CC BY
4ВЕСТНИК ФИЗИОТЕРАПИИ И КУРОРТОЛОГИИ № 2, 2020 УДК 616.59.084+59.089+616.72-007.248+616.316.5+615.036.8 DOI 10.37279/2413-0478-2020-26-2-38-41
Галкина О. П.
ВЛИЯНИЕ АППЛИКАЦИЙ ПЕЛОИДА САКСКОГО МЕСТОРОЖДЕНИЯ НА СОСТОЯНИЕ ОКОЛОУШНЫХ СЛЮННЫХ ЖЕЛЕЗ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ У КРЫС С АДЪЮВАНТНЫМ АРТРИТОМ, ПРОШЕДШИМ МЕТОТРЕКСАТ-ТЕРАПИЮ
ФГАОУ ВО «КФУ им. В. И. Вернадского», Медицинская академия имени С. И. Георгиевского, г. Симферополь
Galkina O. P.
THE INFLUENCE OF APPLICATIONS OF THE PELOID OF THE SAKSKI DEPOSIT ON THE STATE OF THE PAROTID SALIVARY GLANDS IN THE EXPERIMENT IN RATS WITH ADJUVANT ARTHRITIS PASSED BY METOTREXATE THERAPY
V. I. Vemadsky Crimean Federal University, Medical Academy named after S. I. Georgievsky, Simferopol
РЕЗЮМЕ
С целью восстановления органических нарушений и функциональной активности больших слюнных желез в экспериментальном исследовании апробирован метод аппликаций пелоида Сакского месторождения у крыс с моделированным адъювантным артритом, прошедших базовое лечение соматической патологии метотрексатом. Установлено, что аппликации пелоида проекции больших слюнных желез способны снижать степень выраженности воспалительных явлений в железистой ткани, опосредованных ревматическим процессом, а также нивелировать негативное влияние цитотоксического препарата метотрексата. Ключевые слова: адъювантный артрит, околоушная железа, лечение, морфология.
SUMMARY
In order to restore of organic disorders and the functional activity of the large salivary glands in the experimental method was tested the application of the peloid of the Saki deposit in rats with simulated adjuvant arthritis who underwent basic treatment of somatic pathology with methotrexate. It has been established that applications of the peloid of the projection of large salivary glands are able to reduce the severity of inflammatory phenomena in the glandular tissue mediated by the rheumatic process, as well as neutralize the negative effect of the cytotoxic drug methotrexate. Key words: adjuvant arthritis, parotid gland, treatment, morphology.
Эпидемиологические исследования последних лет свидетельствуют о росте заболеваемости ревматоидным артритом в популяции детей и подростков. Настораживает негативный прогноз проспективных расчетов [1]. Отягощающим фактором заболевания является и то, что ревматоидный артрит, неизменно находит реактивный «отклик» со стороны других органов и систем [2]. Наименее изученными внесуставными проявлениями ревматоидного артрита является патология стоматологического характера [3, 4, 5]. В связи с этим, актуальным представляется изучение изменений со стороны органов головы и шеи у лиц с установленным диагнозом «Ювенильный ревматоидный артрит» (ЮРА) (МКБ-10: М08.0) в возрасте до 16 лет.
Аутоиммунный характер ЮРА обуславливает высокий интерес к изучению органов, участвующих в формировании локального иммунитета и продуцирующих периферические гормоны, в том числе, к большим слюнным железам. Сегодня уже известно, что белковый секрет, вырабатываемый железистыми клетками-сероцитами, содержит лактоферрин, пе-роксидазу и гликопротеин, который обеспечивает секрецию и транспорт плазматическими клетками, расположенными по периферии концевых отделов выводных протоков. Исчерченные же протоки больших слюнных желез содержат секреторные гранулы, выполняющие инкреторную функцию - выработку гормональных веществ (инсулина, паротина,
ренина, эритропоэтина, тимотропного фактора, факторов роста) [6]. Использование секрета слюнных желез в качестве диагностической среды приобретает все большую актуальность, особенно у детей [7]. Исходя из современных представлений о функциональной активности больших слюнных желез, возрастает значимость их сохранения в состоянии физиологической нормы.
