Научная статья на тему 'ВЫБОР ОПТИМАЛЬНЫХ БИОЛОГИЧЕСКИХ МОДЕЛЕЙ ДЛЯ ИЗОЛЯЦИИ И КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ШТАММОВ CANDIDATUS RICKETTSIA TARASEVICHIAE'

ВЫБОР ОПТИМАЛЬНЫХ БИОЛОГИЧЕСКИХ МОДЕЛЕЙ ДЛЯ ИЗОЛЯЦИИ И КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ШТАММОВ CANDIDATUS RICKETTSIA TARASEVICHIAE Текст научной статьи по специальности «Науки о здоровье»

CC BY
7
0
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
Candidatus Rickettsia tarasevichiae / культивирование риккетсий / биологическая модель / морская свинка / клещевая экспериментальная модель / Candidatus Rickettsia tarasevichiae / cultivation of rickettsia / a biological model / a guinea pig / a tickborne experimental model

Аннотация научной статьи по наукам о здоровье, автор научной работы — Самойленко Ирина Евгеньевна, Штрек Сергей Владимирович, Кумпан Людмила Валерьевна, Решетникова Татьяна Александровна, Боброва Оксана Алексеевна

Candidatus Rickettsia tarasevichiae — кандидат в новые виды риккетсий, который не культивируется на традиционных риккетсиологических моделях. Целью данного исследования являлось выбрать оптимальные биологические модели для изоляции и культивирования Candidatus R. tarasevichia. Штаммы риккетсий изолировали из клещей Ixodes persulcatus, собранных в лесостепной зоне Омской и Новосибирской областей. В качестве биологических моделей использовали клеточные культуры Vero, самцов морских свинок, сосунков беспородных белых мышей, клещевую экспериментальную модель (КЭМ) на основе лабораторной линии клещей I. persulcatus. С использованием культуры клеток Vero удалось изолировать штаммы Candidatus R. tarasevichiae и изучить особенности их культивирования. С помощью КЭМ установлен высокий уровень трансовариальной передачи Candidatus R. tarasevichiae в клещах I. persulcatus. Можно предположить, что эти клещи являются не только вектором, но и резервуаром для Candidatus R. tarasevichiae. У самцов морских свинок при заражении этой риккетсией, в отличие от риккетсий группы клещевой пятнистой лихорадки, практически не выявляется скротальный феномен (периорхит). Возможность использования куриных эмбрионов для культивирования этой риккетсии в настоящее время окончательно не изучена. Применение сосунков беспородных белых мышей для изоляции нецелесообразно. В данном исследовании установлено, что наиболее адекватными моделями для изоляции и культивирования Candidatus R. tarasevichiae являются клещевая экспериментальная модель и культура клеток.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по наукам о здоровье , автор научной работы — Самойленко Ирина Евгеньевна, Штрек Сергей Владимирович, Кумпан Людмила Валерьевна, Решетникова Татьяна Александровна, Боброва Оксана Алексеевна

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

SELECTION OF OPTIMAL BIOLOGICAL MODELS FOR ISOLATION AND CULTIVATION OF CANDIDATUS RICKETTSIA TARASEVICHIAE STRAINS

Candidatus Rickettsia tarasevichiae is a candidate for a new rickettsia species that is not cultivated in traditional rickettsiological models. The purpose of this study was to select optimal biological models for the isolation and cultivation of Candidatus R. tarasevichia. Rickettsia strains were isolated from Ixodes persulcatus ticks collected in the foreststeppe zone of the Omsk and Novosibirsk regions. Vero cell cultures, male guinea pigs, sucklings of outbred white mice, and an experimental tick model (ETM) of a laboratory line of ticks I. persulcatus were used as biological models. Using Vero cell culture, it was possible to isolate strains of Candidatus R. tarasevichiae and study the characteristics of their cultivation. Using a tick-borne experimental model, a high level of transovarial transmission of Candidatus R. tarasevichiae in I. persulcatus ticks was established. It can be assumed that these mites are not only a vector, but also a reservoir for Candidatus R. tarasevichiae. Male guinea pigs, when infected with this rickettsia, in contrast to rickettsia of the tick-borne spotted fever group, practically do not demonstrate the scrotal phenomenon (periorchitis). The possibility of using chicken embryos for cultivating this rickettsia has not been fully studied yet. We consider the use of sucklings from outbred white mice to isolate Candidatus R. tarasevichiae inappropriate. This study found that the most adequate models for the isolation and cultivation of Candidatus R. tarasevichiae are the tick experimental model and cell culture.

