CC BY
103
образованием богатой капиллярами и клетка- генной стимуляцией аллогенным липидосо-
ми созревающей соединительной ткани и зре- держащим препаратом. Инволюция макрофа-
лых гистиоцитарно-макрофагальных липо- гальной гранулемы, образующейся вокруг
гранулем, заполняющих образовавшиеся тка- депо липидосодержащего препарата, была
невые дефекты. очень медленной из-за постоянного присутст-
После введения жиросодержащей фор- вия антигенного раздражителя, каким являет-
мы препарата в сроки от 7 до 28 суток наблю- ся жиросодержащая форма препарата, и низ-
далось относительно стабильное состояние кой обновляемости клеток гранулем.
гранулемы, что объясняется постоянной антиСведения об авторах статьи:
Хамитова Гульшат Валиевна - к.м.н., доцент кафедры акушерства и гинекологии Казанского государственного медицинского университета (410012, г. Казань, ул. Бутлерова, 49)
Лиходед Валерий Алексеевич - д.м.н., проф., зав. каф. Фармацевтической технологии с курсом биотехнологии Башкирского государственного медицинского университета (г. Уфа, ул. Летчиков, 1, р.тел. 278-12-09)
Хуснутдинов Шамиль Масгутович - к.м.н., доцент кафедры онкологии с курсом ИПО Башкирского государственного медицинского университета (450054, г. Уфа, пр. Октября, 73/1).
ЛИТЕРАТУРА
1. Cytoreductive surgery in ovarian cancer/ Pomel C., Jeyarajah A., Oram D. [et al.] //Cancer Imaging. 2007 Dec 17;7:210-5.
2. Heated intraoperative intraperitoneal mitomycin C and early postoperative intraperitoneal 5-fluorouracil: pharmacokinetic studies/ Jacquet P., Averbach A., Stephens A.D. [et al.] //Oncology. 1998 Mar-Apr;55(2):130-8
3. Intraperitoneal chemotherapy for ovarian cancer: overview and perspective /Rao G, Crispens M, Rothenberg ML. [et al.] // J Clin Oncol. 2007 Jul 10;25(20):2867-72
4. Intraperitoneal Chemotherapy in Patients with Advanced Ovarian Cancer: The Con View / Vergote I., Amant F., Leunen K. [et al.] // The Oncologist. - 2008. -Vol. 13, No. 4, 410-414;
5. Intraperitoneal chemotherapy with taxanes for ovarian cancer with peritoneal dissemination /de Bree E,, Rosing H,, Michalakis J. [et al.] //Eur J Surg Oncol. 2006 Aug;32(6):666-70
6. Phase II study of intraperitoneal recombinant interleukin-12 (rhIL-12) in patients with peritoneal carcinomatosis (residual disease < 1 cm) associated with ovarian cancer or primary peritoneal carcinoma /Lenzi R., Edwards R., June C.//J Transl Med. 2007 Dec 12;5:66.
7. The addition of extensive upper abdominal surgery to achieve optimal cytoreduction improves survival in patients with stages IIIC-IV epithelial ovarian cancer /Eisenhauer E.L., Abu-Rustum N.R., Sonoda Y. [et al.] //Gynecol Oncol. 2006 Dec;103(3):1083-90.
8. The effect of maximal surgical cytoreduction on sensitivity to platinum-taxane chemotherapy and subsequent survival in patients with advanced ovarian cancer /Eisenhauer E.L., Abu-Rustum N.R., Sonoda Y. [et al.] //Gynecol Oncol. 2008 Feb;108(2):276-81.
УДК 577.12:543.635.353:612.122.2:616-006.81-092.9 © Ф.Д. Зайнуллин, Ш.Х. Ганцев, Л.Н. Кудряшова, 2010
Ф.Д. Зайнуллин, Ш.Х. Ганцев, Л.Н. Кудряшова ВЛИЯНИЕ ПОЛИНЕНАСЫЩЕННЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ З-ОМЕГА ТИПА НА БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СЫВОРОТКИ КРОВИ, ПЕЧЕНИ И МЫШЦ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ С ПЕРЕВИВНЫМИ ОПУХОЛЯМИ
ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава», г. Уфа
В работе представлены результаты влияния полиненасыщенных жирных кислот омега-3 типа на содержание белка, липидов и гликогена в сыворотке крови, печени, мышцах, а также на вес и продолжительность жизни лабораторных белых мышей с моделированной меланомой В16.
