CC BY
23
УДК 577.27:577.175.1:575.22:578.825.13 12Сорошна О. Г., 12Попов М. М., 'Лядова Т. I.
ВИВЧЕННЯ П0ШИРЕН0СТ1 Р13НИХ АЛЕЛ1В 1НТЕРЛЕЙК1НУ-28 У ПАЦ1СНТ1В 3 ХР0Н1ЧНИМИ ФОРМАМИ ЕПШТЕЙНА-БАРР В1РУСНО'МНФЕКЦМ
1Харювський нацюнальний ушверситет ¡меш В.Н. Каразша (м. Харкш) 2ДУ «1нститут мшробюлогм та ¡мунолопим. I.I. Мечникова HAH Укра'Гни» (м. Харюв)
olga-sorokina@ukr.net
Робота була виконана на кафедр1 загально! та кгмычно! ¡мунологи та алергологи медичного факультету Харювського нацюнального уыверситету ¡менн В.Н. Каразша та кгмычних базах кафедри: 06-ласна кгмычна ¡нфекцмна лкарня м. Харкова \ КЗОЗ «Мюька пол1клшка N° 6», а також на баз1 ДУ «1нсти-тут м1кробюлоги та ¡мунологи ¡м. 1.1. Мечникова НАН УкраТни» в перюд 2014-2017 рр. в рамках науково-дослщницько! теми: «Вивчення рол1 ¡мунних, аутог мунних та метабол1чних порушень у патогенез! та наслщки ¡нфекцмного процесу, викликаного герпес-в1русами», № державно! реестраци 011211005911.
Вступ. У сучасному свт ¡нфекцмы захворюван-ня займають домшуюче мюце у патологи людини [13,15]. Тепершне столггтя е стол1ттям опортуню-тичних ¡нфекцм завдяки зростаючому впливу не-сприятливих фактор1в навколишнього середовища на оргаызм ¡, перш за все, на ¡мунну систему [3,9]. Серед численних фактор1в, яю безпосередньо впли-вають на ¡мунну систему, на особливу увагу заслуго-вують в1руси Ымейства герпесу [6,9,14,29].
Герпесв1русы ¡нфекци займають одне з перших мюць за поширенютю, складнютю д1агностики та лкування серед ¡нфекцмних захворювань [1]. В1рус Епштейна-Барр (ВЕБ) вщноситься до Ымей-ства Негрезу1г1с1ае та е в1русом герпесу 4-го типу [2,8,11,16,19,21,22].
У структур! герпесв1русних ¡нфекцм ВЕБ займае важпиве мюце. Це пов'язано з високим ступенем ¡н-фкування населения в усьому свт, осктьки специ-ф1чы антитта до даного в1русу виявляються майже у 95%дорослого населения [1,6,10,20,32].
Актуальнють вивчення захворювань, виклика-них ВЕБ, обумовлена дов1чною персистенц1ею вг русу в оргаызм1 людини, потенцмною онкогеннютю, здатнютю до реактиваци ауто1мунних захворювань, ураженням серця, нирок, суглоб1в та ¡н. На сьогод-ншнм день стрними залишаються питания терапи хроычних форм ВЕБ- ¡нфекци (ХВЕБ), що пов'язане з розвитком резистентност1 до препарат1в ацикпов1р та частими рецидивами у ¡мунокомпроментованих пац1еттв [3,8,13,17,29,31].
Пюля заюнчення гострого перюду хвороби вг руси групи герпес не ел1м1нуються з оргаызму [18,29,41]. Цим фактом, в першу чергу, \ визнача-ються подалыхн несприятлив1 наслщки перенесено! ¡нфекци. Нав1ть в умовах повноцЫно функцюнуючо! ¡мунно! системи можпива реактивац1я герпесв1руЫв протягом життя господаря, реплкац1я з утворенням ¡нфекцмного потомства та подальша асоц1ац1я з ма-л1гызац1ею [20,22,23,26,34,37].
На сучасному eTani медично! науки ¡мунолога-ми р1зних кра!н накопичено достатнм матер1ал з вивчення ¡мунопатологп при ¡нфекцмному монону-клеоз1 (IM), що змусило переглянути ставлення до цього захворювання, як до абсолютно доброяюсно-го та довести можпивють його затяжного та хроыч-ного nepe6iry [4,5,7,12,25,28,40].
Узв'язку з наявнютю велико! ктькост1 пац1еттв, в яких протягом тривалого часу збер1гаються Ti чи ¡ним скарги, виникае нагальна потреба вивчення причин цього явища. Особливий ¡нтерес викпикае питания вивчення частоти виникнення р1зних генотитв у па-щенгпвз ВЕБ-¡нфекц1ею.
