CC BY
32
Профессор В.И. Циркин, А.Н. Трухин, доцент Е.Н. Сизова, профессор С.А. Дворянский, И.А. Макарова ВЛИЯНИЕ СЫВОРОТКИ КРОВИ БЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН НА СОКРАТИМОСТЬ И ХЕМОРЕАКТИВНОСТЬ МИОМЕТРИЯ КРЫСЫ И МИОКАРД ЛЯГУШКИ
Кировская государственная медицинская академия Вятский государственный гуманитарный университет Вятский социально-экономический институт
Введение. Работы последних лет [6,7,8,10,11,13,14,15,16] свидетельствуют о существовании в организме человека и животных эндогенных модуляторов хемореактивности прямого действия, в том числе эндогенного сенсибилизатора и эндогенного блокатора ß-адренорецепторов (ЭСБАР, ЭББАР), эндогенного блокатора и, возможно, эндогенного сенсибилизатора М-холинорецепторов (ЭБМХР, ЭСМХР). Считается, что эти факторы, входящие в систему модуляции периферических структур автономной нервной системы [15], способны изменять ß-адрено- и М-холинореактивность миоцитов матки, сосудов и трахеи и тем самым модулировать эффективность ß-адренергических и М-холинергических воздействий эндокринной и автономной нервной системы. Независимо от природы эндогенных модуляторов становится все очевиднее, что они играют важную роль в процессах регуляции деятельности внутренних органов в условиях нормы и патологии. Наиболее вероятно, что они оказывают свое модулирующее влияние на миокард. Частично об этом свидетельствуют данные о М-холинолитическом эффекте сыворотки крови животных, выявленном в опытах с миокардом лягушки и кролика [2,8,12]. Однако влияние ЭСБАР, ЭББАР, ЭБМХР и ЭСМХР, содержащихся в крови человека, на ß-адрено- и М-холинореактивность миокарда до настоящего времени не исследовалось, хотя это представляет определенный интерес, так как эффективность ß-адрено- и М-холинергических влияний на сердце во многом определяет состояние кровообращения в условиях нормы, а их снижение, как предполагается [4,17,20,21], может лежать в основе развития артериальной гипертензии, сердечной недостаточности и других заболеваний сердечно-сосудистой системы, частота которых все еще остается высокой [5,18]. О нарушении вегетативной регуляции деятельности сердца свидетельствует и изменение характера вариабельности сердечного ритма при этих заболеваниях [9,10]. Изучение влияния ЭСБАР, ЭББАР, ЭБМХР и ЭСМХР на ß-адрено- и М-холинореактивность миокарда может представлять интерес и для акушерства, так как предполагается [14], что развитие гестоза, артериальной гипертензии и вегето-сосудистой дистонии является следствием изменения характера ß-адренергических и М-холинергических воздействий на сердце и сосуды при беременности, возникающего в результате высокого содержания в системе «мать-плод» эндогенных агонистов ß-адренорецепторов (ß-АР) и ЭСБАР. Как известно [1,3,18], эти заболевания часто осложняют течение беременности.
Цель работы - изучить влияние сыворотки крови (1:104, 1:103, 1:500 и 1:100) беременных женщин (в том числе при наличии вегето-сосудистой дистонии по гипертоническому типу или артериальной гипертензии I-II степени) на сократимость и хемореактивность миометрия крысы и миокарда лягушки и одновременно оценить относительное содержание в крови эндогенных модуляторов хемореактивности (ЭСБАР, ЭББАР, ЭБМХР, ЭСМХР).
