CC BY
74
Русакова Е.А., Лебедев С.В., Косян Д.Б., Копанева Н.Ю.
Оренбургский государственный университет Е-mail: inst_bioelement@mail.ru
ВЛИЯНИЕ ФИТАЗЫ НА МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ ПРИ РАЗЛИЧНОМ УРОВНЕ ФОСФОРА В РАЦИОНЕ
В статье представлены данные экспериментальных исследований влияния ферментного препарата Ронозим NT (CT) на морфологические и биохимические показатели крови при различном уровне фосфора в рационе подопытной птицы. Биохимический анализ крови подтверждает положительное влияние препарата Ронозим NT (CT) на пластические процессы цыплят-бройлеров (синтез белка, обеспеченность кальцием и фосфором) и состояние эритрона.
Ключевые слова: фитаза, цыплята-бройлеры, кровь, гемоглобин, эритроциты, общий белок, мочевина, креатинин, Ронозим NT (CT), фосфор, кальций.
Проблема полноценного питания птицы современных высокопродуктивных кроссов актуальна на сегодняшний день. В условиях техногенных нагрузок приоритетной задачей является поиск средств и способов повышения защитных сил организма, способствующих увеличению продуктивности. Кормовые добавки, содержащие различные компоненты - витамины, микро- и макроэлементы, ферменты, пробиотики, антибиотики, антиоксиданты, вкусовые вещества, сорбенты, иммуностимуляторы в настоящее время широко используются в кормлении цыплят-бройлеров. [1, 2].
В числе таких добавок - ферментный препарат Ронозим КТ (СТ), активное вещество которого представлено фитазой. Действие препарата направлено на повышение усвояемости фитатного фосфора, а также уменьшения выделения фосфора с экскрементами, что, во-первых, сопровождаться повышением продуктивных качеств птиц, во-вторых, снизит загрязнение окружающей среды экскрементами с неусвоенными птицей питательными веществами [3].
Одним из показателей физиологического состояния организма при изучении факторов экзогенного происхождения является кровь, по состоянию показателей которой можно определить обеспеченность организма питательными веществами, дать объективную оценку физиологического статуса организма в целом [4, 5].
На основании вышеизложенного, целью нашего исследования является оценка влияния ферментного препарата Ронозим КТ (СТ) при различном уровне фосфора в рационе подопытной птицы на ряд морфологических и биохимических показателей крови цыплят-бройлеров.
Материалы и методы исследования
Исследования проведены в условиях экспериментально-биологической клиники (виварий) Оренбургского государственного университета на модели цыплят-бройлеров кросса «Смена-7». Для проведения эксперимента было отобрано 100 суточных цыплят, которые методом пар-аналогов были разделены на пять групп: контрольная и четыре опытных (n=20).
Контрольная группа получала основной рацион, сформированный по рекомендациям ВНИТИП (2010). I группа - основной рацион с уровнем фосфора 6 г/кг; II группа - основной рацион с уровнем фосфора 6 г/кг с включением ферментного препарата Ронозим NP (CT) в дозировке 150 мг/кг; III группа - основной рацион с уровнем фосфора 5,8 г/кг; IV группа -основной рацион с уровнем фосфора 5,8 г/кг с включением ферментного препарата Ронозим NP (CT) в дозировке 150 мг/кг.
Ронозим NP (CT) - ферментный препарат (Компания DSM Nutritional Products), представляет собой фитазу (активность - 10000 ед/г), полученную из Peniophora lycii путем глубинной ферментации генетически модифицированных микроорганизмов Aspergillus oryzae.
Для проведения биохимических исследований в суточном, 28 и 42-дневном возрасте цып-лят-бройлеров были отобраны образцы крови для определения содержания гемоглобина (г/л), общего белка (г/л), мочевины (ммоль/л), креа-тинина (мкмоль/л), кальция (ммоль/л), фосфора (ммоль/л), а также активности ряда ферментов печени (АсАТ (ЕД/л), АлАТ (ЕД/л), ЩФ (ЕД/л)). В стабилизированной ЭДТА
крови измеряли общепринятые константы гомеостаза: количество эритроцитов (1012/л), общее количество лейкоцитов (109/л).
Исследования проводились в независимой аккредитованной испытательной лаборатории ГНУ «Всероссийский НИИ мясного скотоводства» (аккредитация Госстандарта России - Рос. RU №000121 ПФ59 от 12.05.2008 г.) по стандартным методикам.
Для обработки результатов использовали стандартные программы.
