CC BY
15
УДК 636. 599.053.087
Лесик Я. В., к. вет. н., с.н.с. © Федорук Р. С., д.вет.н., професор, член-кореспондент НААН, Долайчук О.П., к. б. н., м.н.с.
E-mail: inenbiol@mail.lviv.ua Incmumym бюлогптваринНААН, м. Лъвгв, Украгна
BIKOBA ДИНАМ1КА ВМ1СТУ ГЛ1КОПРОТЕШ1В У KPOBI КРОЛ1В ЗА ЗГОДОВУВАННЯ PI3HOIК1ЛЬКОСТ1 ХЛОРИДУ ХРОМУ
У cmammi наведено результаты доелгдженъ згодовування кролям з 90 до 174-добового вгку хлориду хрому, в кшъкостг 50, 100 i 150 мкг Cr/кг маси комбжорму, у вигляд1 CrCl3 х 6 Н20. 3 'ясовано його вплив на eMicm глтопротегтв та окремих моноцукргв ixnix вуглеводних компонент1в у Kpoei крол1в на 118, 139 i 174 добиросту тарозвитку.
Згодовування кролям хлориду хрому в найменшт досл\джуван1й кшъкост\ - 50 мкг ~/кг комбгкорму з 90- до 174-добового вгку позначилося у кровг вгроггдним тдвищенням концентрацИ доелгджуваних глтопротешв за винятком фукози, що була вищою на другому (139 di6) i третьему (174 di6) вжових nepiodax пор1вняно з контрольною групою.
У кровi тварин II доелгдно! групи вгдзначено активацт системи глтопротетового захисту на 139 i 174 доби життя, про що евгдчитъ eipozidne зростання eMicmy глшопротешву ixniu Kpoei пор1вняно з контролем.
Уведення Хрому (III) до рацюну крол1в у ктъкостг 150 мкг Cr/кг комбторму, позначилося меншим впливом на оргатзм крол\в на 118 i 139 доби росту и розвитку, modi як лише у в1щ 174 di6 вгдзначено вгроггдно вищии eMicm глтопротешву ixniu Kpoei.
Ключов{ слова: кpoлi, Хром, глтопротети, кров, eiKoei nepiodu, моноцукри.
УДК 636. 599.053.087
Лесик Я. В., к. вет. н., с.н.с. Федорук Р. С., д.вет.н., профессор , член- корреспондент НААН ,
Долайчук А.П., к. б. н., м.н.с.
Институт биологииживотныхНААН, г. Львов
ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА СОДЕРЖАНИЯ ГЛИКОПРОТЕИНОВ В КРОВИ КРОЛИКОВ ПРИ СКАРМЛИВАНИЕ РАЗЛИЧНОГО КОЛИЧЕСТВА ХЛОРИДА ХРОМА
В статье приведены результаты исследований скармливания кроликам с 90 до 174- суточного возраста хлорида хрома, в количестве 50 , 100 и 150 мкг Cr / кг комбикорма, в виде CrCl3 х 6 Н20. Выяснено его влияние на содержание гликопротеинов и отдельных моносахаров их углеводных компонентов в крови кроликов на 118, 139 и 174 суток роста иразвития.
Скармливание кроликам хлорида хрома в наименьшей исследуемой количестве - 50 мкг
~/кг комбикорма с 90 - до 174 - суточного возраста
© Лесик Я. В., Федорук Р. С., Долайчук О.П., 2014
196
сказалось в крови вероятным повышением концентрации исследуемых гликопротеинов за исключением фукозы, которая была выше на втором (139 суток) и третьем (174 суток) возрастных периодах по сравнению с контрольной группой.
В крови животных II исследовательской группы отмечено активацию системы гликопротеиновой защиты на 139 и 174 суток жизни, о чем свидетельствует достоверное возрастание содержания гликопротеинов в их крови по сравнению с контролем.
Введение хрома (III) в рацион кроликов в количестве 150 мкг Cr / кг комбикорма, сказалось меньшим влиянием на организм кроликов на 118 и 139 суток роста и развития, тогда как только в возрасте 174 суток отмечено достоверно более высокое содержание гликопротеинов в их крови.
Ключевые слова: кролики, Хром, гликопротеины, кровь, возрастные периоды, моносахара.
Summary
Ya. V. Lesyk, Fedoryk R.S., Dolaychuk O.P. DYNAMICS OF GLYCOPROTEINS IN RABBIT BLOOD FOR FEEDING VARYING AMOUNTS OF CHROMIUM CHLORIDE
The results of studies of feeding rabbits with 90 to 174-day old chromium chloride in an amount of 50, 100 and 150 mg Cr/kg of feed, in the form of CrCl3 x 6 H2O. It was shown his influence on the content of specific glycoproteins and their carbohydrate component monosaccharides in the blood of rabbits at 118, 139 and 174 days of growth and development.