Методика. В 48 сериях изучали содержание ЭСБАР, ЭББАР, ЭБМХР и ЭСМХР в венозной крови 51 беременной женщины (на сроке 21-40 нед), в том числе у женщин с неосложненным течением беременности (группа 1, n=22), у женщин с вегето-сосудистой дистонией (группа 2, n=19) или с артериальной гипертензией I-II степени (группа 3, n=10), исследуя влияние 104-, 103-, 500- и 100-кратных разведений сыворотки этой крови на ß-адрено- и М-холинореактивность 408 продольных полосок рога матки небеременных крыс (фаза метаэструса или диэструса) и 204 изолированных сердец озерных лягушек (R. ridibunda), оцениваемую по реакции на адреналин (10-8г/мл на миометрии, 10-6г/мл - на миокарде) или ацетилхолин (10-6г/мл). Регистрацию сократительной активности (СА) тест-объектов, а также оценку их ß-адрено- и М-холинореактивности проводили по методике [13] на «Миоцитографе», состоящем из механотронов 6МХ1С, самопишущих приборов Н-3020 и шприцевого дозатора. СА изолированного сердца регистрировали при 16-22оС, а СА продольных полосок рога матки крыс (длиной 6-8 мм, шириной 2-3 мм) - при 38оС. Скорость перфузии соответственно раствора Рингера (в мМ: NaCl -114,4; KCl- 1,6; CaCl2-1,80; NaHCOs - 2,4; pH-7,4) и раствора Кребса (в мМ: NaCl - 136; KCl - 4,7; CaCl2 - 2,52; MgCl2 - 1,2; KH2PO4 - 0,6; NaHCO3 - 4,7; C6H12O6 - 11; pH-7,4) составляла 0,7мл/мин, а скорость движении диаграммной ленты - 5400 и 180мм/час. Сокращения сердца вызывали электростимулами, которые на каждом 10-минутном этапе эксперимента наносили однократно в конце этапа в виде 30-секундных пачек импульсов от электростимулятора ЭСЛ-1 (1Гц, 5мс, 5-10В). Оценку исходной ß-адрено- или М-холинореактивности тест-объекта и ее изменения под влиянием исследуемых разведений сыворотки крови оценивали путем трехкратного воздействия на него соответственно адреналина или ацетилхолина. Каждый 7-этапный эксперимент проводили однотипно: например, при исследовании влияния сыворотки (1:100) на ß-адренореактивность миокарда, по схеме (рис., панель Б): раствор Рингера ^ адреналин (10-6г/мл) ^ раствор Рингера ^ сыворотка (1:100) ^ сыворотка (1:100) + адреналин (10-6г/мл) ^ раствор Рингера ^ адреналин (10-6г/мл). Механограммы оценивали количественно и качественно. Сыворотку венозной крови беременных женщин или пуповинной крови новорожденных получали путем 15-минутного центрифугирования (при 2000 об/мин) крови и последующего ее разведения раствором Рингера или Кребса.
Забор крови проводили общепринятым способом; до исследования ее хранили (не более суток) при 4оС. Различия оценивали по критерию Фишера-Стьюдента, считая их достоверными при р<0,05.
Результаты исследования. Показано (рис., панели А и В), что все полоски матки обладали спонтанной СА (частота - 5,72-8,87 сокращений за 10 минут, амплитуда - 3,69-8,21мН, суммарная СА - 51,94-112,88 мН/10мин), которую адреналин (10-8г/мл) при 1-м тестировании незначительно снижал (до 70,7% от исходного уровня), а ацетилхолин (10-6г/мл) повышал (до 128,26-267,93%). У миокарда (рис. панели Б и Г ) минимальная амплитуда составляла 1,76-5,64 мН, максимальная амплитуда - 7,50-12,07 мН, а время ее достижения - 6,20-9,05 с. Под влиянием адреналина (10-6г/мл) минимальная амплитуда возрастала до 174,60-239,11% от исходного уровня, максимальная - до 134,15-173,12%; время достижения максимальной амплитуды - до 103,81-129,0%. Под влиянием ацетилхолина (10-6 г/мл) минимальная амплитуда снижалась до 34,43-53,63%, максимальная - до 45,25-61,88%; время достижения максимальной амплитуды варьировало от 75,67% до 101,21% от исходного уровня.
Миоцитингибирующая и миоцитстимулирующая активность сыворотки крови. Сыворотка (1:104, 1:103, 1:500, 1:100) крови женщин всех групп в опытах на миокарде не влияла на его сократимость и хроно-инотропные отношения, а в опытах с миометрием в разведениях 1:104 и 1:103 вызывала небольшое снижение параметров СА, что, с учетом представлений [6,10,11,13,14,16], объясняется наличием в крови связанных агонистов Р-АР. В разведениях 1:500 и 1:100 сыворотка крови в части опытов ингибировала СА, что с учетом данных [6,10,11,13,14,16], обусловлено наличием в крови эндогенного ингибитора сократимости миоцитов (ЭИСМ). В части опытов в этих же разведениях она повышала СА, что на основе представлений [6,10,11,13,14,16], объясняется наличием в крови эндогенного активатора сократимости миоцитов (ЭАСМ). Действительно, при изучении Р-адреномодулирующей активности сыворотки крови установлено, что процент опытов, в которых разведения 1:104, 1:103, 1:500, 1:100 проявляли утероингибирующую активность, в группе 1 составил соответственно 68,2%, 50,0%, 36,4% и 13,6% опытов, в группе 2 - 52,6%, 47,4%, 52,6% и 21,1% опытов, в группе 3 - 20,0%, 40,0%, 50,0% и 30%; при этом межгрупповые различия выявлены для разведения 1:104 - они свидетельствуют о более низкой миоцитингибирующей активности сыворотки в группе 3 по сравнению с группой 1 (20,0% против 68,2%, р1_3<0,05). Количественный анализ показал, что разведение 1:104 вызывало достоверное (р<0,05) снижение амплитуды сокращений только в группе 2 (до 92,08±3,68% от исходного уровня), изменения в группах 1 (94,56±4,69%) и в группе 3 (98,87±5,02%) носили недостоверный характер, а разведение 1:103 вызывало достоверное (р<0,05) снижение амплитуды сокращений только в группе 1 (до 86,82±5,07%), а в группах 2 и 3 амплитуда сокращений (соответственно 95,49±8,29% и 106,13±6,49%) не отличалась достоверно от фонового уровня. Все это говорит о более низком содержании связанных агонистов Р-АР в группе 3.
