УДК 619:616.981.49-097:615.371:636.2.082/.085:547
Федорченко A.M., астрант © Бглоцерювсъкыы нацюналъныы аграрныыутеерсытет
ВИЗНАЧЕННЯ 1МУН0БЮЛ0Г1ЧН01 РЕАКТИВНОСТ1 ТЕЛЯТ, НАРОДЖЕНИХ В1Д KOPIB, ЯКИМ ЗГОДОВУВАЛИ СЕЛ-ПЛЕКС
Наведет результаты дослгдженъ вплыву згодовування коровам в nepiod сухостою селенооргатчного препарату Сел-Плекс на iмунобюлог1чш показныкы народженых eid ных телят, ят в подалъшому булы iMymsoeam салъмонелъозною вакцыною.
Ключовг слова: телята, салъмонелъоз, мушзащя, селен, сел-плекс, аскорбтова кыслота, Т-, В-л1мфоцыты, фагоцытарна актывшстъ (ФА), фагоцытарныы тдекс (Ф1), БАСК, ЛАСК.
Постановка проблеми. Ефективне утримання велико! рогато! худоби, збережешсть приплоду - одне з основних завдань галуз1 молочного скотарства [1], а яюсне вщтворення здорового стада з акцентом на стшкють до захворювання молодняку - одна з головних умов ycnimHOCTi галуз1 [2].
Тому основне завдання полягае в забезпеченн1 т1льних Kopie повноц1нними i збалансованими кормами та належним доглядом, оск1льки в1д цього залежить стан материнсько! ¿мунно! системи, яка впливае на формування захисних орган1в та систем теляти пщ час внутр1шньоутробного розвитку [3].
KpiM цього, т1льним коровам для пщвищення ¿муностимулюючо! взаемод1! системи "мати - плщ" часто застосовують 61олог1чно активш препарати, в1там1ни та макро- i м1кроелементи [4]. Серед них на особливу увагу заслуговуе селен. Бюлопчна роль селену в орган1зм1 проявляеться пригн1ченням процес1в утворення в1льних радикал1в через систему 6ioxiMi4Horo ферментативного захисту та стимуляц1ею ¿мунно! системи [5, 6].
Рашше проведен! нами дослщження щодо вивчення ¿мунно! в!дпов!д! оргашзму телят, вакцинованих сальмонельозною вакциною на фон! згодовування !м Сел-Плексу з аскорб!новою кислотою, засв!дчили [7], що ц! препарати суттево впливали на стан ¿мунореактивностг Тому сл!д провести вивчення показниюв ¿мунореактивност! телят, отриманих в!д Kopie, яким в юнщ сухост!йного пер!оду згодовували селеноорган!чний препарат Сел-Плекс.
Забезпечення селеном т!льних Kopie у пер1од сухостою забезпечуе новонароджених телят м1кроелементом, тому що вш легко проходить через плаценту [8] та шляхом споживання молозива i молока. Концентрац1я селену в молощ п1двищуеться за згодовування його коровам у вигляд1 добавок [9], а це позитивно впливае на життед1яльшсть телят [10].
© Науковий KepiBHHK - 1вченко В.М. доктор вет. наук, професор Федорченко A.M., 2012
366
Метою наших дослщжень було вивчити показники ¿мунореактивносп телят, отриманих вщ кор1в, яким у сухостшний перюд згодовували селенооргашчний препарат Сел-Плекс, ¿мушзованих на цьому фош сальмонельозною вакциною.
Матер1али та методи дослщжень. Дослщи проводили на молочнш ферм! агроф1рми "Глушки" Бшоцерювського району Кшвсько! области На першому етат вадбрали 30 тшьних кор1в, за 50-60 д1б до род1в !х роздшили на 2 групи по 15 гол1в у кожнш. Коровам контрольно! групи згодовували лише основний рацюн, а тваринам друго! групи (дослщна) до основного рацюну додатково шдив1дуально щоденно вранщ протягом 1 мкяця з комбжормом згодовували оргашчну селеновмютну сполуку Сел-Плекс у доз! 10 г на гол/добу.
