178
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
кальций-связывающий белок Iba-1 (маркер фагоцитирующих клеток) [4]. На срезах через дистальный сегмент нерва реципиента определяли площадь, занимаемую Iba-1 + клетками. Показано, что в интактном нерве идентифицируются отдельные Iba-1 + резидентные макрофаги. Через 7 сут после наложения лигатуры в дистальном сегменте нерва резко увеличивается количество макрофагов. Это наблюдение подтверждает известный факт повышения числа гематогенных макрофагов, которые участвуют в процессах ВД после повреждения нерва. Нами было проведено сравнительное исследование площади, занимаемой иммунореактивными клетками в группе крыс с лигатурой и в группе крыс, которым после наложения лигатуры трансплантировали МСК. Оказалось, что однократное введение суспензии МСК приводит к снижению количества Iba-1+макрофагов. Полученные данные свидетельствуют об изменении процессов ВД в нерве реципиента после однократной субпериневральной трансплантации МСК и требуют дальнейшего углубленного изучения.
Литература:
1. Siemionow M., Strojny M.M., Kozlowska K. et al. Stem Cell Rev Rep. 2021. V.18. P. 642-659.
2. Lavorato A., Raimondo S., Boido M. et al. Int J Mol Sci. 2021. V. 22. P. 572.
3. Petrova E.S., Kolos E.A. Neurosci Behav Physiology. 2021. V. 51. P. 513-518.
4. Kolos E.A., Korzhevskii D.E. Acta Naturae. 2020. V.12(1). P. 4-17.
ВЛИЯНИЕ АУТОЛОГИЧНОГО ЛЕЙКОКОНЦЕНТРАТА, ОБОГАЩЕННОГО ГЕНЕТИЧЕСКИМ МАТЕРИАЛОМ, НА РЕМОДЕЛИРОВАНИЕ НЕЙРОГЛИИ В ГОЛОВНОМ МОЗГЕ МИНИ-СВИНЕЙ С ИШЕМИЧЕСКИМ ИНСУЛЬТОМ
В.П. Петрова, А.Р. Сираева, И.И. Гайнуллин, Р.Х. Ахметов, И.С. Минязева, К.Р. Яппарова, Д.А. Трофимов, В.А. Маркосян, Р.Р. Исламов, З.З. Сафиуллов
ФГБОУ ВО Казанский ГМУ Минздрава России, Казань, Россия
e-mail: andrei.izmaylov@kazangmu.ru
Ключевые слова: аутологичный лейкоконцетрат, генная терапия, ишемический инсульт, мини-свинья, сосудистый эн-дотелиальный фактор роста (VEGF), глиальный нейротрофи-ческий фактор (GDNF), нейрональная молекула клеточной адгезии (NCAM).
Естественные ограничения регенерации в ЦНС остаются основной проблемой при лечении неврологических заболеваний, в том числе ишемических инсультов головного мозга. Среди активно разрабатываемых способов предупреждения развития постишемических негативных последствий является доставка в мозг терапевтических генов, кодирующих нейропротекторные молекулы. Цель исследования — оценить влияние аутологичного генетически обогащенного лейкоконцентрата (ГЛ), продуцирующего рекомбинантные сосудистый эндотелиальный фактор роста (VEGF), глиальный нейротрофический фактор (GDNF) и нейрональную молекулу клеточной адгезии (NCAM), на ремоделирование нейроглии в периинфаркт-ной области головного мозга через 21 сут после моделирования ишемического инсульта у мини-свиньей.
Вьетнамские вислобрюхие мини-свиньи (25-30 кг) были разделены на три группы: (1) контрольные (n=3), опытные (n=3) и интактные (n=3) животные. Контрольным и опытным животным моделировали ишемический инсульт путем окклюзии средней мозговой артерии. Через 4 часа после операции мини-свиньям из опытной группы внутривенно вводили аутологичный ГЛ, трансдуцирован-ный аденовирусными векторами (Ad5/F35), несущими гены vegf165, gdnf и ncam1, а животным из контрольной группы — аутологичный нативный ГЛ. Через 3 недели после моделирования инсульта животных вводили в глубокий наркоз. Головной мозг извлекали из черепной коробки и фиксировали в 4% забуференном растворе параформальдегида. Из периинфарктной области готовили замороженные срезы толщиной 20 |_im. Постишемические изменения астроцитов, олигодендро-цитов и клеток микроглии изучали с использованием специфических антител к GFAP, Olig2 и Iba 1, соответственно, на площади 0,5 мм2.
Иммунофлуоресцентный анализ астроцитов выявил увеличение площади GFAP-положительной площади в контрольной группе [5,48 (4,89-6,26)], по сравнению с опытной [3,51 (2,35-4,86)] и интактной [3,95 (3,254,50)] группами. Количество миелинообразующих 0Пд2-позитивных клеток было снижено в контрольной группе [52,00 (48,50-52,50)], по сравнению с интакт-ной группой [62,00 (60,50-74,50)]. Количество Olig2-позитивных клеток в опытной группе [55,00 (52,5058,00)] не отличалось от интактных значений. Анализ клеток микроглии показал увеличение ^^позитивной площади у контрольных [17,53 (15,50-18,44)] и опытных [13,09 (12,55-13,57)] животных, при сравнении с интактными [3,35 (2,85-3,64)] мини-свиньями.
Полученные нами данные свидетельствуют, что внутривенное введение аутологичного ГЛ, продуцирующего рекомбинантные молекулы VEGF, GDNF и NCAM, через 4 часа после моделирования ишемического инсульта сдерживает развитие астроглиоза и поддерживает миелинизацию нервных отростков в периинфарктной области мозга. Исследование поддержано грантом Российского научного фонда № 19-75-10030.
ДИНАМИКА УРОВНЕЙ ЦИТОКИНОВ В РЕГЕНЕРИРУЮЩИХ ТКАНЯХ ТЕРМИЧЕСКИХ ОЖОГОВ КОЖИ КРЫС ПРИ ПРИМЕНЕНИИ МАЗИ С НОВЫМ ПРОИЗВОДНЫМ N-АЦЕТИЛАМИНОГЕКСАНОВОЙ КИСЛОТЫ
М.А. Петровская, М.Б. Петрова, Е.В. Андрианова, Е.Н. Егорова
ФГБОУ ВО Тверской государственный медицинский университет Минздрава России, Тверь, Россия
e-mail: solm1990@mail.ru
Ключевые слова: регенерация тканей, термические ожоги кожи, производное ацексамовой кислоты, фактор некроза опухоли альфа, трансформирующий фактор бета.
В эксперименте изучалось использование нового производного N-ацетил^-аминогексановой кислоты (N-ацетил^-АК) при заживлении ожоговых ран кожи площадью 225 мм2. Методом иммуноферментного анализа определяли уровни цитокинов, ассоциированных с воспалением — фактора некроза опухоли альфа (TNFa) и трансформирующего фактора бета (TGFß) в гомоге-натах регенерирующих тканей с помощью тест-систем
Гены & Клетки XVII, №3, 2022