Влияние зубного эликсира "Виноградный" на уровень маркеров воспаления и дисбиоза в десне крыс с экспериментальным гингивитом Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

16. A comparative study of normal inspection, autofluorescence and 5-ALA-induced PPIX fluorescence for oral cancer diagnosis /C.S. Betz, H. Stepp, P. Janda et al. // Int. J. Cancer. -2002. - Vol. 97, № 2. - P. 245-252.

17. Левицкий А. П. Сравнительная характеристика трех методов определения фосфатаз слюны человека / А. П. Левицкий, А. И. Марченко, Т. Л. Рыбак // Лабораторное дело. - 1973. - № 10. - С. 624-625.

18. Visser L. The use of p-nitrophenyl-N-testbutyloxycarbonyl-L-alaninate as substrate for elastase / L. Visser, E. R. Blouf // Biochem. Biophys. Acta. - 1972. - Vol. 268, N 1. - Р. 275-280.

19. Determination of bioactive rat parathyroid hormone (PTH) concentrations in vivo and in vitro by a 2-site homologous immuno-radiometric assay / V.L. Schultz, S.C. Gamer, J.R. Lavigne, S.U. Toverud // Bone and Mineral.- 1994. - Vol. 27, № 2. - P. 121-132.

20. Лабораторные методы исследования в клинике: справочник / В. В. Меньшиков, Л. Н. Делеторская, Р. П. Зо-лотницкая [и др.] ; под ред. В. В. Меньшикова. - М. : Медицина, 1987. - 368 с.

Надшшла 22.06.11

Ключов1 слова: ясна, гiнгiвiт, duc6io3, листя винограду, зу-бний елжсир.

V. V. Lepskij, V. V. Lepskij, L. N. Khromagina, O. E. Knava

SE "The Institute of Dentistry of the NAMS of Ukraine"

THE INFLUENCE OF DENTIFRICE WATER "VINOGRADNYJ" UPON THE LEVEL OF MARKERS OF INFLAMMATION AND DISBIOSIS IN GUMS OF RATS WITH EXPERIMENTAL GINGIVITIS

At the simulation of gingivitis by application of apitoxin suspension the development of inflammatory (the growth of activity of elastase and concentration of MDA) and disbiotic (the growth of activity of urease and the degree of disbiosis) phenomena in gum was found. The irrigation of oral cavity with diluted dentifrice water "Vinogradnyj " ("Grape ") removed almost to the norm all pathological phenomena in gum.

Key words: gum, gingivitis, disbiosis, grape leaves, dentifrice water.

УДК 616.36-002-07:616.316-078.33

В. В. Лепский, В. В. Лепский, к. мед.н.

Л. Н. Хромагина, к. биол. н. О. Э. Кнава.

ГУ «Институт стоматологии НАМН Украины»

ВЛИЯНИЕ ЗУБНОГО ЭЛИКСИРА «ВИНОГРАДНЫЙ» НА УРОВЕНЬ МАРКЕРОВ ВОСПАЛЕНИЯ И ДИСБИОЗА В ДЕСНЕ КРЫС С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫМ ГИНГИВИТОМ

При моделировании гингивита путем аппликаций суспензии пчелиного яда установлено развитие в десне воспалительных (увеличение активности эластазы и концентрации МДА) и дисбиотических (увеличение активности уреазы и степени дисбиоза) явлений. Орошение полости рта разведенным зубным эликсиром «Виноградный» устраняло почти до нормы все патологические явления в десне. Ключевые слова: десна, гингивит, дисбиоз, листья винограда, зубной эликсир.

В. В. Лепський, В. В. Лепський, Л. М. Хромагта, О. Е. Кнава

ВПЛИВ ЗУБНОГО ЕЛ1КСИРУ «ВИНОГРАД-НИЙ» НА Р1ВЕНЬ МАРКЕР1В ЗАПАЛЕННЯ

I ДИСБ1ОЗУ В ЯСНАХ ЩУР1В З ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИМ Г1НГ1В1ТОМ

При моделювант гiнгiвiту шляхом апткацш суспензи бджолиног отрути встановлено розвиток в яснах запальних (тдвищення активностi еластази i концентраци МДА) та дiзбiотичних (збыьшення активностi уреази i ступеню дис-бiозу) явищ. Зрошення порожнини рота розведеним зубним елжсиром «Виноградний» усувало майже до норми уЫ па-тологiчнi явища в яснах.