Feeding rabbits chromium chloride are the least studied quantity - 50 mg Sr3 + / kg feed with 90 - to 174 -day age affected the blood likely increase in concentration of the glycoproteins except for fucose, which was higher in the second (139 days) and third (174 days) age periods compared with the control group .
The blood of animals II research group observed the activation of glycoprotein protection for 139 and 174 days of life , as evidenced by the likely increase in the content of glycoproteins in their blood compared to controls.
Insertion of Chromium (III) in the diet of rabbits in the amount of 150 mg Cr / kg of feed affected less impact on the body of rabbits at 118 and 139 days of growth and development , while only at the age of 174 days observed significantly higher levels of glycoproteins in their blood.
Key words: rabbits, Chrome, glycoproteins, blood, monosaccharides.
Вступ. Хром e одним з м1кроелемент1в, що впливають на функцюнальну актившсть ¿мунно! системи i збшьшують стшккть тварин до захворювань. Водночас, у л1тературних джерелах зустр1чаються неоднозначш даш щодо впливу Хрому(Ш) на ¿мунну функцш оргашзму тварин. Зокрема, сполуки Хрому мають важливе значения у регуляци ¿мунно! вщповвд, тому що беруть участь в ¿муностимулюючих ироцесах оргашзму [1]. Неоднозначна системна вщповщь оргашзму людини i тварин на дш Хрому ускладнюе визначення конкретного його впливу на ¿мунну систему [2, 3]. Це може зумовлюватися тим, що ¿мунобюлопчна реактившсть оргашзму змшюеться впродовж онтогенезу i остаточно формуеться тшьки на певному еташ ф1зюлопчного дозр1вання оргашзму [10]. Суперечливють отриманих результата ¿мунно! вщповда на дш
197
добавок Хрому вщзначали в оргашзм1 велико! рогато! худоби [4], свиней [5], овець [6] таптищ [7].
Бшьшкть молекул, яю беруть участь в ¿муннш вщповда належать до гл1копроте!шв - специф1чшсть, процеси розшзнавання та взаемоди яких визначае вуглеводна частина, що вистуиае як сигнальш молекули [8]. Серед гл1копроте!шв, що виконують захисну функцш, особливо! уваги заслуговують глжопротеши кровг До них належать бшьшють бшюв плазми кров1, частина з них вщома як «бшки гостро! фази» [9]. Глжопротеши е невщ'емною частиною ¿мунно! системи \ !х концентращя у кров1 та стввщношення окремих !хшх моноцукр1в також змшюеться впродовж шдивщуального розвитку оргашзму [11, 12, 13]. Тому метою дослщження було вивчити вплив уведення р1зно! юлькоси хлориду хрому до рацюну крол1в на концентрацию гл1копроте!шв та окремих моноцукр1в !хшх вуглеводних компонента у кров1 з 90 до 174-добового вжу.
Матер1али 1 методи. Дослщження проводили на кролях породи арий велетень у крол1вничому господарств1 с. Демня Микола!вського району Льв1всько! облает^ подшених на чотири групи (контрольну { три дослщш, по 5 самок I 5 самщв вщ кролематок-сестер у кожнш), пдабраних за принципом аналопв. Молодняк крол1в контрольно! групи отримував стандартний гранульований комбшорм I воду без обмеження. Тваринам першо! (I), друго! (II) та третьо! (III) дослщних груп - цей же комбжорм з введениям у рацюн добавки хлориду хрому вщповщно у юлькоси 50, 100 I 150 мкг Сг/кг комбжорму у вигляд1 СгС13 х 6 Н20. Утримання крол1в кл1ткове, за методом I. М. Михайлова. Тривалкть дослщження 94 доби, у т. ч. пщготовчий перюд - 10 д1б, дослщний -84 доби. У пщготовчому перюд1 - на 90 добу I в дослщному - на 118, 139 та 174 доби життя (28, 49 I 84 доби згодовування Хрому) вщбирали зразки кров1 з крайово! вушно! вени крол1в для бюх1м1чних дослщжень. У кров1 визначали моноцукри вуглеводних компонента гл1копроте!шв - вмкт фукози за методом Дше, гексоз, зв'язаних з бшками та серогл1ко!д1в - орциновим методом, аалових кислот - за Свеннерхольмом, та гл1копроте!нових комплекЫв: церулоплазм1ну - методом Равша, гаптоглобшу фотометричним методом - за прийнятими у бюлогп методами, описаними в довщнику [14]. Цифров1 даш опрацьоваш статистично з використанням t критерш Стьюдента.