Результати дослщжень та Тх обговорення. У кор1в обох груп до початку досл1ду, через 1 мшяць теля початку згодовування Сел-Плексу та на 23 добу теля род1в вранщ до початку год1вл1 брали кров ¿з яремно! вени. Вмкт селену у сироватщ кров! визначали методом атомно-абсорбцшно! спектрофотометр!!. Результати наведено в таблиц! 1.
Таблиця 1
Динамжа показннкчв вмкту селену в сироватщ кров1 тшьних ко|Мв
до та теля отелення
Група До початку дослщу мкг/100мл Через 1 м1сяць теля згодовування Сел-Плексу мкг/100мл Через 2-3 дт теля отелення мкг/100мл
1-ша контрольна (п=15) 11,1±1,07 9,6±0,73 6,34±0,71**
2-га дослщна (п=15) 10,66±1,12 13,78±0,34**и 11,56±0,54**и
Примггка: ** - р<0,05 пор1вняно з попередшми показниками;
■ - р<0,001 пор1вняно з контрольною групою.
1з даних табл. 1 випливае, що до початку досл1ду в сироватщ кров! контрольно! I дослщно! груп кор1в вм!ст селену суттево не вщр!знявся та знаходився в межах ф!зюлопчно! норми. Через 1 мюяць теля початку дослщу в контрольнш грут спостер1галась тенденщя до зниження вмюту селену до 9,6±0,73 мкг/100 мл, тод1 як у дослщнш грут кор1в вщм1чалось в!рогщне пщвищення на 3,12 мкг/100 мл пор1вняно ¿з попередшми даними (р<0,05) I на 4,18 мкг/100 мл з контрольною групою (р<0,001). На 2-3 добу теля отелення в обох групах спостер1галось в1рогщне зниження вмкту селену в сироватщ кров!, зокремау контрольнш грут - на 3,26 мкг/100 мл (р<0,05). У дослщнш груш хоч [ вщм1чалось зниження вмюту селену пор1вняно ¿з попередшми показниками, але ця р1зниця на 5,26 мкг/100 мл залишалась в!рогщно (р<0,001) вищою пор1вняно з контрольною групою.
На 2-му етат дослщжень, у м1ру розтелень кор1в контрольно!! досл!дно! груп, вщбирали теличок ! за принципом аналопв формували групи: контрольна - 5 гол!в ! досл!дна - 5 гол!в. Рац!он год!вл! телят обох груп був
367
аналопчний: в nepini 6 д1б випоювали молозиво, а пот1м молоко - по 5 л на голову, починаючи з 11 дня - молоко по 6 л, кр!м того давали ciHO люцернове i комбшорм. Телята контрольно! групи знаходились лише на основному ращош, а тваринам дослщно! групи до основного рацюну щоденно вранщ, починаючи з 3-го дня теля народження (до 1 м1сяця теля ревакцинацп), в корм добавляли селенооргашчний препарат Сел-Плекс у доз1 3 г на гол/добу в комплекс! з аскорбшовою кислотою в доз1 3 гна гол/добу, згодовували шдив1дуально.
Через 10 д1б теля пщготовчого перюду, в телят обох груп брали кров для дослщження та ¿мушзували концентрованою формол-галуневою вакциною проти сальмонельозу телят. Вакцина виготовлена Херсонським державним пщприемством - бюлопчна фабрика. Сер1я №1, держконтроль №1. Ревакцинащю телят проводили через 20 д1б. Вакцину вводили пщшюрно в доз1 2 мл, а за ревакцинацп - 2,5 мл. За тваринами щоденно проводили клмчш спостереження: визначали температуру тша, частоту пульсу й дихання, апетит тощо. Пщ час проведения клмчних дослщжень було встановлено, що температура, пульс, дихання, апетит у телят дослщно! i контрольно! груп були аналопчними i вщповщали нормативним показникам. Кров для лабораторних дослщжень вщбирали вранщ до год1вл1 в перюд до початку дослщу, через 10 д1б теля пщготовчого пер1оду та через 10, 20 д1б теля вакцинаци i ревакцинац11.