Однонукпеотидний пол1морф1зм (ОНП, вщ ан-ггмйського Single nucleotide polymorphism, SNP) - це BiflMiHHOCTi послщовностт ДНК розм1ром в один ну-кпеотид у reHOMi представниюв одного виду або м1ж гомолопчними дтянками гомолопчних хромосом. За результатами проведених наукових дослщжень вже виявлена важпива роль ОНП, яю впливають на формування ¡мунно! вщповщ1, ¡нтенсивнють неспе-циф1чних ¡мунних реакцм i формують схильнють до р1зних захворювань. Ц1 дан1 дозволяють по новому оцшити роль генетичного пол1морф1зму як господаря, так i патогену [24,30,25].
1снують роботи, присвячен1 вивченню ¡нших Bi-русних захворювань, в яких було показано вплив генетичних фактор1в оргаызму людини на сприятли-вють nepe6iry захворювання.
На сьогодн1шн1й день вщомо, що ¡нтерлейюни (IL)-28A, IL-28B i IL-29, як1 також називають ¡нтерфе-рон-лямбда (INF-X) 2,3 i 1 вщповщно, вщносяться до Ымейства цитоюыв 2 кпасу i являють собою нещо-давно вщкриту групу против1русних циток1н1в. INF-X, ¡ндукуе против1русн1, антипрол1феративн1, проти-пухлинн1та ¡мунн1 ефекти.
У пор1внянн1 з INF-a, бтки с1мейства INF-X, мають меншу против1русну активнють in vitro [25,33,36,37]. 1снують роботи, в яких було продемонстровано, що INF-X3 пригн1чуе в1русний гепатит С (ВГС) в за-лежност1 в1ддози i часу впливу, збтьшуе експрес1ю reHiB стимульованих ¡нтерфероном (ISGs, interferon stimulated genes), i пщвищуе против1русну актив-HicTb INF-a [32,35,36,39].
Ген IL-28B локал1зований у хромосом! 19q 13. Поручз ним виявлен1 пол ¡морфы локуси (rs12979860, rs8099917). Ген IL28B кодуе бток INF-X-3, який е лг гандом циток1нового рецептору II класу. IL28B запускав JAK (янус- юназу) / STAT (signal transducerand activator of transcription) - сигнальний каскад, що передав ¡нформащю вщ позаклггинних пол1пептидних
сигнал1в до промотор1в генмв- м1шеней, блокуючи синтез в1русних бшмв.
Дтянка ДНК у регуляторнм обласн гену 28В, в якому вщбуваеться замша нуклеотиду цитозин (С) на тим1н (Т), позначаеться як генетичний маркер гз12979860 (позначення ОПН за базою даних 1ЧСВ1). 1снують наступи! можпив1 його генотипи: С/С, СД \ ТД а дтянку де вщбуваеться зам1на нуклеотиду Т на гуанш (С), позначаеться як генетичний маркер ^8099917 (позначення ОПН за базою даних ЫСВ1). 1снують наступы можпив1 його генотипи: Т / Т, Т / й ¡0/0.
На даний час вже е роботи, в яких було показано, що бтки 11ЧР-Х важпив1 для ел1мшаци ВГС. У сво1й робот! ми виршили вивчити питания про юнування ко-реляцмних зв'язюв м1ж певними генотипами 11_-28В та прогнозом ВЕБ-¡нфекци, а також вивчити частоту зустр1чаемост1 тих чи ¡нших генотип1в гену 11_-28В.
Мета дослщження. Метою дано! роботи було вивчення поширеностт р1зних алел ¡в 11_-28В у пац1ен-т1в з хроычними формами ВЕБ- ¡нфекци.
Об'ект1 методи дослщження. Нами було обсте-жено 108 хворихз ХВЕБ, основними кгмычними про-явами у яких були р1зн1 ¡мунопатолопчн1 та ¡муноде-фщиты стани, яю були увмшли у I групу (табл. 1). До групи пор1вняння були включен 20 пац1ент1в, яю мали ванамнез1дан1 про перенесения ВЕБ-¡нфекци, але на час проведения дослщження не мають ыяких скарг (II група). Вк пац1ент1в становив вщ 20 до 65 роюв (се-реднм вк 35 рок1в ± 10,7 роюв), серед нихжшки ста-новили 62,2% (п = 66), чоловки - 38,8% (п = 42).
Таблиця 1. IOiíhíhhí групи спостереження
N9 з/п Групи спостереження Ктьюсть nauicHTÍB
1. nauicHTH з pi3HHMH проявами ВЕБ-¡нфекци: - Тривалий субфебрилтет - Неспециф1чна л1мфаденопат1я - Хрон1чний тонзил1т - СИНДРОМ XpOHiHHOÍ втоми - Реактивний артрит 108
31
29
21
16
11
2. Пац1енти, як1 перенесли ВЕБ в анамнезу без наявност1 скарг на час досл1дження 20
3. Всьо го 128
3a6ip анал1з1в та !х техычне виконання здмсню-валося в клш1ко-д1агностично1 лаборатори Обласно! кл1н1чно1 ¡нфекцмно! лкары, частина анал1з1в вико-нувалася в лабораторП «В1рола». У процес1 пщтвер-дження д1агнозу пац1ентам проводився загальний анал1з кров1, комплекс молекулярно-генетичних та серолопчних досл1джень.