Текст научной работы на тему «ВЫБОР ОПТИМАЛЬНЫХ БИОЛОГИЧЕСКИХ МОДЕЛЕЙ ДЛЯ ИЗОЛЯЦИИ И КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ШТАММОВ CANDIDATUS RICKETTSIA TARASEVICHIAE»

УДК 616.98:579.881 ГРНТИ 34.27.59

ВЫБОР ОПТИМАЛЬНЫХ БИОЛОГИЧЕСКИХ МОДЕЛЕЙ ДЛЯ ИЗОЛЯЦИИ И КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ШТАММОВ CANDIDATUS RICKETTSIA TARASEVICHIAE

1 12 12 12 1 И.Е. Самойленко , С.В. Штрек ' , Л.В. Кумпан ' , Т.А. Решетникова ' , О.А. Боброва , 12 12 1 1 12 Н.В. Абрамова ' , С.Н. Шпынов ' , А.В. Санников , В.В. Якименко , Н.В. Рудаков '

1ФБУН «Омский НИИприродно-очаговых инфекций» Роспотребнадзора

Россия, 644080, г. Омск, проспект Мира, 7; mail@oniipi.org

2ФГБОУ ВО «Омский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 644099, г. Омск, ул. Ленина, 12

Candidatus Rickettsia tarasevichiae — кандидат в новые виды риккетсий, который не культивируется на традиционных риккетсиологических моделях. Целью данного исследования являлось выбрать оптимальные биологические модели для изоляции и культивирования Candidatus R. tarasevichia. Штаммы риккетсий изолировали из клещей Ixodes persulcatus, собранных в лесостепной зоне Омской и Новосибирской областей. В качестве биологических моделей использовали клеточные культуры Vero, самцов морских свинок, сосунков беспородных белых мышей, клещевую экспериментальную модель (КЭМ) на основе лабораторной линии клещей I. persulcatus. С использованием культуры клеток Vero удалось изолировать штаммы Candidatus R. tarasevichiae и изучить особенности их культивирования. С помощью КЭМ установлен высокий уровень трансовариальной передачи Candidatus R. tarasevichiae в клещах I. persulcatus. Можно предположить, что эти клещи являются не только вектором, но и резервуаром для Candidatus R. tarasevichiae. У самцов морских свинок при заражении этой риккетсией, в отличие от риккетсий группы клещевой пятнистой лихорадки, практически не выявляется скро-тальный феномен (периорхит). Возможность использования куриных эмбрионов для культивирования этой рик-кетсии в настоящее время окончательно не изучена. Применение сосунков беспородных белых мышей для изоляции нецелесообразно. В данном исследовании установлено, что наиболее адекватными моделями для изоляции и культивирования Candidatus R. tarasevichiae являются клещевая экспериментальная модель и культура клеток.

Ключевые слова: Candidatus Rickettsia tarasevichiae, культивирование риккетсий, биологическая модель, морская свинка, клещевая экспериментальная модель.

SELECTION OF OPTIMAL BIOLOGICAL MODELS FOR ISOLATION AND CULTIVATION OF CANDIDATUS RICKETTSIA TARASEVICHIAE STRAINS

1 12 12 12 1 I.E. Samoylenko , S.V. Shtrek' , L.V. Kumpan' , T.A. Reshetnikova, ' , O.A. Bobrova , 12 12 1 1 12 N. V. Abramova ' , S.N. Shpynov ' , A.V. Sannikov , V. V. Yakimenko , N.V. Rudakov '

1FBSI "Omsk Research Institute of Natural Focal Infections" Rospotrebnadzor Russia, 644080, Omsk, prospect Mira, 7, mail@oniipi.org

2FSBEI HE "Omsk State Medical University" of the Ministry of Health of Russia Russia, 644099, Omsk, ul. Lenina, 12

Candidatus Rickettsia tarasevichiae is a candidate for a new rickettsia species that is not cultivated in traditional rickettsiological models. The purpose of this study was to select optimal biological models for the isolation and cultivation of Candidatus R. tarasevichia. Rickettsia strains were isolated from Ixodes persulcatus ticks collected in the forest-steppe zone of the Omsk and Novosibirsk regions. Vero cell cultures, male guinea pigs, sucklings of outbred white mice, and an experimental tick model (ETM) of a laboratory line of ticks I. persulcatus were used as biological models. Using Vero cell culture, it was possible to isolate strains of Candidatus R. tarasevichiae and study the characteristics of their cultivation. Using a tick-borne experimental model, a high level of transovarial transmission of Candidatus R. tarase-vichiae in I. persulcatus ticks was established. It can be assumed that these mites are not only a vector, but also a reservoir for Candidatus R. tarasevichiae. Male guinea pigs, when infected with this rickettsia, in contrast to rickettsia of the tick-borne spotted fever group, practically do not demonstrate the scrotal phenomenon (periorchitis). The possibility of

© Самойленко И.Е., Штрек С.В., Кумпан Л.В., Решетникова Т.А., Боброва О.А., Абрамова Н.В., Шпынов С.Н., Санников А.В., Якименко В.В., Рудаков Н.В., 2024

using chicken embryos for cultivating this rickettsia has not been fully studied yet. We consider the use of sucklings from outbred white mice to isolate Candidatus R. tarasevichiae inappropriate. This study found that the most adequate models for the isolation and cultivation of Candidatus R. tarasevichiae are the tick experimental model and cell culture.