Ключевые слова: полиненасыщенные жирные кислоты омега-3, меланома, белок, гликоген, липиды.
F.D. Zajnullin, Sh.H. Gantsev, L.N. Kudryashova INFLUENCE OF POLYNONSATURATED FAT ACIDS 3-OMEGA TYPE ON BIOCHEMICAL INDICATORS WHEY OF BLOOD, LIVER AND MUSCLES IN EXPERIMENT WITH REPLACED TUMOURS
In work results of research of influence of polynonsaturated fat acids a type omega-3 on the maintenance of fiber, lipids and a glycogen in whey of blood, a liver, muscles, and also on weight and life expectancy at laboratory white mice, the replaced are presented by a tumors of melanoma B16.
Key words: polynonsaturated fat acids an omega-3, a melanoma, fiber, a glycogen, lipids.
Полиненасыщенные жирные кислоты (ПНЖК) омега-3 типа - это эссенциальные нутриенты, основными пищевыми источниками которых являются рыба, нерыбные морепродукты и льняное масло. Повышенное внимание за последние годы к жирным кисло -там омега-3 типа объясняется их способностью обладать противоопухолевой и антиме-тастатической активностью (Беспалов В.Г., 2008).
Главными механизмами противоопухолевой и антиметастатической активности ПНЖК омега-3 типа является их способность вызывать оксидантное повреждение, тормозить ангиогенез, ингибировать экспрессию онкогенов (Беспалов В.Г., 2008), регулировать гены и факторы транскрипции, индуцирующие апоптоз в опухолевых клетках различного гистогенеза, стимулировать реакции противоопухолевого иммунитета (Хорошилов И.Е., 2005).
Антиканцерогенное действие ПНЖК омега-3 типа объясняется и тем, что они тормозят превращение арахидоновой кислоты в простагландины, которые стимулируют рост опухолей, ингибируют активность циклоокси-геназ, липоксигеназ, протеинкиназ и фосфо-липаз - ферментов, способствующих опухолевой трансформации (Barber M.D., 2001).
Полезным эффектом являются свойства жирных кислот разжижать кровь, обеспечивать снижение ее вязкости, снижать риск образования опухолевых эмболов в кровеносных сосудах, затруднять процессы адгезии опухолевых клеток и инвазии, то есть препятствовать метастазированию. (М.И. Давыдов, Ш.Х.Ганцев, 2010).
ПНЖК омега-3 типа могут быть полезны как вспомогательные средства при лечении онкологических больных. Экспериментальными исследованиями доказано, что ПНЖК омега-3 типа повышают чувствительность клеток злокачественных опухолей к лучевой терапии и цитостатикам (Попова Т.С., 2002) .
Нами проведены экспериментальные работы на белых лабораторных мышах с моделированной опухолью меланомы В16.
Цель нашего исследования - определить влияние ПНЖК 3-омега типа на биохимические показатели сыворотки крови, печени и мышц, вес и продолжительность жизни у белых лабораторных мышей с моделированной опухолью меланомы В16.
Материал и методы
Для эксперимента использовалась 21 лабораторная белая мышь, животные были разделены на три группы:
1-я группа - (контрольная) интактные мыши, получавшие обычный корм;
2-я группа - мыши с моделированной опухолью меланомы В16, получавшие обычный корм;
3-я группа - мыши с моделированной опухолью меланомы В16, получавшие обычный корм и ПНЖК омега-3 типа внутрижелу-дочно.
Перевивание опухоли меланомы В16 производилось методом иньекции клеток в брюшную полость (рис.1). С целью создания одинаковых условий мышам 1-й группы в брюшную полость вводился физиологический раствор 0,9% - 1,0 мл.
Рис.1. Моделирование опухоли меланомы В16 на белых лабораторных мышах.
Наблюдение за лабораторными мышами осуществлялось в течение 39 дней. Внутри-желудочное введение ПНЖК омега-3 типа по 4 мг производилось ежедневно с помощью специально изготовленной иглы (рис.2).
Рис.2. Внутрижелудочное введение полиненасыщенных жирных кислот омега-3 лабораторным белым мышам с моделированной опухолью меланомы В16.