Результати дослщжень. Анал1з одержаних результата вмкту гл1копроте!шв у кров1 крол1в евщчить про певш особливосп впливу Хрому (Ш) залежно вщ його юлькоси у рацюш (табл. 1). Зокрема, вмкт гексоз, зв'язаних з бшками у кров1 тварин I дослщно! групи, був в1рогщно вищим впродовж дослщження, тод1 як у тварин И групи вш перевищував !хнш р1вень у кров1 тварин контрольно! групи на 139 I 174 доби життя. Застосування бшьшо! юлькоси хлориду хрому (150 мкг Сг/кг комбжорму), позначилося в1рогщним пщвищенням гексоз, зв'язаних з балками у кров1 крол1в III дослщно! групи на останньому перюд1 дослщження пор1вняно з контролем. Це може евщчити про здатшеть Хрому змшювати гл1копроте!новий статус оргашзму та пщвищувати вмют моноцукр1в !хшх вуглеводних компонента у крол1в, що було бшьше виражено для тварин, яю споживали найменш1 його юлькостг
Концентращя сероглжовдв у кров1 крол1в 11II дослщних груп на 118; 139 1 174 доби росту й розвитку була вщповщно вищою на 19,0 1 14,2; 8,7 1 4,3 та 4,3 I 13,0 % пор1вняно з контрольною групою. Вщомо, що до сероглжодав входять понад 15 гл1копроте!шв, серед яких преальбумш, альфа-1-кислий
198
гл1копроте!н, еритропоетин та шшг Цю групу вщносять до «бшк1в гостро! фази» [15]. Пщвищений р1вень серогл1ко!д1в у межах величин ф1зюлопчно! норми, вказуе на активацш ¿муннобюлопчно! вщповда, що може бути пов'язано з впливом Хрому на метабол1зм цих бшюв в оргашзм1 крол1в.
Таблиця 1
Вмкт глжопротеТшв 1 моноцук|Мв Тхшх вуглеводних компонентов у
кров1 крол1в (М±т, п=6)
Показ ник Гру-па тварин Перюд дослщжень
тдготов-чий, 90 доба житгя дослщний (вш у днях / доба згодовування добавок)
118/28 139/49 174/84
Гексози, зв'язаш з бшком, г/л К 1,12±0,03 1,16±0,02 1,18±0,04 1,23±0,04
Д-1 1,17±0,03 1,23±0,02* 1,29±0,02* 1,36±0,04*
Д-11 1,14±0,04 1,22±0,03 1,28±0,03* 1,39±0,03**
Д-ш 1,18±0,04 1,19 ± 0,03 1,25 ± 0,04 1,38 ± 0,04*
Серогль К01ДИ, г/л К 0,22±0,008 0,21 ± 0,007 0,23 ± 0,004 0,23 ± 0,006
Д-1 0,23±0,003 0,25±0,004** 0,25±0,004** 0,24±0,004*
Д-11 0,23±0,007 0,24±0,004* 0,24±0,002* 0,26±0,005*
Д-Ш 0,21±0,006 0,23±0,002 0,24±0,004 0,25±0,005*
Гапто-глобш, г/л К 1,54±0,02 1,57±0,01 1,58±0,01 1,60±0,05
д-1 1,55±0,02 1,69±0,05* 1,68±0,03* 1,75±0,03*
Д-11 1,49±0,01 1,63±0,02* 1,70±0,04* 1,77±0,05*
д-ш 1,52±0,01 1,58±0,01 1,64±0,04 1,67±0,03
С1алов1 кислоти, у.о. к 121,6±2,17 122,6±3,33 119,6±4,14 123,6±1,62
д-1 122,8±3,46 131,3±3,02* 130,5±3,43* 133,6±3,07*
Д-11 118,3±1,89 127,6±4,26 131,1±3,40* 132,8±2,63*
д-ш 120,3±2,20 126,0±5,06 129,8±3,52* 131,8±2,57
Фукоза, мг% к 3,10±0,02 3,17±0,05 3,14±0,02 3,15±0,02
д-1 3,15±0,03 3,33±0,09 3,27±0,05* 3,34±0,07*
Д-11 3,12±0,02 3,24±0,04 3,32±0,04** 3,36±0,08*
д-ш 3,16±0,03 3,21±0,05 3,24±0,06 3,26±0,04*
Церуло-плазмш, у.о. к 350,5±8,47 373,8±5,51 364,8±11,81 372,8±7,98
д-1 347,5±8,96 398,3±11,20* 405,010,10* 429,6±7,80***
Д-11 354,0±7,67 400,6±8,13* 403,8±11,16** 417,3±8,58**
д-ш 362,2±11,96 390,3±10,04 387,3±9,45 416,6±7,60**
Примгтка. У цт / наступят таблицях статистично в1рог1дт ргзницг стосовно до тварин контрольнойгрупи: * — р<0,05; ** — р<0,01; *** — р<0,001
У кров1 крол1в I I II дослщних груп впродовж дослщження зростав вмкт гаптоглобшу (Р<0,05), тод1 як у тварин Ш групи в1рогщних змш даного показника не спостер1галося. Основна функщя гаптоглоб1ну полягае у виб1рковому зв'язуванш гемоглобшу. Цей комплекс е грубодисперсним, а тому вш не фшьтруеться через нирков1 клубочки, завдяки чому попереджуеться втрата оргашзмом Феруму. Це зумовлюе бактерюстатичний ефект, оскшьки обмежуеться доступ Феруму для мжрооргашзм1в [16]. Зростання вмюту гаптоглобшу може свщчити про бшьше виражену здатшсть малих кшькостей Хрому до активаци ¿мунно! системи оргашзму крол1в I I II групи пор1вняно з тваринами контрольно! та III дослщно! груп.
