CC BY
34
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Аутоиммунные заболевания Autoimmune diseases
США), основанные на технологии Luminex xMAP (Luminex, США) с применением магнитных микросфер Milliplex Mag. Регистрацию и анализ данных проводили на приборе Luminex MAGPIX (Luminex,CfflA). Определяли концентрация следующих цитокинов/хемокинов: IFNy, TNFa, CCL2/MCP-1, CCL8/MCP-2, CCL20/MIP-3a, CXCL9/MIG, CXCL10/IP-10 и CXCL11/I-TAC.
Результаты. В плазме крови больных АИГ и больных ПБЦ концентрация CCL8/MCP-2 была снижена (для АИГ Me = 14,7 [Q1 = 8,2 - Q3 = 18,7] пкг/мл, p < 0,001, ПБЦ - 15,7 [9,9-21,2] пкг/мл, p < 0,001), в группе здоровых доноров 37,8 [29,9-44,3] пкг/мл. В плазме крови больных в обеих группах увеличены концентрации хемокинов: CXCL9/MIG (для АИГ 2311 [1250-4901] пкг/мл, p = 0,0004, ПБЦ - 2873 [1940-6806] пкг/мл, p < 0,0001, в группе здоровых доноров 441,1 [341,9-806,9] пкг/мл), CXCL10/IP-10 (АИГ - 634,6 [461,0-911,7] пкг/мл, p < 0,0001, ПБЦ - 1053 [607-1518] пкг/мл, p < 0,0001, в группе здоровых доноров 183,5 [112,9-254,7] пкг/мл), CCL2/MCP-1 (АИГ - 233,7 [194,3-290,4] пкг/мл, p = 0,0028, ПБЦ - 266,9 [160,8432,0] пкг/мл, p = 0,001, в группе здоровых доноров 143,7 [102,7-200,4] пкг/мл). В плазме крови больных больных ПБЦ также увеличены концентрации следующих цито-кинов/хемокинов: CXCL11/I-TAC (у больных - 141,2 [94,1-293,1] пкг/мл, p = 0,0026, в группе здоровых доноров 77,9 [57,7-124,2] пкг/мл) и TNFa (у больных - 8,8 [6,1-13,6] пкг/мл, p = 0,0227, в группе здоровых доноров 6,8 мл [5,9-8,6] пкг/).
Заключение. В результате проведенного исследования показано, что в плазме периферической крови больных аутоиммунным гепатитом повышена концентрация хемокинов CXCL9/MIG, CXCL10/IP-10, CCL2/MCP-1, а больных первичным билиарным циррозом - также повышена концентрация этих хемокинов и, кроме того, концентрации CXCL11/I-TAC и TNFa. Также показано, что в плазме периферической крови обеих групп пациентов снижена концентрация хемокина CCL8/MCP-2.
ВЛИЯНИЕ ИММУНОСУПРЕССИВНОЙ ТЕРАПИИ НА CУБПОПУЛЯЦИОННЫЙ СОСТАВ B-КЛЕТОК У БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКОЙ
Будкова А.И.1, Мазинг А.В.1, Серебрякова М.К.3, Кудрявцев И.В.1, 3, Тришина И.Н.2, Маслянский А.Л.2, Тотолян Арег А.1, 4
1ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова» Министерства здравоохранения РФ, Санкт-Петербург, Россия
2 ФГБУ«Северо-Западный федеральный медицинский исследовательский центр им. В.А. Алмазова» Министерства здравоохранения РФ, Санкт-Петербург, Россия
3 ФГБНУ«Институт экспериментальной медицины», Санкт-Петербург, Россия
4 ФБУН«Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера», Санкт-Петербург, Россия
Введение. B-лимфоциты выполняют ряд функций. В развитии аутоиммунных заболеваний (АИЗ) они играют важную роль: синтез аутоантител, презентация ауто-антигенов, секреция провоспалительных цитокинов, образование эктопических герминативных центров и моделирование иммунного ответа.
Материалы и методы. Были обследованы 25 больных с СКВ (23 женщины, 2 мужчин) в возрасте от 18 до 65 лет. Группу контроля составили 49 здоровых доноров (28 женщин, 21 мужчина) в возрасте 35-62 лет. В качестве группы сравнения были обследованы 27 больных с ССД и 47 больных с СШ. Из базовой иммуносупрессивной терапии 32% (п = 8) больных СКВ получали последние 3 месяца циклофосфан, 100% (п = 25) — глюкокортикоиды. Для выявления популяции В-лимфоцитов периферической крови был использован метод проточной цитофлуоме-трии. Статистический анализ был проведен с помощью программы GraphPаd Р1^т 7.
