CC BY
28ВЛИЯНИЕ 5% ГЕЛЕЙ РАЗЛИЧНЫХ ПЕКТИНОВ С АМИНОФТАЛГИДРАЗИДОМ НА ЗАЖИВЛЕНИЕ ОЖОГОВЫХ РАН
В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
111 2 2 Хуранов А.А. , Евглевски А.А. , Павленко С.Г. , Левченко Г.В.
1ФБГУ ВО «Кубанский государственный медицинский университет »
2
НОЧУВО «Кубанский медицинский институт»,
г. Краснодар
Аннотация. У 20 самцов крыс весом 180-200г, оценивали влияние 5% гелей свекловичного, яблочного и цитрусового пектинов с аминофталгидразидом на заживление экспериментальной модели ожоговой раны. Мазки-отпечатки с раны анализировались в сроки на 1-е, 3-и, 7-е и 10-е сутки после отторжения ожогового струпа. В линейке 5% гелей пектина с иммуномодулятором аминофталгидразидом наибольшую эффективность заживления ран показал свекловичный пектин.
Ключевые слова: свекловичный, яблочный, цитрусовый 5% гельпектин, ожоговая рана, эксперимент, крысы, цитологические характеристики, кровь, раневой экссудат, мазки-отпечатки.
Введение
Современное представление лечения ожоговых ран подразумевает использование комплексной терапии, немаловажное значение в которой отводится воздействию на местный раневой процесс. Далеки от разрешения вопросы, связанные с выбором препаратов для местного лечения ожоговых поверхностей, которые адекватно воздействуют на рану в соответствие с фазой процесса. Основные требования к раневым покрытиям и препаратам заключаются в защите раны, антимикробном воздействии, положительном влиянии на регенерацию, а также атравматичность при перевязках. В лечении ожоговых и гнойных ран с хорошим лечебным эффектом используются пектины [1,2], обладающие не только высокой антимикробной активностью в отношении музейных и клинических штаммов кишечной палочки, протея, синегнойной палочки [3,4]. Кроме того, имеются указания на микробицидное действие пектинов на патогенных представителей кишечной микрофлоры [5]. Введение иммунных препаратов для местного лечения ожоговых ран повышает эффективность многих лекарственных средств [6, 7].
Длительное время мазки-отпечатки с раневой и ожоговой поверхности остаются простым и доступным способом мониторинга [8]. С помощью указанного метода возможно не только оценить количественный и качественный клеточный состав, но и прогнозировать течение раневого процесса [9].
Материал и методы
Нами изучены мазки-отпечатки раневого экссудата, полученные от 20 самцов крыс линии «Вистар» весом 180-200г. Ожоговая рана глубиной ША степени в области спины животного создавалась с помощью разработанной полезной модели №2014134994/14 (056707) от 12.01.2015г.
После отторжения ожогового струпа лечение раны осуществлялось 5% гелями свекловичного, яблочного и цитрусового пектинов с аминофталгидразидом. В группу сравнения введены 20 самцов крыс линии «Вистар» весом 180-200г, леченых левомеколем. Мазки-отпечатки с раны получали на 1 -е, 3-и, 7-е и 10-е сутки после отторжения ожогового струпа. После фиксации окраску мазков-отпечатков выполняли методом Май-Грюнвальда. Учет результатов осуществляли полуколичественным методом Астальди и Верга (1957). Результаты обрабатывали методами вариационной статистики на ЭВМ с помощью программы «Статистика 6».
Результаты
Исследование мазков экссудата, полученных с поверхности ожоговых экспериментальных ран через 1 -е сутки после отторжения ожогового струпа, показало присутствие большого количества полинуклеаров, вероятнее всего являющимися сегментоядерными нейтрофильными лейкоцитами; мононуклеаров встречалось приблизительно в 2-2,5 раза меньше и среди них преобладали лимфоциты. Встречаются макрофаги, эпителиоидные клетки, плазмоциты и единичные фибробласто-подобные клетки. Интересно, что в ряде мазков обнаружено значительное количество типичных эозинофилов. В экссудате отмечено большое количество эритроцитов, в том числе и "выщелоченных". Почти все клети гистиогенного происхождения имели явные признаки дегенерации (кариопикноз, кариорексис, вакуолизацию цитоплазмы). В исследуемые первые сутки визуальных различий в картине мазков экссудата, различных групп животных обнаружено не было.
