CC BY
31
®
ребёнка
КлУчна пед1атр1я / Clinical Pediatrics
УДК 613.95-053.5/.67:612.017:373.22 ВИСОЧИНА 1.Л.
Державний заклад «Днпропетровська державна медична академ'ю» МОЗ Укра!ни
BiKOBi OCOBAMBOCTi iMYHHOi СИСТЕМИ У ДПЕЙ ¡3 ДИТЯЧИХ БYДИHKiB У CTAHi KAiHi4HOrO 3ÄOPOB'ß
Резюме. У cmammi наведет результати iмунологiчного до^дження, проведеного в динамщ спостере-ження у 196 Kniшчно здоровых дтей з дитячих будиншв вком вгд 6 до 18 ротв. Показано наявтсть вгд-мшностей iмунологiчних показнишв залежно вiд вку обстежених дтей. Ключовi слова: дти шкльного вку, дитячi будинки, iмунiтет.
Вступ
Формування та становления iмунноi системи людини е довготривалим процесом, ^ подiбно ш-шим системам, оргашзацш iмунологiчного захис-ту зазнае вш^ змiни, повнiстю розвиваючись до 15—16 рокiв життя [4—6]. Дгги характеризуються особливим станом iмунних структур i механiзмiв, що адекватш вiдповiдному вiковому перiоду, е не-обх1дними саме в цей перюд життя, i тому найкра-щим чином вiдповiдають та забезпечують бюлопчш запити i функцп у рiзнi вiковi перiоди 1х розвитку. 1муштет — важливий елемент збереження iмуноло-пчно! iндивiдуальностi та в загальнобюлопчному планi — це механiзм тдтримання iмунологiчного гомеостазу органiзму людини, який забезпечуеться неспецифiчними та специфiчними клггинними та гуморальними факторами [4].
Ре^зац1я та перебiг iнфекцiйних захворювань у дггей багато в чому визначаеться станом iмуно-лопчно! реактивностi i як вщповщдю на це — пев-ним iмунним захистом оргашзму. За даними рiзних авторiв, схильнють дiтей до гострих респiраторних захворювань значною мiрою обумовлена незавер-шешстю розвитку iмунноi системи, у тому чи^ не-достатнiстю мiсцевого iмунiтету [4—6].
У структурi шфекцШно! захворюваносп домшу-ють ГРВ1, питома вага яких залишаеться високою впродовж багатьох десятилиъ i становить до 80 % у дитячш популяци [1, 9]. За результатами популя-цшного монiторингу у дiтей, якi спочатку вихову-ються в соцiально неблагополучних сiм'ях, а потiм формують групу дiтей-сирiт та дiтей, позбавлених батьювського пiклувания (незалежно вiд вiку та ста-тi), рiвень загально! захворюваносп в середньому в 1,6—1,8 раза перевищуе аналогiчнi середньостатис-тичнi державш показники [3, 8].
Тому метою даного дослщження було вивчення особливостей Гмунно1 вiдповiдi у дiтей з дитячих бу-динкiв залежно вщ вiку (вщ 6 до 18 роив) у перiодi клiнiчного благополуччя.
Матер1али та методи
Дане iмунологiчне дослiдження проводилось вiдповiдно до основних положень GCP ICH i Гель-сшсько'1 декларацп з бiоетики, було добровГльним та узгоджувалося з офщшними опiкунами дiтей, медичними працiвниками та вихователями дитячих будинкiв.
Згiдно з дизайном роботи, умовами включения дитини до цього дослщження були вщповщшсть да-них об'екгивного обстеження з констатащею стану соматичного здоров'я та вщсутшсть проявiв заго-стрень хрошчних вогнищ iнфекцГl.
Iмунологiчне обстеження проводилось у пе-рГодГ клГнГчного благополуччя та включало в себе визначення в сироватщ кровГ вмГсту лейкоципв, лГмФоцитГв, CD25+-клiтин, сироваткових Гмуно-глобулшГв класiв A, M, G. Дослщження вмГсту ци-токГНГВ IL-2, IL-4, IL-10, IL-12р70; IL-12р40+p70; TGF-ß1 (трансформуючого фактора росту ßt) проводилось за допомогою твердофазного Гму-носорбентного ензимозв'язаного методу (ELISA) Гз застосуванням тест-систем рГзних виробни-кГв (ELISA, Diaclone, France; ELISA Kit, Finland; DRG ELISA, Germany). Для ощнки рГвня проективного ГмунГтету слизових вивчали вмют SIgA («Вектор-БЕСТ», РосГя) та протимжробних бГлкГв а-дефензинГв 1—3 i лактоферину (Human HNP 1—3
© Височина 1.Л., 2013 © «Здоров'я дитини», 2013 © Заславський О.Ю., 2013
KëiHi4Ha neAiorpifl / Clinical Pediatrics
та Human Lactoferrin; Hycult® biotech) у ротоглот-ковому ceKpeTi.
