CC BY
0
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
Мамаева Е. А., Фирсова М. В., Соловьев М. В., Абакумова А. В., Старцев А. А., Макунина Э. А., Ковригина А. М., Данилина Т. П.,
Обухова Т. Н., Абрамова Т. В., Менделеева Л. П.
МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ РАЗЛИЧИЯ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК В КОСТНОМ МОЗГЕ И СУБСТРАТЕ КОСТНОЙ
ПЛАЗМОЦИТОМЫ ПРИ ПЛАЗМОКЛЕТОЧНОЙ МИЕЛОМЕ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Хромосомные аберрации высокого риска t(4;14) и t(14;16) при плазмоклеточной миеломе (ПМ) выявляются у 15% и 5% больных ПЖ соответственно и являются фактором неблагоприятного прогноза. t(ll;14) встречается в 21% случаев и относится к цитогенетическим аномалиям стандартного риска. Показано, что у 38% больных ПЖ с костными плазмоцитомами опухолевое поражение костного мозга представлено единичными плазматическими клетками (Фирсова М.В., 2017). Это создает трудности в определении цитогенетических факторов неблагоприятного прогноза. Определение экспрессии белков — продуктов онкогенов NSD2, c-Maf и циклина D1 иммуногистохимическим (ИГХ) методом на биопсийном материале костных плазмоцитом может рассматриваться как косвенный признак наличия хромосомных аберраций.
Цель работы. Определить частоту экспрессии белков — продуктов онкогенов NSD2, c-Maf и циклина D1 в субстрате костной плазмоцитомы с помощью ИГХ-исследования, сопоставить с результатами цитогенетического исследования CD138+ клеток костного мозгау больных ПЖ.
Материалы и методы. В ретроспективное исследование включен 21 пациент с ПЖ (7 мужчин, 14 женщин) в возрасте от 24 до 63 лет (медиана 57 лет), у которых в дебюте заболевания выявлены костные плазмоцитомы. Всем пациентам выполнены рутинные лабораторные исследования, низкодозная КТ костей скелета. 7 пациентам выполнено цитоге-нетическое исследование CD138+ клеток костного мозга методом флюоресцентной ¿я éita гибридизации (FISH). Всем больным проведено ИГХ-исследование биоптатов костных плазмоцитом с использованием антител к CCND1, NSD2, с-ЖАЕ
Результаты и обсуждение. По результатам ИГХ-исследования биоптатов костных плазмоцитом экспрессия белков — продуктов онкогенов не выявлена в 5 случаях (23,8%). Экспрессия белка NSD2 выявленау 7 больных (33,4%), экспрессия циклина D1 — уб больных (28,6%). При этом соче-танная экспрессия 2 белков (NSD2 и c-Maf) определена в 1 случае (7,1%), 3 белков — в 1 случае (7,1%). У 7 пациентов сопоставлены результаты цитогенетического исследования клеток костного мозга и ИГХ-исследования биоптатов костных плазмоцитом (табл.). В случаях 1—3 выявлена положительная корреляция между двумя методами, что характеризует метод ИГХ как высокочувствительный способ определения маркеров высокого риска у больных ПЖ. В случаях 4—5 при отсутствии цитогенетических аберраций в костном мозге выявлена экспрессия белков NSD2 и циклина D1 в биоптате костной плазмоцитомы. В случаях 6—7 в плазматических клетках костного мозга выявлена t(4;14), а в субстрате костной плазмоцитомы — сочетанная экспрессия 2 или 3 белков — продуктов онкогенов (рис.), что может свидетельствовать об активации другого опухолевого клона плазматических клеток в костной плазмоцитоме.
Таблица. Сопоставление результатов цитогенетического исследования клеток костного мозга методом FISH и иммуногистохимического исследования биоптатов костной плазмоцитомы у больных ПМ
№ пациента Частота выявления цитогенетических аберраций среди CD138+ клеток костного мозга (метод FISH) Наличие экспрессии белков — продуктов онкогенов в биоптате костной плазмоцитомы
t(4;14) t (11;14) t (14;16) NSD2 Циклин D1 C-Maf
1 0% 70% 0% +
2 90% 0% 0% +
3 0% 80% 0% +
4 0% 0% 0% +
5 0% 0% 0% +
6 90% 0% 0% + +
7 70% 0% 0% + + +
Заключение. Частота экспрессии белков NSD2 и циклина D1 в субстрате костной плазмоцитомы больных ПМ составила 33,4 и 28,6% соответственно. Проведенное сопоставление хромосомных аберраций, выявленных методом FISH в костном мозге, и экспрессии белков — продуктов онкогенов в субстрате костной плазмоцито-мы может свидетельствовать о клональной гетерогенности ПМ и активации разных опухолевых клонов при костных плазмоцитомах.