Пол1морфнють ген1в визначали за допомогою методу пол1морф1зму довжин рестрктних фрагмен-tíb (ПДРФ) та методом пол1меразно! ланцюгово! реакцП (ПЛР) у режим1 «реального часу» на ампл1ф1-катор1 Rotor-Gene-3000 ф1рми Corbett Research та на детектуючому ампл1фкатор1 ДТ-96 ф1рми ДНК-технолог1я.
Для детекци досл1джуваних пол1морф1зм1в проводили ампл1ф1кацю певних дтянок вщповщних геыв. Для визначення алельних вар1ац1й гену IL-28B використовували комерцмну тест-систему ф1рми «ДНК-технолог1я».
Для виявленняточковихмутацм SNP 39743165Т> G (rs8099917) та SNP 39738787С> Т (rs12979860) гену IL-28B використовували метод ПЛР та ПДРФ. У якост1 матер1алу для дослщження використовува-лася ДНК, отримана з лейкоцит1в за допомогою ко-мерцмних реагент1в для видтення ДНК з кгмычного матер1алу «Ц1тол1з1н» ф1рми «АмплЮенс». Детекц1ю пол1морф1зму гену IL-28B rs12979860 проводили методом ПЛР у режим! «реального часу» на детектуючому ампл1фкатор1 ДТ-96 ф1рми ДНК-технолог1я. Пюля денатураци (80°С, 2 хв; 94°С, 5 хв) проводили ампл1фкац1ю з 51 циклу, кожен з яких включав: денатураци (94°С, 30 сек), отжиг праймер1в та елон-гацю (67°С, 10 сек) - 5 цикл1в; денатурацю (94°С, 5 сек), отжиг праймер1в та елонгац1ю (67°С, 5 сек) - 45 цикгмв; один цикл при 25°С, 30 сек. Автоматична де-текц1я результат1в ампл1ф1кацП проводилася прила-дом ДП-96. ПЛР проводили в обсяз1 35 мкл у розчи-Hi наступного складу: 20 мл розчину праймер1в, 10 мкл cyMiuji Taq- пол1мерази та буфера, а також 5 мкл ДНК. Експоненц1альне зростання ктькост1 продукту у канал1 FAM, та його вщсутнютьу канал1 НЕХдетек-туеться, як генотип СС; зростання в обох каналах детектуеться, як СТ i ттьки у канал1 HEX - як ТТ. Екс-поненц1альне зростання кшькост1 продукту у канал1 FAM, i його вщсутнютьу канал1 HEX детектуеться, як генотип ТТ; зростання в обох каналах детектуеться, якТй i ттьки в канал1 HEX - як GG.
Обробка даних. Статистична обробка результа-т1в досл1дження проводилася вщповщно до реко-мендацм до статистично! обробки медико-бюло-г1чних даних. Використовувався пакет статистичних програм STATISTICA 10.0. Для кожного вар1ац1йного ряду проводився розрахунок середньоарифметич-ного (М), середньоквадратичного в1дхилення (a) i середньо! похибки середньо арифметичного (т). За допомогою критер1ю Стьюдента-Ф1шера (t) проводилась оц1нка ймов1рност1 р1зниц1 середн1х величин у пор1внюваних трупах (р). Для визначення про-гностично! значущост1 обчислюваних показник1в, як1 вивчалися, використовували анал1з Парето. Для виявлення кореляцмних залежностей м1ж певними показниками використовувалися коефщ1ент коре-ляцП П1рсона (г) та ймов1рнють кореляцП (р). Якщо г = 0, то кореляцмний зв'язок вщсутнм; вщ 0,1 до ± 0,29 - слабкий; вщ ± 0,3 до ± 0,69 - середнм (по-м1рний); вщ ± 0,7 до ± 0,99 - сильний (виражений), ± 1 - повна. Якюы дан1 анал1зувалися за допомогою таблиць сполученост1 за критер1ем П1рсона %2. Кри-тичний р1вень статистично! значущост1 (р) дор1вню-вав 0,05.
Результати досл1дження та'fx обговорення. В
результат! проведено! роботи були виявлен1 статистично значущ1 вщмшност1 для алельних вар1ац1й гену IL-28B серед пац1ент1в досл1джуваних груп. У таблиц! 2 i 3 вказан1 отриман1 результати частоти виявлення окремих алельних пар у пол1морфних локусах ген1в цитоюыв.
