CC BY
50
Vol. 22, № 9. - P.831-838. 8. Jeney V., Balla J., Yachie A. et al. Prooxidant and cytotoxic effects of circulating heme // Blood. - 2002. - Vol.100, №3. - P. 879887. 9. Wagener F.A.D.T.G., Volk H.D., Willis D. et al. Different faces of the heme-heme oxygenase system in inflammation // Pharmacol. Rev. - 2003. -Vol.55, №3. - P. 551-571.
ФЕРМЕНТАТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ПРЕПАРАТА ФЕРРАН
Пудовкин Н.А. Поперечнева Т.Ю., Кутепова И.Ю., Сазонов А.А.
Резюме
В статье изложены результаты исследований влияния препарата ферран на активность фермента каталазы в сыворотке крови белых крыс.
Установлено, что после введения препарата ферран не происходит сбой в работе антиоксидантной системы.
ENZYME ACTIVITY OF ANTIOXIDANT SYSTEM AFTER MEDICINE FERRAN HAS
BEEN APPLEIED
Pudovkin N.A., Poperechneva T.J., Kutepova I.J., Sazonov A.A.
Summary
The research results of the influence of medicine ferran on active of catalase in blood serum of white rats.
It was proved that after the medicine has been applied there are no problems in antioxidant system functioning.
УДК 619:614.616.6
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ДЕЗИНФЕКТАНТА НАТОПЕН
Равилов Р.Х., Угрюмов О.В., Фаткуллова А.А., Гайфуллин Р.М.,
Г арипов Л.Н.
ВГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины
имени Н.Э. Баумана»
ОАО НИИ «Нефтепромхим» филиал ООО «Фосфорос» в г. Казани ООО «Челны-Бройлер», РТ ЗАО «Бирюли», РТ
Ключевые слова: дезинфектант, токсикологические,
гематологические, биохимические показатели.
Key words: disifectant, toxicological, hematological, biochemical indicators.
В настоящее время особое место в рецептуре композиционных новых дезинфицирующих средств занимают четвертичные аммониевые соединения (ЧАС). Эти вещества составляют основу большей части новых разработок российского и зарубежного производства. Введение ЧАС в рецептуру дезинфицирующих средств обеспечивает снижение токсичности, приданию дезинфектантам антикоррозийных средств и усилению биологической активности, обусловленной синергизмом [9, 2].
Натопен - принципиально новое эффективное дезинфицирующее средство широкого спектра антимикробного действия, содержащее в своем составе ЧАС [6, 7]. При разработке и внедрении новых дезинфицирующих средств наряду с изучением их биологической активности необходимым является изучение токсикологических свойств. Согласно Методическим указаниям «Оценка токсичности и опасности дезинфицирующих средств» (МУ1.2.1105-02) [4], утвержденным Главным государственным санитарным врачом РФ 10.02.02г., изучение токсичности дезинфицирующих средств определяется видом дезинфекции с дифференцированным подходом к их изучению.
Исходя из вышеизложенного, целью данных исследований являлось изучение токсикологических показателей дезинфектанта Натопен.
Материалы и методы. Исследования проводили в следующей последовательности: оценка параметров «острой» токсичности; изучение местно-раздражающего действия и действия на слизистые оболочки глаз; кожно-резорбтивное действие; изучение влияния препарата Натопен на клинический статус, гематологические и биохимические показатели крови сельскохозяйственных животных и птиц.
Исследование «острой» оральной токсичности дезинфицирующего средства Натопен проводили общепринятыми методами согласно «Методическим указаниям по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве», «Руководству по
экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ [3, 8]. Величину ЛД^ вычисляли по методу Кербера. Полученные величины ЛД50 при введении в желудок классифицировали по 4 классам опасности в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76.
Определение кожной резорбции проводили в подостром эксперименте на крысах (10-20 аппликаций) с ежедневной экспозицией 2-4 часа. Нанесение препарата осуществляли пробирочным методом на 2/3 хвоста животного, что составляет 5% поверхности тела. Обследование подопытных животных проводили через 5-10-20 аппликаций. Влияние препарата Натопен на организм телят, КРС и взрослых кур после проведения влажной дезинфекции изучали с применением клинических,
гематологических и биохимических исследований общепринятыми методами [1]. Гемотологические и биохимические исследования проводили общепринятым методом с использованием аппаратов-анализаторов Hema screm 13 и screm master.
Исследования лейкоцитарной формулы крови проводили в окрашенных по Романовскому-Гимза мазках периферической крови. Подсчитывали не менее 200 клеток, а затем выводили процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов. Количество общего белка в сыворотке крови определяли с помощью рефрактометра ИРФ-22. Определение фракций белка сыворотки крови проводили методом Олла и Маккарда в модификации Карпюка А.С.