Keywords: Candidatus Rickettsia tarasevichiae, cultivation of rickettsia, a biological model, a guinea pig, a tickborne experimental model.

Введение

В последние годы в связи с широким внедрением молекулярно-биологических методов исследований выявлено значительное количество новых риккетсий, имеющих статус Candidatus, которые часто не культивируются на традиционных риккетсиологических моделях. Появление кандидатов в новые виды риккетсий приводит к необходимости проведения экспериментальных исследований по отбору оптимальных моделей для их изоляции и культивирования, отработке условий культивирования и накопления биомассы возбудителя, созданию препаратов для диагностики новых риккетсиозов. К этой категории относится и Candidatus Rickettsia tarasevichiae, описанный в 2003 г. с использованием методов моле-кулярно-биологического анализа в клещах Ixodes persulcatus, собранных в России [1]. Фенотипические свойства Candidatus R. tara-sevichiae в настоящее время окончательно не изучены.

Цель исследования — выбор оптимальных биологических моделей для изоляции и культивирования кандидата в новые виды Candidatus R. tarasevichiae.

Материалы и методы исследования. Для изоляции штаммов риккетсий использованы клещи I. persulcatus, собранные в лесостепной зоне Омской (Подгородка) и Новосибирской (Усть-Тарка) областей в 2003 г., и клещи I. persulcatus лабораторной линии ИШ-7/8-15 (Знаменское, 2015 г.), спонтанно инфицированной Candidatus R. tarasevichia, родительские особи которой собраны в таёжной зоне Омской области в 2015 г. В работе по воспроизведению экспериментальной инфекции на самцах морских свинок использованы штаммы Candidatus R. tarasevichiae из коллекции Омского НИИ природно-очаговых инфекций «Усть-Тарка-10/2003» (регион происхождения Новосибирская область) и «Подгородка-27/2003» (регион происхождения Омская область).

Изоляцию и дальнейшее культивирование риккетсий проводили с использованием клеточной культуры Vero по методике, описанной ранее [2]. Культуральные флаконы с инфицированными клетками инкубировали в углекислотном термостате при температуре 36 оС в течение 8-14 суток. После завершения инкубации флаконы подвергали заморажива-

нию при -20 оС и последующему оттаиванию для разрушения клеток и максимального выхода из них риккетсий. После оттаивания материал центрифугировали в течение 10 мин. при 3000-5000 об./мин. Супернатант в объёме

0.5 мл использовали для дальнейшего пассирования, из 0,2 мл готовили мазки; остатки супернатанта хранили в криопробирках в низкотемпературном холодильнике при -70 оС.

Для определения наличия и концентрации риккетсий полученные образцы исследовали методом флюоресцирующих антител по стандартной методике, используя иммуноглобулины диагностические для выявления рик-кетсий группы КПЛ, люминесцирующие сухие (НПО «Биомед», Россия). Морфологические и тинкториальные свойства риккетсий изучали в соответствии с рекомендациями П.Ф. Здро-довского и Е.М. Голиневич (1972). Выявление ДНК риккетсий проводили в однораундовой ПЦР с применением праймеров, амплифици-рующих фрагменты генов цитратсинтазы (gltA), 16S рибосомальной РНК и поверхностного мембранного белка 190 кДа (ompA) с последующим секвенированием положительных образцов [1]. Для выполнения ПЦР в реальном времени использовали тест-систему РеалБест ДНК Rickettsia species (Вектор-Бест, Кольцово).

Воспроизведение экспериментальной инфекции проводили путём внутрибрюшинно-го заражения самцов морских свинок весом 300-350 г. Животным вводили по 2,0 мл 1030 %-й суспензии лиофилизированных штаммов, изолированных в культуре клеток Vera.

Изучена также возможность использовать в качестве модели для изоляции Candidatus R. tarasevichiae сосунков беспородных белых мышей в возрасте 3-5 дней. В качестве заражающего материала была использована суспензия, приготовленная из 15 экземпляров клещей

1. persulcatus лабораторной линии ИШ-7/8-15 (11 напитавшихся самцов, 1 не питавшаяся самка и 3 частично напитавшиеся самки). Сосунков белых мышей заражали 20 %-й суспензией интрацеребрально (17 экземпляров) и подкожно (15 экземпляров) в объёме 0,01 мл.

