CC BY
13
УДК: 619:615:577.1:616-003.269:636
Дунаев Ю.К., науковий сшвроб^ник © Нацюнальний науковий центр «1нститут експериментальног I клШчног ветеринарног медицини», м. Хартв
ВПЛИВ ДОШКУБАЦШНО1 ОБРОБКИ ЯСЦЬ ДЕЗ1НФ1КУЮЧИМИ ЗАСОБАМИ НА БЮХ1М1ЧШ ПОКАЗНИКИ
КРОВ1 ТА 1МУННУ РЕЗИСТЕНТН1СТЬ ОРГАН1ЗМУ КАЧОК В
ОНТОГЕНЕЗ1
У статт1 представленI результати бюхгмгчних та гематолог1чних дослгджень кровг качок в онтогенезI в процес ¡нкубацп на шкаралупу качиних яець за умов впливу дезтфектант1в «Полгдезу» та формалту. Анал1з проведених дослгджень свгдчить про вгроггдну ембрютксичтсть та зниження ¡мунног резистентност1 качок, ят були оброблеш формалтом, у пор1внянш з птицею, яку обробляли «Полгдезом». Значних вгдхилень бюхгмгчних показнитв в1д гх фгзюлоггчних значень внаслгдок дИ дезтфгкуючих препарат1в у кровг качок не встановлено.
Ключовi слова: Дезтф1куюч1 препарати, ткубацтне качине яйце, качит ембрюни, кров I сироватка кровг каченят, «Полгдез», формалт.
Вступ. 1нтенсивне промислове виробництво м'яса водоплавно1 птищ вимагае тдвищення обсягу шкубаци яець i збшьшення показниюв !х якост1 Одним з кнуючих i ще недостатньо вивчених питань, що знижують ефектившсть качювництва, е значний вщсоток до шкубацшного бракування яець. Забруднення на поверхш шкарлупи яець мктять велику кiлькiсть мiкроорганiзмiв. Iнкубацiя таких яець призводить до тдвищеного !хнього вiдходу у зв'язку з ранньою ембрiональною смертнiстю та появою "тумаюв" [2]. У цей час в Укрш'ш й у рядi шших кра!н технологiя шкубаци качиних яець передбачае !хню дезiнфекцiю формальдегiдом. Однак, не дивлячись на висою бактерицидш властивостi, за даними агентства IАRС, у постановi Свропарламенту (СС) 648/2004 вщ 31.03.2004 [3], вiн офщшно визнаний канцерогеном для людини. Сучасш, менш токсичнi, але не менш ефективнi дезiнфектанти для обробки качиних яець практично не використовуються, немае порiвняльних даних 1хнього впливу на патогенну мiкрофлору качиних яець, достатньо не вивчений !хнш вплив на ембрюгенез, показники кровi й рiвень iмунноl резистентностi органiзму птицi [1, 4, 6]. Тому метою нашо! роботи було порiвняльне вивчення ди дезiнфектантiв «Полщезу» та формалiну на бiохiмiчнi показники природно! резистентностi кровi качок в онтогенезi.
Матер1али та методи. Дослiдження проводили у дослщному господарствi "Борки" 1нституту птахiвництва УААН, а також у лаборатори вивчення хвороб птахiв i лаборатори бiохiмil ННЦ «1ЕКВМ». На iнкубацiю було закладено 2000 шт. яець. Вони були роздшеш на двi групи. Дослыдну групу (п = 1000 шт.)