С первого дня эксперимента велся учет веса, с этой целью каждые 2 дня производилось взвешивание мышей всех 3 групп на электронных весах. За время проведения эксперимента во 2-й и 3-й группах умерли по 2 мыши. В 2-й на 14 и 26-й дни, в 3-й на 16 и
32-й дни. В качестве биологического материала после умерщвления были взяты ткани печени, мышц и кровь.
В экспериментах животные использовались согласно международным и российским этическим принципам и нормам биоэтики (Хельсинская декларация Всемирной медицинской ассоциации, 1964; Европейская конвенция по биоэтике, 1996; Основы законодательства РФ, 1999).
Результаты и обсуждения Как было сказано выше, исследованию были подвергнуты ткани печени, мышц и кровь лабораторных мышей всех трех групп.
Учитывая важность состояния белкового обмена, у лабораторных белых мышей определено содержание общего белка в печени, мышцах и сыворотке крови. Результаты представлены в табл. 1.
Таблица 1
Общий белок в печени, мышце, сыворотке крови, г/л
Количество мышей Группа 1 Группа 2 Группа 3
печень мышцы кровь печень мышцы кровь печень мышцы кровь
1 60,3 73,5 40,5 20,4 40,3 19,2 30,4 30 20,5
2 70,3 60,4 50,6 30,3 20,5 12,8 45,5 50,4 30,4
3 40,9 50,5 39 23,4 24 16,6 40,6 48,5 28,7
4 58,5 40,5 44,5 40,5 20 25,5 50,5 50,6 30,6
5 74,7 60,8 50,8 - - 28,4 50 49,2 29,4
6 60,3 70,3 37,6 - - - - - -
7 70,5 60,4 40,5 50,4 32 - - - -
М±т 62±4,2 59±4,2 43,2±2,1 32,6±5,6 27,2±3,8 20,4±2,7 43,2±3,7 45,6±39,9 27,8±1,9
В ходе исследования выяснилось, что среднее количество общего белка значительно отличается во всех группах животных как в тканях печени и мышц, так и сыворотке крови.
Как видно из табл. 1, средний показатель общего белка у лабораторных мышей контрольной группы составил: в печени -62±4,2г, в мышцах - 59±4,2г, в сыворотке крови - 43,2±2,1г; 2-й группы (не получавшие ПНЖК 3-омега типа) соответственно в печени - 32,6±5,6г, в мышцах - 27,2±3,8г, в сыворотке крови - 20,4±2,7г, мышей 3-й группы (получали ПНЖК 3-омега типа), вышеуказанный показатель распределился следующим образом: в печени - 43,2±3,7г, в мышцах - 45,6±39,9г, в сыворотке крови - 27,8±1,9г. Из этого следует, что у лабораторных мышей с моделированной опухолью меланомы В16 и получавших ПНЖК 3-омега типа содержание общего белка ниже, чем в контрольной группе, но превышает вышеуказанный показатель по сравнению со 2-й группой. Таким образом, превышение среднего показателя общего белка у лабораторных мышей 3-й группы по сравнению со 2-й в печени на 17,1%, в мышцах на 31,1%, в сыворотке крови на 14,3%.
Не менее важным, с нашей точки зрения, является определение липидного обмена, поэтому следующим этапом нашего исследования было определение содержания липидов в печени и мышцах у лабораторных белых мышей (табл. 2).
Нами установлено, что содержание липидов в печени и мышцах у экспериментальных мышей контрольной группы и с моделированной опухолью меланомы В16 разное.
Таблица 2
Содержание липидов в печени и мышцах, мг%__________
Количество мышей Группа 1 Группа 2 Группа 3
печень мышцы печень мышцы печень мышцы
1 30 16 18,2 10 23 13,6
2 40 22,5 24 14,3 30,2 12,3
3 34 25 19,8 19 28,6 18
4 38 11 22 16 36,1 15,1
5 39 17 - - 29,8 19,2
6 37 18 - - - -
7 35 14 31 18 - -
М±т 36,1±1,2 17,5±1,7 23±2,2 15,4±1,6 29,4±2,0 15,6±1,2
Что касается содержания липидов в печени (табл. 3), то в контрольной группе показатель составил - 36,1±1,2мг%, во 2-й -23±2,2мг%, в 3-й - 29,4±2,0мг%. Таким образом, если у лабораторных мышей, получавших жирные кислоты 3-омега типа, средний
показатель липидов в печени ниже на 6,7мг%, то у мышей 2-й группы на - 13,1мкг% по сравнению с контрольной группой. В итоге средний показатель липидов у мышей с моделированной опухолью меланомы В16 3-й группы выше такового во 2-й на 17,7%.