У таблиц! 2 ми можемо побачити, що серед па-ц1ен"пв уЫх груп переважали вар1анти СС та СТ гено-тигпв у локус1 гз12979860 по гену П_-28В. У пац1ент1в з ХВЕБ, частота зустр1чаемост1 генотипу СС стано-вила 45,36%, (49хворих), генотипу СТ-43,52%, (47
Таблиця 2
Частота зустр1чаемост1 генотишв 11.-28В (локус гв"! 2979860)
Назва Локус Генотип I група (п=108) II група (п=20)
гену Абс. % Абс. %
СС 49 45,36 13 65
11_- 28 В Г812979860 СТ 47 43,52 7 35
ТТ 12 11,12 0 0
хворих), найбтьш рщюсним генотипом виявився генотип ТТ, осктьки частота його виявлення серед пац1ент1в дано! групи склала 11,12% (12 хворих). Серед пац1ент1в групи пор1вняння частота виявлення генотипу СС становила 65% (13 чол.), генотипу СТ - 35%, (7 чол.); генотип ТТ не було виявлено в жод-ного патента.
У таблиц! 3 ми можемо побачити, що серед пацг еттв уЫх груп переважали генотипи ТТ \ Тй у локус1 ^8099917 по гену 11_-28В. У пац1ент1в з ХВЕБ, яю увг йшлидо I групи дослщження, частота зустр1чаемост1 генотипу ТТ становила 67,59% (73 хворих), генотипу
Таблиця 3.
Частота зустр1чаемост1 генотишв 11.-28В (локус гз8099917)
Назва гену Локус Генотип I група (п=108) II група (п=20)
Абс. % Абс. %
11_- 28 В Г88099917 ТТ 73 67,59 16 80
Тй 29 26,85 4 25
йй 6 5,56 0 0
Тй - 26,85% (29 хворих), найбтьш рщюсним генотипом виявився генотип ОС, осктьки частота його виявлення серед пац1ент1в дано! групи склала 5,56% (6 хворих). Серед пац1ент1в групи пор1вняння часто-
Частота комбшацш алелей 11.-28В у пац1ентш дослщжуваних груп
11_- 28 В Iгрупа (п=108) II група (п=20) Статистична
локус Г812979860 локус Г88099917 Абс. % Абс. % достов1рнють
ТТ 47 43,51 12 60 р>0,05
СС Тй 2 1,85 1 5 р>0,05
йй 0 0 0 0
ТТ 25 23,15 4 20 р>0,05
СТ Тй 22 20,37 3 15 р>0,05
йй 0 0 0 0
ТТ 1 0,93 0 0 р>0,05
ТТ Тй 5 4,63 0 0 р>0,05
йй 6 5,56 0 0 р>0,05
та виявлення генотипу ТТ становила 80% (16 чол.), генотипу Тй - 25% (4 чол.); генотип йй не було виявлено у жодного патента.
Також нами було проведено анал1з поеднань р1з-них алельних вар1ацм серед пац1ент1в р1зних кгмычних груп, яю знаходились пщ нашим наглядом. При анал1з1 однонукпеотидних замш у регуляторних областях ^8099917 та гэ12979860 гену 11_28В були отримаы статистично значущ1 докази не-випадкового поеднання алельних пар СС та ТТ у I та II трупах спостереження (табл. 4).
Анал1зуючи отримаы дан1 було встановлено, що частота невипадкового поеднання алельних пар СС I ТТ у пац1ент1в групи пор1вняння була набагато вище, н1ж серед пац1ент1в з ХВЕБ, яю ув1йшли до I групи досл1дження, та становила 60%) (12 чол.) та 43,51%) (47 чол.) вщповщно. Серед пац1ент1в групи пор1вняння не було виявлено жодно! комб1нац1й генотипу ТТ у локус1 гз12979860 11_-28В з генотипами ТТ, Тй I йй у локус1 гз8099917, тод1 як серед хворих на ХВЕБ таю комбшаци вщзначалися. Звертае на себе увагу те, в жоднм з досл1джува-них груп не було виявлено пац1ент1в з комбшац1ею алельних пар СС-йй I СТ-ОО.
Також звертае на себе увагу наступна тенденц1я: лише у частини пац1ент1в з ХВЕБ, яю знаходились у I груп1 доогмдження, та у бтьшост1 пац1ент1в групи пор1вняння част1ше виявлялося поеднання генотипу СС у л о кус I гэ 12979860 И-28В та генотипу ТТ у локус1 гз8099917. Це дозволяе припустити, що при виявлены у пац1ент1в под1бно! комб1нацП слщ оч1кувати б1льш легкого переб1гу захворю-вання та бтьш сприятливого прогнозу. Дана ппотеза вимагае подальшого вивчення та буде нами опрацьована найближчим часом.