Миоцитстимулирующая активность для разведений 1:104, 1:103, 1:500, 1:100 в группе 1 отмечена соответственно в 9,1%, 18,2%, 40,9% и 81,8% опытов, в группе 2 - в 15,8%, 36,8%, 31,6% и 52,6% опытов, в группе 3 - в 40,0%, 20,0%, 20,0% и 50,0% опытов; межгрупповые различия выявлены для разведения 1:100 -они свидетельствуют о более низком содержании ЭАСМ в группе 2 и (в определенной степени) в группе 3 по сравнению с группой 1 (соответственно 52,6% и 50,0% против 81,8%, р1-2<0,05; р1_з>0,05). Количественный анализ выявил, что разведение 1:100 достоверно (р<0,05) повышало суммарную СА только в группе 1 (до 136,76±13,09% от фона), а в группе 2 и 3 такое повышение суммарной СА носило недостоверный характер (соответственно - до 119,47±12,08% и 175,43±56,40%), что говорит о более низком содержании ЭАСМ в группах 2 и 3 по сравнению с группой 1.
В опытах, в которых изучали М-холиномодулирующие эффекты сыворотки, показано, что миоцитингибирующая активность для разведений 1:104, 1:103, 1:500 и 1:100 в группе 1 наблюдалась соответственно в 27,3%, 50,0%, 40,9% и 18,2% опытов, в группе 2 - в 31,6%, 36,8%, 10,5% и 21,1% опытов, в группе 3 - в 30,0%, 30,0%, 60,0% и 40%. Для разведения 1:500, отражающего содержание ЭИСМ, выявлены межгрупповые различия. Они свидетельствуют о том, что в группе 2 эта активность наблюдается реже, чем в группах 1 и 3 (10,5% против 40,9% и 60,0%, р2-1,3<0,05), а в группе 3 она наблюдалась чаще, чем в группе 1 (60,0% против 40,9%, р3-1>0,05). Это означает, что содержанием ЭИСМ в группе 2 ниже, чем в группе 1, а в группе 3, наоборот, выше (тенденция). Миоцитстимулирующая активность при исследовании разведений 1:104, 1:103, 1:500 и 1:100 в группе 1 наблюдалась соответственно в 45,5%, 22,7%, 45,5% и 77,3% опытов, в группе 2 -в 52,6%, 47,4%, 63,2% и 68,4% опытов, в группе 3 - в 60,0%, 20,0%, 40,0% и 60,0% опытов (Р1_2_3>0,1). Количественный анализ выявил ряд достоверных различий между группами, однако они дают противоречивую картину и, в конечном итоге, не подтверждают данные о более низком содержании ЭАСМ в группах 2 и 3, отмеченные выше, что объясняется предшествующим тестированием полосок ацетилхолином.
В целом, эти данные позволяют заключить, что содержание связанных агонистов Р-АР снижено в группе 3, содержание ЭАСМ снижено в группах 2 и 3, а содержание ЭИСМ снижено в группе 2 и повышено в группе 3.