Результаты

Культивирование риккетсий в культуре клеток проводили на протяжении не менее трёх пассажей. После каждого пассажа

материал исследовали в РНИФ на наличие риккетсий, а также проводили изучение морфологических и тинкториальных свойств по Здродовскому [3]. В культуре клеток Vera наблюдалось умеренное накопление риккетсий до 5-15 экземпляров в каждом поле зрения, преимущественно в цитоплазме клеток. Были оптимизированы условия культивирования риккетсий за счёт увеличения времени инкубации заражённых клеток с 7 до 14 суток [2]. При бактериоскопии мазков было выявлено, что количество риккетсиеподобных микроорганизмов при увеличении времени инкубации увеличилось до 25-30 экземпляров в каждом поле зрения с преимущественной локализацией микроорганизма в цитоплазме клеток.

Изучение возможности воспроизвести экспериментальную инфекцию Candidatus R. tarasevichiae на самцах морских свинок проводилось различными дозами заражающего материала, с гидрокортизоном и без него.

Для внутрибрюшинного заражения были использованы лиофильно высушенные штаммы «Усть-Тарка-10/2003» и «Подгород-ка-27/2003». Каждым штаммом были заражены по 2 морские свинки — по 2,0 мл растворённой лиофилизированной культурой. За день до заражения и на 5-й день после заражения свинкам было введено внутримышечно по 20 мг гидрокортизона с целью подавления иммунной системы животных. На следующий день после введения гидрокортизона у животных отмечалось снижение ректальной температуры на 1,9-2,8 °С. Затем температура возвращалась к исходному уровню и только у одной из свинок превысила его на 0,6 °С на 9-й день после заражения. Скротальный феномен (периорхит) был либо слабо выражен, либо не наблюдался вовсе.

При вскрытии у всех свинок, заражённых этими штаммами с использованием гидрокортизона, наблюдалась сходная патоло-гоанатомическая картина: незначительное увеличение и гиперемия паховых лимфатических узлов, увеличение печени разной степени выраженности, увеличение и грануляция селезёнки, незначительное увеличение размеров тестикул и их гиперемия, чаще умеренно выраженная. В то же время у всех животных отмечалась значительная гиперемия мозга и значительная инъекция сосудов мозга и твёрдых мозговых оболочек. При микроскопии мазков-отпечатков, окрашенных по Здродовскому, во всех органах выявлены единичные риккетсии в большинстве полей зрения, за исключением

мозга, в мазках из мозга наблюдалось 10-15 микробных тел в поле зрения и отдельные скопления риккетсий.

При заражении свинок штаммом «Усть-Тарка-10/2003» в такой же дозировке, но без гидрокортизона, не наблюдалось ни подъёма температуры, ни скротального феномена. При вскрытии отмечались умеренная гиперемия и инъекция сосудов брюшины и влагалищных оболочек яичек, умеренная инъекция паховых лимфоузлов, а также грануляция селезёнки. Как и в предыдущем опыте, отмечалась значительная гиперемия и инъекция сосудов мозга и мозговых оболочек. При микроскопии мазков-отпечатков из лимфатического узла, тести-кул и селезёнки, окрашенных по Здродовскому, наблюдалось от 10 до 25 риккетсий в поле зрения, в мазке из мозга — до 75 и более микробных тел в поле зрения.

При увеличении дозы заражающего материала в два и три раза, без применения гидрокортизона, к описанным ранее патолого-анатомическим изменениям добавились гиперемия и очаговые изменения в лёгких. При микроскопии выявлялись от единичных до 15 риккетсий в поле зрения, в мозге — до 75 микробных тел в поле зрения.

Нами также изучена возможность использования для изоляции Candidatus R. tarasevichiae сосунков беспородных белых мышей, которых с этой целью заражали суспензией из клещей лабораторной линии I. persulcatus ИШ 7/8-15. Интрацеребрально было заражено 17 сосунков, подкожно — 15 сосунков белых мышей весом 3-4 грамма. Вскрытие животных проводили на 3-й, 4-й, 7-й и 10-й день после заражения. На 3-й день после заражения патологоанатомические изменения не наблюдались, ДНК риккетсий в исследованных органах (селезёнка, мозг) не обнаружена. На 4-й день после заражения у вскрытых животных наблюдалось усиление сосудистого рисунка мозга и незначительное увеличение селезёнок. ДНК риккетсий в ПЦР-РВ в мозге и селезёнке у сосунков, заражённых интрацеребрально, выявлена на 30-м цикле детекции, что соответствует концентрации риккетсий 5 х 108 м.т./мл, и на 32-34-м циклах — при подкожном заражении. На 7-й день наблюдалось усиление инъекции сосудов головного мозга и значительное увеличение размеров селезёнок (в 2-3 раза в сравнении с предыдущим вскрытием). ДНК риккетсий в ПЦР-РВ выявлено на 32-м цикле (36 х 107 м.т./мл) в мозге у сосунков, заражённых как интрацеребрально, так и подкожно,

в селезёнке — на 35-м цикле (15 х 10 м.т./мл) только у одного животного, заражённого подкожно. На 10-й день наблюдалось уменьшение инъекции сосудов головного мозга, значительное увеличение размеров селезёнок сохранялось. ДНК риккетсий в ПЦР-РВ при этом не выявлено.