В ранее проведенных нами исследованиях были изучены особенности морфологической структуры околоушной железы (ОЖ) в экспериментальной модели ЮРА у лабораторных крыс. В гистологических препаратах ОЖ были выявлены начальные изменения, характерные для развития аутоиммунного воспаления, а также признаки, свидетельствующие о снижении функциональной активности органа. Отсутствие грубых склеротических изменений на раннем этапе развития аутоиммунных реакций со стороны слюнной железы явилось положительным моментом [8]. С целью создания экспериментальной модели, максимально приближенной к клинической ситуации, мы провели лабораторным крысам терапию адъювантного артрита метотрексатом. Данный препарат применяется в ревматологии согласно общепринятым Протоколам. Иммуносу-прессивный эффект метотрексата в ОЖ проявлялся снижением выраженности морфологических признаков аутоиммунного поражения железистой ткани. Наряду с этим негативными проявлениями
метотрексат-терапии явились очаги перидукталь-ного склероза, дезорганизация соединительной ткани и формирование лимфоидных инфильтратов, что свидетельствовало о хронизации процесса [9]. Полученные результаты послужили основанием для разработки лечебно-профилактических мероприятий, способствующих снижению риска про-грессирования выявленных изменений и обеспечивающих нормализацию функционального состояния ОЖ на этапе терапии ревматоидного артрита метотрексатом или его аналогами.
Период пребывания детей и подростков с ревматоидным артритом в санаторно-курортных условиях является наиболее оптимальным в формировании устойчивого реабилитационного эффекта [10, 11]. Вследствие чего в качестве средства, способствующего коррекции состояния ОЖ у больных ЮРА, нами был выбран пелоид Сакского месторождения, который показан к применению у данного контингента. Пелоидотерапия у детей и подростков с ревматоидным артритом апробирована на протяжении ряда лет в санаторно-курортных учреждениях г. Евпатория. Также имеется опыт использования лечебной Сакской грязи в стоматологической практике [12,13, 14].
Целью исследования явилась разработка способа коррекции состояния околоушных желез на модели адъювантного артрита у лабораторных крыс после метотрексат-терапии.
Материалы и методы
Экспериментальное исследование проведено на 24-х лабораторных белых крысах (самцы и самки) линии «Wistar», которым был смоделирован адъювантный артрит. Возраст животных на момент окончания моделирования составлял 2-2,5 месяца, что сопоставимо с детским и подростковым возрастом человека. Затем была проведена мето-трексат-терапия артрита. В результате из животных были составлены группы наблюдения: контрольная (здоровые, n=8), сравнения (животные с адъювантным артритом + метотрексат-терапия, n=8), основная (животные с адъювантным артритом + метотрексат-терапия + пелоидотерапия, n=8). В основной группе (после предварительной подготовки) проводили накожно аппликации пелоида Сакского месторождения. Курс лечения - 10 процедур ежедневно.
При проведении эксперимента руководствовались требованиями «Европейской конвенции защиты позвоночных животных, использующихся в экспериментальных и других научных целях» (Страсбург, 1986).
Животных выводили из опыта под тиопенталовым наркозом на 3-5-е сутки после окончания курса пелоидотерапии. Производили забор ОЖ и фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина. Для морфологического исследования использовали материал размерами 0,3 см х 0,3 см х 0,2 см. Ткань обезвоживали в батарее спиртов восходящей концентрации, просветляли в ксилоле, выдерживали в насыщенном при Г+37°С растворе парафина в ксилоле. Далее помещали в парафин при Г+56°С, заливали смесью парафина и воска, изготавливали парафиновые блоки. Серийные срезы толщиной 4-5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, по ван Гизону и по Вейгерту.
Цифровые фотографии и просмотр микропрепаратов осуществляли с помощью светового микроскопа «Olympus CX-41».
Результаты и их обсуждение
Анализ гистологических препаратов ОЖ у животных основной группы свидетельствовал о позитивной динамике морфологической картины в сравнении с группой контроля. Остаточные явления воспалительно-деструктивных процессов частично сохранялись. В виде мелких очагов, преимущественно в междольковой соединительной ткани, отмечались признаки незначительного отека стромы железы. Сохранялись локальные нарушения гемодинамики, проявляющиеся в полнокровии сосудов микроциркуляторного русла с единичными петехи-альными кровоизлияниями, менее выраженные в сравнении с препаратами контрольной группы, что
свидетельствовало о восстановлении васкуляриза-ции ОЖ. Параллельно с этим наблюдалось уменьшение выраженности явлений отека интерстици-ального пространства и соединительнотканных прослоек, что нашло отражение в исследуемых препаратах (Рис. 1).
Рисунок 1. Ткань околоушной железы лабораторных крыс с адъювантным артритом после терапии метотрексатом и пелоидотерапии. Незначительные признаки отека и набухания междольковой соединительной ткани, полнокровие сосудов микроциркуляторного русла (стрелки).