© Дунаев Ю.К., 2009
91
перед закладкою на шкубацш за допомогою розпилювача типу «Росинка» обробляли дезшфжуючою речовиною «Полщез», контрольну групу (1000 шт.) методом газаци - 40% розчином формалшу. Для оцшки впливу випробуваних дезшфжуючих засобiв на бiохiмiчнi показники кровi через 1, 14 i 60 дiб методом випадково! вибiрки у каченят контрольно! й дослщно! груп вщбирали кров. Одержання плазми кровi здiйснювали шляхом стабшзаци кровi сумшшю фiзiологiчного розчину й гепарину у сшввщношенш 1:24 з наступним центрифугуванням протягом 15 хв. при 3000 об./хв,. Проводили дослщження наступних показниюв: ШОЕ, гемоглобiну, вмiст загального бшка, альбумiну, глобулiну, рiвень амiнотрансфераз (АлАТ, АсАТ) i сечово! кислоти; тдраховували лейкоформулу. Визначення загального бiлка сироватки кровi проводили за методом Лоурi зi спiв. у модифжаци Мшлера [5, 7]. Визначення в кровi загального гемоглобiну, вмiсту альбумiнiв, сечовини i активностi гепатоспецифiчних ферментiв: аланшамшотрансферази (АлАТ) i аспартатамiнотрансферази (АсАТ) проводили з використанням стандартних наборiв реактивiв виробництва фiрми Реагент (Укра!на) i набору реактивiв для визначення концентраци гемоглобiну в кровi, лейкоформулу розраховували методом пiдрахунку 100 клiтин у пофарбованому мазку кровi за Романовським-Гiмза [5, 6, 7]. Отримаш данi оцiнювали за нормативними показниками, використовуючи довiдковi данi. Математичну обробку одержаних результат проводили за методами варiацiйноl статистики [7].
Результати дослщжень. Результати одержанi при вивченнi проте!нограми в органiзмi качок в онтогенезi (табл. 1), вказують на змши бiлкових фракцiй, що може свщчити про гальмування бiосинтезу бiлка, утворення фшальних бiлкових метаболiтiв i активност маркерних трансамiназ у групi, яку обробляли формалшом.
У добових каченят ще! групи рiвень загального бшка був вiрогiдно (р<0,05) нижче на 8,4 %, у порiвняннi iз групою, яку обробляли полiдезом. Вмкт бiлкових фракцiй також був нижче на 10 -11 %, хоча !х значення у каченят обох груп перебували на рiвнi нормальних. При цьому спостерiгалося пiдвищення утворення сечово! кислоти на 47 % (р<0,05) i активностi гепатоспецифiчних трансамшаз у контрольнiй групi, яку обробляли формалшом. Рiвень активностi трансамiназ у контролi був на 23 -36 % вище (р<0,05), нiж у дослщнш групi качок, шкаралупу яець яких обробляли «Полiдезом». Посилення активност цих ферментiв мае досить важливе значення, оскiльки вони беруть участь у взаемоперетвореннях амшокислот та у збереженш органiчного нiтрогену у виглядi амiногруп.
Слiд зазначити, що до 60-о! доби значення активностi ферменив АлАТ i АсАТ практично вирiвнюються й залишаються в межах норми. Виходячи з одержаних результат, можна припустити, що формалiн, як досить сильний токсикант, пригшчуе процеси бюсинтезу бiлка й активiзуе мембранопатi! гепатоциив, що може привести до розвитку гепатодистрофiчних процесiв у печiнцi.
92
Таблиця 1.
Показники бшкового обмшу в сироватщ кров1 каченят, шсля обробки «Полвдезом» i формалшом перед закладкою на шкубащю (М±т; ___ п=6)____
В1к качок (доба) Дезшфект анти Загальни й бшок, г/л Альбум ши, г/л Глобулши, г/л Сечова кислота, мкМ/л АлАТ, мМ/л/г од. АсАТ, мМ/л/г од.
1 Полдез 45,2± 15,4± 29,8± 226,0± 0,65± 1,41±
0,35а 0,20 а 0,50 а 14,0 а 0,05а 0,1
Формалш 41,4± 13,7± 26,7± 330,0± 0,80± 1,92±
0,55ь 0,70 ь 0,40 ь 13,3 ь 0,09 <1 0,2а
14 Полдез 43,2± 16,1± 27,1± 220,0± 0,54± 1,48±
0,65а 0,60 0,70 а 13,3 0,05ь 0,11
Формалш 39,9± 15,7± 24,2± 226,0± 0,68± 1,81±
0,45ь 0,40 0,50 ь 10,0 0,05d 0,25ь
60 Полвдез 50,2± 17,1± 33,1± 217,0± 0,41± 1,60±
0,40а 0,50 0,30 а 16,6 0,06 0,10
Формалш 46,7± 16,5± 30,2± 243,0± 0,46± 1,90±
0,35ь 0,30 0,40 ь 13,3 0,03d 0,01е
Примтка: а:Ь, а:с; c:d, при р < 0,05,a:d - р<0,01
Клмчний аналiз кровi каченят (табл. 2) показав, що рiвень гемоглобiну був вiрогiдно нижче на 13 % тшьки у добових каченят контрольно! групи. Така ж закономiрнiсть була виявлена i за вмiстом еритроциив, рiвень яких був також на 8,3 % нижче (р<0,05). На 14 i 60-ту добу експерименту достовiрних змiн вмiсту, як еритроциив, так i гемоглобiну, в кровi птицi обох груп не виявлено. Показники кшькосп загального гемоглобiну й еритроциив у кровi обох груп свщчать про те, що даш дезiнфiкуючi препарати iстотно не впливають на еритропоез в органiзмi качок.