Из изъятых у животных органов были сформированы три пробы 10 %-ных суспензий для заражения развивающихся куриных эмбрионов (РКЭ): 1 — из образцов селезёнок на 4-й день после заражения, 2 — из образцов мозга на 4-й день после заражения и 3 — из образцов мозга на 3-й день после заражения. К сожалению, все пробы оказались контами-нированы посторонней микрофлорой. Учитывая низкую концентрацию риккетсий в органах заражённых сосунков белых мышей, данная модель не является оптимальной для изоляции Candidatus R. tarasevichiae.

Изучение трансовариальной передачи Candidatus R. tarasevichiae с использованием клещевой экспериментальной модели (КЭМ) [3].

В наше распоряжение В.В. Якименко были предоставлены имаго первого поколения лабораторной линии клещей I. persulcatus, естественно инфицированных в природе. При индивидуальном исследовании 20 личинок первого поколения в двухраундовой ПЦР во всех образцах была выявлена ДНК Candidatus R. tarasevichiae.

После кормления клещей на взрослых белых мышах были получены личинки второго поколения от двух самок (№ 1 и № 2). Наличие риккетсий в голодных личинках выявляли в реакции непрямой иммунофлуорес-ценции (РНИФ) и методом «гнездовой» ПЦР. Исследовано по 50 пулов (по 20 личинок) из потомства каждой самки. Известно, что R. bellii, также относящаяся к предковой группе риккетсий, перекрёстно реагирует с антителами как к риккетсиям группы клещевой пятнистой лихорадки (КПЛ), так и к риккетсиям группы сыпного тифа (СТ) [4]. Исходя из этого, нами было проведено параллельное исследование индивидуальных экземпляров личинок (по 50 из каждой линии) с иммунными сыворотками к R. sibirica (группа КПЛ) и к R. prowazekii (группа СТ).

В результате проведённых исследований по изучению вертикальной передачи установлено: ДНК риккетсий выявлена во всех 50 пробах голодных личинок, полученных от самки № 1 (100 %), из 50 проб личинок, полу-

ченных от самки № 2, положительными в ПЦР оказались 33 пробы (66 %). При секвенирова-нии положительных в ПЦР проб подтверждено наличие ДНК Candidatus R. tarasevichiae.

Риккетсии, содержащиеся в личинках, полученных от самки № 1, положительно реагировали с антителами к R. sibirica (группа КПЛ) в 42 пробах из 50 исследованных (84 %±5,24) и с антителами к R. prowazekii (группа СТ) в 32 пробах из 50 (64 %±6,86). Риккетсии, содержащиеся в личинках, полученных от самки № 2, положительно реагировали в 42 из 50 проб (84 %±5,24) с антителами к R. sibirica и в 30 пробах из 50 с антителами к R. prowazekii (60 %±7,00).

Установлено, что Candidatus R. tarasevichiae, так же как и R. bellii [5], реагирует с антителами как к риккетсиям группы КПЛ, так и к риккетсиям группы СТ. Возможно, это свойство является общим для всех риккетсий предковой группы. Перекрёстное реагирование с антителами к риккетсиям групп КПЛ и СТ наблюдалось у риккетсий, содержащихся в личинках, полученных от самки № 1, в 30 исследованных пробах (60,0±7,0 %), у рик-кетсий, содержащихся в личинках, полученных от самки № 2, — в 26 пробах (52,0±7,1 %) [6]. Перекрёстное реагирование Candidatus R. tarasevichiae с антителами к риккетсиям групп КПЛ и СТ в аналогичном процентном соотношении наблюдалось нами ранее.

Обсуждение

Выбор биологических моделей для изоляции и культивирования Candidatus R. tarasevichiae обретает особую актуальность на фоне появившихся данных о роли этой риккетсии в инфекционной патологии. Нами был впервые описан случай смешанной инфекции R. sibirica и Candidatus R. tarasevichiae с ме-нингиальными проявлениями, который привёл к летальному исходу Мы не выявили в образцах пациентки другие передаваемые клещами патогены или кишечные вирусы, которые также могут приводить к менингиальному синдрому [7, 8].