Висновки. В результат! проведених дослг джень нами встановлено, що домшуючим генотипом 11_-28В гз12979860 е генотип СС, який виявлявся у 49 хворих (45,36%) ХВЕБ I у 13 чол. (65%) групи пор1вняння. 1нш1 комбшаци алельних пар зустр1чалися набагато рщше. Анал1з локусу 11_-28В гз8099917 дозволив встановити високу частоту вериф1кацИ генотипу ТТ у пац1ент1в групи пор1внян-ня (16 чол., що скпало 80%) та вияв-Таблиця 4. лявся у частини хворих на ХВЕБ, яю складали I групу (73 чол., що скпало 67,59%). Частота невипадкового поеднання алельних пар СС та ТТ у па-ц1ент1в групи пор1вняння була набагато вище, ыжсеред хворих на ХВЕБ, яю входили у I групу та становила 60% (12 чол.) та 43,51% (47 чол.) вщповщно, що може служити маркером бтьш сприятливого прогнозу. У пацг ент1в групи пор1вняння не було виявлено комбшацм генотипу ТТ в локус1 гэ 12979860 11_-28В з генотипами ТТ, Тй I йй в локус1 гз8099917, тод1 як в груп1 хворих на ХВЕБ I групи таю комбшаци вщзначалися. Виявлеы подг бн1 комб1нацИ дозволяють припуска-ти, що у даних пац1ент1в е тенденц1я
до формування хронмчних рецидивуючих форм ВЕБ-¡нфекци.
Перспективи подальших дослщжень. На-
ступним напрямком нашо! роботи буде доогмджен-ня впливу генотигмв IL-28B на nepe6ir ВЕБ-¡нфекцм,
частоту рецидивування та прогноз. Також перспек-тивними е дослщження ефективност1 Tepani'i та оптим1зац1я схем против1русно! Tepani'i в залежностт вщ генотипу патента.
JliTepaTypa
1. Vozianova G.I. Infekcijnij mononukleoz, yak polietiologichne zahvoruvannya/G.I. Vozianova, G.I. Glej //Suchasni infekcii. - 2004. - № 2. -S. 37-41.
2. Gerpes pathogen i laboratornaja diagnostika/V. A. Isakov, V.V. Borisova, D.V. Isakov. -SPb., 1999 - 190 s.
3. Znachenie markerov gerpeticheskih virusovdlj ocenki sostojanija zdorovja detej / N.U. Egorova, F.S. Harlamova, V.F. Uchajkin [i dr.] // Detskie infekcii. - 2008. - № 2. - S. 16-21.
4. Immunologicheskie kriterii naznachenija immunokorrigiruushchih preparatov pri infekcionnom mononukleoze u detej / G.F. Zheleznikova, V.V. Ivanova, A.S. Levina [i dr.] //Allergologija I immunologija. - 2006. - № 3. -S. 335-336.
5. Infekcionnij mononukleoz, associirovannij s virusom gerpesa 6 tipa / E.V. Novosad, O.V. Shamsheva, N.D. L'vov [i dr.] // Detskie infekcii. -2008. - № 1. -S. 36-38.
6. Isakov V. A. Gerpesvirusnie infekcii cheloveka: Rukovodstvo dlya vrachej / V.A. Isakov, E.I. Arhipova, D.V. Isakov. - SPb.: Spec Lit., 2006. -302 s.
7. Kann N.U. Znachenie persestiruyushchej gerpesvirusnoj infekcii vformirovanii vtorichnogo immunodeficita u chastoboleushchih detej / N.U. Kann // Detskie infekcii. - 2008. - № 2. - S. 64-66.
8. Karagas N.V. Epidemiologicheskaya harakteristika citomegalovirusnoj infekcii i pnevmocistoza, cac oportunisticheskih infekcij. Dis. doct. biol. nauk / N.V. Karagas. - Moskwa, 2002. - 181 s.
9. Kel'cev V.A. Funkcional'noe sostoyanie i vzaimosvyaz' immunnoj i endokrinnoj system u bol'nih Epshtejn-Barr virusnim mononukleozom / V.A. Kel'cev, L.I. Grebenkina, E.V. Petrova // Detskie infekcii. - 2005. - № 1. - S. 29-32.
10. Mukke N.A. HHV-6 associrovannaya infekciyavstructure lihoradochnih zabolevanij u detej i podrostkov/ N.A. Mukke, I.V. Zubkova //Vopr. sovremennoj, pediatrii. - 2006. - № 1. - S. 401.
11. Osnovi immunologii / A.A. Yarilin. - M.: Medicina, 1999. - 608 s.
12. Problemi diagnostiki i klassifikacii vtorichnih immunodeficitov/V.S. Shirinskij, N.M. Starostina, U.A. Sennikova, O.A. Malisheva // Allergologiya i immunologiya. - 2000. - № 1. - S. 62-70.
13. Uchajkin V.F. Rukovodstvo po infekcionnim boleznyaaam u detej / V.F. Uchajkin. - M.: GEO TAR Medicina, 1999. - 824 s.