Уровень содержания липидов в мышечной ткани изменяется незначительно, если в контрольной группе составляет 17,5±1,7мг%, то во 2-й и 3-й 15,4±1,6 и 15,6±1,2мг% соответственно. Причем снижение содержание липидов в мышцах происходит равномерно у лабораторных белых мышей с моделированной опухолью меланомы В16 и не зависит от приема ПНЖК 3- омега типа.
Во время исследования проводилось изучение тканей печени и мышц животных на содержание гликогена (табл. 3).
Таблица 3
Содержание гликогена в печени и мышцах, мг%
Исходя из таблицы 3, содержание гликогена в печени у интактных мышей (получали обычный корм) составило 3357±261мг%, у мышей 2-й группы с моделированной опухолью меланомы В16 2-й группы -
1421±65мг% и 3-й группы - 1635мг%. Из представленных данных следует, что у лабораторных белых мышей с перевивной опухолью меланомы В16 содержание гликогена в печени в 2 раза ниже. Причем если у лабораторных мышей 2-й группы (получали обычный корм) средний показатель гликогена ниже по сравнению с контрольной на 57,7%, то у мышей 3-й группы (получали обычный корм и ПНЖК кислоты 3-омега типа) на 51,3%.
Этого нельзя сказать о среднем показателе гликогена, содержащемся в мышцах мышей и если в контрольной группе он равен 350 мг%, то во второй и третьей 232 и 200 мг% соответственно. Средний показатель гликогена в мышцах у мышей получавших ПНЖК 3-омега типа, ниже такового у лабораторных мышей с моделированной опухолью меланомы В16 и получавших обычный корм -на 9,1 %.
Масса тела - один из важнейших показателей, отражающих жизнедеятельность живого организма. Как было сказано выше, во время эксперимента проводился строгий кон-
троль за прибавлением веса лабораторных белых мышей всех трех групп (рис. 3). Взвешивание мышей производилось до кормления и введения ПНЖК 3-омега типа внутрижелу-дочно перед началом исследования и в последующем каждые два дня.
3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37
1 группа 2 группа 3группа
Рис.3. Средняя скользящая средних показателей прибавления веса у лабораторных мышей.
Как видно из рис. 3, за первые три дня исследования вес лабораторных белых мышей с моделированной опухолью меланомы В16 увеличился на 2,17 и 2,27 г соответственно, что в три раза больше по сравнению с мышами 1-й группы (0,79 г). Это объясняется, с нашей точки зрения, тем, что мышам 2-й и 3-й групп в первый день исследования проведена внутрибрюшинная инъекция взвеси клеток меланомы В16. Вес содержимого инъекции составил 1,5±0,3г.
В последующие 10 дней белые лабораторные мыши всех групп прибавляли вес, но мыши контрольной группы прибавляли вес в два раза быстрее, средняя прибавка в весе за 3 дня составляла по 1,2 г. Что касается мышей с моделированной опухолью меланомы В16, то увеличение веса у них происходило с постепенным снижением среднего показателя с
0,81 до - 0,03 г во 2-й и с 0,67 до 0,23 г в третьей группах. На 13-й день исследования вес мышей всех трех групп сравнялся и составил 18,63; 18,83; 18,61г соответственно.
Начиная с 13-го дня, лабораторные мыши 1-й группы прибавляли вес по 0,2 г каждые три дня до конца исследования, и к концу эксперимента средний вес одной мыши составлял 22,71±0,16 г. Этого нельзя сказать про мышей других групп, так как с 23 дня начинается увеличение веса за счет интенсивного роста опухоли (рис. 4). Хотелось бы отметить, что увеличение веса во второй половине исследования отмечается у всех мышей с моделированной опухолью меланомы В16, но у мышей, получающих ПНЖК 3-омега типа увеличение веса шло меньшими темпами. Так, если мыши 2-й группы каждые три дня прибавляли по 0,42г и к концу исследования средний вес мыши составил 24,58±0,23г, то мыши 3-й группы прибавляли по 0,31г, и
Количество мышей Группа 1 Группа 2 Группа 3
печень мышцы печень мышцы печень мышцы
1 4635 417 1613 264,2 1738 311,4
2 2433 204 1335 180,7 1668,6 155,7
3 3337 259,6 1418 292 1918 283,6
4 3754 431 1501,7 222,5 1182 222,5
5 3152 347,6 - - 1672 125,8
6 2967 353 - - - -
7 3221 437 1237,5 200,2 - -
М±т 3357±261 350±33 1421±65 232±20 1635±122 200±31
средний вес к концу исследования составил 23,43±0,13г.