Таблиця 2
Кшшчний аналп кров1 каченят, ембрiони яких були оброблеш _полiдезом i формалшом (М±т; п=6)__
В1к качок Дезшфектанти Гемоглобш Еритроцити Лейкоцити ШОЕ
(доба) (г/л) (млн/мкл) (тис/мкл) (мм/год.)
1 Полщез 105,7±3,4а 4,19±0,2 36,7±1,1а 2,3±0,33
Формалш 91,25±6,2ь 3,84±0,1 37,8±0,9 1,8±0,33d
14 Полщез 114,16±5,1е 4,66±0,3 29,1±1,2ь 3,0±0,11а
Формалш 113,78±3,2 4,40±0,1 32,4±0,8 4,7±0,30ь
60 Полщез 116,35±2,1 4,56±0,2 21,3±1,1е 2,8±0,33а
Формалш 114,31±2,4 4,46±0,1 28^1^ 4,1±0,30ь
Примтка: а:Ь, а:с; c:d, при р < 0,05,a:d - р<0,01
93
Вмкт лейкоципв на 1-шу добу дослщу перебував на рiвнi референтних значень. У наступи дослщжуваш перiоди, рiвень лейкоцитiв зростав на 13 -14 % (р<0,05) на тлi пiдвищення значення ШОЕ в кровi каченят контрольно! групи. Таю коливання ШОЕ можуть свщчити про наявнiсть патологiчного процесу в органiзмi та збiльшення вмiсту великодисперсних бшюв, що за спрямованiстю змш корелюе з результатами дослiджень бшкового профiлю сироватки кровi. Неоднорiднiсть популяци клiтин кровi, як червоного, так i бiлого паростка кровотворення, свщчить про порушення регуляторних механiзмiв в органiзмi птицi контрольно! групи, шкаралупу яець яких обробляли формалiном.
За отриманими результатами лейкоформули кровi (табл. 3) встановлено, що вмкт юних i паличкоядерних нейтрофiлiв був на рiвнi референтних значень i не мав вiрогiдних вiдхилень. Кiлькiсть сегментоядерних нейтрофшв була на 10 -12 % нижче у груш качок, яку обробляли формалшом. Такий тип лейко грами вказуе на незначну iмуносупресивну дш формалшу на формування повноцiнних нейтрофiльних гранулоцитiв. Кiлькiсть еозинофшв протягом експерименту була вiрогiдно вище у кровi контрольно! групи качок на 23, 15 i 4,5 % вщповщно. Максимальна рiзниця була виявлена на першу добу й поступово швелювалася до 60-! доби. Однак навт на 60 -ту добу вщзначаються достовiрнi розходження в юлькост еозинофiлiв мiж дослiдними групами. Збшьшення кiлькостi даних клiтин вказуе на тдвищення фагоцитарно! активностi внаслщок активацi! процесiв декарбоксилування гiстидину з наступним утворенням пстамшу, як основного алергенного фактора. Розходження в рiвнi лiмфоцитiв свiдчать про те, що на першу добу в грут, яку обробляли формалшом, вщзначаеться незначний лiмфоцитоз, що практично нiвелюеться до 60 -! доби. Лiмфоцитоз, тобто тдвищена кiлькiсть лiмфоцитiв, також може свщчити про накопичення будь-яких токсишв в оргашзм^
Таблиця 3
Лейкоформула кров1 каченят_
BiR качок (доба) Дезшфек-танти Псевдоеозинофiли Е М Б Л
юнi паличко -ядерш сегменто-ядернi
1 Полщез 1,2±0,12a 7,5±0,15 35,5±2,00a 4,6±0,09a 5,0±1,60 1,2±0,14 45,0±1,60a
Формалiн 1,5±0,14c 7,7±0,17 24,2±3,60b 6,0±0,12b 4,3±0,60 1,3±0,12a 55,0±1,60b
14 Полiдез 1,0±0,08 7,5±0,08 39,4±1,60a 4,6±0,17a 3,6±1,60 1,3±0,11 42,6±2,00a
Формалiн 1,1±0,06 7,6±0,12 29,4±4,60b 5,3±0,14b 3,0±0,60 1,6±0,13 52,0±5,60b