Результаты подсчета количества клеточных форм в полях зрения микроскопа установлены различия между контрольной и экспериментальной группами, выражающиеся в увеличении доли полинуклеаров в составе клеток экссудата, с использованием гельпектина в комплексе с аминофталгидразидом, однако это увеличение не было статистически достоверным (Р>0.05). Следует отметить, что общее количество клеток (не считая эритроцитов) в мазке экссудата основной группы было в среднем на 20% больше, чем в контроле (Р<0.05).
Визуальная цитологическая картина мазка экссудата на 3-и сутки после отторжения ожогового струпа и начала лечения практически осталась прежней по отношению к первым суткам.
В контрольной группе среднее число клеток в поле зрения снизилось на 13%, количество полинуклеаров и мононуклеаров также упало на 5% и 37% соответственно.
При использовании 5% гельпектина в комплексе с аминофталгидразидом количество полинуклеаров увеличилось на 4%, содержание мононуклеаров уменьшилось на 6%, общее число клеток снизилось на 5%. В сравнении с контролем, количество полинуклеаров увеличилось на 26%, число мононуклеаров возросло на 66%, общее число клеток в поле зрения микроскопа стало больше в среднем на 31%.
Серьезные изменения цитологическая картина мазка экссудата претерпела на 7-е сутки после начала эксперимента по сравнению с предыдущим срокам. В мазках во всех исследованных группах животных, отмечено резкое снижение общего числа клеток, как гистиогенного так и гематогенного происхождения. В контрольной группе общее число клеток упало на 68%, количество мононуклеаров уменьшилось на 40%.
В экссудате ран животных, подвергшихся терапии с применением 5% гельпектина в комплексе с аминофталгидразидом цитологическая картина указывала, что практически исчезли эозинофилы, фибробласто-подобные клетки, гистиоциты и плазматические клетки. Эти отличия были статистически достоверными (Р<0.001).
В контрольной группе животных на 10-е сутки эксперимента цитологическая картина в мазках раневого отделяемого характеризовалась бедностью клеточных форм. Визуализируемые клетки отличались сильными дегенеративными изменениями, касающимися их морфологической структуры. Ядра многих клеток были сильно фрагментированы, цитоплазма вакуолизирована, т.е. имелись нарушения целостности внешней оболочки. В экссудате преобладали клетки гематогенного происхождения - поли- и мононуклеары.
В виду дегенеративных изменений морфологическая идентификация клеток была сильно затруднена. В мазках раневого отделяемого животных леченных с использованием 5% гельпектина в комплексе с аминофталгидразидом встречались лишь единичные клетки, чего не было достаточно для проведения статистической обработки.
В таблице 1 представлены данные о цитологических показателях раневого экссудата в условиях лечения ожоговой раны в различные сроки после отторжения струпа с применения 5% гельпектина в комплексе с аминофталгидразидом.
Таблица 1
Некоторые цитологические показатели раневого экссудата в условиях
применения 5% гельпектина в комплексе с аминофталгидразидом
СРОКИ ИССЛЕДОВАНИЯ Количество полинуклеаров Количество мононуклеаров Суммарное количество клеток в экссудате
Первые сутки после отторжения ожогового струпа Контроль 135+11 56+5 220+12
Лечение 5% гелем пектина с аминофталгидразидом 158+12 Р>0,05 62+6 Р>0,05 265+11 Р<0,05
Третьи сутки Контроль 129+12 35+6 191+18
после начала Лечение 5% 165+11 58+6 251+12
эксперимента гелем пектина с аминофтал-гидразидом Р<0,05 Р<0,05 Р<0,01
Седьмые сутки Контроль 14+2 21+4 61+6
после начала Лечение 5% 4+2 8+1 29+3
эксперимента гелем пектина с р<0,001 Р<0,01 Р<0,001
аминофтал-
гидразидом
Десятые сутки Контроль 2+0,3 5+2 21+2
после начала Лечение 5% Клеток недостаточно для статистической обработки
эксперимента гелем пектина с аминофтал-гидразидом
Примечание. 1. Р - достоверность отличия от контроля.