Окраска гематоксилином и эозином, 20х.
Данная гистологическая картина отражала позитивные качественные и количественные изменения в тканях ОЖ. Полученный результат мы рассматривали как проявление бальнеореакции - тактильного и температурного действий пелоида, способствующих изменению тонуса сосудов и притоку крови к зоне аппликации [15].
В препаратах определялось уменьшение количества очагов склероза и степени его выраженности по сравнению с группой контроля. Разрастания соединительнотканного компонента наблюдались, преимущественно, вокруг междольковых сосудов и незначительно расширенных выводных протоков.
Рисунок 2. Ткань околоушной железы лабораторных крыс с адъювантным артритом после терапии метотрексатом и пелоидотерапии. Локально сохранен отек и набухание междольковой соединительной ткани (*), полнокровие сосудов микроциркуляторного русла (стрелки), умеренная периваскулярная лимфоплазмоцитарная инфильтрация.
Окраска гематоксилином и эозином, 10х.
Возле сосудов и протоков отмечались единичные участки фиброзной ткани, а также слабо выраженная лимфогистиоцитарная инфильтрация с примесью плазмоцитов, что свидетельствовало о локальном сохранении хронического воспаления. Признаки перидуктального склероза, отмечаемые ранее в группе контроля, в препаратах основной группы не визуализировались, что обусловливалось антисклеротическим эффектом пелоида (Рис. 2).
Следует отметить, что в гистологических препаратах ОЖ крыс основной группы отсутствовали лейкоциты, что указывало на уменьшение активности воспалительного процесса и снижение иммуно-реактивности в тканях железы. Выявленное изменение являлось благоприятным признаком морфологического восстановления органа. В большинстве междольковых протоков отсутствовало скопление секрета, что свидетельствовало об улучшении функциональной активности сероцитов, снижении вязкости слюны, усилении сократительной функции миоэпителиальных клеток. Выводные протоки приобретали структуру в соответствии с физиологической нормой, что отражало повышение митотической активности камбиальных элементов, наблюдаемой при восстановлении выводящей системы выводных протоков ОЖ.
Обращает внимание улучшение состояния структурной организации экзокриноцитов, отсутствие признаков некроза и десквамации секреторных клеток в просветы протоков. которые имели место в группе контроля. Форма сероцитов приближалась к традиционно пирамидной, характерной для здоровых ацинусов. Данный гистологический пейзаж отражал активацию камбиальных элементов эпителия протоков, способных дифференцироваться в железистые клетки, смещаться и обновлять ткань ОЖ.
Наряду с выявленной позитивной динамикой в единичных случаях в эпителиоцитах частично сохранялись признаки дистрофических изменений, значительно менее выраженные в сравнении с группой контроля. Также в отдельных участках ткани
ОЖ в некоторых препаратах определялась гиперплазия железистых структур, проявляющаяся в формировании гиперхромных ядер и двуядерных форм эпителиоцитов, что расценивалось как компенсаторно-приспособительная реакция, направленная на усиление секреторной функции (Рис. 3).
Рисунок 3. Ткань околоушной железы лабораторных крыс с адъювантным артритом после терапии метотрексатом и пелоидотерапии. Гиперплазия железистых структур с появлением эпителиоцитов с крупными гиперхромными ядрами, а также двуядерных эпителиоцитов (стрелки).
Окраска гематоксилином и эозином, 40х.
Выводы
Анализ серийных срезов ОЖ лабораторных крыс с адъювантным артритом после метотрексат-тера-пии и курса аппликаций пелоида в проекции ОЖ продемонстрировал улучшение состояние ткани органа. Биологическая активность пелоида Сак-ского месторождения способствовала купированию воспалительного процесса, а также торможению развития склеротических процессов. Предложенный способ коррекции состояния ОЖ может быть рекомендован к применению в клинической практике.
Литература/References
Гончарова О. В., Соколовская Т. А. Заболеваемость детей 0-14 лет в Российской Федерации: лонгитудинальное и проспективное исследования. //Медицинский совет. - 2014. - № 6. - С. 6-8. [Gon-charova O. V., Sokolovskaja T. A. Zabolevaemost' detej 0-14 let v Rossijskoj Federacii: longitudinal'noe i prospektivnoe issledovanija. Medicinskij sovet. 2014;(6):6-8. (in Russ.)]