14. Fomin V.V. O vozmognih mehanizmah giperchuvstvitel'nosti nemedlennogo tipa pri infekcionnom mononukleoze u detej / V.V. Fomin, E.E. Udilova//Ural. Med.zhurn. -2007. - №3. -S. 14-20.
15. HmilevsskayaS.A. Kliniko-laboratornie osobennosti CMV-virusnogo mononucleoza/S.A. Hmilevskaya, I.A. Zajceva, E.V. Mihajlova //Aktual'nie voprosi infekcionnoj patologii i vakcinoprofilaktiki: mater. VI kongr. Detskih infekcionistov Rossii. - M., 2007. - 103 s.
16. Addy PA. Jaundice and infectious mononucleosis in Ghana / PA. Addy, T. Ahiabor, C. Amane, M.A. Pappoe //African Journal of Medicine and Medical Scinces. - 1978. -V. 7. - P. 85-92.
17. Airoldi A. Epstein-Barr virus (EBV) load and interleukin-10 in EBV-positive and EBV-negative post-transplant lymphoproliferative disorders/A. Airoldi, A. Alberti, E. Bonacina, B. Airoldi [etal.]// British Journal of Haematology. -2003. - Vol. 122, № 6. - P. 927-933.
18. Alexander F.E. Epstein-Barr Virus and HLA-DPB1 -0301 in young adult Hodgkin's disease / F.E. Alexander, R.F. Jarret, R.A. Cartwright, W.F. Jarret [etal.] //Cancer Epidemiol. Biomarkers &Prevention. - 2001. - Vol. 10. - P. 705-709.
19. Bagert B.A. Epstein-Barr virus in multiple sclerosis / B.A. Bagert // Current Neurology and Neuroscience Reports. - 2009. -№9. - P. 405-410.
20. Bibert S. IL28B expression depends on a novel TT/-G polymorphism which improves HCV clearance prediction / S. Bibert, T. Roger, T. Calandra, W. Roger [etal.]//The Journal of Experimental Medicine. - 2013. - Vol. 210. - P. 1109-1116.
21. Chan C.W. Epstein-Barr virus-associated infectious mononucleosis in Chinese children / C.W. Chan, A.K. Chiang, K.H Chan, A.S. Lau //The Pediatric Infectious Disease Journal. - 2003. - № 22. - P. 974-978.
22. Dawson C.W. Epstein-Barr virus latent membrane protein 1 (LMP1) activates the phosphatidylinositol 3-kinase. Akt pathway to promote cell survival and induce action filament remodeling / C.W. Dawson, G. Tramountanis, A.G. Ehopoulos, L.S. Young//The Journal of Biological Chemistry. -2003. - Vol. 278, № 6. - P. 3694-3704.
23. Frade R. Gp. 140, the C3d receptor of human B lymphocytes, is also the Epstein-Barr - virus receptor / R. Frade, M. Barel, W. Frade, R. Barel [etal.]// Proceedings of the National Academy of Sciences. - 1985. - Vol. XVI, № 2. - P. 419-427.
24. Franco S. IL28B SNP rs8099917 is strongly associated with pegylated interferonalpha and ribavirin therapy treatment failure in HCV/HIV-1 coinfected patients/S. Franco // Public Library of Science. - 2010. - Vol. 5. - P. 13771.
25. Ivanova V.V. Prolonged immunosuppression and possible chronic infection in children with infectious mononucleosis/V.V. Ivanova, O.V. Rodionova, G.F Zheleznikova // Henry journal of Perinatology & Pediatrics. - 2003. - № 4. - P. 50-59.
26. Jill E.R. The Intersection of Epstein-Barr Virus with the Germinal Center / E.R. Jill, A. David // Journal of Virology. - 2009. -Vol. 83, № 8. - P. 3968-3976.
27. Kann N.Yu. Value of persistent herpesvirus infection in the formation of secondary immunodeficiency in frequently ill children / N.Yu. Kann // Neonatal Sepsis/Infection - Journal of Neonatal Nursing. - 2008. - № 2. - P. 64-66.
28. Lander E.S. Initial sequencing and analysis of the human genome / E.S. Lander // Nature: International weekly journal of science. -2001. - № 409 (6822). - P. 860-921.
29. LiW. Epstein-Barr virus in hepatocellular carcinogenesis /W. Li, B.A. Wu,YM. Zeng, M. Li [etal.] //World Journal of Gastroenterology. -2004. - Vol. 10, № 23. - P. 3409-3413.
30. Marcello T. Interferons alpha and lambda inhibit hepatitis C virus replication with distinct signal transduction and gene regulation kinetics/T. Marcello //Gastroenterology. - 2006. - № 131 (6). - P. 87-98.
31. Molesworth S.J. EBV gH is essential for penetration of В cells but also plays a role in attachment of virus to epithelial cells / S.J. Molesworth, C.M. Lake, C.M. Borza //World Journal of Virology. -2000. - Vol. 274, № 14. - P. 6324-6332.
