовоУоболонки, яка зникала через ю'лька джв. Шви були зиял на 8-10 добу. Отримаж результати тдтверджують вирз-жений протизапальний ефект гелю ф!брину, збагаченого тромбоцитами. В1ропдних в1дмшностей мЬк показниками II основноТ та контр-ольноУ груп не було встановлено (табл. 1).
При доандженж пародонто-лопчного статусу зуб) в пацкнтю I основноУ груп и, б/ля яких не проводились х1рург(ЧН1 мажпуляци', виявлено зниження показниюв, що характеризують запальний процес у пор1внянж з II основною групою I контрольною трупами, що св!дчить про позитивний протизапальний вплив автогелю ф1брину, збагаченого тромбоцитами, не ильки в д1-лянц! оперативного втручання, а \ на переб(г генералвованого паро-донтиту в цтому (табл. 2).
Отже, використання гелю фн брину, збагаченого тромбоцитами,
Таблиця 3
Динатка вмкту С-РБ (сироватка ttpoei) у хворих на генерал1зований пародонтит у раз1 х1рург1чного лшування 1з застосуванням гелю ф16рину, збагаченого тромбоцитами (мг/л)
Термши визначеккя Ï група (л=27) И група (п=11) Контрольна група(п=13)
(Ци лнчу РОППЛ 1 1 Г\~Г 1 1 э ■> 1 3 1 "7 1 1Л
2-3 день лкування **28,44±4,25* *** "56,42+8,21* **47,34+5,13
7-8 день лЫування **7,31±1,34* *** 10,5412,55 12,05±1,37
1 м1сяць **б,22±1,29* *** 9,71+2,62 10,12+2,03
Примнки: * - статистично BiporiflHa р1зниця шж основною i контрольною трупами; ** - статистично в|'ропдна ршиця в пор!Внянж з вихщними даними; *** - статистично вфопдна р1зниця м1ж I i II основними трупами.
Х1рурггчиа сшоматологгя
Таблица 4
ДинамЫа вм'ксту С-РБ (ротова р1дина) у хворих на генерал'гзований пародонтит у раз1 хьрурггчного лЫування та застосування гелю фибрину, збагаченого тромбоцитами (мг/л)
Термши визначення I трупа (п=27) II трупа (п=11) Контрольна трупа (п=13)
До лкування 210 Д7± 17,03 231,34±21,03 253,22±12,03
2-3 день л!кування **420,12±10,25* *** **725,+12,19 **739,13± 17,03
7-8 деньункування **18,24±9,03* *** **83,54±11,03 **69,45±12,03
1 мкяць **9,80+2,07* *** **37,55 ±10,03 **24,33±9,03
Примпки: * - статистично в1ропдна р)зниця мЬк основною ! контрольною трупами; ** - статистично в1ропдна рвниця в портнянн! з вихщними даними; *** - статистично в!рог!дна рвниця м!ж I \ II основними трупами.
Таблиця 5
Ум1ст лтоксину А4 (1хА4) в шкубат'1 гелю фгбрину, збагаченого тромбоцитами (РЙР) „ хворих на генерал130ваний пародонтит (нг/мл)
Гель фгёрину, збагачений тромбоцитами (п = 7) Гель фибрину, збагачений тромбоцитами + гомогенат тканини пародонта (п = 15) Гомогенат тканини пародонта (л = 8)
Ум1ст лтоксину А4 (1.хА4) (нг/мл) *3,23±0Д4** *27,33±4,02** 0,00±0,00
Примгтки: * - статистично В1ропдна р!зниця м1ж гелем ф1брину, збагаченого тромбоцитами, та гелем фибрину, збагаченого тромбоцитами + гомогенат тканини пародонта; ** ■■ статистично в1ропдна рЬниця в пор^внянж з томогенатом ткзнини пзродонта.
демонструе виражений лротиза-пальний ефект, що Ыдтверджено результатами дослщжень показ-ниюв клшнних ¡ндексш та лабо-раторних доопджень пац1ент!8 I групп.
Отриман кл!Н1ЧН1 результати П1дтверджуються даними визна-чення вм1сту С-РБ у хворих 1 групп в сироватц1 кров) в пор1внянн( з И \ контрольною трупами пац!ентт. Доопдження важливого показни-ка активносп запального проце-су виявило статистично в1ропдне зростання його вм1стуу вах трупах теля операцп, однак концентрац!я С-РБ пац1ент1в I групп на 2-3, 7-8 день та через 1 моць була досто-в1рно нижчою в сироватц! кров1 та ротовм р)диж, що об'ективно шд-
тверджуе протизапальний ефект гелю ф1брину, збагаченого тромбоцитами (табл. 3, табл. 4).
Визначення С-реактивного бмка € ефективним дшгностичним кри-тер1ем ефективност) х1рурпчного лкування генералвованого паро-донтиту та об'ективним юльюсним показником оцнки перебегу тсля-операц1йного перюду. Використан-ня автогелю ф(брину, збагаченого тромбоцитами, в комплексному гл-куванж хворих на генералвований пародонтит покращуе пкляопера-ц1йний перебк, стимулюе процеси регенераци, що дозволяе отрима-ти кращ| кулычы результата та за-безпечуе тривалу ремюю.