2. Морфологические изменения половыхжелез крыс при адъювант-ном артрите и лечении метотрексатом / Е. М. Соболева [и др.] // Крымский журнал экспериментальной и клинической медицины. - 2019. - Т. 9. - № 1 - С.46-54. [Soboleva E. M., Kaladze N. N., Zjablickaja E. Ju., Makalish T. P. Morfologicheskie izmenenija polo-vyh zhelez krys pri ad#juvantnom artrite i lechenii metotreksatom. Krymskij zhurnal jeksperimental'noj i klinicheskoj mediciny. 2019;9(l):46-54. (in Russ.)]
3. Безруков С. Г., Каладзе H. H., Галкина О. П. Роль гипофизарно-адреналовой системы в развитии кариозного процесса и некариозных поражений у больных ювенильным ревматоидным артритом. // Российский стоматологический журнал. - 2015. -Т. 19. - № 1. - С. 34-37. [Bezrukov S. G., Kaladze N. N., Galkina O. P. Rol' gipofizarno-adrenalovoj sistemy v razvitii kari-oznogo processa i nekarioznyh porazhenij u bol'nyh juvenil'nym revmatoidnym artritom. Rossijskij stomatologicheskij zhurnal. 2015;19(l):34-37. (in Russ.)]
4. Галкина О. П. Стоматологический статус больных ювенильным ревматоидным артритом. // Научный вестник Крыма. - 2016. - № 2 (2). - С. 9. [Galkina O. P. Stomatologicheskij status bol'nyh juvenil'nym revmatoidnym artritom. Nauchnyj vestnik Kryma. 2016;2(2):9. (in Russ.)]
Каладзе Н. Н. Денситометрические показатели у детей с хроническим катаральным гингивитом на фоне ревматоидного артрита. // Актуальные вопросы стоматологии детского возраста. Материалы 2-ой Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 90-летию со дня рождения профессора Сайфулли-ной Халимы Мухлисовны. Казанский государственный медицинский университет. - 2019. - С.67-70. [Kaladze N. N. Densito-metricheskie pokazateli u detej s hronicheskim kataral'nym gingivi-tom na fone revmatoidnogo artrita. Aktual'nye voprosy stomatologii detskogo vozrasta. Materialy 2-oj Vserossijskoj nauchno-praktich-eskoj konferencii, posvjashhennoj 90-letiju so dnja rozhdenija professora Sajfullinoj Halimy Muhlisovny. Kazanskij gosudarstvennyj medicinskij universitet. 2019; 67-70. (in Russ.)] Вавилова Т. П. Биохимия тканей и жидкостей полостей рта: учебное пособие, 2-е изд., испр. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа; 2008. [Vavilova T. P. Biohimija tkanej i zhidkostej polostej rta: uchebnoe posobie. 2-e izd., ispr. i dop. Moscow: GJeOTAR-Media; 2008. (in Russ.)]
Галкина О. П., Безруков С. Г., Каладзе Н. Н. Саливадиагностика у больных ювенильным ревматоидным артритом. // Стоматология детского возраста и профилактика. - 2018. - Т. 17. - № 2 (65). - С. 24-28. [Galkina O. P., Bezrukov S. G., Kaladze N. N. Sali-vadiagnostika u bol'nyh juvenil'nym revmatoidnym artritom. Stoma-tologija detskogo vozrasta iprofilaktika. 2018;17(2):24-28. (in Russ.)] Галкина О. П., Безруков С. Г., Филоненко Т. Г. Морфологические аспекты структурно-функциональных изменений околоушных желез в экспериментальной модели ювенильного ревматоидного артрита. // Таврический медико-биологический вестник. -
2014. - Т. 17. - № 4 - С. 13-16. [Galkina O. P., Bezrukov S. G., Fi-lonenko T. G. Morfologicheskie aspekty strukturno-funkcional'nyh izmenenij okoloushnyh zhelez v jeksperimental'noj modeli juve-nil'nogo revmatoidnogo artrita. Tavricheskij mediko-biologicheskij vestnik. 2014;17(4):13-16. (in Russ.)]
9. Структурно-функциональные изменения околоушных желез под 12. влиянием терапии метотрексатом в экспериментальной модели ювенильного ревматоидного артрита / О.П. Галкина [и др.] // Таврический медико-биологический вестник. - 2016. - Т. 19. - N° 4 -
С. 13-17. [Galkina O. P., Bezrukov S. G., Kaladze N. N., Filo-nenko T. G. Strukturno-fUnkcional'nye izmenenija okoloushnyh zhelez pod vlijaniem terapii metotreksatom v jeksperimental'noj modeli juve-nil'nogo revmatoidnogo artrita. 2016;19(4):13-17. (in Russ.)] 13.