Результаты. Мы обнаружили у больных СКВ снижение субпопуляций «наивных» В-клеток под влиянием ци-клофосфана по сравнению с больными без данной терапии (р = < 0,05). Также у больных СКВ, независимо от терапии, оказалось достоверно выше число плазмобластов по сравнению с донорами (р < 0,01). Полученные результаты свидетельствуют о том, что при АИЗ патогенетические механизмы заболеваний и терапия приводят к сдвигам в содержании субпопуляций В-клеток. Необходимо отметить отсутствие влияния циклофосфана у больных СКВ на повышенное число плазмобластов, вырабатывающих в большом количестве антитела.
Вывод. Использование в качестве мишени имму-носупрессивной терапии определенные субпопуляции В-клеток, возможно, является одним из перспективных способов достижения скорой и длительной ремиссии.
ЗНАЧИМОСТЬ ЦИТОКИНОВ АДАПТИВНЫХ СУБПОПУЛЯЦИЙ ^-ЛИМФОЦИТОВ В ПАТОГЕНЕЗЕ ЯЗВЕННОГО КОЛИТА
Валеева А.Р., Скороходкина О.В.
ФГБОУ ВО «Казанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, Казань, Россия
Введение. Аутоиммунные заболевания кишечника, к основным нозологическим формам которых относят язвенный колит (ЯК) и болезнь Крона (БК), являются одной из наиболее актуальных проблем в современной гастроэнтерологии ввиду высокой их социальной значимости. Патогенез данной патологии довольно сложен и к настоящему моменту раскрыт не полностью. Так, в качестве значимых причин, влияющих на формирование воспалительной реакции при ЯК называются такие, как факторы окружающей среды, наличие генетической предрасположенности, также обсуждается роль кишечной микробиоты как аутоантигена, индуцирующего развитие аутоиммунных реакций. Традиционно считается, что в развитии ЯК преобладает ^2-опосредованный иммунный ответ. Однако в последнее время в литературе активно обсуждается роль и !Ы7-лимфоцитов в патогенезе ЯК, с учетом их значимости в формировании аутоиммунных процессов и при другой патологии.
Цель. Анализируя уровень Ш-4, Ш-17А и Ш-10, охарактеризовать функциональную активность ТЪ2- и ТЫ7-лимфоцитов в формировании аутоиммунного воспаления у пациентов с ЯК в стадии обострения и ремиссии заболевания.
Материалы и методы. Уровень указанных цитокинов исследовался в сыворотке крови 48 больных в стадии обострения ЯК, а также у 20 больных в период ремиссии заболевания с помощью метода мультиплексного анализа
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
(Bio-Rad USA). Статистическая обработка результатов проводилась с помощью пакета программ STATISTICA 6.0, применялись непараметрические методы описательной статистики (метод Манна—Уитни). Контрольную группу составили 11 здоровых добровольцев.
Результаты. Анализ полученных результатов показал достоверное увеличение уровня IL-4 и IL-17A у пациентов ЯК как в обострении, так и в период ремиссии заболевания. Так, в период обострения ЯК уровень ключевого цитокина 1Ь2-лимфоцитов IL-4 достигал 3,23 пг/мл [2,18; 5,02], а в ремиссии — 3,42 пг/мл [2,8; 4,18], в то время как в контрольной группе указанные показатели не превышали 1,87 пг/мл [1,4; 3,2] (р = 0,002; 0,009 соответственно). Повышение уровня данного цитокина указывает на наличие повышенной функциональной активности Th-2 лимфоцитов у больных ЯК, что в целом соответствует данным и других авторов. Уровень IL-17A, основного цитокина секретируемого 1Ъ17-лимфоцитами, также был увеличен в период обострения ЯК, и его значения достигали 15 пг/мл [12,11; 23,38], а в ремиссии заболевания — 14,68 пг/мл [11,29; 17,19], в то время как в контрольной группе указанные показатели соответствовали 7,36 пг/мл [5,18;8,06], (р = 0,00007; 0,00029 соответственно). Повышение уровня IL-17A может свидетельствовать о роли Th17-лимфоцитов в формировании аутоиммунного воспаления при ЯК. В свою очередь IL-10, секретируемый регулятор-ными Т-лимфоцитами (Treg), обладает известным имму-носупрессивным эффектом. В нашем исследовании было выявлено, что только в период ремиссии ЯК уровень IL-10 был достоверно повышен до 27,99 пг/мл [17,53; 33,55], значения которого в контрольной группе составляли не более 4,36 пг/мл [3,26; 15,25], (р = 0,0046). В период же обострения заболевания уровень IL-10 достоверно не отличался от группы контроля и соответствовал 21,93 пг/мл [3,61; 35,35], (р = 0,065). Следовательно, зафиксированное повышение уровня IL-10, указывает на возможную ингиби-рующую роль Treg, в развитии аутоиммунного воспаления при ЯК особенно в период ремиссии заболевания.