Ранее в Китае также были описаны ме-нингитоподобные проявления в летальном случае риккетсиоза, вызванного Candidatus R. tarasevichiae [9]. Всего описан 61 случай этой инфекции, из них у 34 пациентов была коинфекция буньявирусом рода Phlebovirus, который вызывает сильную лихорадку с синдромом тромбоцитопении. Смертельный исход был зафиксирован в девяти случаях; восемь из

них были вызваны смешанной инфекцией с буньявирусом [9, 10].

По результатам проведённых нами ранее исследований был сделан вывод, что на территории России значительная часть неверифици-руемых острых лихорадочных заболеваний людей, контактировавших с иксодовыми клещами, обусловлена патогенами рода Rickettsia. По данным ИФА, среди больных с клиникой клещевого риккетсиоза из эндемичных территорий по сибирскому клещевому тифу (СКТ) Алтайского края IgM-антитела к Candidatus R. tarasevichia выявлены в 10,8 % случаев, IgG-антитела — в 4,6 %. IgM-антитела к Candidatus R. tarasevichia выявлены у лихорадящих больных после присасывания иксодовых клещей и на севере Омской области, не эндемичном по клещевым риккетсиозам, но на территориях которого доказана инфицированность таёжных клещей этой риккетсией [11].

Высокий уровень трансовариальной передачи Candidatus R. tarasevichiae в клещах I. persulcatus свидетельствует об их тесной экологической связи. Вероятно, клещи I. persulcatus являются не только вектором, но и резервуаром для Candidatus R. tarasevichiae. В нашем исследовании кормление инфицированных клещей на всех стадиях метаморфоза проводили на беспородных белых мышах. Мы считаем целесообразным продолжить эту работу с использованием в качестве прокормите-лей морских свинок и кроликов.

С использованием культуры клеток Vero впервые изолированы штаммы Candidatus

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Candidatus Rickettsia tarasevichiae in Ixodes persulcatus ticks collected in Russia / S. Shpynov [et al.]. Annals of the New York Academy of Sciences. 2003; 990: 162-72. DOI: 10.1111/j.1749-6632.2003.tb07358.x.

2. Особенности культивирования нового генотипа Candidatus Rickettsia tarasevichiae на биологических моделях (культуры клеток, морские свинки) / Л.В. Кумпан [и др.]. Уральский медицинский журнал. 2011; 13: 67-69.

3. Оптимизация метода экспериментального моделирования естественного цикла метаморфоза переносчиков для изоляции, культивирования и изучения риккетсий новых генотипов / И.Е. Самойленко, С.Н. Шпынов, Н.В. Рудаков. Омский научный вестник. 2006; S1: 93-95.

4. Rickettsia bellii sp. nov.: a tick-borne rickettsia, widely distributed in the United States, that is distinct from the spotted fever and typhus biogroups / R.N. Philip [et al.]. International Journal of Systematic

R. tarasevichiae и изучены особенности их культивирования. В опытах на самцах морских свинок показано, что лиофилизированные культуры Candidatus R. tarasevichiae вызывают нелетальную экспериментальную инфекцию с преимущественным поражением сосудов головного мозга.

Выводы

Таким образом, можно утверждать, что наиболее адекватными моделями для изоляции и культивирования Candidatus R. tarasevichiae являются КЭМ и культура клеток, учитывая опыт успешного применения КЭМ при изучении фенотипических признаков R. raoultii. Самцы морских свинок при заражении этой риккетсией, в отличие от риккетсий группы КПЛ, практически не демонстрируют скро-тальный феномен. Тем не менее мы считаем, что полностью отказываться от этой модели нецелесообразно. Необходимо экспериментально подбирать подходящие условия, в том числе использование препаратов, подавляющих работу иммунной системы животных, например, кортикостероидов, для использования морских свинок в работе с Candidatus R. tarasevichiae. Возможность использования куриных эмбрионов для культивирования этой риккетсии в настоящее время окончательно не изучена. Применение сосунков беспородных белых мышей для изоляции Candidatus R. tarasevichiae мы считаем нецелесообразным.

REFERENCES

1. Candidatus Rickettsia tarasevichiae in Ixodes persulcatus ticks collected in Russia / S. Shpynov [et al.]. Annals of the New York Academy of Sciences. 2003; 990: 162-72. DOI: 10.1111/j.1749-6632.2003.tb07358.x.

2. Features of the cultivation of a new genotype of Candidatus Rickettsia tarasevichiae in biological models (cell culture, guinea pigs) / L.V. Kumpan [et al.]. Uralskij medicinskij zhurnal. 2011; 13: 67-69.

3. Optimization of a method for experimental modeling of the natural cycle of vector metamorphosis for the isolation, cultivation and study of rickettsia of new genotypes / I.E. Samojlenko, S.N. Shpynov, N.V. Rudakov. Omskij nauchnyj vestnik. 2006; S1: 93-95.