Математична обробка результапв iмунолоriчно-го дослiдження у 196 клтчно здорових дiтей i3 ди-тячих будинкiв вiком вщ 6 до 18 рокiв проводилась з використанням статистичних програм Statgraf, Matstat, Microsoft Excel для Windows, а при вивченш значущостi розб1жностей статистичних вiдбiрок ви-користовувались пара- та непараметричш критерИ [2, 7].
Обговорення отриманих резуёьталв
За результатами даного iмунологiчного досль дження, проведеного у 196 клтчно здорових дггей i3 дитячих будинкiв, показано, що незалежно вiд вiку переважна бшьшють середнк показникiв (серед-ньоарифметичний результат ± стандартна помилка; M ± m) знаходились у межах дiапазону визначення тест-систем, або в межах юнуючого нормативу в ди-тячш популящ!, за винятком вiрогiдно вищо! за нор-мативнi значення концентраций CD25+-клiтин та де-кiлька нижчого за середнiй норматив тест-системи вмюту TGF-ßj у сироватцi кровi, що поеднувалось зi зниженням SIgA у ротоглотковому секрет у всiх об-стежених дiтей незалежно вiд вшу (р < 0,05).
Аналiз результата iмунологiчного обстеження в рiзних вжових групах (1-ша група — дати до 9 рокiв; 2-га — дгги вщ 10 до 14 роюв та 3-тя група — дгги, дорослiшi за 14 роюв) показав, що залежно вiд вшу iснують вiрогiднi вiдмiнностi або статистичш тенденций змiн переважно! кшькосп iмунологiчних показникiв, якi вивчались, що наочно наведеш на рис. 1. За показниками, що не наведеш на рис. 1, не було зареестровано вiрогiдних розб1жностей.
Порiвняння результапв iмунологiчного обстеження у дггей першо! та друго! дослiджуваних груп дозволило констатувати вiрогiднi вiдмiнностi у кон-центрацiях лiмфоцитiв (p = 0,032), сироваткового IgA (p = 0,013), IL-4 (p = 0,02), яю з вiком збгльшу-ються, та TGF-ßj, концентрац1я якого, навпаки, вь рогiдно зменшуеться (p = 0,009) (рис. 1).
З дорослшанням у дггей вжом понад 14 роюв (3-тя група) порiвняно з групою дiгей вiком вiд 10 до 14 роюв (2-га група) рееструеться (рис. 1) подальше зростання вщносно! концентрацп лiмфоцитiв (р = 0,05), вмiсту CD25+ (р = 0,011), що поеднуеться зi зниженням абсолютно! концентраций лейкоцитiв (р = 0,041) та зменшенням умюту цитокiнiв — IL-2 (р = 0,027), Ъ-4 (р = 0,04), ^-12р70 (р = 0,006), ^-12р40+р70 (р = 0,006) та TGF-P1 (р = 0,00002) у периферичнш кровi. Також у дiтей 3-1 групи у пе-риферичнiй кровi рееструеться вiрогiдно низький умiст лейкоципв (р = 0,024) та TGF-P1 (р = 0,002), що поеднуеться з вiрогiдно високими концентращ-ями CD25+ (р = 0,052) та вщносною кiлькiстю лiм-фоцитiв (р = 0,024) порiвняно з результатами у дггей першо! групи спостереження (рис. 1).
Для виявлення характеру розподшення та струк-тури результата iмунологiчного обстеження у дiтей рiзного вiку з дитячих будинкiв в перiодi клшчно-го благополуччя залежно вщ вiдповiдностi до юну-ючих стандартiв або дiапазону тест-системи проведено шдивщуальне порiвняння всiх отриманих у даному дослщженш результатiв у межах середшх значень, вищих за середш та нижчих за середш (табл. 1), що дозволило видглити дiтей рiзного вiку, данi iмунологiчного обстеження яких вiдрiзнялись вiд середнього рiвня концентраций (норма показни-ка за вжом).