У сироватщ кров! телят визначали вмкт селену, у плазм1 - вм1ст аскорбшово! кислоти за методикою Б.1. Антонова 3i сп1вавт. [11]. Для характеристики природно! резистентност1 визначали к1льк1сть лейкоцит1в, абсолютну к1льк1сть Т- i В-л1мфоцит1в, показники ОФР, БАСК i ЛАСК. Кшькють лейкоцит1в визначали (меланжерним методом) у камер1 Горяева, для визначення показник1в ¿мунокомпетентних кл1тин використовували лейкограму (мазки фарбували за методом Романовського), субпопуляц11 Т- i В-л1мфоцит1в за методом В.М. 1вченка у ствавт. [12], бактерицидну активн1сть сироватки кров! - методом фотонефелометрп ¿з тест-культурою Salmonella dublin за методикою B.C. Чумаченка [13], л1зоцимну активн1сть сироватки кров1 -фотоколориметричним методом з використанням тест-культури Micrococcus lysodecticus штам 256.
Результати досл1джень ¿муноб1олог1чних показниюв подано в табл. 2.
Матер1али таблиц! 2 показують, що до початку дослщу в сироватщ кров1 телят контрольно! i досл1дно! груп вмкт селену був нижче ф1зюлопчно! норми. Зг1дно з даними B.I. Левченка 3i сп1вавт., 2002 piK [14], ф1з1олог1чн1 коливання селену в сироватщ кров1 телят становлять 7,5-16,0 мкг/100 мл. Через 10 д1б теля пщготовчого перюду згодовування телятам Сел-Плексу в комплекс! з аскорбшовою кислотою в сироватщ кров1 телят дослщно! групи в1рог1дно п1двищився вм1ст селену на 2,9 мкг/100 мл (p<0,05), а в плазм1 кров1 -acK0p6iH0B0i кислоти на 0,176 мг/100 мл пор1вняно i3 попередшми даними (p<0,001). Вони були вщповщно вищими на 3,3 мкг/100 мл i на 0,276 мг/100 мл також пор1вняно з тваринами контрольно! групи (p<0,05).
368
У телят дослщно! групи показники вмюту в кров! лейкоцита, абсолютно! кшькост! л1мфоцит1в та !х субпопуляцш Т- \ В-л1мфоцит1в були в!рогщно вищими , пор1вняно з контрольною групою (p<0,05). Це свщчить про вплив препарата на регенеративну здатшсть та ¿мунолопчну вщповщь. 1мунна система таких телят бшьш досконала.
Шсля введения протисальмонельозно! вакцини на 10-ту добу вщм!чалась тенденщя до зниження вмюту селену { аскорбшово! кислоти в кров! телят обох груп, проте щ показники в телят дослщно! групи були вщповщно на 3,18 мкг/100 мл I 0,308 мг/100 мл в!рогщно вищими, пор1вняно з контрольною групою ф<0,05).
На 20-ту добу теля вакцинаци показники вм1сту селену в сироватщ кров11 аскорб1ново! кислоти в плазм1 кров1 в телят дослщно! I контрольно! груп п!двищились пор!вняно з попередн!ми даними, але в дослщнш груп! вони на 3,38 мкг/100 мл ! 0,320 мг/100 мл вщповщно в!рогщно були вищ! пор!вняно з контрольною (p<0,05). У контрольнш груп! телят показники ¿мунокомпетентних кл!тин мали тенденц!ю до пщвищення, проте вм!ст лейкоцит!в, абсолютно! кшькост! л!мфоцит!в, Т- ! В-л!мфоцит!в у тварин досл!дно! групи залишались в!рогщно вищими н!ж у контрольн!й ф<0,001).