Заключение. На основании полученных результатов сделаны следующие выводы: 1) увеличение уровней цитокинов IL-4, IL-17A у больных ЯК указывает на повышение функциональной активности Th2-, Th17-субпопуляций лимфоцитов и их участии в патогенезе хронического аутоиммунного воспаления как при обострении, так и в ремиссии заболевания; 2) повышение уровня IL-10 в период ремиссии заболевания может отражать значимость регуляторных Т-лимфоцитов в инги-бировании аутоиммунного воспаления при ЯК.
ЭФФЕКТЫ IL-6 НА ПОКАЗАТЕЛИ УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА У БОЛЬНЫХ АБДОМИНАЛЬНЫМ ОЖИРЕНИЕМ С РАЗЛИЧНЫМ СОСТОЯНИЕМ УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА
Василенко М.А.1, Кириенкова Е.В.1, Скуратовская Д.А.1, Затолокин П.А.1, 2, Литвинова Л.С.1
1 Балтийский федеральный университет им. И. Канта, Калининград, Россия
2 Областная клиническая больница Калининградской области, Калининград, Россия
Введение. Ожирение сопровождается субклиническим хроническим воспалением жировой ткани (ЖТ), что оказывает влияние на метаболическую и секреторную функцию
ЖТ способствуя формированию инсулинорезистенгносш (ИР) и сахарного диабета (СД) 2 типа (Mathis D., 2013). Ключевыми молекулами с выраженными провоспалитель-ными свойствами являются — фактор некроза опухолей a (TNFa) и IL-6, концентрация которых в висцеральном жире более чем в 100 раз превышает их сывороточный уровень (Fernandez-Real J.M. et al., 2003). IL-6 интересен тем, что оказывает противоположно направленные эффекты на разные ткани. Установлено, что в мышечной ткани высокая концентрация этого цитокина повышает чувствительность к инсулину путем ингибирования синтеза ряда провоспа-лительных молекул, в том числе TNFa. Напротив, в печени и жировой ткани IL-6 вызывает формирование ИР за счет нарушения инсулинового сигналинга.
В связи с вышесказанным целью нашего исследования явилось определение тканеспецифических особенностей синтеза IL-6 различными депо жировой ткани с оценкой взаимосвязей продукции IL-6 с показателями углеводного обмена (УО) у больных ожирением без и с СД 2 типа.
Материалы и методы. Материалом для исследования служили биоптаты ЖТ разной локализации (висцеральная — большой сальник [БС], брыжейка тонкой кишки [БР] и подкожная [ПЖТ]) от 155 пациентов больных абдоминальным ожирением (АО). Участники исследования были разделены на группы, в зависимости от степени (ст.) ожирения (по индексу массы тела, ИМТ) и состоянию УО (наличие/отсутствие СД 2 типа). Уровни экспрессии мРНК генов IL-6 определяли методом количественной полимеразной реакции в режиме реального времени (ПЦР), сывороточное содержание IL-6 — методом иммуноферментного анализа.
Результаты. У всех больных АО (независимо от состояния УО), уровень экспрессии мРНК гена IL-6 в биопта-тах ЖТ БР и БС превышал таковой в ПЖТ. Независимо от состояния УО у больных ожирением с ИМТ < 40 кг/м2 сывороточная концентрация IL-6 связана с его экспрессией в ЖТ БР, тогда как при морбидном ожирении (ИМТ > 40 кг/м2) вклад в сывороточный уровень исследуемого цито-кина вносят оба депо висцеральной жировой ткани: БР и БС. У всех пациентов с ИМТ > 35 кг/м2, независимо от состояния УО, регистрировалось достоверное повышение сывороточного содержания IL-6 относительно контроля.
Выявлено более высокое (в среднем, в 2 раза) плазменное содержание IL-6 у больных ожирением с СД 2 типа по сравнению с результатами, полученными у больных АО без СД 2 типа (р < 0,05). У больных ожирением (ИМТ > 35 кг/м2) без СД 2 типа обнаружены позитивные корреляции сывороточного уровня IL-6 с инсулином (r = 0,69) и отрицательная с глюкозой сыворотки (r = -0,38, r = -0,41 — II и III ст.), тогда так у больных СД 2 типа с аналогичным ИМТ содержание IL-6 в сыворотке крови имело корреляции с С-пептидом (r = 0,83), инсулином (r = 0,69) и гликированным гемоглобином (r = 0,91). Уровень экспрессии гена IL-6 у больных с СД 2 типа в ЖТБР положительно коррелировал с глюкозой (r = 0,90), а в ЖТБС с индексом HOMA-IR (r = 0,66) и гликированным гемоглобином (r = 0,43, р < 0,05 во всех случаях).
Заключение. В результате проведенного исследования показано, что независимо от состояния УО уровень экспрессии мРНК IL-6 в висцеральной ЖТ (БР и БС) превышал таковой в ПЖТ.
Установлено, что у всех больных ожирением независимо от состояния УО на выявлены положительные корреляционные взаимосвязи между сывороточным уровнем IL-6 и инсулином, что косвенно подтверждает влиянии
