CC BY
6
2-я научно-практическая
онлайн-конференция с международным участием «АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПАТОЛОГИИ ГЕМОСТАЗА»
нМ/л-мин, а максимальное значение доверительного интервала (0,95 ДИ) достигало 250,0 нМ/л-мин. Между содержанием тромбоцитов (Тр 109/л) периферической крови и ЭПТ тром-боцитарной плазмы выявлена зависимость, которую отражает уравнение регрессии: у = 19,4411 + (0,0447-х) + (2,9185-105)-х2 (1), где у — содержание тромбоцитов периферической крови (109/л), а х — ЭПТ нМ/л-мин. Зная минимальное пороговое значение ЭПТ, обеспечивающее гемостаз 250 нМ/л-мин можно рассчитать необходимое минимальное содер-
Санкт-Петербург 11 декабря 2020 г.
жание тромбоцитов в крови пациентов с ССВО. Например, минимальное содержание тромбоцитов в крови (у), обеспечивающее защиту от кровотечения составит: у= 19,4411 + (0,04472 5 0) +0,00 0 0 0 29 1 85- 2 5 02 = 32,44-109/л.
Выводы. В случае наличия признаков ССВО во время химиотерапии для защиты от кровотечения трансфузию тромбоцитов следует предусмотреть при снижении содержания тромбоцитов в крови менее 30-109/л, а в случае тромбоза отменить гепарин.
Дмитриев В. В.
Республиканский научно-практический центр детской онкологии, гематологии и иммунологии Министерства здравоохранения Республики Беларусь, Минск
ВЗАИМОСВЯЗЬ ЭНДОГЕННОГО ПОТЕНЦИАЛА ТРОМБИНА И СОДЕРЖАНИЯ ТРОМБОЦИТОВ В ТРОМБОЦИТАРНОЙ ПЛАЗМЕ
Введение. Нет единого мнения, регламентирующего величину терапевтической дозы низкомолекулярного гепарина (НМГ) у пациентов с тромбозом в случае тромбоцитопении.
Цель исследования. Изучить взаимосвязь между содержанием тромбоцитов и величиной эндогенного потенциала тромбина (ЭПТ) тромбоцитарной плазмы.
Материал и методы. После получения информированного согласия доноров на обследование перед предстоящей кровосдачей венозную кровь, полученную путем пункции периферической вены без наложения жгута, стабилизировали 3,8 %-ным раствором цитрата натрия в соотношении 9:1. Стабилизированную цитратную кровь при температуре 20-22оС центрифугировали 5 минут при 200g, после чего богатую тромбоцитами плазму переносили в пластиковую посуду. Оставшуюся часть крови центрифугировали при 2000g в течение 20 минут. Обедненную тромбоцитами плазму собирали в отдельную пластиковую посуду и использовали для приготовления серии разведений тромбоцитарной плазмы. Готовили разведения тромбоцитарной плазмы с содержанием тромбоцитов 5,0-109/л, 10,0-109/л, 20,0-109/л, 30,0-109/л, 40,0-109/л, 50,0-109/л, 60,0-109/л, 70,0-109/л, 100,0-109/л, 200,0-109/л. Подсчет тромбоцитов для каждого образца в серии осуществляли на гематологическом анализаторе XN-3000 (производства SysmexGmbH, Japan) им-
педансным методом, используя оригинальные реагенты (SysmexGmbH). Параллельно осуществляли контроль содержания тромбоцитов, используя микроскоп с фазовоконтрастной приставкой методом G. Brecheretal (1953). Эндогенный потенциал тромбина определяли методом Hemker на флюороскане Fluoroskanascent производства Thermo Electron ^rporation (Maastricht, Netherlands), с использованием наборов реагентов фирмы ThrombinoscopeBV. На 96 луночном планшете ThrombinoscopeBV (Maastricht, Netherlands) в каждые 4 лунки вносили по 80 мкл исследуемой, содержащей тромбоциты, плазмы. В первые 2 лунки добавляли 20 мкл реагента PRP (кат № TS42.00) содержащего смесь 0,5 рМ раствора тканевого фактора и фосфолипидов. Во вторые 2 лунки добавляли калибратор тромбина (кат № TS20.00). Реакцию инициировали после автоматического добавления на борту Fluoroskanascent 20 мкл смеси 2,5 мМ флуосубстрата в 0,1 М растворе кальция хлорида (Набор FluCa, кат № TS50.00). Для каждой серии разведений выполнено по 10 исследований. Результат представлен как медиана (25-й и 75-й процентили)
Результаты. Наименьшая способность к генерации тромбина 145,0 (130,0-178,0) нМ/ л-мин зарегистрирована в плазме, содержащей тромбоциты в концентрации 5,0-109/л. Наибольшая способность разведенной тромбоцитарной плазмы генерировать тромбин
