CC BY
7
кальций-связывающий белок Iba-1 (маркер фагоцитирующих клеток) [4]. На срезах через дистальный сегмент нерва реципиента определяли площадь, занимаемую Iba-1 + клетками. Показано, что в интактном нерве идентифицируются отдельные Iba-1 + резидентные макрофаги. Через 7 сут после наложения лигатуры в дистальном сегменте нерва резко увеличивается количество макрофагов. Это наблюдение подтверждает известный факт повышения числа гематогенных макрофагов, которые участвуют в процессах ВД после повреждения нерва. Нами было проведено сравнительное исследование площади, занимаемой иммунореактивными клетками в группе крыс с лигатурой и в группе крыс, которым после наложения лигатуры трансплантировали МСК. Оказалось, что однократное введение суспензии МСК приводит к снижению количества Iba-1+макрофагов. Полученные данные свидетельствуют об изменении процессов ВД в нерве реципиента после однократной субпериневральной трансплантации МСК и требуют дальнейшего углубленного изучения.
Литература:
1. Siemionow M., Strojny M.M., Kozlowska K. et al. Stem Cell Rev Rep. 2021. V.18. P. 642-659.
2. Lavorato A., Raimondo S., Boido M. et al. Int J Mol Sci. 2021. V. 22. P. 572.
3. Petrova E.S., Kolos E.A. Neurosci Behav Physiology. 2021. V. 51. P. 513-518.
4. Kolos E.A., Korzhevskii D.E. Acta Naturae. 2020. V.12(1). P. 4-17.
ВЛИЯНИЕ АУТОЛОГИЧНОГО ЛЕЙКОКОНЦЕНТРАТА, ОБОГАЩЕННОГО ГЕНЕТИЧЕСКИМ МАТЕРИАЛОМ, НА РЕМОДЕЛИРОВАНИЕ НЕЙРОГЛИИ В ГОЛОВНОМ МОЗГЕ МИНИ-СВИНЕЙ С ИШЕМИЧЕСКИМ ИНСУЛЬТОМ
В.П. Петрова, А.Р. Сираева, И.И. Гайнуллин, Р.Х. Ахметов, И.С. Минязева, К.Р. Яппарова, Д.А. Трофимов, В.А. Маркосян, Р.Р. Исламов, З.З. Сафиуллов
ФГБОУ ВО Казанский ГМУ Минздрава России, Казань, Россия
e-mail: andrei.izmaylov@kazangmu.ru
Ключевые слова: аутологичный лейкоконцетрат, генная терапия, ишемический инсульт, мини-свинья, сосудистый эн-дотелиальный фактор роста (VEGF), глиальный нейротрофи-ческий фактор (GDNF), нейрональная молекула клеточной адгезии (NCAM).
Естественные ограничения регенерации в ЦНС остаются основной проблемой при лечении неврологических заболеваний, в том числе ишемических инсультов головного мозга. Среди активно разрабатываемых способов предупреждения развития постишемических негативных последствий является доставка в мозг терапевтических генов, кодирующих нейропротекторные молекулы. Цель исследования — оценить влияние аутологичного генетически обогащенного лейкоконцентрата (ГЛ), продуцирующего рекомбинантные сосудистый эндотелиальный фактор роста (VEGF), глиальный нейротрофический фактор (GDNF) и нейрональную молекулу клеточной адгезии (NCAM), на ремоделирование нейроглии в периинфаркт-ной области головного мозга через 21 сут после моделирования ишемического инсульта у мини-свиньей.
Вьетнамские вислобрюхие мини-свиньи (25-30 кг) были разделены на три группы: (1) контрольные (n=3), опытные (n=3) и интактные (n=3) животные. Контрольным и опытным животным моделировали ишемический инсульт путем окклюзии средней мозговой артерии. Через 4 часа после операции мини-свиньям из опытной группы внутривенно вводили аутологичный ГЛ, трансдуцирован-ный аденовирусными векторами (Ad5/F35), несущими гены vegf165, gdnf и ncam1, а животным из контрольной группы — аутологичный нативный ГЛ. Через 3 недели после моделирования инсульта животных вводили в глубокий наркоз. Головной мозг извлекали из черепной коробки и фиксировали в 4% забуференном растворе параформальдегида. Из периинфарктной области готовили замороженные срезы толщиной 20 |_im. Постишемические изменения астроцитов, олигодендро-цитов и клеток микроглии изучали с использованием специфических антител к GFAP, Olig2 и Iba 1, соответственно, на площади 0,5 мм2.