Результаты и их обсуждение
Проведенные исследования показывают, что все изучаемые показатели у цыплят-брой-леров всех групп находились в пределах допустимых физиологических норм.
Однако при изучении биохимических свойств крови нельзя ограничиваться лишь физиологическими нормами, а важно оценивать наметившиеся тенденции и незначительные сдвиги, происходящие в пределах этой нормы.
Следует отметить, что с возрастом у цып-лят-бройлеров в крови повышается концентрация гемоглобина, эритроцитов, общего белка.
Введение в рацион цыплят-бройлеров ферментного препарата Ронозим NP (CT) оказало положительное влияние на показатели эритрогомеостаза (табл. 1).
В возрасте 4-х, 6-и недель зафиксировано увеличение содержания гемоглобина в контрольной и I опытной группах на 3,86 %, 6,67 % соответственно. С уровнем гемоглобина положительно коррелирует количество эритроцитов в крови. Так, у цыплят I опытной группы в возрасте 6-и недель этот показатель был на 1,67% выше по сравнению с контролем.
При сравнении II и III групп в возрасте 4-х недель увеличиваются показатели гемоглобина - на 4,68%, эритроцитов - на 5,06%, а в возрасте 6-и недель величина гемоглобина увеличивается на 2,31%, эритроцитов - на 7,28%.
Тенденция увеличения содержания гемоглобина и эритроцитов сохраняется при сравнении IV и V опытных групп.
Более высокое содержание гемоглобина у опытных групп относительно контрольной свидетельствует о большей окислительной способности крови, повышенной интенсивности обмена и лучшей приспособляемости к окружающим условиям.
В таблице 2 представлены биохимические показатели сыворотки крови цыплят на момент убоя в 42-суточном возрасте.
Анализ данных таблицы показал, что опытные группы отличаются от контрольной по целому ряду биохимических констант.
Содержание в сыворотке крови общего белка является показателем интенсификации роста цыплят-бройлеров, имеет важное значение, так как определяет скорость образования мышечной ткани, а, следовательно, и энергию роста организма. Кроме того, белковый обмен диктует интенсивность углеводного и липидного.
Состояние естественной резистентности и физиологической активности организма определяется также количеством белка сыворотки крови. Его содержание в сыворотке крови в 6-и недельном возрасте цыплят I опытной группы -на 6,15%, II - на 8,86%, III - на 13,44%, IV - на 15,41% пятой - на 19,31% выше, чем в контроле.
Мочевина представляет собой диамид угольной кислоты, образующийся в печени при обезвреживании аммиака, синтезируется специальной группой ферментов, ее уровень в крови -
Таблица 1. Морфологические показатели крови цыплят-бройлеров
Группа Возраст, сут
1 28 42
Гемоглобин, г/л
Контрольная 87,33±11,57 97,5±7,5 118,0±5,0
I 101,4±6,5 120,0±6,0
II 112,0±5,5 113,0±6,0
III 117,5±2,0 118,0±5,0
IV 106,0±6,0 111,0±3,0
V 115,0±5,0 114,0±5,0
Эритроциты, 1012/л
Контрольная 1,72±0,38 2,10±0,10 2,25±0,30
I 2,25±0,20 2,57±0,10
II 2,25±0,20 2,42±0,01
III 2,37±0,10 2,61±0,10
IV 2,37±0,10 2,39±0,01
V 2,85±0,30 2,48±0,10
Лейкоциты, 109/л
Контрольная 40,00±0,57 39,7±0,10 38,90±55,5
I 38,8±0,20 37,5±55,4
II 40,3±1,20 39,15±22,1
III 39,7±0,70 36,75±24,5
IV 38,21±0,90 37,95±30,5
V 37,7±1,60 35,05±10,3
Таблица 2. Биохимические показатели сыворотки крови цыплят-бройлеров
Группа Возраст, сут
1 28 42
Общий белок, г/л
Контрольная 24,00±2,00 27,7±3,6 30,5±2,5
I 28,5±3,5 32,5±2,1
II 26,4±2,3 33,5±1,5
III 27,5±2,5 34,6±1,4
IV 25,3±1,28 35,2±1,6
V 26,1±1,32 37,8±1,5
Мочевина, ммоль/л
Контрольная 5,00±2,21 2,70±0,10 2,1±0,01
I 2,29±0,01 1,7±0,10
II 2,39±0,01 2,3±0,10
III 2,26±0,10 2,16±0,01
IV 2,21±0,10 2,11±0,10
V 2,12±0,01 1,9±0,10
Креатинин, мкмоль/л