Застосування малих кшькостей хлориду хрому в рацюш крол1в I групи вщзначилося в1рогщним пщвищенням вмюту Ыалових кислот у кров1 впродовж дослщження та вищим !хшм р1внем у II груш у вщ1 139 I 174 д1б (на 49 I 84 доби
199
застосування добавок) пор1вняно з контрольною групою. У кров! тварин III дослщно! групи концентращя цих компонента збшьшувалася на 8,5 % пор1вняно з контрольною групою. CianoBi кислоти ввдграють важливу роль в регуляцп ¿мунно! вщповда, виконуючи функцш маркер1в бшюв оргашзму, що вщр1зняе 1х вщ чужорщних антигешв. Вони вносять суттевий вклад у поверхневий заряд молекул гл!копроте!шв i визначають ix стшккть до дп протеол1тичних ензим1в, впливають на ¿мунох1м1чн1 властивост!, виступають х1м1чними посередниками, що регулюють функцп трансмембранних рецептор1в [17].
У кров! крол1в I i II дослщних груп вм1ст фукози був в1рог1дно вищим у вщ 139 i 174 д1б (49 i 84 доби дослщження), тод1 як у тварин III групи И р1вень зростав тшьки на останньому eTani застосування добавок пор1вняно з контрольною групою. Фукоза виконуе важлив! бюлопчш функци у процесах онтогенезу, кл1тинно! диференщацп та формування неспециф1чного ¿муштету [18]. Можливо, нижч1 кшькост1 хлориду хрому (50 i 100 мкг Cr/кг комбжорму) сприяли бшьше вираженому його метабол1чному впливу на процеси 1муноб1олог1чно1 реактивност1 орган1зму крол1в.
Вм1ст церулоплазм1ну в кров1 тварин I i II досл1дно! групи в1рогщно зростав впродовж досл1дження та був вищим у молодняку Ш групи на 174 добу життя пор1вняно з контролем. Церулоплазм1н в оргашзм1 тварин пов'язаний з процесами кровотворення та окисно-в1дновними реакц1ями, його висока концентрац1я у кров1 крол1в в yci BiKOBi пер1оди е св1дченням активно! участ! Хрому(Ш) у процесах кровотворення, що було бшьше виражено у крол!в I i II досл!дних груп, як! споживали менш! к!лькост! Хрому(Ш) в рацюш.
Висновки.
1. Згодовування кролям хлориду хрому в найменшш досл!джуван!й кшькост! - 50 мкг Сг3+/кг комбжорму з 90- до 174-добового вшу позначилося у кров! в!рог!дним пщвищенням концентрацп досл!джуваних гл!копроте!н!в за винятком фукози, що була вищою на другому (139 д!б) i третьому (174 д1б) в!кових пер!одах пор!вняно з контрольною групою.
2. У кров! тварин II дослщно! групи вщзначено активацш системи гл!копроте!нового захисту на 139 i 174 доби життя, про що евщчить в!рогщне зростання вм!сту гл!копроте!н!в у !хнш кров! пор!вняно з контролем.