Р-Адреносенсибилизирующая активность сыворотки. В опытах с миометрием (рис, панель А) она проявлялась в увеличении ингибирующего эффекта адреналина (10-8г/мл). Например, при исследовании сыворотки крови (1:100) женщин группы 1 установлено, что адреналин при 1-м тестировании угнетал суммарную СА миометрия до 84,62±5,32% от исходного уровня, на фоне сыворотки - до 26,14±7,49%, а после ее удаления - до 81,48±8,27% (р 2-1,3<0,05). Для разведений 1:104, 1:103, 1:500 и 1:100 в группе 1 эта активность отмечена соответственно в 63,6%, 86,4%, 81,8% и 95,5% опытов, в группе 2 - в 63,2%, 78,9%, 94,7% и 73,7%
опытов, а в группе 3 - в 60,0%, 80,0%, 70,0% и 60,0% опытов (р1-2-3>0,1). Количественный анализ показал, что во всех трех группах ß-адреносенсибилизирующая активность достоверно наблюдается для разведений 1:103, 1:500 и 1:100. Это говорит о наличии в крови беременных женщин ЭСБАР, а также о высоком его уровне.
В опытах с миокардом (рис, панель Б.) ß-адреносенсибилизирующая активность сыворотки проявлялась в повышении положительного инотропного эффекта адреналина (10-6г/мл). Так, при исследовании сыворотки крови (1:100) женщин группы 1 установлено, что адреналин при 1-м, 2-м и 3-м тестированиях повышал максимальную амплитуду сокращений соответственно до 165,02±11,21%, 253,08±31,91% и 155,01±6,25% от исходного уровня (р2-13<0,05). Судя по изменению максимальной амплитуды сокращений, для разведений 1:104, 1:103, 1:500 и 1:100 в группе 1 эта активность отмечена соответственно в 31,8%, 31,8%, 72,7% и 90,9% опытов, в группе 2 - в 63,2%, 42,1%, 63,2% и 73,7% опытов, в группе 3 - в 40,0%, 40,0%, 60,0% и 90,0% опытов (р1-2-3>0,1). Количественный анализ показал, что достоверно эта активность в группах 1 и 3 выявлена для разведений 1:103, 1:500 и 1:100, а в группе 2 - для разведений 1:104, 1:103, 1:500 и 1:100. С учетом наших данных [6,10,11,13,14,16], косвенно это говорит о наличии в крови у беременных женщин ЭСБАР, способного изменять ß-адренореактивость кардиомиоцитов, а также о более высоком (почти в 10 раз) его содержании в группе 2.
Выраженность ß-адреносенсибилизирующей активности сыворотки и, как отмечено выше, вероятность ее наблюдения в опытах с миометрием крысы не зависели от кратности ее разведений (в диапазоне 1:103, 1:500 и 1:100), а в опытах с миокардом, судя по изменению максимальной амплитуды сокращений, зависели (с уменьшением кратности они возрастают). Это означает, что ЭСБАР на миоциты матки влияет по типу «все или ничего», а на кардиомиоциты - градуально. В свою очередь такой вывод дает основание предположить существование двух селективных ЭСБАР - ЭСБ1АР и ЭСБ2АР. В целом, полученные данные свидетельствуют о высоком содержании ЭСБАР у женщин во второй половине беременности, которое, как выявлено в опытах с миокардом, повышено (примерно на порядок) при вегето-сосудистой дистонии (группа 2).
ß-Адреноблокирующая активность разведений 1:104, 1:103, 1:500 и 1:100 в опытах с миометрием отмечена в группе 1 в 27,3%, 4,5%, 4,5% и 4,5% опытов, в группе 2 - в 26,3%, 21,1%, 0,0% и 5,3%, в группе 3 - в 30,0%, 20,0%, 0,0% и 20,0% (р1-2-3>0,1). В опытах с миокардом, судя по изменению максимальной амплитуды сокращений, в группе 1 эта активность отмечена соответственно в 36,4%, 13,6%, 4,5% и 0,0% опытов, в группе 2 - в 10,5%, 10,5%,10,5% и 0,0% опытов, а в группе 3 - в 50,0%, 0,0%, 10,0% и 0,0% опытов; при этом для разведения 1:104 выявлено достоверное различие - в группе 2 эта активность наблюдалась достоверно реже, чем в группах 1 и 3 (10,5% против 36,4% и 50,0%; р2-1,3<0,05). Таким образом, вероятность наблюдения ß-адреноблокирующей активности снижалась с уменьшением кратности разведения. С учетом представлений [6,10,11,13,14,16], эти данные можно объяснить наличием в крови связанных агонистов ß-АР, вызывающих десенситизацию ß-АР. Как показывают результаты опытов с миокардом, содержание в крови связанных агонистов ß-АР в группе 2 ниже, чем в других группах. В целом, полученные данные указывают на отсутствие ЭББАР в крови у беременных женщин.