П!сля ревакцинац!! телят у сироватщ вмкт селену ! в плазм! кров! вмкт аскорб!ново! кислоти телят обох груп мав тенденц!ю до зниження. Клггинш ¿муноб!олог!чн! показники кров! телят дослщно! групи залишались бути в!рогщно вищими пор!вняно з контролем ф<0,001).
На 20-ту добу теля ревакцинаци телят показники вм!сту селену в сироватщ та аскорбшово! кислоти в плазм! кров! зросли ! були в!рогщно вищими пор!вняно з контрольною групою. У телят дослщно! групи вщм!чалась тенденщя до зростання абсолютно! к!лькост! Т- ! В-л!мфоцит!в.
Подальш! досл!дження через 2 ! 6 м!сяц!в показали, що показники вмюту селену в сироватц! та аскорбшово! кислоти в плазм! кров! телят дослщно! ! контрольно! груп мали тенденщю до зниження, але в телят дослщно! групи вони залишались вищими.
Результата наших дослщжень показали, що теля парентерального введения сальмонельозно! вакцини на 10-ту добу ! теля ревакцинаци на 10-ту добу вмкт селену ! аскорбшово! кислоти в кров! телят обох груп мав тенденщю до зниження, а поим пщвищився. Це явище ми пояснюемо тим, що введена сальмонельозна вакцина викликала п!двищен! витрати !х в орган!зм!. Це дае п!дстави припустити, що одн!ею ¿з причин можливих ускладнень при вакцинаци е п!двищен! витрати селену ! в!там!ну С. П!сля вакцинац!! на 20-ту добу ! ревакцинац!! вмют селену ! аскорб!ново! кислоти в кров! пщвищився, це вщповщае фаз! переходу !х у кров ¿з резервуар!в у органах та пов'язано з п!двищеними витратами !х в оргашзмг
369
370
Резистентшсть оргашзму телят забезпечуеться комплексом складних фактор1в неспециф1чно1 резистентности таких як бактерицидна (БАСК) та л1зоцимна актившсть сироватки кров1 (ЛАСК). Особливо важливе значения мае фагоцитоз. Вони е шформативними показниками впливу вакцини на оргашзм.
Результати дослщжень показниюв БАСК, ЛАСК, ФА та Ф1 представлен! в таблиц! 3.
Таблиця 3
. !оказники неспецн(|нчно1 резистентност1 кров1 телят_
Група телят БАСК, % ЛАСК, % ФА, % Ф1, од.
До початку дослвду
1-ша група (п=5) 39,92±1,24 3,62±0,17 73,3±1,72 3,45±0,44
2-га група (п=5) 42,78±1,13 3,56±0,12 78,0±1,5 3,48±0,27
Через 10 д!б теля згодовування Сел-Плексу I аскорбшовоТ кислоти
1-ша група (п=5) 40,84±0,69 3,75±0,14 77,8±1,93 3,25±0,39
2-га група (п=5) 57,9±1,5*и 5,01±0,33*и 92,26±1,07*и 6,13±0,31*и
Через 10 д!б теля вакцинацп
1-ша група (п=5) 45,92±2,9 3,66±0,07 79,34±1,2 3,41±0,28
2-га група (п=5) 63,6±2,08 5,02±0,35 94,34±1,14 7,2±0,22
Через 20 д!б теля вакцинацп
1-ша група (п=5) 47,3±1,6 3,82±0,15 81,3±3,43 3,15±0,31
2-га група (п=5) 68,38±1,4и 5,47±0,26и 92,7±0,72и 7,35±0,2и
Через 10 д!б теля ревакцинацп
1-ша група (п=5) 51,43±2,15 3,69±0,23 87,32±4,16 3,64±0,2
2-га група (п=5) 70,2±1,44 5,6±0,23 93,32±0,43 6,82±0,21
Через 20 д!б теля ревакцинацп
1-ша група (п=5) 52,14±3,44 3,66±0,21 88,5±2,86 3,58±0,16
2-га група (п=5) 70,58±1,72и 5,44±0,25и 94,9±0,86 7,4±0,24и
Через 2 чкиш теля ревакцинацп
1-ша група (п=5) 51,36±1,9 3,57±0,23 80,67±1,65 3,25±0,22
2-га група (п=5) 71,64±1,37 5,42±0,15 93,3±1,22 4,54±0,26
Через 6 мкицш теля ревакцинацп
1-ша група (п=5) 49,68±2,75 3,15±0,32 64,3±1,72 3,14±0,35
2-га група (п=5) 65,7±2,21 5,03±0,39 85,6±1,86 4,73±0,46
Примггка: * - р<0,001 пор1вняно з попередшми показниками;
■ - р<0,001 пор1вняно з першою групою.
