CC BY
8тканевая терапия при дегенеративных повреждениях сухожилий
лено аксиальное смещение. Умерло 72% больных. При двухсторонней локализации внутричерепных гематом — увеличение объема вторичного отека ишемии в патологической зоне в первую очередь обуславливает прогрессирование аксиальной дислокации, боковое же смещение может отсутствовать или быть незначительным.
выводы: Степень повреждения головного мозга зависит, в первую очередь, от суммарного объема первичного повреждения (гематомы очагов ушиба) и вторичных факторов (отек, набухание, ишемия). Нами выявлена зависимость объема внутричерепных гематом, ушибов мозга от вторичных факторов повреждения головного мозга — объемного образования, отека-набухания и ишемии мозга. Имеется четкая зависимость влияния общего патологического объема на исход заболевания больных с тяжелой черепно-мозговой травмой.
литература
1. Гайдар Б.В. Практическая нейрохирургия. — СПб., 2002. — 644с.
2. Квитницкий-Рыжов Ю.Н. Современное учение об отеке и набухании головного мозга.- Киев, 2005. — 184с.
3. Ходиев В.Э. Клинико-компьютерно-томографическое
изучение отека головного мозга у нейрохирургических больных//Дисс ... канд. мед. наук.-М., 1986. — 188с.
4. Bullock R., Tesdale A. Surgical management of traumatic intracranial hematomas. — Elsewier, Amsterdam, 2008. — P. 249-198.
5. Faleiro R.M., Faleiro L.C., Caetano E. Decompressive craniotomy: prognostic factors and complications in 89 patients. //Arq Neuropsiquiatr., 2008. — Vol. 66 (2B). — P. 369-73.
6. Graham D.I., Adams J.H., Murray L.S. Neuropathology of the vegetative state after head injury. // Neuropsychol Rehabil., 2005. — Vol. 15 (3-4). — P. 198-213.
7. Kelly D, Dobrstein C., Becker D. General principles of head injury management // In "Neurotrauma ", eds. Narayan R. Ketal., McGraw-Hill, 2006. — P.71-101.
8. Maas A.I., Steyerberg E.W., Butcher I. Prognostic value of computerized tomography scan characteristics in traumatic brain injury: resultsfrom the IMPACT study. // J Neurotrauma, 2007. — Vol. 24 (2). — P. 303-14.
9. Mikawa S., Ebina T. Multiple intracranial lesions in head injury: clinical considerations, prognostic factors, management, and results in 95patients //Surg Neurol., 2004. -Vol. 56 (2). — P.82.
10. Nolan S. Traumatic brain injury: a review. // Crit Care Nurs Q., 2005. — Vol. 28 (2). — P. 188-94.
тканевая терапия при дегенеративных повреждениях
сухожилий
(экспериментальное исследование)
Коструб А.А., Блонский Р.И., Гончарук Е.И., Довбешко Г.И., Засаднюк И.А.,
Заец В.Б., Волкова Н.А.
«Институт проблем криобиологии и криомедицины HAH Украины» Отдел криобиологии репродуктивных систем, Харьков Украина ГУ ««ИТО НАМНУ», клиника спортивной и балетной травмы, Украина, Киев ««Институт физики HAH Украины» Отдел физики биологических систем, Киев, Украина
Руководитель Коструб A.A. 01601 ул. Воровского, 27 Киев, Украина +380503582401, cventin-334617@yandex.ru
цель проекта: Изучение влияния аутологических МСК, аутологических фибробластов, а также факторов роста, на репаративные процессы в сухожилии при его дегенеративном повреждении
Материалы и методы: Исследования выполнено на 361 половозрелых крысах самцах со смоделированным дегенеративным повреждением ахиллового сухожилия массой 300±10 г.
При исследовании руководствовались "Европейской конвенцией относительно защиты позвоночных животных, которые используются с экспериментальными и другими научными целями" (Страсбург, в 18.03.86 г.).
Опытные животные были разделены на 4-и группы. В первую группу вошли животные, которым с целью лечения дегенеративного повреждения сухожилий вводились однократно аутологичные МСК. Во вторую группу вошли животные, которым с целью лечения дегенеративного повреждения сухожилий вводились одноразово аутологичные фибробласты. В третью группу вошли животные которым с целью лечения дегенеративного повреждения сухожилий вводились однократно аутологическая плазма обогащенная факторами роста. В четвертую группу вошли животные, ко-
торым с целью лечения дегенеративного повреждения сухожилий вводился физ. раствор.
Опытных животных выводили из эксперимента на 7-ые, 21-ые и 45-е сутки путем декапитации — забирая кровь для биохимического исследования.
Мы проводили патоморфологическое исследование сухожилий опытных животных на разных сроках лечения, определяли и сравнивали их прочностные характеристики, а также проводили инфракрастное спектроскопическое исследование опытных сухожилий.
Исследуя сыворотку крови, опытных животных на разных сроках лечения мы определяли содержание коллагеназы, гиалуронидазы, гликозаминогликанов (ГАГ), свободной и белково-связанной фракции гид-роксипролина, что характеризирует реппаративный тендогенез в процессе лечения экспериментальных животных.