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XVI, №4, 2020
в количестве 1357,0 (1054,0-1520,0) нМ/л-мин зарегистрирована при содержании тромбоцитов 200,0-109/л, что было меньше (р = 0,04; ТЧвБ!:), чем 1425(1080,0-1820,0) нМ/л-мин в обогащенной не разведенной тромбоци-тарной плазме с содержанием тромбоцитов 546,0(376,0-570,0)-109/л. Минимальная величина ЭПТ 289,0 (178,0-454,0) нМ/л-мин, превышающая пороговое значение 250 нМ/л-мин была зарегистрирована при числе тромбоцитов в пределах 20,0-109/л. В диапазоне от (20,0-100,0)-109/л между содержанием тромбоцитов и величиной эндогенного потенциала тромбина (ЭПТ) тромбоцитарной плазмы выявлена линейная зависимость. Наличие линейной зависимости подтверждал коэффициент отношения величины ЭПТ к содержанию тромбоцитов для каждой из серий разведения тромбоцитов в тромбоцитарной плазме. При содержании тромбоцитов более 100,0-109/л, генерируемый тромбоцитами, ЭПТ не прирастал параллельно увеличению содержания тромбоцитов в исследуемой плазме. Снижение величины ЭПТ
параллельно снижению содержания тромбоцитов в диапазоне (100,0-20,0)-109/л сопровождается торможением генерации тромбина в тромбоцитарной плазме пропорционально степени тромбоцитопении. Данное обстоятельство указывает на необходимость, в случае проведения противотромботического лечения, уменьшения терапевтической дозы низкомолекулярных гепаринов пропорционально степени тромбоцитопении при снижении содержания тромбоцитов в крови менее 100,0-109/л. Снижение содержания тромбоцитов в крови менее 20,0-109/л приводит к снижению ЭПТ менее 250 нМ/л-мин, что повышает риск кровотечения, связанного с тромбоцитопенией.
Выводы. Снижение величины ЭПТ параллельно снижению содержания тромбоцитов в диапазоне (20,0-100,0)-109/л сопровождается торможением генерации тромбина в тромбоцитарной плазме пропорционально степени тромбоцитопении, что определяет необходимость пропорционального снижения дозы антикоагулянта у пациентов с тромбозом.
Игнатьев С. В., Лянгузов А. В., Сергунина О. Ю., Калинина С. Л., Докшина И. А.
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», г. Киров
ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ЭПТАКОГА АЛЬФА В ТЕРАПИИ УРГЕНТНЫХ КРОВОТЕЧЕНИЙ У БОЛЬНЫХ ГЕМОБЛАСТОЗАМИ
Введение. Эптаког альфа — рекомбинантный фактор свертывания крови Vila (rFVIIa) разработан для лечения больных ингибиторной формой гемофилии. В настоящее время показания для его применения расширились: врожденный дефицит фактора свертывания крови VII, тромбастения Гланцмана. Разнонаправленные механизмы действия препарата позволяют усилить инициацию образования тромбина, распространение и стабилизацию фибринового сгустка. В последнее время rFVIIa все чаще применяется «off-label» для купирования жизнеугрожающих кровотечений при неэффективности стандартной гемостатиче-ской терапии, что является шансом для спасения жизни пациента.
Цель. Оценить эффективность применения эптакога альфа у онкогематологических больных при ургентных кровотечениях.
Материалы и методы. Проведен ретроспективный анализ применения rFVIIa у 17 онко-
гематологических больных с 2015 по 2018 гг, в возрасте от 7 до 62 лет (Ме - 42 г.), из них 13 женщин и 4 мужчины. Острый лимфобластный лейкоз диагностирован у 6 пациентов, острый миелобластный лейкоз — у 3, неходжкинские лимфомы — у 4, лимфома Ходжкина — у 2 и по 1 случаю множественной миеломы и хронического миелоидного лейкоза. Желудочно-кишечное кровотечение выявлено у 7 пациентов, легочное — у 6, профузное носовое — у 3. У 2 обследованных геморрагический синдром развился после инвазивных вмешательств: трахе-остомии и пункции подключичной вены (ге-маторакс). Все пациенты на момент введения гРУ11а находились в отделении интенсивной терапии и реанимации в крайне тяжелом состоянии, обусловленном тяжестью основного заболевания, цитопенией, коагулопатией, полиорганной недостаточностью. Применение гРУПа обосновано неэффективностью замести-