10. Терапевтическая ценность биорезонансной стимуляции и «малой» бальнеотерапии в оказании стоматологической помощи больным ювенильным ревматоидным артритом на этапе реабилитации / Каладзе Н. Н. [и др.] // Вестник физиотерапии и курортологии. - 2018. - Т. 24. - № 1 - С. 14-19. [Kaladze N. N.. Galkina О. P., Bezrukov S. G., Meltseva E. M. Terapevticheskaja 14. cennost' biorezonansnoj stimuljacii i «maloj» bal'neoterapii v okazanii stomatologicheskoj pomoshhi bol'nym juvenil'nym revmatoidnym artritom na jetape reabilitacii. Vestnik fizioterapii i kurortologii. 2018;24(1);14-19. (in Russ.)]
11. Соболева E. M., Каладзе H. H., Скоромная H. H. Роль гормонов гипофиза, периферических желез внутренней секреции, инсули-ноподобного фактора роста-1 и системы RANKL/OPG в ремоде-лировании костной ткани у больных ювенильным ревматоидным 15. артритом на санаторно-курортном этапе реабилитации. // Вестник физиотерапии и курортологии. - 2016. - Т. 22. - № 1 - С. 914. [Soboleva E. M., Kaladze N. N., Skoromnaja N. N. Rol' gor-
monov gipofiza, perifericheskih zhelez vnutrennej sekrecii, insulino-podobnogo faktora rosta-1 i sistemy RANKL/OPG v remodelirovanii kostnoj tkani u bol'nyh juvenil'nym revmatoidnym artritom na sana-torno-kurortnom jetape reabilitacii. Vestnik fizioterapii i kurortologii. 2016;22 (1):9-14. (in Russ.)]
Галкина О. П. Сочетанное применение интраоральной пелоидотерапии и биорезонансной стимуляции у подростков с пародон-титом. // Вестник физиотерапии и курортологии. - 2016. - Т. 22. - N 1 - С. 15-19. [Galkina O. P. Sochetannoe primenenie in-traoral'noj peloidoterapii i biorezonansnoj stimuljacii u podrostkov s parodontitom. Vestnik fizioterapii i kurortologii. 2016;22(1):15-19. (in Russ.)]
Райда А. И. Эффективность комплексной терапии пародонтита, включающего ультрафонофорез жидкой фракции лечебной грязи. // Вестник физиотерапии и курортологии. - 2000. - N° 5 -С. 26. [Rajda A. I. Jeffektivnost' kompleksnoj terapii parodontita, vkljuchajushhego ul'trafonoforez zhidkoj frakcii lechebnoj grjazi. Vestnik fizioterapii i kurortologii. 2000;(5):26. (in Ukr.)] Колесник К. А., Горобец О. В., Каладзе Н. Н. Оценка эффективности применения фототерапии и лечебной грязи при ортодонти-ческом лечении детей с гипердонтией. // Вестник физиотерапии и курортологии. - 2019. - Т. 25. - N 1 - С. 68-71. [Kolesnik K. A., Gorobec O. V., Kaladze N. N. Ocenka jeffektivnosti primenenija fototerapii i lechebnoj grjazi pri ortodonticheskom lechenii detej s gi-perdontiej. Vestnik fizioterapii i kurortologii. 2019;25(1):68-71. (in Russ.)]
Грязелечение / А. П. Холопов [и др.]. - Ставрополь: Периодика Кубани, 2002. [Holopov A. P., Shashel' V. A., Perov Ju. M., Nastenko V. P. Grjazelechenie. Stavropol': Periodika Kubani. 2002. (in Russ.)]
Сведения об авторе
Галкина Ольга Петровна - доцент, д.мед.н., заведующая кафедрой пропедевтики стоматологии Медицинской академии имени С. И. Георгиевского Федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего образования «КФУ им. В. И. Вернадского» 295006, Республика Крым, Россия, Симферополь, бульвар Ленина, 5/7. e-mail: galkina-on-line@mail.ru Information about author:
Galkina O. P. - http://orcid.org/0000-0002-8153-0999
Конфликт интересов. Авторы данной статьи заявляют об отсутствии конфликта интересов, финансовой или какой-либо другой поддержки, о которой необходимо сообщить.
Conflict of interest. The authors of this article confirmed financial or any other support with should be reported.
Поступила 25.02.2020 г.
Received 25.02.2020