Мангасарова Я. К., Давыдова Ю. О., Гальцева И. В., Тихомиров Д. С., Туполева Т. А., Кравченко С. К.
ВЛИЯНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО СТАТУСА ПАЦИЕНТА С ЛИМФОМОЙ НА РЕАКТИВАЦИЮ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ ПОСЛЕ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АУТОЛОГИЧНЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Пациенты с лимфомами после трансплантации относятся к высокой группе риска по герпес-вирусной инфек-аутологичных гемопоэтических стволовых клеток (ауто-ТГСК) ции на фоне вторичной иммунной недостаточности. Остаются
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2022; ТОМ 67; №2 |
неизвестны сроки манифестации герпес-вирусной инфекции в период после ауто-ТГСК и иммунный статус пациентов.
Цель работы. Оценить частоту встречаемости ДНК вирусов герпеса человека (CMV, HSV1, -2, HHV6, EBV) в различных биологических жидкостях на разных этапах ауто-ТСГК (режим кондиционирования СЕАМ), изучить иммунные факторы, влияющие на реактивацию исследуемых вирусов.
Материалы и методы. С 2019 по 2021 г. в ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России ауто-ТСГК (режим кондиционирования СЕАМ) в полной ремиссии заболевания выполнена 87 больным с лимфомами. Вирусную репликацию (CMV, HSV1, -2, HHV6 и EBV) определяли ПЦР-РВ в различных биологических жидкостях (кровь, кал, слюна) и субпопуляционный состав лимфоцитов и концентрацию иммуноглобулинов классов М, G, А перед началом режима кондиционирования, на «+5» и «+10» день ауто-ТСГК.
Результаты и обсуждение. На разных этапах ауто-ТСГК в различных биологических жидкостях вирусная репликация была выявлена в 42% случаев:
• до ауто-ТСГК репликация вирусов была выявлена в 9% случаев;
• «+5» день после ауто-ТСГК вирусная репликация в крови не детектировалась при наличии репликации в иных биологических жидкостях (слюна, кал, моча, БАЛ): HSV1, -2 — у 9%, HHV6 - у 13%, CMV - у 1%, EBV - у 3%;
• «+10» день после ауто-ТСГК вирусные ДНК в различных биологических жидкостях определялись у 42% больных: HSV1,
-2 - 16%, ННУ6 - 23%, CMV - 2%, EBV - 1%. Оценено влияние таких факторов, как концентрация иммуноглобулинов классов М, О, А и субпопуляционного состава лимфоцитов. Статистически значимыми оказались лишь два фактора — это доля В-клеток от всех лимфоцитов и абсолютное содержание В-клеток в крови, измеренные до выполнения ауто-ТГСК. Медиана доли В-клеток у пациентов, у которых после ауто-ТГСК обнаруживались герпес-вирусы, составила 0,26%, а в группе пациентов без вирусной инфекции — 6,7% (р=0,019). Медиана абсолютного содержания В-клеток до ауто-ТГСК в группе пациентов с выявляемыми вирусами после ауто-ТГСК составила 0,001 х 109/л, а в группе пациентов без вирусной инфекции — 0,098 х 109/л (р=0,026). КОС-кривые для этих значимых параметров субпопуляционного состава лимфоцитов показали, если до ауто-ТГСК доля В-клеток была <1,5%, то вероятность обнаружения вирусов составляла 86%, а если доля В-клеток была > 1,5%, то вирусыу пациентов не обнаруживались в течение 10 дней после ауто-ТГСК (р=0,0095).
Заключение. Наиболее часто у пациентов с лимфомами после ауто-ТСГК наблюдалась реактивация HSV1, -2 и HHV6 в 16 и 23% соответственно. Частота выявления вирусной репликации увеличивалась с 26 до 42% в период восстановления гранулоцит-поэза на «+10» день. В период миелотоксического агранулоцито-за ДНК герпес-вирусов не определялась в крови, но выявлялась в иных биологических жидкостях. Одним из предикторов реактивации вирусной инфекции может служить снижение В-клеток от всех лимфоцитов и абсолютное содержание В-клеток в крови перед ауто-ТСГК.