Иммунофлуоресцентный анализ астроцитов выявил увеличение площади GFAP-положительной площади в контрольной группе [5,48 (4,89-6,26)], по сравнению с опытной [3,51 (2,35-4,86)] и интактной [3,95 (3,254,50)] группами. Количество миелинообразующих 0Пд2-позитивных клеток было снижено в контрольной группе [52,00 (48,50-52,50)], по сравнению с интакт-ной группой [62,00 (60,50-74,50)]. Количество Olig2-позитивных клеток в опытной группе [55,00 (52,5058,00)] не отличалось от интактных значений. Анализ клеток микроглии показал увеличение ^^позитивной площади у контрольных [17,53 (15,50-18,44)] и опытных [13,09 (12,55-13,57)] животных, при сравнении с интактными [3,35 (2,85-3,64)] мини-свиньями.
Полученные нами данные свидетельствуют, что внутривенное введение аутологичного ГЛ, продуцирующего рекомбинантные молекулы VEGF, GDNF и NCAM, через 4 часа после моделирования ишемического инсульта сдерживает развитие астроглиоза и поддерживает миелинизацию нервных отростков в периинфарктной области мозга. Исследование поддержано грантом Российского научного фонда № 19-75-10030.
ДИНАМИКА УРОВНЕЙ ЦИТОКИНОВ В РЕГЕНЕРИРУЮЩИХ ТКАНЯХ ТЕРМИЧЕСКИХ ОЖОГОВ КОЖИ КРЫС ПРИ ПРИМЕНЕНИИ МАЗИ С НОВЫМ ПРОИЗВОДНЫМ N-АЦЕТИЛАМИНОГЕКСАНОВОЙ КИСЛОТЫ
М.А. Петровская, М.Б. Петрова, Е.В. Андрианова, Е.Н. Егорова
ФГБОУ ВО Тверской государственный медицинский университет Минздрава России, Тверь, Россия
e-mail: solm1990@mail.ru
Ключевые слова: регенерация тканей, термические ожоги кожи, производное ацексамовой кислоты, фактор некроза опухоли альфа, трансформирующий фактор бета.
В эксперименте изучалось использование нового производного N-ацетил^-аминогексановой кислоты (N-ацетил^-АК) при заживлении ожоговых ран кожи площадью 225 мм2. Методом иммуноферментного анализа определяли уровни цитокинов, ассоциированных с воспалением — фактора некроза опухоли альфа (TNFa) и трансформирующего фактора бета (TGFß) в гомоге-натах регенерирующих тканей с помощью тест-систем
«Bender MedSystems GmbH» (Австрия) «Rat TNF alpha» и «Rat TGF beta 1» соответственно. Крысы были разделены на 4 группы. В интактной группе ожог не моделировали, в опытной ежедневно на дефект наносили 2% мазь с N-ацетил-б-АК, в контрольной группе 1 обработка ран не проводилась, в контрольной группе 2 наносилась мазевая основа. Планиметрический анализ и иммунологические исследования проводили на 7, 14, и 21 сутки эксперимента.
Установлено, что концентрации TNFa и TGFß у животных всех групп в регенерирующих тканях в ходе заживления были достоверно повышены по сравнению с интактными крысами [1, 2]. Содержание TNFa на 7 сутки (фаза воспаления) на 20,7% и 28,3% было ниже, чем в контрольных группах 1 и 2 соответственно (оба р<0,05). На 14 сутки исследования (фаза пролиферации) уровень TNF-a во всех группах снизился на порядок и его различия между животными изучаемых групп были недостоверны. На 21 сутки (фаза эпителизации) концентрация TNF-a статистически значимо снизилась у крыс всех групп с ожогами по сравнению с предыдущей фазой, но достоверно не различалась между группами.
Уровень TGFß по мере заживления ожогов достоверно снижался и на 7 сутки в опытной группе был выше на 27,5% и 22,4%, а на 14 сутки - на 35,0% и 22,9%, чем в контрольных группах 1 и 2 соответственно (все р<0,05). На 21 сутки концентрация TGFß статистически значимо снизилась у животных всех групп по сравнению с предыдущем сроком наблюдения и не различалась достоверно между группами.
Планиметрическая оценка также подтвердила проре-генераторный потенциал нового производного N-ацетил-б-АК: у крыс опытной группы заживление ожогового дефекта осуществлялась в среднем на 2,2 суток ранее в сравнении контрольными группами.