32. Nielsen L. A mucapture immunoassay for detection of human herpesvirus-6 (HHV-6) IgM antibodies in human serum / L. Nielsen, B.F. Velstergaard //Journal of Clinical Virology. - 2002. - Vol. 25. - P. 145-154.
33. Rauch A. Genetic variation in IL28B is associated with Chronic Hepatitis С and treatment failure: a genome-wide association study / A. Rauch //Gastroenterology. -2010. - Vol. 138, № 4. - P. 18-45.
34. Razonable R.R. Detection of simultaneous р-herpesvirus infections in clinical syndromes due to defined cytomegalovirus infection / R.R. Razonable, A. Rivero, R.A. Brown, B. Rivero [et al.]//Clinical Transplantation Journal. -2003. - Vol. 17, № 2. - P. 114-120.
35. Sheppard P. IL-28, IL-29 and their class II cytokine receptor IL-28R / P. Sheppard [et al.] // Mongraphy Immunoly. - 2003. - № 4 (1). - P. 63-68.
36. Shirinsky V.S. Problems of diagnosis and classification of secondary immunodeficiencies / V.S. Shirinsky, N.M. Starostina, Yu.A. Sennikova, O.A. Malysheva //Allergology and immunology. - 2000. - № 1. - P. 62-70.
37. Suppiah V. IL28B is associated with response to chronic hepatitis С interferon-alpha and ribavirin therapy / V. Suppiah // Monography Genetics. - 2009. - № 41. - P. 1100-1104.
38. TanakaY Genome-wide association of IL28B with response to pegylated interferon-alpha and ribavirin therapy for chronic hepatitis C/Y Tanaka // Monography Genetics. -2009. - № 41. - P. 1105-1109.
39. Tsega E. Serological and demographic survey of Epstein-Barr virus infection in Ethiopia / E. Tsega, B. Mengesha, B.G. Hansson, E. Nordenfelt [et al.] // Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene. - 1987. - № 81. - P. 677-680.
40. Zheleznikova G.F. Immunological criteria for prescribing immunocorrecting drugs for infectious mononucleosis in children / G.F. Zheleznikova, V.V. Ivanova, A.S. Levina, M.V. Ivanova [et al.] //Allergology and immunology. - 2006. - № 3. - P. 123-127.
41. Zhou L. IL-29/IL-28A suppress HSV-1 infection of human NT2-N neurons / L. Zhou, Jieliang Li, Xu Wang, Li Ye [et al.] // Journal of Neuro Virology. -2011. -Vol. 17, №3. -P. 212-219.
УДК 577.27:577.175.1:575.22:578.825.13
ВИВЧЕННЯ ПОШИРЕНОСТ1 Р13НИХ AJ1EJ11В 1НТЕРЛЕЙК1НУ-28 У ПАЦ16НТ1В 3 ХРОН1ЧНИМИ ФОРМАМИ ЕПШТЕЙНА-БАРР В1РУСНОГ1НФЕКЦМ Сорокша О. Г., Попов М. М., Лядова Т. I.
Резюме. Майже у 95% дорослого населения виявляються специф1чн1 антитта до Bipycy Епштейна-Барр (ВЕБ). Метою дано! роботи було вивчення поширеност1 р1зних ал ел ¡в IL-28B у пац1ент1в з хроычними формами ВЕБ- ¡нфекци. Нами було обстежено 108 хворих з хроычними формами ВЕБ- ¡нфекци, головними клш1чними проявами в яких були pi3Hi ¡мунопатолопчы стани (I трупа). До групи пор1вняння були включен 20 пац1ент1в, у яких в анамнез! були даы за перенесения ВЕБ, але на момент проведения дослщження вони не мали жодно! скарги (II трупа). В результат! проведених досл1джень було виявлено, що частота поеднання алельних пар СС i ТТ у пац1ент1в групи пор1вняння була значно вищою, н1ж у пац1ент1в I групи (rs12979860). Комбшацм генотипу ТТ з генотипами ТТ, TG i GG (rs8099917) у rpyni пор1вняння не виявля-лось, тод1 як у пац1ент1в I групи таю поеднання вщзначалися. Виявлен1 комбЫаци дозволяють припустити, що у даних пац1ентт е тенденщя до формування хрошчних рецидивуючих форм ВЕБ-шфекцм.
Ключов1 слова: ¡нфекцмний мононукпеоз, Епштейна-Барр в1русна ¡нфекц1я, генотип, цитокши, ¡нтер-лейкш-28, пол1морф1зм геыв.
УДК 577.27:577.175.1:575.22:578.825.13
ИЗУЧЕНИЕ РАСПРОСТРАНЕННОСТИ РАЗЛИЧНЫХ АЛЛЕЛЕЙ ИНТЕРЛЕЙКИНА-28 У ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКИМИ ФОРМАМИ ЭПШТЕЙНА-БАРР ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ Сорокина О. Г., Попов Н. Н., Лядова Т. И.