результаты исследования: анализируя результаты полученных данных, а также проводя их сравнительную характеристику — наилучшие результаты мы получили в опытной группы животных которым с целью лечения дегенеративного повреждения сухожилий вводились аутологические МСК, следующей
№ 4, июнь 2011
295
ежемесячный научно-практическии медицинским журнал
группой за эффективностью лечение была группа животных которым с целью лечения дегенеративного повреждения сухожилий вводились аутологические фибробласты, наихудшие результаты по сравнению с 1-й и 2-й опытными группами были у животных 3-й опытной группы которым с целью лечения дегенеративного
повреждения сухожилий вводились аутологическая плазма обогащенная факторами роста.
Благодаря использованию аутологичних МСК, а также аутологичних фибробластов, ожидаем достичь оптимизации тендорепарации сухожилий при их дегенеративном повреждении
влияние аутологических мезенхимальных стволовых клеток на регенерацию суставного хряща
(экспериментальное исследование)
А.А. Коструб, И.А.Засаднюк, Заец В.Б., Блонский Р.И., Е.И. Гончарук
ГУ «ИТО НАМНУ», клиника спортивной и балетной травмы, Украина, Киев Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков*
Руководитель Коструб А.А. 01601 ул. Воровского, 27 Киев, Украина +380503582401, cventin-334617@yandex.ru
введение: Проблема восстановления поврежденного суставного хряща в современной ортопедии остается актуальной. По данным разных авторов, у больных с внутрисуставными повреждениями коленного сустава, которым выполнялись артроскопические исследования, повреждения суставного хряща составляло 63 — 92 %. Высокая частота повреждений суставного хряща, сложность клинической диагностики, особенно в раннем периоде, а также не всегда удовлетворительные результаты лечения замедляют восстановление функции и приводят к развитию остеоартроза.
цель работы — обосновать возможность применения аутологических МСК костного мозга для оптимизации репаративних процессов суставного хряща после его механического травматического повреждения.
Материалы и методы: Работа выполнена на 30 взрослых кроликах-самцах, массой 3,0 ± 0,25 кг. У всех животных скальпелем во фронтальной плоскости по надколенниковой поверхности бедренной кости наносили повреждение на всю глубину суставного хряща размером 6 на 3 мм, без повреждения целостности субхондральной костной платинки.
Животным первой серии, которые служили контролем для животных второй и третьей серий опытов, на 5 день после ушивания послеоперационной раны, в полость оперируемого коленного сустава вводили по 0,25 мл солевого физраствора (плацебо). Животным второй и третьей серии на 5 день в полость оперируемого коленного сустава вводили по 106 недифференцированных аутологичных МСК костного мозга и МСК с направленным хондрогенным дифференцированием соответственно.
Кроме того, для изучения непосредственного участия в формировании регенерата МСК, культивированных in vitro и имплантированных в полость травмированного коленного сустава, их перед введением в сустав метили красным флюорисцентным зондом РКН-26 (Sigma, США).
За всеми животными проводили клиническое наблюдение. Из опыта кроликов выводили путем применения летальных доз эфира для наркоза через 45 суток после травмы.
Животных, которым вводили меченые МСК, выводили из эксперимента через 7,14 и 21 сутки после введения МСК.
Качество репаративных процессов в месте дефекта оценивали, учитывая поверхностное строение регенерата, морфологию новообразованной ткани, структуру ее матрикса, характер и жизнеспособностьхондроцитов, состояние кальци-фицированной зоны хряща и субхондральной костной пластинки, наличие зон вторичной осфикации кровеносных сосудов.
Для оценки использовали альтернативную OS шкалу, согласно которой качество регенерата считали неудовлетворительным при получении суммарного балла — 0 и оптимальным при суммарно полученном балле — 10.
Источником аутологичных МСК была спонгиозная костная ткань, которая механическим путем забиралась из крыла подвздошной кости кролика. Культивирование и хондрогенное дифференцирование аутологичных МСК костного мозга осуществляли по общепринятой методике.
результаты и их обсуждение: При анализе полученных данных за альтернативной OS шкалой (М±т) выявлен достоверно лучший результат при применении недифференцированных культур МСК (8,6±0,24) в модели механического травматического полнослойного повреждения суставного хряща по сравнению с культурой МСК с направленным хондрогенным дифференцированием (7,6± 0,24, (р<0,05)).
У животных, которым были трансплантированы меченые аутологические МСК, во всех случаях на криостатных срезах выявляли клетки с меткой донорских МСК.
На 7 день клетки были расположены диффузно, без заметных скоплений. На 14 день — меченые клетки, которые флюоресцировали в красной зоне спектра, создавали компактные конгломераты преимущественно возле зоны дефекта. На 21 день меченые клетки удалось выявить лишь в зоне регенерата.
выводы: Полученные данные свидетельствуют о непосредственном участии аутологичных МСК в процессах хондрорепарации при их экзогенном введении в полость сустава. Выявлен достоверно лучший результат при применении недифференцированных культур МСК для лечения повреждений суставного хряща.
296
№ 4, июнь 2011