4. Rickettsia bellii sp. nov.: a tick-borne rickett-sia, widely distributed in the United States, that is distinct from the spotted fever and typhus biogroups / R.N. Philip [et al.]. International Journal of Systematic

Bacteriology. 1983; 33. 94-106. DOI: 10.1099/00207713-33-1-94.

5. Актуальные аспекты изучения Candidatus Rickettsia tarasevichiae / Н.В. Рудаков [и др.]. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2015; 6: 14-9.

6. Изучение уровня трансовариальной передачи Candidatus Rickettsia tarasevichiae в лабораторных линиях Ixodes persulcatus / О.А. Боброва [и др.] // Микроорганизмы и биосфера «Microbios - 2018»: материалы IV Национального конгресса бактериологов и Международного симпозиума. 12-13 сентября 2018 г. Омск, 2018. С. 14-15.

7. Клинико-лабораторная характеристика клещевого риккетсиоза, связанного с микст-инфицированием Rickettsia sibirica и Candidatus Rickettsia tarasevichiae / Н.В. Рудаков [и др.] // Инфекция и иммунитет. 2021. Т. 11. № 6. С. 1173-78.

8. A fatal case of tick-borne rickettsiosis caused by mixed Rickettsia sibirica subsp. sibirica and «Candidatus Rickettsia tarasevichiae» infection in Russia / N.V. Rudakov [et al.] // Ticks and Tick-borne Diseases. 2019. Vol. 10. № 6: 101278. DOI: 10.1016/j.ttbdis.2019.101278.

9. Human infection with Candidatus Rickettsia tarasevichiae / N. Jia [et al.] // New England journal of medicine. 2013. Vol. 369, № 12. P. 1178-80. DOI: 10.1056/NEJMc1303004.

10. Candidatus Rickettsia tarasevichiae Infection in Eastern Central China: A Case Series / W. Liu [et al.] // Annals of Internal Medicine. 2016. Vol. 164. № 10. P. 641-8. DOI: 10.7326/M15-2572.

11. Апробация иммуноферментного анализа для серологической диагностики инфекций, вызываемых риккетсиями группы клещевой пятнистой лихорадки / Н.В. Абрамова [и др.] // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2010. № 1. С. 17-21.

Ирина Евгеньевна Самойленко — кандидат медицинских наук, ведущий научный сотрудник лаборатории зоонозных инфекций;

samoilenko.irinasamoylenko@yandex.ru; Сергей Владимирович Штрек — кандидат медицинских наук, доцент, заведующий лабораторией, ведущий научный сотрудник; Омский НИИ природно-очаговых инфекций.

Людмила Валерьевна Кумпан — кандидат медицинских наук, доцент кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии Омского государственного медицинского университета.

Оксана Алексеевна Боброва — младший научный сотрудник лаборатории зоонозных инфекций Омского НИИ природно-очаговых инфекций.

Наталия Валерьевна Абрамова — кандидат медицинских наук, доцент кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии Омского государственного медицинского университета;

Станислав Николаевич Шпынов — доктор медицинских наук, главный научный сотрудник; Алексей Владимирович Санников — младший научный сотрудник; лаборатория зоонозных инфекций отдела ПОБЗ; Валерий Викторович Якименко — доктор биологических наук, начальник отдела ПОВИ; Омский НИИ природно-очаговых инфекций.

Bacteriology. 1983; 33. 94-106. DOI: 10.1099/00207713-33-1-94.

5. Actual aspects of studying Candidatus Rickettsia tarasevichiae / N.V. Rudakov [et al.] // Epidemiologiya i vakcinoprofilaktika. 2015; № 6: 14-9.

6. Study of the level of transovarial transmission of Candidatus Rickettsia tarasevichiae in laboratory lines of Ixodes persulcatus / O.A. Bobrova [et al.] // Mikroorganizmy i biosfera «Microbios - 2018»: Materi-aly IV Nacionalnogo kongressa bakteriologov i Mezhdunarodnogo simpoziuma. 12-13 Sep. 2018. Omsk, 2018. P. 14-15.

7. Clinical and laboratory characteristics of tickborne rickettsiosis related to Rickettsia sibirica and Can-didatus Rickettsia tarasevichiae / N.V. Rudakov [et al.] // Infection and Immunity. 2021. Vol. 11, №. 6. P. 117378. DOI: 10.15789/2220-7619-CAL-1597.

8. A fatal case of tick-borne rickettsiosis caused by mixed Rickettsia sibirica subsp. sibirica and «Candidatus Rickettsia tarasevichiae» infection in Russia / N.V. Rudakov [et al.] // Ticks and Tick-borne Diseases. 2019. Vol. 10. № 6: 101278. DOI: 10.1016/j.ttbdis.2019.101278.

