CC BY
84
Раздел 2 Педиатрия
ках, гастроинтестинальном тракте и мозге, что объясняет многосистемность поражения. В отечественной литературе описаны единичные случаи этого редкого заболевания. Систематизация уникальных случаев имеет важное значение для изучения клинического полиморфизма и генетической гетерогенности заболевания, поиска наиболее эффективных методов терапии с целью улучшения качества жизни больных с этим тяжелым заболеванием.
Цель: дать клиническую, гормональную и молекуляр-но-генетическую характеристику случаев синдрома Олгрова.
Материалы и методы: диагноз синдрома Олгрова был нами установлен у 2 пациентов в возрасте 10,5 и 7,5 лет, соответсвенно. Анализ гена АААЗ проводился с помощью метода прямого автоматического секвени-рования.
РЕЗУЛЬТАТЫ: клиническое наблюдение 1. Диагноз синдрома Олгрова заподозрен у мальчика 10,5 лет с первичной надпочечниковой недостаточностью после исключения у него Х-сцепленной адренолейкоди-строфии. Обращали внимание сочетание первичной надпочечниковой недостаточности с алакримией и ахалазией, а также отягощенность семейного анамнеза (близкородственный брак и наличие сибсов, девочек 1,5 мес. и 3,5 лет, умерших в данном возрасте, причина смерти не установлена, вероятнее от надпочечниковой недостаточности, как проявлении синдрома Олгрова). При гормональном обследовании отмечено выраженное повышение уровня АКТГ > 1250 пг/мл, при норме до 46 пг/мл, низкий уровень кортизола < 27,6 нмоль/л (норма 55-690), повышенный уровень ренина — 58,8 (норма 4,4-46,1 мкМЕ/мл), 17OH-прогестерон был в норме 1,2 нмоль/л (норма 1,0-6,0). При молекулярно-генетическом исследовании гена ЛЛЛЗ выявлено изменение нуклеотидной последовательности с.709delC, не описанное в базах данных по мутациям и полиморфизмам, приводящее к преждевременной терминации белка. Клиническое наблюдение 2. У девочки 7,5 лет был заподозрен синдром Олгрова в связи с жалобами на отсутствие слез с рождения (алакримия), сухость кожных покровов, плохие зубы (постоянно на лечении у стоматолога), затруднения при глотании твердой пищи (не может глотать таблетки), моторную неловкость, особенности походки, затруднения в обучении, сложности в общении со сверстниками. При гормональном обследовании уровень АКТГ — 55,6 (норма менее 46 пг/мл, при стрессе до 100), кортизол — 398,21 (норма 185-624 нмоль/л), активность ренина плазмы в норме. Проведена проба с синактеном-депо с целью исключения скрытой надпочечниковой недостаточности, уровень кортизола через 24 ч. после введения синактена-депо составил 1500нмоль/л, что исключило надпочечниковую недостаточность (НН) у девочки в настоящий момент, но не исключает развитие НН в последующем. Для подтверждения диагноза синдром Олгрова девочке проведена ДНК-диагностика. При молекулярно-генетическом исследовании гена ЛЛЛЗ выявлено изменение нуклеотидной последовательно-
сти с.856С>Т, приводящее к замене p.Arg286Term в гомозиготном состоянии, описанное в международной базе данных по мутациям HGMD (CM 10151). Проведена ДНК диагностика родителей и сибса пробанда. У сибса пробанда — девочка 1 год 4 месяца — не выявлено семейной мутации p.Arg286Term. Мать и отец пробанда являются носителями семейной мутации. Выводы: данные наблюдения подчеркивают необходимость включения синдрома Олгрова в алгоритм дифференциальной диагностики первичной надпо-чечниковой недостаточности у детей, а также у детей с изолированными проявлениями, такими как алакри-мия и ахалазия пищевода. Дополнительные методы исследований помогают уточнить диагноз, а современные методы молекулярно-генетического анализа, помимо точного диагноза, позволяют проводить медико-генетическое консультирование семей для оценки рисков и возможности пренатальной диагностики при планировании в конкретной семье последующего деторождения.
ВАРИОМНЫЙ АНАЛИЗ ВЫСОКОФУНКЦИОНАЛЬНОГО АУТИЗМА (СИНДРОМА АСПЕРГЕРА)
Юров И.Ю.1-2-3, Ворсанова С.Г.1-2-4, Зеленова М.А.1-2-4, Строганова Т.А.4, Юров Ю.Б.1-2-4 'ФГБНУ «Научный центр психического здоровья», г. Москва
2Обособленное структурное подразделение ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова «Научно-исследовательский клинический институт педиатрии» Минздрава России, г. Москва
3ГБОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования Минздрава России, г. Москва
4ГБОУ ВПО «Московский городской психолого-педагогический университет», г. Москва
Синдром Аспергера (высокофункциональный аутизм) характеризуется трудностями в социальном взаимодействии, ограниченным репертуаром интересов/ занятий и четырехкратным (по некоторым данным - восьмикратным) преобладанием мужского пола. Распространенность заболевания варьирует от 1:250 до 1:5000. Примечательно, что изучения вариаций числа копий последовательностей ДНК (С№Мз) при данном заболевании проводились крайне редко. В настоящей работе были исследованы 15 мальчиков с синдромом Аспергера (4-17 лет) с помощью вариом-ного анализа — молекулярного кариотипирования в сочетании с оригинальной биоинформатической технологией. У двух мальчиков были обнаружены дупликации в участках Yq11.222 и Yq11.223q11.23 (размер: 0,28 и 1, 9 млн пн, соответственно). У пациента с дупликацией Yq11.222 также были обнаружены деле-ции в генах KRT6C, OTOA и PAK3, ассоциированного с умственной отсталостью и вовлеченного в геномную сеть аксонального наведения. У одного ребенка была выявлена делеция в участке 3p22.1p21.32 с во-
РОССИЙСКИЙ ВЕСТНИКПЕРИНАТОЛОГИИ И ПЕДИАТРИИ, 4, 2015
ИННОВАЦИОННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ В ПЕДИАТРИИ И ДЕТСКОЙ ХИРУРГИИ
влечением кластера генов цинковых пальцев и гена ССК. В других случаях были выявлены делеции генов SLC19A3, LYAR, СН1Т1; трипликации в генах RHBDD1и SHISA5; дупликации генов MXRЛ5, WWP2, ZNF264, ЛиЖС и SLC6Л14; делеции первого экзона гена NDE1 и 5-8 экзонов гена WT1; триплика-ция 13 экзонов гена LPЛ (АРОА). Настоящее исследование демонстрирует то, что вариомный анализ позволяет определять гены-кандидаты такого клинически и этиологически гетерогенного заболевания, как синдром Аспергера. Следовательно, дальнейшее изучение вариома (совокупности клинически значимых в расширенной когорте детей с высокофункциональным аутизмом является оправданным. Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда (проект №14-35-00060).