Литература:
1. Li Y., Xu D.B., Wang H.J. Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2016.
32(7). 408-412.
2. Al-Gareeb A., Gorial F., Mahmood A. Arch Rheumatol. 2019.
34(4). 426-433.
ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ВЛИЯНИЯ ТУЧНЫХ КЛЕТОК НА РЕПАРАТИВНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ТИРОЦИТОВ ПОСЛЕ ИНФРАКРАСНОГО ЛАЗЕРНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ
Д.А. Пешкова1, Е.С. Головнева1, 2, Д.Р. Солянникова2
1 ГБУЗ Многопрофильный центр лазерной медицины, Челябинск, Россия
2 ФГБOУ ВО Южно-Уральский государственный медицинский университет Минздрава России, Челябинск, Россия
e-mail: da.peshkova@outlook.com
Ключевые слова: лазер, щитовидная железа, тироциты, тучные клетки, старение.
Процессы пролиферации и регенерации тканей регулируются при взаимодействии нервной, иммунной и эндокринной систем. Тучные клетки (ТК) являются уникальными тканевым биосенсором, который замыкает на себя все эти звенья. Благодаря широком спектру медиаторов, ферментов, цитокинов и факторов роста ТК активно влияют на пролиферацию, синтетические
возможности клеток, ангиогенез и микроциркуляцию в развитии защитно-приспособительных и компенсаторных реакций [1]. В щитовидной железе интенсивность регенеративных процессов снижается с возрастом, вплоть до развития старческого гипотиреоза, связанного с не только с местными изменениями, но и нарушениями в работе оси гипоталамус-гипофиз-щитовидная железа. Одним из способов стимуляции регенерации является инфракрасное лазерное воздействие, приводящее к активации Caa+-зависимых процессов в клетках [2], к которым относится и экзоцитоз гранул ТК [1].
Целью исследования являлось изучение возрастных особенности влияния тучных клеток на репаративные изменения тироцитов после инфракрасного лазерного воздействия.
Эксперимент проведен на 96 крысах Вистар. Изучались эффекты однократного воздействия инфракрасным лазером на щитовидную железу молодых и старых животных. Сроки выведения из опыта 1 час, 1, 3, 7 суток. Гистологические препараты щитовидной железы анализировались морфометрически.
Однократное лазерное воздействие на область щитовидной железы молодых животных приводило к миграции ТК в строму органа, увеличению количества клеток и повышению их секреторной активности начиная со срока 1 час. Фолликулярный эпителий отзывался про-лиферативными изменениями и повышением функциональной активности на протяжении всего эксперимента. У старых животных после лазерного воздействия происходила активная дегрануляция ТК на 3 и 7 сутки и кратковременное (до 3-х суток) повышение функциональной активности тироцитов. Корреляционный анализ выявил прямые сильные связи между морфофункциональными показателями тучных клеток и тироцитов.
Новые данные о зависимости реакции ТК после лазерного воздействия от возраста животного, и влиянии этих изменений на фолликулярный эпителий подтверждают необходимость индивидуального подбора режимов лазерного воздействия.
Литература:
1. Смелова И.В., Головнева Е.С. Вестник Российского государственного медицинского университета. 2018. № 3. С. 67.
2. Москвин С.В., Кочетков А.В. Эффективные методики лазерной терапии М. — Тверь: Издательство «Триада», 2016. 80 с.
ОСТЕОИНДУКТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ КОМПОЗИТНЫХ МАТЕРИАЛОВ НА ОСНОВЕ ФОТООТВЕРЖДАЕМЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ФИБРОИНА ШЕЛКА
Е.С. Пигусова1, А.К. Судьина1, А.А. Рамонова1, А.Ю. Архипова1 2, В.Г. Богуш3, И.В. Бессонов1, К.В. Шайтан1, А.М. Мойсенович1
1 Биологический факультет, МГУ
им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
2 Биологический факультет, Университет МГУ-ППИ, Шэньчжэнь, Китай
3 НИЦ Курчатовский институт, Москва, Россия
e-mail: ekaterinapigusova@mail.ru
Ключевые слова: тканевая инженерия, метакрилирован-ный фиброин шелка, регенерация костной ткани.
Дефекты костной ткани могут образовываться как следствие травм, операций и остеодегенеративных заболеваний. Для восстановления функций и структуры