Контрольная 21,30±4,01 43,2±2,5 44,12±5,11
I 40,1±2,6 34,13±4,14
II 39,2±1,6 30,5±5,5
III 34,1±2,3 24,5±4,5
IV 36,3±1,3 32,5±3,5
V 31,5±1,5 29,5±4,5
АлАТ, ЕД/л
Контрольная 2,70±0,50 3,00±0,01 3,50±0,50
I 3,50±0,01 3,50±0,01
II 4,00±1,00 3,87±1,00
III 7,00±3,00 6,50±0,50
IV 3,50±0,50 6,50±2,50
V 3,00±0,01 6,00±4,00
АсАТ, ЕД/л
Контрольная 275,07±20,01 295,5±3,5 322,5±6,5
I 316,4±4,4 291,5±5,6
II 306,5±3,5 303,5±5,5
III 267,1±6,3 294,5±7,5
IV 250,5±7,5 309,1±5,0
V 241,1±9,4 310,1±3,0
Кальций, ммоль/л
Контрольная 2,66±0,25 2,95±0,3 2,95±0,3
I 3,48±0,5 3,50±0,2
II 2,91±0,4 2,89±0,2
III 2,89±0,3 2,91±0,4
IV 3,64±0,2 3,09±0,1
V 2,59±0,4 3,64±0,2
Фосфор, ммоль/л
Контрольная 1,96±0,20 1,52±0,2 2,44±0,4
I 1,57±0,4 2,50±0,2
II 1,45±0,2 2,52±0,3
III 1,47±0,1 2,84±0,4
IV 1,48±0,4 2,54±0,2
V 1,68±0,2 2,61±0,3
отражение баланса между скоростью синтеза в печени и скоростью выведения почками с мочой.
В возрасте 4-х недель происходит снижение концентрации мочевины на 15,19%, в возрасте 6-и недель на 19,03% в I опытной группе относительно контрольной.
При сравнении II и III опытных групп в возрасте 4-х недель уменьшается концентрация мочевины - на 5,44%, а в возрасте 6-и недель концентрация мочевины снижается на 6,09%.
Аналогичная картина снижения концентрации мочевины наблюдается при сравнении IV и V опытных групп.
Мочевина выступает индикатором затрат всего белкового фонда организма. Если синтез ее замедляется, следовательно, происходит накопление белка в крови.
Активность АсАТ у цыплят опытной группы в возрасте 4-х недель была на 6,61% выше, чем в контрольной, после чего в возрасте 6-и недель исследуемый показатель в опытной группе увеличивался на 9,61% по отношению к контрольной группе.
Тенденция снижения активности данного показателя сохраняется при сравнении II и III, IV и V опытных групп.
В ходе анализа полученных результатов, различий между показателями активности АлАТ печени птицы контрольной и опытных групп выявлено не было.
Креатинин - является конечным продуктом распада креатина, который играет важную роль в энергетическом обмене мышечной и других тканей.
Тезис о более высоком уровне обменных процессов у цыплят опытных групп имеет еще одно биохимическое подтверждение.
Проведенная оценка уровня креатинина показала, что в крови цыплят суточного возраста контрольной и опытной групп составляла 21,3 мкмоль/л. В четырехнедельном возрасте концентрация креатинина в крови птицы контрольной группы на 7,18% превосходила его концентрацию в I опытной.
В шестинедельном возрасте наблюдается тенденция к снижению концентрации креати-нина на 2,64% в I опытной группе относительно контрольной.
Тенденция к снижению концентрации креатинина увеличения сохраняется при сравнении II и III, IV и V опытных групп.
Рисунок 1. Концентрация кальция и фосфора в крови цыплят-бройлеров, ммоль/л
Креатинин - показатель катаболизма. Очевидно, что в организме цыплят под влиянием препарата Ронозим N7 (СТ) анаболические процессы превалировали над ката-болическими.
Интересны для обсуждения показатели концентрации кальция и неорганического фосфора в сыворотке крови.
Из таблицы 2 следует, что в крови цыплят концентрация кальция и неорганического фосфора существенно различалась в зависимости от групповой принадлежности. У цыплят контрольной группы содержание общего кальция в сыворотке крови составляло 2,66 ммоль/л, что соответствует физиологической норме и обеспечивает правильное кальциево-фосфорное соотношение. Однако следует подчеркнуть, что концентрация и кальция, и неорганического фосфора в сыворотке крови цыплят под влиянием препарата Ро-нозим N7 (СТ) повысилась (рис. 1).