60 Полiдез 0,3±0,09 2,5±0,11 42,2±2,20d 4,2±0,11c 2,5±0,80 1,3±0,14 47,0±3,20
Формалш 0,3±0,06 2,7±0,10 37,2±1,50c 4,4±0,15a 3,1±0,60 2,3±0,16d 50,0±2,00
Примтка: a:b, а:с; c:d, при p < 0,05,a:d - p<0,01
Таким чином, можна припустити, що формалiн, хоча й не проявляв виражено! токсично! ди на органiзм каченят, однак, може бути стимулятором прояву алергшних реакцш i зниження загально! резистентност органiзму в порiвняннi з полщезом.
94
Пщсумовуючи отримаш результати бiохiмiчних дослщжень, можна сказати, що у контрольнш rpyni качок, яку обробляли формалшом, незважаючи на вщповщшсть або незначне перевищення нормативних референтних значень дослщжуваних показникiв, вiдзначенi порушення регуляторних фiзiологiчних механiзмiв як на вивод^ так i протягом усього онтогенезу. У каченят групи, яких обробляли «Полщезом», рiвень гематологiчних i бiохiмiчних показникiв i загально! природничо! резистентностi знаходився на межi нормальних референтних значень для даного виду, не викликаючи ембрютоксично! ди або порушень бiохiмiчних процесiв.
Висновки.
Таким чином, незважаючи на те, що результати проведених дослщжень у грут, яку обробляли формалшом, вiрогiдно не перевищували нормативш референтнi значення, формалш е бiльш ембрiотоксичним у порiвняннi з полiдезом, що впливае на iмунний статус органiзму качок протягом онтогенезу.
Л1тература
1. Байдевлятов А. Дезинфектанты инкубационных яиц [Текст] / А. Байдевлятов, Б. Бессарабов, В. Бородай // Птицеводство. - 2002. - № 2. -С. 34-36.
2. Бессарабов Б.Ф. Инкубация яиц с основами эмбриологии сельскохозяйственной птицы [Текст] / Б.Ф. Бессарабов. - М.: Колос, 2006. -240 с.
3. ДСТУ 4655:2006 Яйця шкубацшш. Технолопя передшкубацшно! обробки. Основш параметри. К.- 12 с.
4. Иммунологические методы исследований [Текст]: пер. с англ. / под ред. А.И. Свеженцева. - Д.: АРТ-ПРЕСС, 2002. - 160 с.
5. Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике. В2т. - Минск: Беларусь, 2000. - Т.1. - 495с.
6. Левченко В.1., Влiзло В.В., Кондрахш 1.П. та ш. Ветеринарна клЫчна бiохiмiя. - Бша Церква, 2002. - 400с.
7. Теца Н.У. Энциклопедия клинических лабораторных тестов [Текст]: пер. с англ. / Н.У. Теца; под ред. Меншикова. - М., 1997. - С. 128.
Summary
Results of biochemical and haematological investigation of duck blood in ontogenesis after influence of «Polydez» and formalin disinfectants on duck eggshell during incubation process, are presented in the paper. Analysis of conducted investigations testifies to probable embryotoxicity and reduce of immune resistance in the group of ducks, which were treated by formalin, in comparison with the group, treated by «Polydez». But, significant derivation of biochemical characteristics from normal indices were not revealed in both groups.
Стаття надшшла до редакцИ 28.04.2009
95