М-Холиноблокирующая активность сыворотки крови в опытах с миометрием проявлялась (рис., панель В) в снижении стимулирующего эффекта ацетилхолина (10-6 г/мл). Так, при исследовании сыворотки крови (1:100) женщин группы 1 установлено, что при 1-м, 2-м и 3-м тестированиях ацетилхолином суммарная СА миометрия составила соответственно 209,95±27,68%, 90,92±5,99% и 297,06±43,14% от фонового уровня (р2-1,з<0,05). При исследовании разведений 1:104, 1:103, 1:500 и 1:100 в группе 1 М-холиноблокирующая активность отмечена соответственно в 4,5%, 27,3%, 54,5% и 86,4% опытов; в группе 2 - соответственно в 26,3%, 42,1%, 36,8% и 63,2% опытов; в группе 3 - соответственно в 30,0%, 20,0%, 30,0% и 60,0% опытов (р1-2-3>0,1). Количественный анализ выявил, что М-холиноблокирующая активность в группе 1 достоверно наблюдалась для разведений 1:500 и 1:100, в группе 2 - для разведений 1:103, 1:500 и 1:100, а в группе 3 -только для разведения 1:100.
В опытах с миокардом (рис., панель Г) М-холиноблокирующая активность сыворотки проявлялась в снижении отрицательного инотропного эффекта ацетилхолина (10-6г/мл). Так, при исследовании сыворотки крови (1:100) женщин группы 1 установлено, что при 1-м, 2-м и 3-м тестированиях ацетилхолином максимальная амплитуда сокращений сердца составила соответственно 45,25±3,56%, 100,33±2,40% и 50,66±3,59% от фонового уровня (р2-13<0,05). Для разведений 1:104, 1:103, 1:500 и 1:100 в группе 1 М-холиноблокирующая активность отмечена соответственно в 13,6%, 50,0%, 95,5% и 95,5% опытов, в группе 2 - в 5,3%, 63,2%, 94,7% и 100,0% опытов; в группе 3 - в 10,0%, 80,0%, 100,0% и 100,0% опытов (р1-2-3>0,1). Судя по изменению максимальной амплитуды сокращений сердца, в каждой группе М-холиноблокирующая активность отмечена достоверно для разведений 1:103, 1:500 и 1:100.
Таким образом, учитывая данные литературы [2,6,8,10,11,12,13,14,16], результаты опытов на миометрии и миокарде говорят о наличии в крови у беременных женщин ЭБМХР, способного изменять М-холинореактивность миоцитов матки и кардиомиоцитов. Его содержание в крови, судя по результатам опытов с миометрием, повышено (примерно в 2 раза) при вегето-сосудистой дистонии (группа 2) и снижено (примерно в 5 раз) при артериальной гипертензии (группа 3).
Опыты также показали, что на миометрии и на миокарде выраженность и, как отмечалось выше, вероятность наблюдения М-холиноблокирующей активности возрастали с уменьшением кратности разведения. Это означает, что ЭБМХР и на миоциты матки, и на кардиомиоциты действует однотипно (градуально). Однако
это обстоятельство, конечно, не исключает возможности наличия селективных ЭБМХР, т.е. ЭБМ1ХР и ЭБМ2ХР, но различия в их действии на миоциты матки и кардиомиоциты не так выражены, как у ЭСБАР.
М-Холиносенсибилизируюшая активность (т.е. повышение ответа тест-объекта на ацетилхолин) для разведений 1:104, 1:103, 1:500 и 1:100 в опытах с миометрием в группе 1 отмечена соответственно в 50,0%, 54,5%, 27,3% и 4,5%, опытов, в группе 2 - в 42,1%, 36,8%, 26,3% и 0,0% опытов, а в группе 3 - в 50,0%, 10,0%, 40,0% и 10,0% опытов. Для разведения 1:103 выявлены достоверные различия, свидетельствующие о том, что в группе 3 эта активность наблюдается реже, чем в группе 1 (10,0% против 54,5%, р1-3<0,05). В опытах с миокардом, судя по изменению максимальной амплитуды сокращений, в группе 1 эта активность отмечена соответственно в 45,5%, 18,2%, 0,0% и 0,0% опытов; в группе 2 - в 42,1%, 5,3%, 0,0% и 0,0% опытов; в группе 3 - в 20,0%, 20,0%, 0,0% и 0,0% опытов (р1_2_3>0,1). Таким образом, вероятность наблюдения М-холиносенсибилизирующей активности в опытах с миометрием и миокардом снижалась с уменьшением кратности разведения. Эти данные указывают на наличие в крови ЭСМХР, который, вероятно, находится в ней в связанном состоянии. Показано, что его содержание, судя по результатам опытов с миометрием, снижено у женщин с артериальной гипертензией (группа 3).