МОЛЕКУЛЯРНО-ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКАЯ ТЕХНОЛОГИЯ Ш SILICO ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ГЕНОМНОЙ ПАТОЛОГИИ
ЮровИ.Ю.123, Ворсанова С.Г.1-2-4, Васин КС.1-2-4, Юров Ю.Б.124
'ФГБНУ «Научный центр психического здоровья», г. Москва
Обособленное структурное подразделение ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова «Научно-исследовательский клинический институт педиатрии» Минздрава России, г. Москва 3ГБОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования Минздрава России, г. Москва
4ГБОУ ВПО «Московский городской психолого-педагогический университет», г. Москва
На современном этапе развития геномики человека использование биоинформатических методов является необходимым для интерпретации полученных данных, поиска генов-кандидатов, анализа геномных ассоциаций и определения молекулярных/клеточных механизмов заболеваний. К подобным технологиям можно отнести приоритезацию генов, которая позволяет оценивать патогенность геномных перестроек и ассоциировать вариабельность последовательностей ДНК с определёнными фенотипическими проявлениями. В настоящей работе предложена био-информатическая технология приоритезации геномных вариаций, основанная на анализе эпигеномных, протеомных и метаболомных баз данных. Межтканевая вариабельность экспрессии генов была выбрана определяющим критерием классификации патологических и приоритезации геномных состояний. Для тестирования предложенной технологии были исследованы 286 вариомов (совокупность изменений копийности последовательностей геномной ДНК) пациентов с умственной отсталостью, аутизмом и/или врождёнными пороками развития, полученных методом молекулярного кариотипирования. В результате исследования были выявлены 6 генов-кандидатов, изменения последовательности ДНК которых можно
рассматривать как ассоциированные с нарушениями психики: KALRN, TM2D3, CYP39A1, DIAPH3, ATP11B и STOX2. При анализе анеуплоидии (трисомии хромосомы 21 или синдрома Дауна) с помощью данной биоинформатической технологии были обнаружены гены-кандидаты патологии головного мозга при этом заболевании: CXADR, GABPA, APP, TIAM1, SYNJ1, SON, ATP50, TTC3, HMGN1, PDXK, SUMO3, S100B. Таким образом, можно сделать вывод о том, что применение данной технологии для приоритезации генов и процессов-кандидатов, позволяет определить генетические механизмы нарушения психики. Исследование выполнено за счёт гранта Российского научного фонда (проект №14-35-00060).
МОЛЕКУЛЯРНАЯ ДИАГНОСТИКА СУБТЕЛОМЕР-НОЙ ДЕЛЕЦИИ КОРОТКОГО ПЛЕЧА ХРОМОСОМЫ 6
Юров Ю.Б.1-2-3, Ворсанова С.Г.1-2-3, Зеленова М.А.1-2-3, Ратников А.М.1, Юров И.Ю.1-2-4 'ФГБНУ «Научный центр психического здоровья», г. Москва
Обособленное структурное подразделение ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова «Научно-исследовательский клинический институт педиатрии» Минздрава России, г. Москва 3ГБОУ ВПО «Московский городской психолого-педагогический университет», г. Москва 4ГБОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования Минздрава России, г. Москва
Субтеломерные делеции короткого плеча хромосомы 6 являются редкой хромосомной патологией, и обладают ярко выраженной клинической гетерогенностью, для которой характерны задержка психомоторного развития, умственная отсталость, нарушение развития речи, потеря слуха, микроаномалии развития, офтальмологические нарушения, патология сердца, почек и головного мозга. Разнообразие фе-нотипических проявлений делеций в участке 6p25 обуславливает необходимость описания новых случаев с использованием высокоразрешающих методов сканирования генома для определения корреляции генотип-фенотип. В настоящей работе представлен случай делеции 6p25.3p25.2, обнаруженной методом серийной сравнительной геномной гибридизации (array CGH) у девочки 7-ми лет с умственной отсталостью, фокальной (симптоматической) эпилепсией, врождённым пороком сердца, гипертелоризмом глазных щелей и частичной атрофией зрительного нерва. Данный метод позволил выявить аномалию размером более 3 млн пн. Перестройка затронула 35 генов, 15 из которых индексированы в OMIM. Среди последних необходимо отметить гены FOXC1 и FOXC2, которые относятся к транскрипционным факторам семейства forkhead и играют значительную роль в регуляции различных процессов в эмбриональных тканях, развития органов зрения и сердца, а также фунциони-
РОССИЙСКИЙ ВЕСТНИКПЕРИНАТОЛОГИИ И ПЕДИАТРИИ, 4, 2015