Листья винограда являются богатейшим источником биологически активных веществ, среди которых особое место занимают соединения полифеноль-ного ряда [1]. В составе полифенолов винограда обнаружены биофлавоноиды, обладающие Р-витаминной активностью [2], антоцианы, которым свойственно противоязвенное действие [3], хлорогеновая кислота, оказывающая антимикробное и гепатопротекторное действие [4], ресвератрол, который угнетает развитие злокачественных новообразований [5].

Все эти полифенольные вещества хорошо растворяются в водно-спиртовых растворах и сравнительно легко извлекаются из листьев винограда экстракцией спиртом.

Используя водно-спиртовый экстракт из листьев винограда, был получен зубной эликсир «Виноградный», в состав которого входило 20 % экстракта, це-тавлон, ментол, отдушка.

Материалы и методы исследования. Экспериментальный гингивит воспроизводили у крыс с помощью пчелиного яда [7]. Суспензию пчелиного яда (0,5 мг/мл) в количестве 0,5 мл наносили на десну крыс один раз в день в течение трех дней. Через 1 час после нанесения яда орошали полость рта либо водой (2-ая группа), либо разведенным в 5 раз эликсиром (2,5 мл). Орошение производили один раз в день в течение трех дней. Умерщвление животных осуществляли под тиопенталовым наркозом (20 мг/кг) путем тотального кровопускания из сердца. Иссекали мягкие ткани десны и хранили до исследования при минус 30 °С.

В гомогенатах десны (20 мг/мл физиологического раствора) определяли уровень маркеров воспаления [8]: активность эластазы и концентрацию малонового диальдегида (МДА). Определяли также активность антиоксидантного фермента каталазы и уровень антиоксидантно-прооксидантного индекса АПИ [8].

© Лепский В. В., Лепский В. В., Хромагина Л. Н., Кнава О. Э, 2011.

"Вiсник стоматологИ", № 3, 2011

23

Микробную обсемененность десны оценивали по активности уреазы [9]; уровень неспецифической антимикробной защиты - по активности лизоцима [9]. По соотношению относительных активностей уреазы и лизоцима рассчитывали степень дисбиоза [9].

Результаты исследований и их обсуждение. На рис. 1 представлены результаты определения в десне маркеров воспаления - активности эластазы и концентрации МДА. Как видно из этих данных, при моделировании гингивита в десне достоверно увеличи-

вается уровень обоих маркеров воспаления. Орошение полости рта зубным эликсиром снижает эти показатели практически до нормы.

Напротив, активность в десне антиоксидантного фермента каталазы (рис. 2) достоверно снижается при гингивите и проявляет тенденцию к повышению после применения эликсира.

Рис. 1. Влияние эликсира «Виноградный» на уровень маркеров воспаления в десне крыс при гингивите: 1 - норма; 2 -гивит; 3 - гингивит+эликсир (*- р<0,05 в сравнении с нормой; **- р<0,05 в сравнении с гингивитом).

Рис. 2. Влияние эликсира «Виноградный» на активность каталазы и индекс АПИ в десне крыс с гингивитом (обозначение -см. рис. 1)

Более показательны изменения индекса АПИ: он достоверно снижается при гингивите и достоверно увеличивается (вплоть до нормы) при орошении полости рта эликсиром (рис. 2).

На рис. 3 представлены результаты определения в десне активности уреазы, лизоцима и степени дис-биоза. Как видно из этих данных, при гингивите достоверно увеличивается активность уреазы, что свидетельствует о росте микробной обсемененности этой ткани при моделировании гингивита. Орошение полости рта эликсиром снижает активность уреазы до нормы (правда, по сравнению с группой нелеченных

крыс р>0,05 из-за больших индивидуальных разбросов).

Активность лизоцима проявляет тенденцию к снижению при гингивите и тенденцию к увеличению после применения эликсира. Однако, значение р во всех случаях более 0,05 из-за больших индивидуальных разбросов.

Рассчитанная по методу Левицкого [9] степень дисбиоза (рис. 3) показывает более чем троекратное увеличение этого показателя при гингивите и достоверное снижение (почти до нормы) после применения зубного эликсира.