Оценку местно-раздражающего действия проводили согласно методическим указаниям «Оценка воздействия вредных химических соединений на кожные покровы и обоснование предельно-допустимых уровней загрязнения кожи» [5] в однократных и повторных (10-12 аппликаций) опытах. В экспериментах использовали 2 вида животных (кролики, белые крысы). Для изучения раздражающего действия на кожу животных отбирали со светлой кожей. Время экспозиции составляло 4 часа. Препарат наносили в нативном виде из расчета 20 мг/см площади выстриженного участка. Площадь участка аппликаций для кроликов составляла 8х9 см., для крыс - 3х4 см. Реакцию кожи регистрировали через 20 часов и затем в течение 14 дней после воздействия по сравнению с симметричными контрольными участками кожи того же животного. Отмечали функционально-морфологические изменения кожи (эритема, отек, трещины, изъязвления, сухость, шелушение и др.). Выраженность эритемы определяли визуально или с помощью колориметрической линейки. Классификацию эритемы проводили в баллах. Величину отека определяли путем изменения кожной складки (мм). Изучение местного действия препарата на слизистую оболочку глаза проводили однократно на кроликах. В один глаз вносили препарат в количестве 1-2 капли, другой глаз служил контролем. Регистрация изменений слизистой оболочки глаза, склеры, роговицы проводили визуально сразу после воздействия, через час и ежедневно в течение 14 дней. Отмечали выраженность гиперемии и отека слизистой оболочки, инъекцию сосудов клеры, состояние роговицы, количество и качество выделений из глаз.
Результаты исследований. При изучении острой оральной токсичности препарата Натопен было установлено, что у мышей оральное введение раствора препарата в минимальных дозах (800-700 мг) на кг живой массы вызывало возникновение симптомов легкого отравления, которые исчезали через 6-10 часов. Дача препарата в максимально переносимой дозе (800мг/кг) вызывала угнетение общего состояния, одышку и дрожь. По истечении 8-12 часов данные симптомы исчезали.
При введении препарата в смертельных дозах (1300 мг/кг) наблюдалось резкое ухудшение общего состояния через 2-3 минуты, а также хорошо выраженные признаки интоксикации, характеризовавшейся сильным беспокойством, выраженной одышкой, дрожью и ослаблением сердечнососудистой деятельности. Гибель мышей наступала в течение 3-6 часов. Абсолютно смертельная доза (1300 мг/кг) вызывала клиническую картину и гибель в более короткие сроки - в течение 2-4 часов. Картина патологоанатомических исследований характеризовалась общим венозным застоем, отеком легких, асфиксическим сердцем и катаральным гастроэнтеритом.
В результате исследований установлено, что максимально переносимая доза (МПД) Натопена для взрослых белых мышей составляет 800 мг/кг; абсолютно смертельная доза - 1300 мг/кг; ЬБ5о -1065 мг/кг. Исходя из этого, препарат Натопен согласно ГОСТу 12.1.007-76 относится к умеренно опасным веществам (III класс опасности). При этом, необходимо отметить, что токсичность едкого натра составляет ЬО100 - 800 мг/кг, ЬБ50 -435 мг/кг, МПД - 150 мг/кг. Таким образом, препарат Натопен по параметрам острой оральной токсичности в 2,5 раза менее токсичен, чем едкий натр.
Оценка раздражающего действия препарата Натопен производилась визуально на основе наблюдений за изменениями слизистой оболочки глаза, склеры и роговицы после воздействия, через час и ежедневно в течение 14 дней. При введении препарата в конъюнктивальный мешок глаз кроликов и морских свинок в 2%-ой концентрации наблюдались гиперемия, отек конъюнктивы и окружающих тканей, а также слезотечение и светобоязнь, которые исчезали на 4-5 сутки наблюдений.
Изучение местно-раздражающего действия препарата Натопен показало, что ежедневные аппликации раствора на кожу кроликов и белых крыс в течение 14 дней в 2%-ной концентрации вызывают развитие дерматита без образования корки и трещин; при этом имели место гиперемия и шелушение кожи, которые исчезали на 5-6 сутки наблюдений. При однократном нанесении на чистую кожу препарат в нативном виде не вызывает изменений.
При исследовании клинического статуса, гематологических и биохимических показателей крови телят, КРС и птицы, содержащихся в клетках и помещениях после проведения влажной дезинфекции, не выявлено закономерных изменений (Р>0,05) (таблицы 1-3).