Згiдно з даними табл. 1, умют лейкоцитiв у 98,1 % вах спостережень зареестровано в межах норми, а концентрацiя лiмфоцитiв у 80,8 % за вщносним вмiстом та в 13,5 % вах спостережень за абсолютною кгльюстю була вищою за нормальну, при цьому бгльшють високих результатiв була зареестрована у дггей, дорослших за 10 рокiв (2-га та 3-тя група спостереження).
Концентрацiя сироваткових ^М та IgG залежно вщ фактичного результату мала рiзний характер — нижчу за вiковий умют було зареестровано у 25,9; 9,3 та 1,9 % вщповщно, для вах спостережень. Максимально часто змши щодо вмiсту сироваткових iмуноглобулiнiв були зареестрованi в другiй груш спостереження. Вищий за вiковий рiвень було зафiксовано тiльки для сироваткових iмуноглобу-лiнiв IgM та IgG (42,6 та 51,9 % вах спостережень вiдповiдно), питома вага яких превалювала серед дiтей 1-1 та 2-1 груп спостереження порiвняно з пелитами.
У групах обстежених дiтей iз дитячих будинкiв у перiодi клiнiчного благополуччя вмiст CD25+-клiтин у периферичнiй кровi як за показником абсолютно! кшькосп (51,9 % даних спостережень), так i за показником оптично! щшьносп (48,1 %) був вищим за представлений лабораторiею норматив, i серед цих дней переважну бiльшiсть становили дати, старшi за 14 роюв (75 %).
Вмiст цитокiнiв (^-2; 4; 10; 12р70; 12р40+р70) у сироватщ кровi обстежених дiтей у переважнш бiльшостi випадкiв не вiдрiзнявся вщ нормативу показникiв тест-системи виробника, за винятком
160 140 120 100 80 60 40 20 0
ÎfciE
а
п1-ша група «2-га група □ 3-тя група
Рисунок 1. Bîkobî вщм1нност1 ¡мунолог1чних показниюв у дтей з дитячих будинюв у пер1од1 кл¡н1чного благополуччя
KëiHi4Ha пeдiaтpiя / Clinical Pediatrics
вiрогiдно не значущих вiдмiнностей розподшення фактичного результату вмюту IL-10, IL-12р70 та IL-4 залежно вщ одиниць вимiрювання (оптична щiльнiсть).
У 84,9 % усiх результатiв було зафiксовано ниж-чий за середнiй рiвень TGF-ßp представлений ви-робником тест-системи (57,75—152,25 AU/мл), але який повнiстю вiдповiдав дiапазону визначення даного цитокiну в сироватщ кровi (норматив тест-системи виробника DRG ELISA, Germany, щодо вмюту TGF-ßj становить 3—600 AU/мл).
Ощнка результатiв дослщження мукозально! iмунноï системи показала, що концентрацiя проти-мiкробних бiлкiв лактоферину та а-дефензишв 1—3 у ротоглотковому секретi у вск обстежених дiтей вiдповiдaлa нормативу тест-систем виробника, що в 79,7 % випадюв поеднувалось зi зниженням умюту SIgA серед уск обстежених дней. Максимально часто дефщит секреторного iмуноглобулiну А було зареестровано в дггей раннього шильного в^ (1-ша група, 90 %), з дорослшанням питома вага дaноï склaдовоï зменшувалась у три рази (до 30 %) у дней
другоï групи спостереження та у 4,5 раза (до 20 %) — у пщлитав.
За результатами проведеного кореляцшного ана-лiзу описаних вище iмунологiчних покaзникiв, вiк обстежених дней мав вiрогiднi зв'язки з концентра-цiею лейкоцитiв (р = 0,001; r = —0,4387), лiмфоцитiв (р = 0,009; r = 0,3599) та вмютом цитокiнiв: IL-10 (р = 0,03; r = -0,258); IL-4 (р = 0,042; r = -0,2923); TGF-ßj (р = 0,003; r = -0,3999). Стать обстежених дней мала вiрогiднi кореляцИ з умютом лейкоципв (р = 0,05; r = 0,2776), лiмфоцитiв (р = 0,042; r = -0,2923); рiвнем ОТ25+-клиин (р = 0,042; r = -0,2923); сироватковим IgM (р = 0,021; r = 0,3135) та TGF-ßj (р = 0,018; r = -0,3243).
