CC BY
8ежемесячный научно-практическии медицинским журнал
группой за эффективностью лечение была группа животных которым с целью лечения дегенеративного повреждения сухожилий вводились аутологические фибробласты, наихудшие результаты по сравнению с 1-й и 2-й опытными группами были у животных 3-й опытной группы которым с целью лечения дегенеративного
повреждения сухожилий вводились аутологическая плазма обогащенная факторами роста.
Благодаря использованию аутологичних МСК, а также аутологичних фибробластов, ожидаем достичь оптимизации тендорепарации сухожилий при их дегенеративном повреждении
влияние аутологических мезенхимальных стволовых клеток на регенерацию суставного хряща
(экспериментальное исследование)
А.А. Коструб, И.А.Засаднюк, Заец В.Б., Блонский Р.И., Е.И. Гончарук
ГУ «ИТО НАМНУ», клиника спортивной и балетной травмы, Украина, Киев Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков*
Руководитель Коструб А.А. 01601 ул. Воровского, 27 Киев, Украина +380503582401, cventin-334617@yandex.ru
введение: Проблема восстановления поврежденного суставного хряща в современной ортопедии остается актуальной. По данным разных авторов, у больных с внутрисуставными повреждениями коленного сустава, которым выполнялись артроскопические исследования, повреждения суставного хряща составляло 63 — 92 %. Высокая частота повреждений суставного хряща, сложность клинической диагностики, особенно в раннем периоде, а также не всегда удовлетворительные результаты лечения замедляют восстановление функции и приводят к развитию остеоартроза.
цель работы — обосновать возможность применения аутологических МСК костного мозга для оптимизации репаративних процессов суставного хряща после его механического травматического повреждения.
Материалы и методы: Работа выполнена на 30 взрослых кроликах-самцах, массой 3,0 ± 0,25 кг. У всех животных скальпелем во фронтальной плоскости по надколенниковой поверхности бедренной кости наносили повреждение на всю глубину суставного хряща размером 6 на 3 мм, без повреждения целостности субхондральной костной платинки.
Животным первой серии, которые служили контролем для животных второй и третьей серий опытов, на 5 день после ушивания послеоперационной раны, в полость оперируемого коленного сустава вводили по 0,25 мл солевого физраствора (плацебо). Животным второй и третьей серии на 5 день в полость оперируемого коленного сустава вводили по 106 недифференцированных аутологичных МСК костного мозга и МСК с направленным хондрогенным дифференцированием соответственно.
Кроме того, для изучения непосредственного участия в формировании регенерата МСК, культивированных in vitro и имплантированных в полость травмированного коленного сустава, их перед введением в сустав метили красным флюорисцентным зондом РКН-26 (Sigma, США).
За всеми животными проводили клиническое наблюдение. Из опыта кроликов выводили путем применения летальных доз эфира для наркоза через 45 суток после травмы.
Животных, которым вводили меченые МСК, выводили из эксперимента через 7,14 и 21 сутки после введения МСК.
Качество репаративных процессов в месте дефекта оценивали, учитывая поверхностное строение регенерата, морфологию новообразованной ткани, структуру ее матрикса, характер и жизнеспособностьхондроцитов, состояние кальци-фицированной зоны хряща и субхондральной костной пластинки, наличие зон вторичной осфикации кровеносных сосудов.
Для оценки использовали альтернативную OS шкалу, согласно которой качество регенерата считали неудовлетворительным при получении суммарного балла — 0 и оптимальным при суммарно полученном балле — 10.
Источником аутологичных МСК была спонгиозная костная ткань, которая механическим путем забиралась из крыла подвздошной кости кролика. Культивирование и хондрогенное дифференцирование аутологичных МСК костного мозга осуществляли по общепринятой методике.
результаты и их обсуждение: При анализе полученных данных за альтернативной OS шкалой (М±т) выявлен достоверно лучший результат при применении недифференцированных культур МСК (8,6±0,24) в модели механического травматического полнослойного повреждения суставного хряща по сравнению с культурой МСК с направленным хондрогенным дифференцированием (7,6± 0,24, (р<0,05)).
У животных, которым были трансплантированы меченые аутологические МСК, во всех случаях на криостатных срезах выявляли клетки с меткой донорских МСК.
На 7 день клетки были расположены диффузно, без заметных скоплений. На 14 день — меченые клетки, которые флюоресцировали в красной зоне спектра, создавали компактные конгломераты преимущественно возле зоны дефекта. На 21 день меченые клетки удалось выявить лишь в зоне регенерата.
выводы: Полученные данные свидетельствуют о непосредственном участии аутологичных МСК в процессах хондрорепарации при их экзогенном введении в полость сустава. Выявлен достоверно лучший результат при применении недифференцированных культур МСК для лечения повреждений суставного хряща.
296
№ 4, июнь 2011