Обсуждение результатов. Таким образом, результаты 48 серий исследований позволяют заключить, что в крови женщин с относительно благополучным течением беременности (группа 1) содержатся факторы, оказывающие прямое влияние на сократимость миометрия, в том числе ЭАСМ и ЭИСМ (содержание ЭАСМ выше, чем содержание ЭИСМ), а также связанные агонисты Р-АР, которые, оккупируя эти рецепторы, с одной стороны, могут ингибировать СА миоцитов матки, а с другой - приводить к десенситизации Р-АР. Кроме того, в крови содержатся ЭСБАР, ЭБМХР и ЭСМХР (при этом содержание ЭБМХР намного выше, чем содержание ЭСМХР). В тоже время на этом этапе репродуктивного процесса в крови у беременных женщин отсутствует ЭББАР.
При вегето-сосудистой дистонии (группа 2) повышено содержание ЭСБАР (в 10 раз), что установлено в опытах с миокардом, и содержание ЭБМХР (в 2 раза), что выявлено в опытах с миометрием. Не исключено, что более высокое содержание ЭСБАР обусловлено, учитывая данные [7,14], повышением уровня гистидина, а более высокое содержание ЭБМХР, судя по данным [8,12], обусловлено увеличением уровня лизофосфатидилхолина. Все это означает, что при вегето-сосудистой дистонии эффективность Р-адренергического воздействия на сердце может быть повышена, а эффективность М-холинергического воздействия - снижена. Кроме того, показано, что при этой патологии уменьшено содержание связанных агонистов Р-АР (выявлено в опытах с миокардом), что, учитывая данные [6], косвенно указывает на снижение продукции катехоламинов в мозговом слое надпочечников (возможно, как компенсация повышения интенсивности Р-адренергических влияний на сердце, или как первичное изменение, вызывающее в последующем ряд компенсаторных процессов, включая рост содержания ЭСБАР и ЭБМХР). Кроме того, при вегето-сосудистой дистонии снижено содержание ЭАСМ и ЭИСМ (это установлено в опытах с миометрием), что, вероятно, также способствует формированию этой патологии. Если предположение о повышении содержания лизофосфатидилхолина в крови при вегето-сосудистой дистонии верно (судя по повышению содержания ЭБМХР), то, учитывая другие эффекты этого вещества [8,22,23], можно предположить, что в этом случае возникает ряд нежелательных явлений (активация перекисного окисления липидов, снижение продукции N0 в эндотелиоцитах, повышение тонуса сосудов и сократимости миокарда), которые еще в большей степени нарушают функциональные возможности организма.
При изучении Р-адрено- и М-холиномодулирующей активности сыворотки крови удалось также показать, что при артериальной гипертензии снижено содержание связанных агонистов Р-АР (выявлено в опытах с миометрием), что, вероятнее всего, отражает снижение уровня катехоламинов под влиянием приема беременными женщинами анаприлина, так как известно [4], что Р-адреноблокаторы уменьшают продукцию катехоламинов. Нами также показано, что при артериальной гипертензии снижено содержание ЭБМХР и ЭСМХР (это установлено в опытах с миометрием) при сохранении обычного для беременности содержания ЭСБАР. Это означает, что при артериальной гипертензии эффективность Р-адренергического и М-холинергического воздействия на сердце существенно не меняется. В то же время при этой патологии, как показали опыты с миометрием, снижено содержание ЭАСМ и повышено содержание ЭИСМ. Эти данные позволяют заключить, что, скорее всего, артериальная гипертензия, наблюдаемая у исследуемых женщин, не связана с усилением Р-адренергических влияний на сердце, а является результатом чрезмерного влияния на гладкие мышцы сосудов известных гормонов-вазоконстрикторов при дефиците воздействия вазодилататоров, т.е. обусловлена повышением базального тонуса сосудов. С этих позиций не исключается, что выявленное нами повышение содержания в крови ЭАСМ при артериальной гипертензии является компенсаторным процессом, направленным на снижение базального тонуса сосудов. В целом же, вопрос о значении установленных изменений при вегето-сосудистой дистонии и при артериальной гипертензии требует дополнительного исследования.