В крови цыплят опытных групп отмечена более высокая активность щелочной фосфата-зы. Функционально фермент связан с метаболизмом фосфора. В частности, фосфатаза контролирует процесс отщепления неорганического фосфата от органических носителей фосфора.
Препарат Ронозим N7 (СТ) включает в свой составе фермент фитазу, который разрушает хе-латные соединения фосфора, и тем самым, обеспечивает субстратом щелочную фосфатазу на
уровне энтерального обмена. С этой логической позиции более высокая концентрация неорганического фосфора в сыворотке крови цыплят опытных групп понятна и ожидаема.
Разность в содержании кальция и фосфора в крови между контрольными и опытными группами цыплят-бройлеров обеспечивает метаболические преимущества опытной птице и является следствием существенного улучшения структуры костной ткани.
Таким образом, применение ферментного препарата Ронозим N7 (СТ) оказывает влияние на обменные процессы, что сопровождается вариабельностью биохимических показателей в пределах физиологической нормы. Биохимический анализ крови подтверждает положительное влияние препарата Ронозим N7 (СТ) на пластические процессы цыплят-бройлеров (синтез белка, обеспеченность кальцием и фосфором) и состояние эритрона.
21.09.2011
Список литературы:
1. Вишняков, А.И. Последствия антропогенного влияния на состав крови цыплят-бройлеров / А.И. Вишняков, А.А. Тор-шков // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. - 2009. - Т. 4. - № 24/1. - С. 166-167.
2. Фисинин, В.И. Кормление сельскохозяйственной птицы / В. И. Фисинин, И.А. Егоров, Т.М. Околелова [и др.] // Сергиев Посад: ВНИТИП, 2004. - 375 с.
3. Егоров, И. Фитаза в растительных комбикормах для бройлеров / И. Егоров, Э. Анчиков // Птицеводство. - №4. -2007. - С. 40-45.
4. Гематология птиц / И.А. Болотников, Ю.В. Соловьев. - Л.: «Наука», 1980. - 116 с.
5. Биохимия: учебник / под ред. Е.С. Северина. 2-е изд. - М.: ГЭОТАР-МЭД, 2004. - 784 с.
Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ в рамках ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы по гранту № 16.740.11.0676 от 07.06.2011 г.
Сведения об авторах: Русакова Елена Анатольевна, аспирант кафедры общей биологии Оренбургского государственного университета, e-mail: inst_bioelement@mail.ru Лебедев Святослав Валерьевич, заведующий лабораторией Интститута биоэлементологии Оренбургского государственного университета, д.б.н., e-mail: LSV74@list.ru Косян Дианна Багдасаровна, магистр кафедры общей биологии Оренбургского государственного университета, e-mail: kosyan.diana@mail.ru Копанева Наталья Юрьевна, студентка кафедры общей биологии Оренбургского государственного университета, e-mail: inst_bioelement@mail.ru 460018, г. Оренбург, пр-т Победы, 13, тел. (3532) 372482
UDC 636.084.42
Rusakova, E.A., Lebedev S.V., Kosan D.B., Kopaneva N.U.
EFFECT OF PHYTASE ON SOME BIOCHEMICAL PARAMETERS OF BLOOD BROILER CHICKENS
The article presents the results of experimental studies of biochemical blood when introduced into the diet of the experimental birds enzyme preparation Ronozmi NT (CT), indicating a decrease in the concentration of urea, creatinine, aspartate aminotransferase decrease in activity, with an increase in total protein content.
Key words: phytase, broiler chickens, blood, biochemistry, total protein, urea, creatinine, ALT, AST, Ronozmi NT (CT).
Bibliography:
1. Vishnyakov, A.I. The consequences of human influence on the blood of broiler chickens/A.I. Vishnyakov, A.A. Torshkov// Proceedings of the Orenburg State Agrarian University. - 2009. - T. 4. - №24/1. - S. 166-167.
2. Feeding of poultry / V.I. Fisinin, I.A. Egorov, T.M. Okolelova [et al.] // SergievPosad: VNITIP, 2004. - 375 p.
3. Egorov, I. Phytase in vegetable compound feed for broilers / I. Egorov, E. Anchikov// Poultry. - №4. - 2007. - S. 40-45.
4. Hematology birds / I.A. Bolotnikov, Y. Soloviev. - Leningrad: »Nauka», 1980. - 116 p.
5. Biochemistry: Textbook / edited. E.S. Severin. 2nd ed. - Moscow: GEOTAR-MED, 2004. -784 p.