3. Уведення Хрому(Ш) до рац!ону крол!в у к!лькост! 150 мкг Cr/кг комбжорму, позначилося меншим впливом на оргашзм крол!в на 118 i 139 доби росту й розвитку, тод! як лише у вщ! 174 д1б в!дзначено в!рог!дно вищий вм!ст гл!копроте!н!в у !хн!й кров!.
Л1тература
1. Efects of chromium on the immune system / R. Shrivastava, R.K. Upreti, P.K. Seth, U.C. Chaturvedi // FEMS Immunology and Medical. Microbiology. -2002. - Vol. 34. - P. 1-7.
2. Spears J.W. Micronutrients and immune function in cattle / J.W. Spears // Proc. Nutr. Soc. - 2000. - Vol. 59. - P. 1-8.
3. Vincent J.B. The nutritional biochemistry of chromium (III) // Vincent J. B./ Department of Chemistry The University of Alabama Tuscaloosa USA, 2007.- 279 p.
4. Khalili M. Lactation performance and serum biochemistry of dairy cows fed supplemental chromium in the transition period / Khalili M., Foroozandeh D., Toghyani M. // African Journal of Biotechnology. - 2011. - Vol.10 (50). - P. 1030410310.
200
5. Lien T.F. Effects of chromium propionate supplementation on growth performance, serum traits and immune response in weaned pigs // Lien T.F., Yang K.H., Link K.J. / Asian-Australasia. Journal of Animal Sciences. - 2005. - Vol. 18. -P. 403-408.
6. Gentry L.R. Dietary protein and chromium tripicolinate in Suffolk weather lambs Effects on production characteristics, metabolic hormonal responses, and immune status // Gentry L.R., Fernandez J.M., Ward T.L. / J. Anim. Sci. - 1999. -Vol. 77. - P. 1284-1294.
7. Uyanik F. Effects of dietary chromium chloride supplementation on performance, some serum parameters, and immune response in broilers // Uyanik F., A. Atasever A., Ozdamar S., Aydin F. / Biol. Trace. Elem. Res. - 2002. - 90 (1-3). -P. 99-115.
8. Pilatte Y. Sialic acids as important molecules in the regulation of the immune system: pathophysiological implications of sialidascs in immunity / Y. Pilatte, J. Bignon, C. R. Lambre // Glycobiology. - 1993. - Vol. 3, № 3. - P. 201-217.
9. Apweiler R. On the frequency of protein glycosylation, as deduced from analysis of the SWISS-PROT database / R. Apweiler, H. Hermjakob, N. Sharon // Biochim Biophys Acta. - 1999. - 1473. - P. 4-8.
10. Маслянко Р.П. Основи ¿мунологп / Маслянко Р. П. - Льв1в : Вертикаль, 1999. - 427 с.
11. Молдогазиева Н. Т. Альфа-фетопротеин - новые подходы к изучению структуры и функции / Н. Т. Молдогазиева, А. А. Терентьев // Успехи современного естествознания. - 2006. - № 5. - С. 87-89.
12. Mizejewski G.J. Alpha-fetoprotein structure and function: relevance to isoforms, epitopes, and conformational variants / Gerald J. Mizejewski // Exp. Biol. Med. - 2001. - Vol. 226, № 5. - P. 377-408.
13. Terentiev A.A. Cell adhesion proteins and a-fetoprotein. Similar structural motifs as prerequisites for common functions / A. A. Terentiev, N. T. Moldogazieva // Biokhimiya. - 2007. - Vol. 72, № 9. - P. 1133-1152.
14. Вл1зло B.B. Лабораторш методи дослщжень у бюлогп, тваринництв1 та ветеринарнш медицин!: довщник / В. В. Вл1зло, Р. С. Федорук, I. Б. Ратич та ш.; заред. В. В. Вл1зла. - СПОЛОМ, 2012. - 764 с.
15. Dube D. Glycans in cancer and inflammation - Potential for therapeutics and diagnostics / D. H. Dube, C. R. Bertozzi // Nat Rev Drug Discov. - 2005. -Vol. 4. - P. 477-488.
16. Власенко С. А. Продукцш оксиду азоту та бшюв гостро! фази за гестацшного процесу, метриту i ортопедично! патологи у кор1в / С. А. Власенко, М. В. Рубленко // Бюл. твар. - 2012. - Том 14, № 1, 2. - С. 361-369.
17. Schauer R. Achievements and challenges of sialic acid research / R. Schauer // Glycoconj. J. - 2000. - Vol. 17. - P. 485-499.
18. Becker D. J. Fucose Biosynthesis and biological function in mammals / Becker D. J., Lowe J. B. // Glycobiology. - 2003. - Vol. 13. - P. 41-53.
Рецензент - д.вет.н., професор Головач П.1.
201