Одним из важных результатов проведенного исследования, с нашей точки зрения, является обоснование положения о том, что ЭСБАР, находящийся в системе «мать-плод», способен повышать не только Р-адренореактивность миометрия, как предполагалось ранее [6,10,11,13,14,16], но и миокарда. Действительно, в опытах, проведенных параллельно на миокарде и миометрии, впервые показано, что ЭСБАР, а также ЭБМХР и ЭСМХР проявляют свое действие независимо от органной специфичности и характера влияния катехоламинов и ацетилхолина на деятельность органа. Все это углубляет представление о механизмах
регуляции деятельности сердца, в том числе о важном участии в этом процессе эндогенных модуляторов хемореактивности прямого действия - ЭСБАР и ЭБМХР, что, с нашей точки зрения, должно учитываться в клинической практике.
Опыты также позволяют считать, что миокард лягушки, подобно миометрию крысы, может быть использован для идентификации эндогенных модуляторов хемореактивности, в том числе ЭСБАР, ЭБМХР, ЭБМХР и ЭСМХР.
Выводы:
1 В опытах с миометрием крысы и миокардом лягушки при исследовании Р-адрено- и М-холиномодулирующей активности 104-, 103-, 500- и 100-кратных разведений сыворотки венозной крови беременных (20-40 нед) женщин показано, что эти разведения не влияют на хроно-инотропные отношения и сократимость миокарда, но изменяют сократительную активность миометрия, снижая или увеличивая ее, что говорит о наличии в крови связанных агонистов Р-АР, а также эндогенного активатора и эндогенного ингибитора сократимости миоцитов (ЭАСМ, ЭИСМ).
2. На миокарде и миометрии исследованные разведения сыворотки крови проявляли преимущественно Р-адреносенсибилизирующую и М-холиноблокирующую активность, реже - Р-адреноблокирующую и М-холиносенсибилизирующую активность, что говорит о наличии в крови эндогенного сенсибилизатора Р-адренорецепторов (ЭСБАР), эндогенного блокатора М-холинорецепторов (ЭБМХР), связанных агонистов Р-адренорецепторов (Р-АР) и эндогенного сенсибилизатора М-холинорецепторов (ЭСМХР).
3. При вегето-сосудистой дистонии содержание ЭСБАР и ЭБМХР повышено, а содержание связанных агонистов Р-АР, ЭАСМ и ЭИСМ - снижено; при артериальной гипертензии содержание ЭБМХР, ЭСМХР, связанных агонистов Р-АР и ЭАСМ снижено, а содержание ЭИСМ повышено. Не исключается, что выявленные изменения могут иметь отношение к патогенезу данных осложнений.
Список литературы:
1. Абрамченко В.В., Капленко О.В. Адренергические средства в акушерской практике. - СПб.: ТОО ТК «Петрополис», 2000.- 272 с.
2. Звездина Н.Д., Турпаев Т.М. Холинолитические свойства сыворотки крови. //Физиол. ж.урн. СССР им. И.М. Сеченова.- 1970.- Т.56, №8.- С.1136-1141.
3. Козинова О.Л. Нейроциркуляторная дистония и беременность // Акушерство и гинекология.- 2001.- №4.-С.5-6.
4. Красникова Т.Л., Габрусенко С.А. Р-адренергические рецепторы сердца в норме и при сердечной недостаточности. //Успехи физиол. наук.- 2000.- Т.31, №2.- С.35-50.
5. Люсов В.А. Инфаркт миокарда (вчера, сегодня, завтра): Актовая речь.- М., 1999- 96с.
6. Мальчикова С.В., Сизова Е.Н., Циркин В.И. и др. Содержание в сыворотке крови больных, перенесших острый коронарный инцидент, эндогенных факторов, изменяющих сократительную активность, Р-адрено- и М-холинореактивность гладких мышц, и влияние на него физических тренировок // Вятский медицинский вестник.- 2002.- № 3.- С. 42-54.
7. Ноздрачев А.Д., Туманова Т.В., Дворянский С.А. и др. Активность ряда аминокислот как возможных сенсибилизаторов Р-адренорецепторов гладкой мышцы // Доклады РАН. -1998.- Т.363, №1.- С.133-136.
8. Проказова Н.В., Звездина Н.Д., Суслова И.В и др. Влияние лизофосфатидилхолина на чувствительность сердца к ацетилхолину и параметры связывания хинуклидинилбензилата с мембранами миокарда // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова - 1998.- Т.84, №10.- С.969-978.
9. Рябыкина Г.В., Соболев А.В. Вариабельность ритма сердца.- М: Изд. "Стар'Ко", 1998. -215 с.