Рис. 3. Влияние эликсира «Виноградный» на активность уреазы, лизоцима и степень дисбиоза в десне крыс с гингивитом (обозначение - см. рис. 1)

Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют о противовоспалительном и антидисбио-тическом действии биологически активных веществ из листьев винограда (прежде всего, за счет большого набора различных полифенолов [10]). Ряд из них (хлорогеновая кислота) обладает антимикробной активностью, другие (антоцианы, флавононы, катехи-ны), подавляя свободно-радикальные процессы и снижая активность провоспалительных ферментов (фосфолипазы А2, протеаз, липоксигеназ) [11], осуществляют противовоспалительное действие. Эти результаты дают основание для использования зубного эликсира «Виноградный» в стоматологии, в частности, для профилактики и лечения гингивитов.

Список литературы

1. Andersen O. M. Flavanoids: Chemistry, Biochemistry and Applications / O. M. Andersen, K. R. Markham. - Taylor and Francis CRC Press, 2005. - 1256 с.

2. Мука из виноградных листьев - источник витамина Р в комбикормах / А. П. Левицкий, В. Т. Гулавский, И. В. Ходаков [и др.] // Зерновi продукти i комбжорми. - 2011. -№ 1 (41). - С. 30-33.

3. Clifford M. N. Anthocyanins - nature, occurrence and dietary burden / M. N. Clifford // J. Sci. Food and Agr. [МФИШ]. - 2000. - 80, № 7. - С. 1063-1072.

4. Левицкий А. П. Хлорогеновая кислота: биохимия и физиология / А. П. Левицкий, Е. К. Вертикова, И. А. Сели-ванская // Мгкробюлопя i бютехнолопя. - 2010. - № 2 (10). -С. 6-21.

5. Флавоноиды и резвератрол как регуляторы активности Ah-рецептора: защита от токсичности диоксина / В. А. Тутельян, М. М. Гаппаров, Л. Ю. Телегин [и др.] // БЭ-БИМ. - 2003. - Т. 136, № 12. - С. 604-611.

6. Файзуллш О. В. Вплив екстракту з листя винограду культурного на переб^ аскорбат-шдукованого перекисного окислення лiпiдiв / О. В. Файзуллш, Л. М. Ворошна, А. Л. Загайко // Медична хiмiя. - 2005. - Т. 7, № 4. - С. 77-79.

7. Пат. На корисну модель № 31011 UA, МПК (2006) А 61 Р 31/00, А 61 С 7/00, А 61 К 35/56. СпоЫб моделюван-ня пнггвпу / Левицький А. П., Селiванська I. О., Макаренко О. А. [та ш.]. - Опубл. 2008. - Бюл. № 6.

8. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости: метод. Рекомендации / А. П. Левицкий, О. В. Деньга, О. А. Макаренко и др. - Одесса, 2010. - 16 с.

9. Пат. На корисну модель № 16048 UA. Cnoci6 оцш-ки дисбактерюзу порожнини рота / Левицький А. П., Макаренко О. А., Селiванська I. О. [та îh.]. - Опубл. 17.07.2006. -Бюл. № 7.

10. Тутельян В. А. Биологически активные вещества растительного происхождения. Катехины: пищевые источники, биодоступность, влияние на ферменты метаболизма ксенобиотиков / В. А. Тутельян, Н. В. Лашнева // Вопросы питания. -2009. -Т. 78, № 4. - С. 4-20.

11. Middleton E., Jr. The effects of plant flavonoids on mammalian cells: implications for inflammation, heart disease, and caroer / E. Jr. Middleton, C. Kandaswami, T. C. Theoha-rides // Pharmacol. Rev. -2000. -V. 52, № 4. - P. 673-751.

Поступила 04.07.11

УДК 616.314-089.281+678.048:615.451

Н. В. Рожкова, В. А. Лабунец, д. мед. н., В. В. Лепский, к. мед. н., В. В. Лепский

ГУ "Институт стоматологии НАМН Украины"

СРАВНИТЕЛЬНАЯ АНТИДИСБИОТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЗУБНЫХ ЭЛИКСИРОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ДИСБИОЗЕ СЛИЗИСТОЙ ПОЛОСТИ РТА

В эксперименте на крысах при моделировании дисбиоза слизистой полости рта с помощью линкомицина установлено антидисбиотическое действие ряда зубных эликсиров ("Экстравин-Дента", "Биодент-4", "Лизомукоид") и виноградного концентрата "Экстравин". Наиболее эффективными оказались "Экстравин-Дента" и "Лизомукоид". Ключевые слова: дисбиоз слизистой полости рта, зубные эликсиры, антидисбиотическое действие.

© РожковаН. В., Лабунец В. А., Лепский В. В., Лепский В. В., 2011.