Показники вмюту лейкоципв у обстежених дней корелювали з умютом IL-10 (р = 0,027; r = 0,3589) та лiмфоцитiв периферичноï кровi (р = 0,001; r = - 0,4611), яю, у свою чергу, мали прямий зв'язок з умютом IL-10 (р = 0,067; r = 0,3004) та концентра-щею ОТ25+-клиин (р = 0,014; r = 0,3398).
Серед цитоюнш рiвень IL-12p70 (пг/мл) мав прямий кореляцшний зв'язок iз IL-4 (р = 0,036; r=0,3009)
Таблиця 1. Bîkobî особливост iмунiтету в дтей шкльного вку з дитячих будинкв у перюд1 кл¡н1чного
благополуччя, %
Показник Межi оцiнки 1-ша група 2-га група 3-тя група Bei дгги
Лейкоцити, г/л Нижче норми 0 3,4 0 1,9
Норма 100 96,6 100 98,1
Лiмфоцити, % Норма 71,4 13,8 6,3 19,2
Вище норми 28,6 86,2 93,8 80,8
Лiмфоцити, г/л Норма 100 100 56,3 86,5
Вище норми 0 0 43,8 13,5
IgA, г/л Нижче норми 22,2 32,1 17,6 25,9
Норма 77,8 67,9 82,4 74,1
IgM, г/л Нижче норми 0 17,9 0 9,3
Норма 77,8 21,4 76,5 48,1
Вище норми 22,2 60,7 23,5 42,6
IgG, г/л Нижче норми 0 3,6 0 1,9
Норма 33,3 25 88,2 46,3
Вище норми 66,7 71,4 11,8 51,9
CD25+, % Нижче норми 0 3,4 0 1,9
Норма 71,4 58,6 25 50
Вище норми 28,6 37,9 75 48,1
CD25+, г/л Норма 51,7 58,6 25 48,1
Вище норми 42,9 41,4 75 51,9
IL-12p70, пг/мл Нижче норми 0 16 5,9 10
Норма 100 84 94,1 90
TGF-ß1, AU/мл Нижче норми 62,5 83,3 100 84,9
Норма 37,5 16,7 0 15,1
SIgA Нижче норми 90 78,9 76,9 79,7
Норма 10 21,1 23,1 20,3
Кл1н1чна пед1атр1я / Clinical Pediatrics
та зворотнш з TGF-P1 (р = 0,05; г = —0,4662). У свою чергу, вмют TGF-P1 мав вiрогiднi кореляцГ! з IL-4 (р = 0,027; г = -0,5206); ^-2 (р = 0,05; г = 0,5604) та сироватковим IgG (р = 0,021; г = 0,3298). Цитокши амейства ^-12р40+р70 були пов'язаш тiльки з рГв-нем IgG (р = 0,06; г = 0,3814), а ^-2 корелював iз концентрацiею IgМ (р = 0,039; г = 0,5776).
У структурi показниюв мукозально! ланки Гму-нiтету концентрацГя SIgA в ротоглотковому секрет мала зворотнiй кореляцiйний зв'язок зi статтю об-стежених дггей (р = 0,006; г = -0,3173) та з такими iмунологiчними показниками, як кГльюсть лейко-цитш (р = 0,018; г = -0,3520), лiмфоцитiв (р = 0,081; г = 0,2629) та цитокГнш: ^-10 (р = 0,068; г = 0,2996) та ^-4 (р = 0,003; г = -0,8320).
Вмют протимжробних бiлкiв лактоферину (р = 0,029; г = 0,2732) та а-дефензишв 1-3 (р = 0,032; г = -0,2686) у ротоглотковому секрет мав зворот-ш кореляцшш зв'язки зi станом бактерюносшства умовно-патогенно! флори на слизових верхнГх ди-хальних шляхiв; при цьому рiвень лактоферину був обернено пов'язаний з умютом сироваткового IgМ (р = 0,05; г = -0,9461).
Таким чином, отримаш результати оцшки Гмуно-логiчних показникГв у сироватщ кровi та вмiсту про-тимжробних бГлкГв i секреторного iмуиоглобулiиу А у ротоглотковому секрет дiтей шкГльного вiку з дитячих будинк1в в перюдГ клiнiчного благополуччя свщчать про дисбаланс рiзних ланок Гмунно! вщповщ, зни-ження мукозального iмуиiтету слизових та напружен-ня механiзмiв мюцевого захисту, що пщтверджувалось результатами проведеного кореляцшного аналiзу.