Мангасарова Я. К.1, Шмаков Р. Г.2, Кравченко С. К.1
АГРЕССИВНЫЕ ЛИМФОМЫ У БЕРЕМЕННЫХ
1ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава России, 2ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства,
гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России
Введение. Редкая встречаемость агрессивных лимфом во время беременности, отсутствие единых подходов к лечению данных пациенток и информации о физическом развитии детей, частоты врожденной и приобретенной патологии новорожденных делает данную проблему актуальной.
Цель работы. Анализ результатов лечения больных агрессивными лимфомами, диагноз которым впервые установили на разных сроках беременности.
Материалы и методы. С 1993 по 2021 г. на лечении в ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России находились 82 беременные женщины с лимфомами, из них 22 (27%) с агрессивными: первичная медиастинальная В-клеточная крупноклеточная лимфома (ПМВКЛ) (п=14), анапластическая крупноклеточная АЬК+ лимфома (п=1), В-клеточная крупноклеточная лимфома (п=7). Медиана
возраста пациенток составила 30 (21—37) лет. Медиана срока беременности на момент диагностики агрессивной лимфомы составила 22 недели (диапазон 11—32), 2 беременности были многоплодными.
Результаты и обсуждение. Химиотерапию в зависимости от варианта лимфомы (К+БА-ЕРОСН-21, УАСОР-В, К+СНОР-21, СНОЕР) во время беременности проводили в 86% случаев, 14% — в послеродовом периоде. Родилось 24 ребенка: 11 мальчиков, 13 девочек.
Заключение. В результате выбранной тактики и работы междисциплинарной команды врачей 21 пациентка завершила лечение и находится в полной ремиссии заболевания. Одна пациентка умерла в прогрессии заболевания. Все рожденные дети, несмотря на химиотерапию и выявленные у них перинатальные осложнения, живут без каких-либо отклонений в развитии.
Масликова У. В., Хамаганова Е. Г., Дроков М. Ю., Урыбин И. Ю., Михльцова Е. Д., Старикова О. С., Попова Н. Н., Конова З. В., Довыденко М. В., Королева О. М., Дубняк Д. С., Дмитрова А. А., Васильева В. А., Кузьмина Л. А., Паровичникова Е. Н.
ВЛИЯНИЕ «НАИЛУЧШЕГО« ГЕНОТИПА КИЛЛЕРНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНОПОДОБНОГО РЕЦЕПТОРА НА РАЗВИТИЕ НЕСОСТОЯТЕЛЬНОСТИ ТРАНСПЛАНТАТА У РЕЦИПИЕНТОВ АЛЛОГЕННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Натуральные киллеры (НК) — клетки врождённой иммунной системы, которые первыми восстанавливаются после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) и играют важную роль в контроле над опухолью и защите от инфекций в ранний посттрансплантационный период. Функциональная активность НК-клеток зависит от наличия на их поверхности киллерного иммуноглобулиноподобного рецептора (КНР). В норме ингибирующий КНР распознаёт собственные клетки НЬА и не повреждает их. Однако в случае алло-ТГСК име-ется мисматч в генах КНР и их лигандах, т.к. НЬА и КНР кодируются на разных хромосомах и наследуются не связанно. Таким образом, возможно негативное влияние тех или иных КНР реципиента в направлении «хозяин против трансплантата». Условно
гены КИР разделены на три группы — «наилучшая», «лучшая», «нейтральная».
Цель работы. Изучить влияние «наилучшего» иммуноглобулиноподобного рецептора на развитие несостоятельности транс-плантатау реципиентов аллогенных гемопоэтических стволовых клеток при злокачественных и незлокачественных заболеваниях по сравнению с «лучшими» и «нейтральными» КИР
Материалы и методы. В исследовании были проанализированы образцы крови 66 реципиентов гемопоэтических стволовых клеток. Генотипирование осуществляли методом полимеразной цепной реакции с сиквенс-специфическими праймерами (PCR-SSP) с использованием наборов KIR Genotyping SSP Kit (IBAG Healthcare, Germany). Оценивалось влияние наличия «наилучшего»