2. Суммарное количество клеточных форм экссудата включает в себя мононуклеары, полинуклеары, а также другие клетки (эозинофилы, моноциты, макрофаги и т.п.) обнаруженные в нем.
При сравнительном использовании свекловичного, яблочного и цитрусового 5% гельпектинов с аминофталгидразидом установлено, что лучшие показатели заживления ран через призму изучения клеточного состава мазков отпечатков принадлежит свекловичному, как обладающему самым большим свинцовым числом.
Соотношение пектинов можно рассматривать в виде линейки свекловичный - яблочный - цитрусовый.
Таким образом, результаты цитологического исследования показали, что в ожоговых ранах исследованных групп лабораторных животных, как в контроле, так и с применением 5% гельпектина в комплексе с аминофталгидразидом, наблюдается положительная динамика, характеризующаяся переходом воспалительно-регенераторной тканевой реакции к регенераторной. Однако, с применением 5% гельпектина в комплексе с аминофталгидразидом динамика процесса предпочтительней, так как уже на 3-и сутки отмечается переход процесса из воспалительно-регенераторной фазы к регенераторно-воспалительной. Следует отметить, что у 2-х животных основной группы на 3-и сутки наблюдался переход процесса даже в регенераторную стадию, что не отмечалось ни у одного лабораторного животного контрольной группы. Наилучшими показателями в отношении регенерации показал свекловичный пектин.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Чумаков, П.А. Применение препаратов пектина в комплексном лечении гнойных заболеваний мягких тканей : дис. канд. мед. наук: 14.00.27 / Павел Александрович Чумаков. - Омск, 2006. - 120с.
2. Хубутия М. Ш. Патент на изобретение РФ №2455997 / М. Ш. Хубутия и соавт., 2012. Способ лечения инфицированных ожоговых ран IIIA степени.
3. Беретарь, С.Т. Антибактериальные свойства свекловичного пектина / С.Т. Беретарь, З.Н. Хатко // Материалы международной научно-практической конференции «Функциональные продукты питания: ресурсосберегающие технологии переработки сельскохозяйственного сырья, гигиенические аспекты и безопасность», КубГАУ, Краснодар, 2009. - С.58-63.
4. Шевчук, В.Ю. Влияние 5% свекловичного пектинового геля госпитальную на микрофлору / В.Ю. Шевчук и соавт. // Кубанский научный медицинский вестник, 2013.-№1(136).-С.195-197.
5. Потиевский Э. Г., Шавахабов Ш. Ш., Бондаренко В. М., Ашубаева З. Д. Экспериментальное и клиническое изучение влияния пектина на возбудителей острых кишечных инфекций / Э. Г. Потиевский, Ш. Ш. Шавахабов, В. М. Бондаренко, З. Д. Ашубаева // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.-1994.-Приложение. - С.106-109.
6. Паничев, А.М. Цеолиты в хирургии / А.М. Паничев, Н.И. Богомолов, Н.П. Богатова и др. - Владивосток: Изд-во ДВГТУ, 2004.-120 с.
7. Крюкова, В.В. Патогенетическое обоснование Сорбционно-аппликационной терапии гнойных ран : дис. канд. мед. наук: 14.00.16, 14.00.27 / Крюкова Виктория Викторовна. - Чита, 2005. - 151с.
8. Покровская М. П., Макаров М. С., Цитология раневого экссудата как показатель процесса заживления ран. Медгиз. 1942. 52с.
9. Widgerow, A.D. The burn wound exudate-An under-utilized resource / A.D. Widgerow et al. // Burns. 2014 Jun 27.