Резюме. Почти у 95% взрослого населения выявляются специфические антитела к вирусу Эпштейна-Барр (ВЭБ). Целью данной работы было изучение распространенности различных аллелей IL-28B у пациентов с хроническими формами ВЭБ-инфекции. Нами было обследовано 108 больных с хроническими формами ВЭБ-инфекции, основными клиническим проявлениями у которых были различные иммунопатологические состояния (I группа). В группу сравнения были включены 20 пациентов, имевших в анамнезе данные о перенесенной ВЭБИ, но не имеющих на момент проведения исследования никаких жалоб (II группа). В результате проведенных исследований было выявлено, что частота сочетания аллельных пар СС и ТТ у пациентов группы сравнения была значительно выше, чем у пациентов I группы (rs12979860). Комбинаций генотипа ТТ с генотипами ТТ, TG и GG (rs8099917) в группе сравнения не выявлялось, тогда как в группе пациентов I группы такие сочетания отмечались. Выявленные комбинации позволяют предполагать, что у данных пациентов имеется тенденция к формированию хронических рецидивирующих форм ВЭБ-инфекции.
Ключевые слова: инфекционный мононукпеоз, Эпштейна-Барр вирусная инфекция, генотип, цитокины, интерлейкин-28, полиморфизм генов.
UDC 577.27:577.175.1:575.22:578.825.13
THE STUDY OF THE PREVALENCE OF DIFFERENT ALLELES OF INTERLEUKIN-28 IN PATIENTS WITH CHRONIC FORMS OF THE EPSTEIN-BARR VIRUS INFECTION
Sorokina O. G., Popov N. N., Liadova Т. I.
Abstract. In the modern world, infectious diseases occupy a dominant place in human pathology. The structure of herpesvirus infections Epstein-Barr virus (EBV) is an important place. This is due to a high degree of infection of the population around the world, depending on the specific virus detected in almost 95% of the adult population. The aim of this work was to study of the prevalence of different alleles of IL-28B in patients with chronic forms of the EBV- infection. We examined 108 patients with chronic forms of the EBV- infection, the main clinical manifestations of which were various immunopathological and immunodeficient conditions that were included in the I group. The comparison group included 20 patients who had in anamnesis EBV- infection, but did not have any complaints at the time of the study (group II). Statistical processing of the results of the study was carried out in accordance with the recommendations for statistical processing of biomedical data.
As a result of the study, it was found that patients of all groups were dominated by variants of CC and CT at the locus rs12979860 for the IL-28B gene. In patients with chronic EBV-infection (I group), the frequency of occurrence of CC genotypes was 45.36%, CT - 43.52%, the genotype TT - 11.12% was revealed as the most rare genotype. In the comparison group, the frequency of occurrence of CC genotypes was 65%, CT - 35%, the genotype of TT was not detected by anyone. In patients of all groups, variants of TT and TG prevailed in the locus rs8099917 for the IL-28B gene. In patients with chronic EBV-infection (I group), the incidence of genotypes of TT was 67.59%, TG - 26.85%, the genotype GG 5.56% was the rarest genotype. In the II group of subjects, the incidence of genotypes of TT was 80, TG - 25%, the genotype of TT was not detected in anybody in this group. A combination of the CC genotype at the locus rs 12979860, and the TT genotype at the locus rs8099917 was more often found in some patients with chronic EBV- infection (I group), as well as in the comparison group for the IL-28B gene. Patients of the comparison group in the IL-28B gene did not have combinations of the TT genotype at the locus rs 12979860 with the TT, TG and GG genotypes at the locus rs8099917, whereas in the group of patients with chronic EBV-infection (I group) such combinations were noted.
Conclusions. As a result of our studies, we found that the dominant genotype of IL- 28B rs 12979860 is the CC genotype. The frequency of a nonrandom combination of allele pairs CC and TT in patients of the comparison group was much higher than in the group of persons with chronic EBV- infection (I group). Analysis of the locus IL-28B rs8099917 allowed to establish a high frequency of verification of the TT genotype in patients with chronic EBV- infection (I group) and in the comparison group. The frequency of a nonrandom combination of allele pairs CC and TT in patients of group II was much higher than in the group of persons with chronic EBV-infection (I group). The comparison of the TT genotype in the locus rs 12979860 IL-28B with the TT, TG and GG genotypes in locus rs8099917 was not found in the comparison group patients, whereas in the group of patients with chronic EBV- infection (I group) such combinations were noted. The revealed combinations suggest that these patients tend to form chronic recurrent forms of the EBV- infection.
Keywords: infectious mononucleosis, Epstein-Barr virus infection, genotype, cytokine, interleukin-28, the polymorphism of genes.
Рецензент - проф. Дубшш С. I.
Стаття надшш ла 21.07.2017 року