Висновки
1. З вжом у дiтей шкгльного вку з дитячих будин-кiв вщбуваеться збiльшения представництва CD25+-клiтин на тлГ поступового зниження концентраций ^-10 г TGF-P1 в периферичнiй кровь
2. Серед дГтей шкГльного вжу з дитячих будин-кГв в перюдГ клГнГчного благополуччя незалежно
вГд вГку у 50 % даних спостережень концентрацГя CD25+-клiтин у середньому була вГропдно ви-щою за межу нормальних показникГв, що поед-нувалося зГ зниженням у 84,9 % випадюв вмГсту TGF-ßj (порГвняно з середнГми показниками тест-системи), та рееструвалось зниження SIgA в ротоглотковому секретГ у 79,7 % усГх обстежених дГтей (р < 0,05).
3. Проведений кореляцшний аналГз показав на-явнГсть переважно зворотних кореляцш вГку обстежених дГтей з Гмунолопчними показниками, якГ м1ж собою мають численнГ зв'язки, що характеризуе структурш перебудови Гмуштету в групах обстежених дГтей.
Список л1тератури
1. Аналгз та тенденцгг захворюваност1 дитячого населения Украгни / Р.О. Могсеенко, Я.1. Соколовська, Т.К. Кульчиць-ка, Т.М. Бухановська // Современная педиатрия. — 2010. — № 3(31). — С. 13-17.
2. Герасимов А.Н. Медицинская статистика. — М.: МИА, 2007. — 475 с.
3. Державний комтет статистики Украгни. Захист дтей, якг потребують особливог уваги сустльства. Статистичний збгрник. — Кигв, 2011. — 13 с.
4. Дитяча гмунологгя: Шдручник / За ред. Л.1. Чернишовог, А.П. Волохи. — К. : ВСВ «Медицина», 2013. — 720 с.
5. Дранник Г.Н., Курченко А.И., Дранник А.Г. Иммунная система слизистых, физиологическая микрофлора и пробиоти-ки. — Киев, Полиграф плюс: — 2009. — 143 с.
6. Казмгрчук В. 6, Ковальчук Л.В. КлМчна гмунологгя i алергологы. — Вгнниця: Нова книга, 2006 — 504 с.
7. Лапач С.Н., Чубенко А.В., Бабич П.Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Excel. — К. : Морион, 2000. — 320 с.
8. Состояние здоровья и принципы реабилитации детей-сирот и детей, лишенных родительской опеки / Н.Н. Коренев, И.С. Лебец, Р.А. Моисеенко, О.М. Носова// Современная педиатрия. — 2004. — № 2. — С. 24-29.
9. Характеристика здоров 'я дитячого населення Украгни / Г. О. Слабкий, Т.К. Кульчицька, В.В. Лазоришинець, Н.С. Бедш // Современная педиатрия. — 2009. — № 6(28). — С. 35-40.
Отримано 01.06.13 □
Высочина И.А.
Государственное учреждение «Днепропетровская государственная медицинская академия» МЗ Украины
ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ У ДЕТЕЙ ИЗ ДЕТСКИХ ДОМОВ В СОСТОЯНИИ КЛИНИЧЕСКОГО ЗДОРОВЬЯ
Резюме. В статье представлены результаты иммунологического исследования, проведенного в динамике наблюдения у 196 клинически здоровых детей из детских домов в возрасте от 6 до 18 лет. Показано наличие различий иммунологических показателей в зависимости от возраста обследованных детей.
Ключевые слова: дети школьного возраста, детские дома, иммунитет.
Vysochyna I.L.
State Institution «Dnipropetrovsk State Medical Academy> of Ministry of Public Health of Ukraine, Dnipropetrovsk, Ukraine
AGE FEATURES OF THE IMMUNE SYSTEM IN CLINICALLY HEALTHY CHILDREN FROM ORPHANAGES
Summary. The article presents the results of an immunological study, carried out in the dynamics of observation in 196 clinically healthy children from orphanages aged from 7 to 18 years. The presence of differences in immunological parameters is shown depending on the age of examined children. Key words: school-age children, orphanages, immunity.