Анал1з даних таблиц! 3 свщчить, що до початку дослщу показники неспециф1чно! резистентное^ кров1 телят дослщно! \ контрольно! груп суттево не вщр1знялися.
Шсля пщготовчого перюду показники неспециф1чно! резистентност1 в кров1 телят обох груп пщвищились, проте в телят дослщно! групи були в1рогщно (р<0,001) вищими пор1вняно з контрольною: БАСК - на 17,06 %, ЛАСК - на 1,26 %, ФА - на 14,46 %, Ф1 - на 2,88 од.
Таким чином отримаш даш свщчать про ефективний вплив комплексу Сел-Плексу з аскорбшовою кислотою на показники природно! резистентност1 телят.
371
Пкля парентерального введения телятам протиеальмонельозно! вакцини вщм1чали пщвищення показниюв неспециф1чно! резистентное^ в обох трупах, проте в дослщнш вони на 20-ту добу були в1рог1дно вищими БАСК на 21,08 %, ЛАСК на 1,65 %, ФА на 11,4 %, Ф1 на 4,2 од. пор1вняно з контрольною (p<0,001). Под1бна картина епоетер1галаеь i теля ревакцинацп.
В подальшому, через 2 i 6 мкящв теля ревакцинацп показники неспециф1чно1 резистентное^ в обох трупах телят мали тенденщю до зниження, але в дослщнш rpyni вони залишалиеь вищими шж в контроле
Отримаш результати пщтверджують, що комплекс селену з аскорбшовою кислотою посилюють ¿мунну вщповщь оргашзму.
Висновки: 1. Згодовування коровам селенооргашчного препарату Сел-Плекс в перюд сухостою сприяе пщвищенню вмкту селену в сироватщ кров1 Kopie i телят, отриманих вщ них.
2. Використання телятам теля народження комплексу Сел-Плекс з аскорбшовою кислотою в дозах по 3 г на голову на добу, викликае в1рогщне пщвищення в сироватщ кров1 вмюту селену, а в плазм1 в1там1ну С.
3. Протисальмонельозна вакцина, парентерально введена телятам, на цьому фон1 сприяла пщвищенню ¿мунореактивност1 ix орган1зму, що проявлялось в1рог1дним зростанням показник1в природно! резистентност1: кшькост1 лейкоцит1в, абсолютно! к1лькост1 л1мфоцит1в, Т- i В-л1мфоцит1в та показниюв неспециф1чно! резистентност1: ОФР, БАСК i ЛАСК.
Л1тература
1. Канарейкина H.H. Заболеваемость и сохранность животных разных генетических груп в условиях интенсивной технологи производства молока / H.H. Канарейкина, Р.В. Тамарова // Ветеринарный врач. - 2011. - № 1. - С. 65-67.
2. Кондрахш 1.П. Вплив ращошв сухостшних Kopie на ¿мунний статус новонароджених телят та ix CTiftKicTb до flncnencii' / 1.П. KoHflpaxiH, К.М Кунська // Ветеринарна медицина Укра!ни. - 2005. - №5. - С. 14-15.