Показатели До обработки (контроль) После проведения дезинфекции через
24 часа 72 часа 30 дн
М т М1 т1 Р1 М2 т2 Р2 М3 тэ Р3
Клини- ческие температура, °С 38.9 0.2 38.99 0.17 0.91 38.6 0.17 0.81 39.6 0.13 1.2
пульс, уд./мин 72.9 0.79 73.5 0.65 0.64 72.9 0.59 0.69 72.9 0.61 0.69
дыхание, дых. дв ./мин 11.9 0.36 11.9 0.34 0.85 11.9 0.41 0.71 12.6 0.6 0.91
(и К « о (и V К и О ч о Й § (и и 12 эритроциты, 10 /л 6.34 0.07 6.37 0.06 0.99 6.35 0.03 0.79 6.45 0.041 0.79
лейкоциты, 109/л 7.74 0.03 6.98 0.07 0.89 7.69 0.028 0.91 7.73 0.045 0.76
базофилы, % 0.31 0.19 0.19 0.08 0.74 0.31 0.06 0.89 0.32 0.09 0.89
зозинофилы, % 5.9 0.13 5.9 0.09 0.77 6.2 0.081 0.94 7.1 0.16 0.78
нейтрофилы, %:
палочкоядерные 5.6 0.15 6.1 0.16 0.88 5.96 0.13 0.96 4.89 0.21 0.94
сегментоядерные 26.6 0.49 31.2 0.31 0.85 31.2 0.28 0.78 32.1 0.29 0.69
лимфоциты, % 54.78 0.44 51.5 0.49 0.76 55.1 0.49 0.91 51.6 0.53 0.74
моноциты, % 6.81 0.2 5.11 0.69 0.69 1.23 0.04 0.90 3.99 0.09 0.81
Биохимические гемоглобин, г/л 104.2 2.13 101.3 2.4 0.87 102.1 2.9 0.79 101.4 2.8 0.92
общ.белок, г/л 6.8 0.05 7.13 0.08 0.68 7.09 0.05 0.74 7.1 0.08 0.97
альбумины, г/л 2.54 0.03 2.9 0.021 0.71 2.42 0.02 0.78 2.4 0.03 0.96
глобулины, г/л:
а 1.08 0.006 1.02 0.02 0.79 1.09 0.01 0.8 1.09 0.009 0.95
в 0.9 0.004 0.91 0.006 0.68 0.94 0.02 0.7 0.96 0.008 0.91
У 2.28 0.011 2.3 0.031 0.69 2.64 0.021 0.9 2.65 0.020 0.92
Показатели До обработки (контроль) После проведения дезинфекции
24часа 72часа 10 дн 30 дн
М т М1 т1 Р1 М2 т2 Р2 Мэ т3 Р3 М4 т4 Р4
Клини- ческие температура, °С 38,9 0.2 39,1 0.18 0.92 39,1 0.18 0.82 39.02 0.16 0,99 39,1 0.16 0.81
пульс, уд./мин 73.6 0.85 73.1 0.59 0.63 72.5 0.65 0.79 73.6 0.57 0.64 72.7 0.57 0.96
дыхание, дых.дв./мин 12.1 0.36 12.3 0.41 0.81 12.3 0.41 0.71 13,1 0.41 0.87 12.2 0.41 0.75
(и К « о (и V К и О ч о Й § (и и эритроциты, 10 /л 6.30 0.04 6.37 0.05 0.97 6.29 0.06 0.80 6.29 0.039 0.86 6.4 0.07 0.79
лейкоциты, 109/л 7.79 0.06 7.81 0.04 0.90 7.86 0.043 0.86 7.84 0.044 0.79 7.6 0.02 0.69
базофилы, % 0.25 0.11 0.23 0.07 0.79 0.28 0.06 0.84 0.31 0.07 0.86 0.29 0.079 0.89
эозинофилы, % 6.2 0.13 6.6 0.06 0.76 6.61 0.079 0.91 6.36 0.10 0.73 6.8 0.16 0.81
нейтрофилы, %:
палочкоядерные 6,1 0.17 5.91 0.19 0.84 5.92 0.21 0.89 6,1 0.16 0.96 5.79 0.13 0.94
сегментоядерные 28,9 0.46 29.9 0.29 0.87 29.6 0.38 0.75 28,4 0.33 0.75 29.6 0.29 0.71
лимфоциты, % 53.92 0.45 54,1 0.51 0.79 52,9 0.56 0.84 54,21 0.44 0.71 54.1 0.41 0.76
моноциты, % 4.63 0.2 3,26 0.05 0.71 4,69 0.08 0.86 4,62 0.06 0.84 3,42 0.04 0.89
гемоглобин, г/л 101.2 2.15 101,3 2.12 0.88 100.1 2.4 0.79 101.3 2.2 0.91 101.2 2.2 0.76
Биохимические общ.белок, г/л 7.2 0.02 7.09 0.05 0.65 7.08 0.078 0.6 7.06 0.03 0.92 7.05 0.05 0.89
альбумины. г/л 2.65 0.03 2.69 0.023 0.63 2.59 0.02 0.8 2.59 0.04 0.91 2.71 0.03 0.94
глобулины, г/л:
а 1.1 0.006 1.06 0.02 0.60 1.1 0.01 0.6 1.09 0.008 0.86 1.08 0.06 0.92
в 0.94 0.007 0.92 0.007 0.62 0.93 0.02 0.7 0.91 0.007 0.87 0.91 0.0097 0.91
У 2,51 0.014 2.42 0.021 0.64 2,46 0.030 0.8 2,47 0.018 0.85 2,35 0.02 0,94
Показатели Контрольная группа Опытная группа
80 дней 140 дней 80 дней 140 дней
М т М т М т М т
Г ематологические:
Эритроциты, млн./мкл 3 0,2 3,7 0,3 2,9 0,3 3,7 0,2
Лейкоциты, тыс./мкл 35,9 0,5 36,1 0,5 35,9 0,5 37,1 0,1
Лейкоформула,%:
базофилы 2,1 0,4 2,4 0,2 2,7 0,4 2,5 0,1
эозинофилы 3,2 0,3 3,1 0,3 2,4 0,3 3,1 0,3
псевдоэозинофилы
юные 0,3 0,1 0,8 0,2 0,2 0,2 0,9 0,2
палочкоядерные 2,1 0,3 1,8 0,1 1,6 0,1 2,1 0,2
сегментоядерные 26,4 0,2 27,1 0,1 28 0,4 27,5 0,2
лимфоциты 65,9 0,4 64,8 0,7 65,1 0,9 63,9 0,7
моноциты
Биохимические:
Г емоглобин, г% 8,5 0,4 8,7 0,2 8,3 0,4 7,9 0,2
Общий белок, г% 3,4 0,2 3,7 0,3 3,1 0,2 3,9 0,1
Альбумины, г% 1,4 0,3 1,2 0,1 1,3 0,1 1,9 0,3
Г лобулины, г%
а 0,8 0,7 0,4 0,2 0,8 0,2 0,7 0,1
в 0,6 0,5 0,9 0,4 0,6 0,2 0,5 0,3
У 0,6 1,2 1,2 0,3 0,4 0,1 0,8 0,1
Примечание: Р>0.05
Таким образом, анализ данных токсикологических исследований показывает, что дезинфицирующее средство Натопен относится к III классу опасности (ГОСТ 12.1.007-76), обладает умеренно раздражающим действием на конъюнктиву глаз, слабым местно-раздражающим и кожно-резорбтивным действиями.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Кондрахин И.П. Методы ветеринарной
клинической лабораторной диагностики / Справочник // Под. ред. И.П. Кондрахина - М.: Колос., 2004. - 520 с.; 2. Краснобаев Ю.В., Краснобаева О.А. Вироцид в присутствии животных - новые аспекты безопасности // Ветеринария. 2011. №3. С.15-17.; 3. Методические указания по
определению токсических свойств препаратов, применяемых в
ветеринарии и животноводстве, Ветеринарные препараты, Справочник -М., 1988.; 4. Методические указания МУ 1.2.1105-02 «Оценка токсичности и опасности дезинфицирующих средств» утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 10 февраля 2002г.; 5. Методические указания 219680. К постановке исследований по изучению раздражающих свойств и обоснованию предельно допустимых концентраций избирательно действующих раздражающих веществ в воздухе рабочей зоны, Минздрав СССР, М.:, 1980.; 6. Равилов А.З., Савельчев А.П., Угрюмова В.С. и др. Натопен - новое универсальное дезинфицирующее средство // РацВетИнформ. 2010. №9. С.39-42.; 7. Равилов А.З., Угрюмова В.С., Савельчев А.П. и др. Натопен - дезинфектант широкого спектра антимикробного действия // Ветеринария. 2010. №12. С.8-12.;
8. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Фисенко В.П., Арзамасцев Е.В., Багали Э.А. и др., М, 2000. - С.247-248.; 9. Угрюмова В.С., Равилов А.З., Фахретдинов П.С. и др. Четвертично аммониевые соединения - перспективное направление в ветеринарной дезинфектологии // Ветеринарный врач. 2005.№1. С. 59-63.
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ДЕЗИНФЕКТАНТА НАТОПЕН
Равилов Р.Х., Угрюмов О.В., Фаткуллова А.А., Г айфуллин Р.М., Г арипов Л.Н.
Резюме
Дезинфектант Натопен относится к умеренно опасным веществам, не оказывает отрицательного влияния на клинические, гематологические и биохимические показатели животных и птиц.
TOXICOLOGICAL ESTIMATION OF DISIFECTANT NATOPEN
Ravilov R.Kh., Ugryumov O.V, Fatkullova A.A., Gajfullin R.M., Garipov L.N.
Summary
Disifectant of Natopen concerns moderately dangerous substances, doesn't render negative influence on clinical, hematological and biochemical indicators of animals and birds.