Для встановлення можливих причин вираженоТ лротизапаль-
ноТ активносп матер[алу у хворих на генералЬований пародонтит ми доел |д ил и вмкт лтоксину А4 в ¡н-кубал гелю ф1брину, збагаченого тромбоцитами (табл. 5).
Примаки: * - статистично в!ро-пдна рЬниця м1ж гелем ф!брину, збагаченого тромбоцитами, та гелем ф!брину, збагаченого тромбоцитами + гомогенат тканини пародонта; ** - статистично в1ропдна рЬниця в пор!внянн1 з гомогена-том тканини пародонта.
Установлено наявнкть (1хА4) \ його зростання в 6-8 раз(в при взаемоди з тканинами пародонта хворих на генерал(30ваний пародонтит, що Ыдтверджуе протиза-пальж властивосл гелю ф1брину, збагаченого тромбоцитами.
Вис нов к и
1. Використання автогелю ф!брнну, збагаченого тромбоцитами, в комплексному л!куванш хворих на генерал1зований пародонтит покращуе тсляоперацшний переб1г, стимулюе процеси регенераци, що дозволяе отримати краыц кли-пчт результати.
2. Автогель ф1брину, збагачений тромбоцитами, мае виражет протизапальн! Еластпвост1, що тдтверджуеться даними клЬпчних шдекс1в та даними лабораторних дослщжень у хворих на генерал!зовании пародонтит.
©УКРАТНСЬКИЙ СТОМАТОАОГМНИЙ АЛЬМАНАХ №3 2010 47
3. Автогель ф1брину, збагачений тромбоцитами, виявляе протизапальний ефект, як у м.1с-щ виявлення, так 1 в щлому на иере&г генерал!зованого пародонтиту.
4. Використаныя автогелго фибрину, збагаченого тромбоцитами, приводить до зннження вмкту С-РБ у ротовш рщиш та сироватщ кров1 теля операщино! травми, що евщчить про його системну протизапальну д1ю. Визначення С-реактивного б1лка е ефективним д1агнос-тичним критер!ем ефективност1 х!рурпчного лшування генерал1зованого пародонтиту та об'ективним шльгасним показником оцгаки пере61 гу тсляолерацшного перюду.
5. Автогель фибрину, збагачений тромбоцитами, мйггить лшоксин - важливу протизапальну речовину (ЬхА4) 1 здатний збшыцувати його синтез у 6-8 раз1в при шкубацн з тканинами пародонта хворих на генерал!зований пародонтит, що, можливо, визначае його потужний протизапальний потенщал.
Лггература
1.1льюв М. М. Комплекснелкування пародонтиту ¡з застосуванням гелю ф1брину збагаченого тромбоцитами / Мар'яна 1льюв, Вп-алж Герелюк// Буковинський медичний В1сник. - 2003. - №4. - С. 69-72.
2. 1льюв М. М. Лроф)лактика гисляоперацшних ускладнень та атрофи альвеолярного в1дростка теля операцм видалення зуб|в / Мар'яна 1льюв, В1тал|й Герелюк// Буковинський медичний вкник. - 2004. - №1. - С. 62-65.
3. Пат. на корисну модель. (11) 28780 (51) А61810/00 Укра'Гнз. Споаб диагностики \ оцшки активносп запального лроцесу при захворюваннях тканин пародонта / Н. М. Павелко, Н. М. Коваль, В, I. Герелюк. За-явл. 17. 07. 07; опубл. 25.12. 07, Бюл. №21.
4. Юрченко М. Ю. Обзор оборудования и методик для получения аутогенной обогащенной тромбоцитами плазмы крови в стоматологии / М. Ю. Юрченко, А. В. Шумский // Новое в стоматологии. — 2003. — №7. — С. 46-47.
5. inflammatory resolution: new opportunities for drug discovery / D. W. Gilroy, T. Lawrence, M. Perretti (et al.] // Nat. Rev. Drug . Discov. - 2004. -Vol. 3, №5. - P. 401-416.
6. Marx R. E. Platelet-Rich Plasma (PRP): What Is PRP and What Is Not PRP? / R. E. Marx // Implant. Dentistry. — 2001. — Vol. 10. — P. 225-228.
7. Resolution of inflammation: state of the art, definitions and terms / C. N. Serhan, S. D. Brain, C. D. Buckley [et al.] // FASEB J. - 2007. -Vol. 21. -P. 325-332.
8. Serhan C. N. Resolution Phases of Inflammation: Novel Endogenous Anti-Inflammatory and Proresolving Lipid Mediators and Pathways / C. N. Serhan // Annu. Rev. Immunol. -2007. -Vol. 25. - P. 101-137.
Cmamma Hadiutu/ia 6. 05. 2010 p.
Резюме
Данной работой определена эффективность использования автогеля фибрина, обогащенного тромбоцитами, на основе проведенного изучения динамики воспалительного процесса (клинические индексы и пробы, с-реактивный протеин, липоксин А4) при хирургическом лечении пародонтита.
Ключевые слова: пародонтит, автогель фибрина, обогащенный тромбоцитами, факторы роста.
Summary
The efficiency of the application of fibrin glue autogel enriched with platelets, was determined on the basis of clinical and laboratory study of the inflammatory process dynamic (the clinical indexes and probes, C-reactive protein, lipoxyne A4 (LxA4) ) , during the surgical treatment of the patients with the generalized periodontitis.
Key words: periodontitis, fibrin glue autogel enriched with platelets, growth factors.
