Научная статья на тему 'Выявление аллотип-зависимых различий в продукции lgG2 с помощью моноклональных антител (mkat)'

Выявление аллотип-зависимых различий в продукции lgG2 с помощью моноклональных антител (mkat) Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
90
14
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Выявление аллотип-зависимых различий в продукции lgG2 с помощью моноклональных антител (mkat)»

"Дни иммунологии в СПб '99"

Медицинский иммунология

кне титры антител (1/160-1/2560) и не нуждались в повторном введении анатоксина, а частота низких и незащитных титров (<1/80) у них была существенно ниже, чем в популяции (17 и 53,7%). Даже через 6-12 лет после введения вакцины специфические антитела не определялись лишь у 26,7% детей с РЗ.

Несмотря на фоновые особенности показателей иммунного статуса у детей с РЗ (снижение числа С03',С08'-лимфоцитов, повышенное содержание С020* и С016’-лимфоцитов, низкая индуцированная продукция ФНО-а и ИЛ-2), в холе дифтерийного вакцинального процесса динамика изучаемых показателей у всех привитых была сходной. Под воздействием антигенной нагрузки у детей с РЗ отмечено восстановление исходно сниженной продукции ФНО-а и ИЛ-2 иммунокомпе-тентными клетками до нормальных значений, для обеспечения эффективного иммунного ответа на вакцинный антиген. Таким образом, представленные результаты исследования указывают на сохранность механизмов регуляции иммунного ответа на вакцинный антиген у детей с РЗ; выявленная высокая интенсивность антитело-образования, возможно, связана с особенностями формирования В-клеток памятиу данных больных, большим количеством долгоживущих В-лимфоцитов, их постоянной активацией с образованием специфических антител.

Выявление аллотип-зависимых различий в продукции 1дй2 с помощью моноклональных антител (МКАТ)

Крутецкая И.Ю., Климович В.Б.,СамоПловмч М.П.

Центральный научно-исследовательский рентгенорадиологический институт М3 РФ Санкт-Пет ербург

Недостаточность или отсутствие синтеза антител подкласса ^62 является одним из наиболее часто встречающихся иммунодефицитов. В то же время, установлено, что различия в уровне продукции 1^02 антител генетически детерминированы и зависят от аллотипа молекулы. Это определяет необходимость отграничения 1^02-дефицита от случаев низкой продукции \о02 у индивидов, гомозиготных по ^С2т(п-), но не имеющих клинических проявлений иммунной недостаточности.

Цель работы состояла в изучении эпитопной специфичности полученного в лаборатории МКАТ против ^2 (продукт клона ЗС7) и выяснении возможности применения его для определения концентрации 1йС2.

Материалом исследования служили образцы сывороток крови 32 штатных доноров. Референс-препарата-ми служили МКАТ против ^2 (6014,6200,00м 1,00М 2), рекомендованные ВОЗ в качестве стандартов специфичности. Связывание МКАТ с ДО2 оценивали с помощью прямого и конкурентного ИФА с адсорбированным на твердой фазе антигеном. Концентрацию lgG2 а сыворотках определяли методом двухдетерминантпого

ИФА с иммобилизованным МКАТ ЗС7 и конъюгатом пероксидазы с полученными и лаборатории МКАТ против IgG человека. Определение аллотигшн lgG2 выполнено методом торможения гемагглютинации в лаборатории Dr.G. de Lange (Амстердам).

Результаты. В конкурентном ИФА референс-препа-раты6200, GOM-1 hGOM-2 подавляли связывание МКАТ ЗС7 с IgG2 не более чем на 25%. Конкуренции МКАТ 6014 и ЗС7 не наблюдали.

В 30% исследуемых сывороток были выявлены значения концентраций IgG2, близкие к нулевым. Факторов, блокирующих связывание МКАТ с lgG2, в этих сыворотках обнаружено не было. Проверка доступности эпитопа, связывающего МКАТ ЗС7, показала, что прогревание при 63°С способствовало частичному раскрытию его. Эпитоп становился полностью доступным для распознавания при изменении конформации молекулы в результате адсорбции на твердой фазе или кратковременного подкнеления до рН~2. Значения концентраций lgG2, полученные с помощью МКАТ ЗС7 после обработки сывороток при рН=2, совпадали со значениями, полученными при замене МКАТ ЗС7 референс-препа-ратом МКАТ 6014.

Установлено, что сыворотки, в которых IgG2 выявляется только после дополнительной обработки, принадлежат индивидам, гомозиготным по аллотипу IgG2tn(n).

На молекулах аллогипа IgG2m(ir) эпитоп, связывающий МКАТ ЗС7, полностью доступен для распознавания. Адсорбция IgG2m(n') на твердой фазе, обработка при рН-2 или прогревание при 63’С экспрессию эпитопа не изменяли.

Выводы:

1. Полученное в лаборатории МКАТЗС7 распознает эпитоп IgG2, отличающийся от распознаваемых известными референс-прегтратами.

2. Эпитоп, связывающий МКАТ ЗС7, на молекулах аллотипа IgG2m(n-) находится в скрытом состоянии и становится доступным для распознавания после изменения конформации молекулы.

3. С помощью тест-системы твердофазного двухдетерминантпого ИФА, основанной на применении МКАТ ЗС7, можно определять концентрацию IgG2 в сыворотках крови человека и дифференцировать аллотип-зави-симый низкий уровень продукции IgG2.

Состояние иммунитета у женщин с синдромом задержки развития плода

Кудряшова А.В., Сотннкова НЛО., Филипова НЛО., Панова И.А., Филинов А.Г.

Научно-исследовательский институт материнства и детства им. В. И. Городкоаа М3 РФ РГваново, Россия

Физиологическое течение беременности и полноценное развитие плода определяется формированием адекватного ответа материнской иммунной систе-

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.