10. Сизова Е.Н., Циркин В.И., Дворянский С. А. Изучение роли эндогенных модуляторов хемореактивности в регуляции коронарного кровотока //Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова.- 2002.- Т.88, № 7.- С.856-864.
11. Сизова Е.Н., Циркин В.И., Трухин А.Н. Эндогенный М-холиносенсибилизатор как компонент системы эндогенных модуляторов хемореактивности // Физиологические проблемы адаптации: Мат. научн. конф.-Ставрополь: СГУ, 2003.- С.124.
12. Суслова И. В., Коротаева А. А., Проказова Н. В. Изменение параметров равновесного связывания [3Н]-хинуклидинилбензилата на мембранах предсердия кролика под действием лизофосфатиднлхолина //Доклады РАН.- 1995.- Т.342, №2.- С.273-276.
13. Циркин В.И, Дворянский С.А., Ноздрачев А.Д. и др. Адреномодулирующие эффекты крови, ликвора, мочи, слюны и околоплодных вод человека. //Доклады РАН.- 1997.- Т. 352, № 1.- С. 124-126.
14. Циркин В.И., Дворянский С. А. Сократительная деятельность матки (механизмы регуляции).- Киров, 1997.-270с.
15.Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Сизова Е.Н. и др. Система эндогенной модуляции, регулирующая деятельность периферических автономных нервных структур // Доклады РАН .-2002.- Т.383, № 5.- С.698-701.
16. Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Сазанова М.Л. и др. Утероактивные, Р-адреномодулирующие и М-холиномодулирующие свойства сыворотки пуповинной крови человека. // Доклады РАН. -2003- Т. 388, № 5.-С. 704-707.
17. Чазов Е.И, Меньшиков М.Ю., Ткачук В.А. Нарушения рецепции гормонов и внутриклеточной сигнализации при гипертонии. // Успехи физиол. наук.- 2000.- Т.31, №1.- С. 3-17.
18. Шехтман М.М. Руководство по экстрагенитальной патологии у беременных. М.: «Триада», 1999.- 816с.
19.Явелов И.С., Деев АД, Травина Е.Е., Грацианский Н.А. Прогностическое значение средней частоты сердечных сокращений и вариабельности ритма сердца, оцененных за короткое время в стандартных условиях в ранние сроки инфаркта миокарда // Кардиология.- 1999.- Т.39,№6. - С.6-15.
20. Castellano M., Bohm M., The cardiac P-adrenoceptor-mediated signaling pathway and its alterations in hypertensive heart disease // Hypertension.- 1997.- V. 29, №3.- P.715-722.
21.Doggrell S.A., Petcu Eugen B., Barnett C.W., Affinity constants and P-adrenoceptor reserves for isoprenaline on cardiac tissue from normotensive and hypertensive rats // J. Pharm. and Pharmacol.- 1998 .V.50, №2.- P.215-223.
22. Kikuta K., Sawamura T., Miwa S. et al. High-affinity arginine transport of bovine aortic endothelial cells is impaired by lysophosphatidylcholine // Circ. Res. - 1998.-V.82, №11.- P.1088-1096.
23.Yamakawa T., Eguchi S., Yamakawa Y. et al Lysophosphatidylcholine stimulates MAP kinase activity in rat vascular smooth muscle cells //Hypertension.- 1998.-V.31, №1.- P.248-253.
A, 10 Mil
РИНГЕР АДР (i РИНГЕР CBK 1:100 CBK 1:100+АДР б РИНГЕР
АДР6
РИНГЕР
АЦХб
РИНГЕР
СВК 1:100 СВК 1:100 +АЦХб РИНГЕР
АЦХб
Рис. Механограммы продольных полосок рога матки небеременной крысы (панели А и В) и изолированного сердца лягушки (панели Б и Г), демонстрирующие ß-адреносенсибилизирующий эффект (панель А и Б) и М-холиноблокирующий эффект (панели В, Г) 100-кратных разведений сыворотки венозной крови (СВК 1:100) беременных женщин. Горизонтальные линии под механограммами отражают момент воздействия раствора Рингера, СВК 1:100, адреналина в концентрациях 10-8 г/мл (АДР 8)и 10-6 г/мл (АДР 6) и ацетилхолина в концентрации 10-6 г/мл (АЦХ 6). На панелях Б и Г сокращения сердца индуцированы одиночными электростимулами (5мс, 5В), идущими в 30-секундной серии с частотой 1Гц.