Рис.4. Опухоль меланомы брюшной полости у лабораторной белой мыши на 39-й день исследования.
Таким образом, на 39-й день исследования средний вес мышей, получающих ПНЖК омега-3 типа, выше чем средний вес мышей контрольной группы на 0,42 г, но ниже среднего веса 2-й группы на 1,15 г. То, что вес мышей 3-й группы меньше, доказывает, что рост опухоли у мышей этой группы происходил меньшими темпами.
Что касается продолжительности жизни у лабораторных мышей - за время эксперимента умерли по две мыши с перевивными опухолями меланомы В16 во 2-й и 3-й группах. Средний возраст мышей контрольной
группы 39 дней (100%); 2-й группы с моделированной опухолью меланомы В16 получавших обычный корм, 33дня (84,6%); 3-й группы с моделированной опухолью меланомы В16, получали ПНЖК 3-омега типа, 34 дня (87,1%).
Выводы
1. Применение ПНЖК 3-омега типа у белых лабораторных мышей с моделированной опухолью меланомы В16 значительно улучшает показатели общего белка в печени, мышцах и сыворотке крови; липидов в печени и мышцах; гликогена в печени и не влияет на содержание гликогена в мышцах.
2. Увеличение среднего веса у белых лабораторных мышей с моделированной опухолью меланомы В16 во второй половине исследования происходит за счет интенсивного роста перевивной опухоли. Рост опухоли у мышей, получавших ПНЖК омега-3 типа, происходит меньшими темпами.
3. Продолжительность жизни у лабораторных белых мышей с моделированной опухолью меланомы В16, получающих ПНЖК 3-омега типа дольше по сравнению с лабораторными мышами с моделированной опухолью меланомы В16 и получавших обычный корм.
Сведения об авторах статьи:
Зайнуллин Финар Динарович - аспирант кафедры хирургии и онкологии с курсами онкологии и патологической анатомии ИПО БГМУ, т.(347)248-53-03, e-mail: zfmar@mail.ru.
Ганцев Шамиль Ханафиевич — Член корр. АН РБ, Заслуженный деятель науки РБ, РФ, профессор, зав. кафедрой хирургии и онкологии с курсами онкологии и патологической анатомии ИПО БГМУ,
450000, гУфа, ул. Ленина, 3. Тел. (347) 248-32-07.
Кудряшова Любовь Николаевна - к.м.н., ассистент кафедры хирургии и онкологии с курсами онкологии и патологической анатомии ИПО БГМУ, т.(347)248-53-03, e-mail: Lubov. Kudrvshova@vandex.ru
ЛИТЕРАТУРА
1. Беспалов, В.Г. Питание и рак. Диетическая профилактика онкологических заболеваний. - М., 2008. - 176 с.
2. Давыдов, М.И. Онкология: Учебник для студентов медицинских вузов. М.И. Давыдов, Ш.Х.Ганцев- М.: ООО «МИО», 2010. - 520 с.
3. Попова, Т.С. Нутритивная поддержка больных в критических состояниях. Т.С. Попова, А.Е. Шестопалов, Т.Ш. Тамазашвили, И.Н. Лейдерман - М.: Издат. Дом «М-Вести», 2002. —320 с.
4. Хельсинская декларация Всемирной медицинской ассоциации, 1964; Европейская конвенция по биоэтике, 1996; Основы законодательства РФ // Ведомости съезда народных депутатов РФ и ВС РФ. - 1993.-№33.
5. Хорошилов, И.Е. Энтеральное питание в гастроэнтерологии: вчера, сегодня, завтра // Фар-матека. - 2005. - Т. 14; №109. - 32 с.
6. Barber, M.D. Cancer cachexia and its treatment with fish-oil-enriched nutritional supplementation // Nutrition 17 (2001) 751-755.