3. Лешовська Н.М. Вплив штерферону, BiTaMiHiB A, D3, E та селену на нecпeцифiчнy pe3ncTeHTHicTb глибоко тiльниx Kopie та i'x народжених телят / Н.М. Лешовська, H.A. Мамчук, O.I. Biщyp, Л.1. Сологуб, В.Й. Ямроз // Бioлoгiя тварин. - 2006. - Т. 8, № 1-2. - С. 247-250.
4. Stadtman J.S. Selenium Bioghemistry / J.S. Stadtman // Ann. Rev. Bioghem - 1990. - Vol. 59. - P. 85-89.
5. Taylor E.W. Selenium and cellular immunity / E.W. Taylor // Biol. Trace Elem. Res.- 1995. - Vol. 49. - P. 85-89.
6. Голубкина H.A. Исследования лекарственных растений в формировании селенового статуса населения России: автореф. дисс. ...д-ра. биол. наук. - М., 1999. - 47 с.
7. 1вченко В.М. Вплив селеновмюного препарату Сел-Плекс на ¿мунобюлопчш показники телят, ¿мутзованих проти сальмонельозу / В.М. 1вченко, A.M. Федорченко // Науковий в ¿сник ветеринарно! медицини: 36. паук. праць.- БшаЦерква, 2011. - Вип. 8 (87).- С. 45 - 50.
372
8. Van Saun R.G. Maternal and fetal selenium concentrations and their interrelationships in dairy cattle / R.G. Van Saun, T.H. Herodt, H.D. Stowe // J. Nutr.- 1989.- Vol. 119. - P. 1128 - 1137.
9. Grace N.D. Influence of Se status on milk Se concentration in dari cows / N.D. Grace, J. Lee, R.A. Mills // N.Z. g. Agr. Res. - 1997. - Vol. 40. - P. 75-78.
10. Muniz-Navairo O. Selenium cvontent and distribution in cow's milk supplemented with two dietary selenium sources / O. Muniz-Navairo, R. Dominguer-Junzales, B. Bermejo-Berrea et. al. // J. Agric. Food chem. - 2005. - Vol. 53, №25. -P.9817-9822.
11. Антонов Б.И. Лабораторные исследования в ветеринари: биохимические и микологические: Справочник / Б.И. Антонов, Т.Ф. Яковлева, В.И. Дерябина и др.; Под. ред. Б.И. Антонова. - М.: - Агропромиздат, 1991. - 287 с.
12. 1вченко В.М. Метода ¿мунолопчних дослщжень в лаборатор1ях ветеринарно! медицини: Метод. рекомендаци для л1кар1в-1мунолопв лабораторш вет. медицини / В.М. 1вченко, H.I. Сахнюк.- БшаЦерква, 2009.- 82 с.
13. Чумаченко В.Е. Методические рекомендации по определению естественной резистентности у сельскохозяйственных животных для ветеринарних специалистов / В.Е. Чумаченко.- Киев, 1992.- 86 с.
14. Левченко B.I. Дослщження кров! тварин та клмчна штерпретащя отриманих результат: Методичт рекомендаци для студешгв факультету ветеринарно! медицини кер!вник!в та слухач1в 1нституту тслядипломного навчання кер1вниюв i спец1ал1ст1в ветеринарно! медицини / B.I. Левченко, В.М. Соколюк, В.М. Безух та ш. - Б1ла Церква, 2002. - 56 с.
Summary A. Fedorchenko
DETERMINATION OF IMMUNOBIOLOGICAL REACTIVITY OF CALVES BORN FROM COWS, WHICH FEEDING SEL-PLEKS
The results of researches of influence of feeding cows are in-process resulted in the period of dead trees of selenoorganic preparation of Sel-Pleks on the immunobiological indexes of born from them calves which in future were immunized a salmonella vaccine.
Key words: calves, immunization, salmonella, selenium, Sel-Plex, ascorbinicum acid, T- and B-limfocytes, fagocitic activity (FA), fagocitic index (FI), BABS, LABS.
Рецензент - д.с.-г.н., професор Буцяк B.I.
373