9. Human infection with Candidatus Rickettsia tarasevichiae / N. Jia [et al.] // New England journal of medicine. 2013. Vol. 369, № 12. P. 1178-80. DOI: 10.1056/NEJMc1303004.

10. Candidatus Rickettsia tarasevichiae Infection in Eastern Central China: A Case Series / W. Liu [et al.] // Annals of Internal Medicine. 2016. Vol. 164. № 10. P. 641-8. DOI: 10.7326/M15-2572.

11. Approbation of Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Serologic Diagnostics of the Infections Caused Spotted Fever Group Rickettsiae / N.V. Abramova [et al.] // Epidemiologiya i vakcinoprofilaktika. 2010. № 1. P. 17-21.

Irina Evgenievna Samoylenko — Cand. Sc. {Medicine}, Leading Researcher at Zoonotic Infections Laboratory; samoilenko. irinasamoy lenko @y andex.ru; Sergey Vladimirovich Shtrek — Cand. Sc. {Medicine}, Associate Professor, Head of Laboratory, Leading Researcher; Omsk Research Institute of Natural Focal Infections.

Lyudmila Valerievna Kumpan — Candidate of Medical Sciences, Associate Professor of the Department of Microbiology, Virology and Immunology, Omsk State Medical University.

Oksana Alekseevna Bobrova — Junior Researcher at Zoonotic Infections Laboratory, Omsk Research Institute of Natural Focal Infections.

Natalia Valerievna Abramova — Candidate of Medical Sciences, Associate Professor of the Department of Microbiology, Virology and Immunology, Omsk State Medical University;

Stanislav Nikolaevich Shpynov — Doctor habil. of Medicine, Chief Researcher; Aleksey Vladimirovich Sannikov — Junior Researcher at Laboratory of Zoonotic Infections of the Department of POBZ; Valery Viktorovich Yakimenko — Doctor habil. of Biological Sciences, Head of the Department of POVID; Omsk Research Institute of Natural Focal Infections.

Николай Викторович Рудаков — доктор медицинских наук, профессор, директор ФБУН «Омский НИИ природно-очаговых инфекций» Роспот-ребнадзора.

Nikolay Viktorovich Rudakov — Doctor habil. of Medicine, Professor, Director of the Federal Budgetary Institution of Science "Omsk Research Institute of Natural Focal Infections" of Rospotrebnadzor.

Статья поступила в редакцию 15.07.2024 г.

Информация

II Международная выставка-форум «Здравоохранение Сибири»

Россия, Новосибирск, 15-18 октября 2024 года

Место проведения: МВК «Новосибирск Экспоцентр», г. Новосибирск, Станционная, 104.

Организаторы: Министерство здравоохранения Новосибирской области, выставочная компания Pro Expo при участии Министерства экономического развития Новосибирской области; Новосибирской областной ассоциации врачей (НОАВ); Ассоциации «Сибирское соглашение»; Новосибирской областной организации специалистов сестринского дела; Новосибирского государственного медицинского университета.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

В программе выставки запланированы мероприятия:

- симпозиум «Трудовое долголетие — инновации и перспективы»;

- V Всероссийская научно-практическая конференция «Роль первичной медицинской профилактики в укреплении общественного здоровья»;

- конференция РОО «Новосибирская профессиональная ассоциация специалистов сестринского дела»;

- конференция «Аллергология-иммунология в повседневной клинической практике»;

- конференция по кардиологии «Диагностика и лечение сердечно-сосудистых заболеваний в свете современных клинических рекомендаций»;

- Межрегиональная научно-практическая конференция «Региональные особенности организации вакцинопрофилактики инфекционных болезней в Сибирском федеральном округе»;

- мастер-класс «Современная поликлиника, организационно-планировочные решения, нормативно-правовое регулирование и функциональные принципы»;

- круглый стол «Дорожная карта диспансеризации — в какой точке мы сейчас находимся?»;

- круглый стол «Рассеянный склероз: междисциплинарный подход и современные подходы к реабилитации»;

- круглый стол «Кадровое обеспечение медицинской и научной деятельности в Сибири: проблемы и пути решения»;

- круглый стол «Ревматология — территория научно-технического лидерства»;

- семинар-практикум «Медицинский маркетинг — эффективные технологии в сфере платных медицинских услуг»;

- круглый стол «Инновационные технологии в основе обучения и длительного наблюдения пациентов с сахарным диабетом»;

- конференция «Стратегические вызовы современной реабилитации: инновационные технологии, новые требования и практические решения в клинической практике».

Участников ждут мастер-классы и другие интересные события.

Регистрация участия и уточнение времени проведения мероприятий — на сайте https://med-sib.proexpo.ru/posetitelyam Координатор деловой программы: Мукина Жанна Эдуардовна.

Тел. +7-996-323-57-93, mukina@proexpo.ru

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.