CC BY
22
Вюник Дншропетровського унiверситету. Бюлопя, медицина Visnik Dnipropetrovs'kogo universitetu. Seria Biología, medicina Visnyk of Dnipropetrovsk University. Biology, medicine
Visn. Dnipropetr. Univ. Ser. Biol. Med. 2016. 7(1), 27-31.
doi:10.15421/021605
ISSN 2310-4155 print ISSN 2312-7295 online
www.medicine.dp.ua
УДК612.398:616.12-005.4+615.22-092.9
Вплив кардiопротекторiв на протеазно-шпбггорний потенцiал кров1 та серця щурiв з адреналiн-iндукованою iшемieю мiокарда
В.А. Паротк1, О.Е. Шаульська1, Л.М. Дяченко2, А.1. Шевцова1
1ДЗ «Днтропетровська медична академiя МОЗ Украти», Днтропетровськ, Украта 2Днтропетровськш державний аграрно-економiчний yHieepcumem, Днтропетровськ, Украта
Проведене комплексне дослщження впливу корвггину та доксициклiну на фiзiологiчний стан i протеазно-iнгiбiторний баланс KpoBi та серцевого м'язу у щурiв з адреналiн-iндукованою iшемieю мiокарда (А1М). Активнiсть матриксних металопротеХназ 2 та 9 (ММП2 та ММП9) визначено методом ензим-зимографи, активнiсть тpипсинoпoдiбних ензимв (ТПЕ), piвень альфа-1 iнгiбiтopа протеХназ (1П1) та альфа-2 макpoглoбулiну (а2-МГ) - методами спектрофотометричного аналiзу з використанням специфiчнoгo субстрату. За А1М порушуеться пpoтеазнo-iнгiбiтopний пoтенцiал кpoвi та серцевого м'яза. У плазм кpoвi тдвищуеться актив-нiсть ММП9, проММП9/2 та piвень 1П1 на тл незмiннoi активнoстi ММП2. Активнiсть ТПЕ та piвень 1П1 у щуpiв з А1М не зм-нюються, але знижуеться piвень а2-МГ. У серцевому м'яз^ навпаки, збiльшуеться активтсть ММП2 та piвень 1П1. Застосування кopвiтину сприяе вiднoвленню р1вня ММП, але порушуе баланс системи ТПЕ/1П1-а2-МГ. За впливу доксициклшу блокуеться актившсть ММП9, значно знижуеться активнiсть ММП2, що свщчип> про iнгiбувальний вплив цього препарату на активнiсть дослщжуваних матриксних металопротехназ. Зроблено висновок про перспективтстъ визначення пpoтеазнo-iнгiбiтopнoгo балансу шд час дoслiдження ефективнoстi д1х фармаколопчних пpепаpатiв.
Ключовi слова: адреналшова iшемiя мюкарда; iнгiбiтopи протеотзу; матрикст металопротехнази; каpдioпpoтектopи
The effect of cardioprotectors on protease-inhibitory potential in blood and heart of rats with epinephrine-induced myocardial ischemia
V. Paronik1, O. Shaul's'ka1, L. Diachenko2, A. Shevtsova1
'Dnipropetrovsk Medical Academy of the Ministry ofHealth of Ukraine, Dnipropetrovsk, Ukraine 2Dnipropetrovsk State Agrarian and Economic University, Dnipropetrovsk, Ukraine
Coronary heart disease is one of the major causes of illness and of deaths in Europe, therefore the definition of the signaling pathways involved in cardioprotection represents a challenging goal in order to discover novel pharmacological approaches. One of the mechanisms included in the implementation of signaling methods is proteolysis, so the aim of our study was to study the balance between activity of the proteolytic enzymes and their inhibitors in the experimental myocardial ischemia of rats and the impact of corvitin (C) and doxycycline (D) on these parameters. Ischemia was induced in Wistar rats by the intraperitoneal injection of epinephrine at a dose of 0.2 mg/100 g of weight during 10 days. All animals were divided into 4 groups: 1 - control (8 rats), 2 - rats with epinephrine-induced myocardial ischemia (EIM, n = 10), 3 - rats, which were entered C after completion of epinephrine injections (n = 10), 4 - rats, which accepted D during 6 days after finishing of epinephrine injections (n = 10). The electrical activity of the heart was recorded on an electrocardiogram (ECG). Activities of matrix metalloproteinases 2 and 9 (MMP2, MMP9) were studied by enzyme-zymography, the activity of trypsin-like enzymes (TLE), levels of alpha-1 proteinase inhibitor (IP1) and alpha-2-macroglobulin (a2-МG) in the blood and the heart were determined by spectrophotometric methods. The experimental results suggest that epinephrine injections lead to changes in the ECG typical for ischemic myocardium. The data obtained showed that the protease-inhibitory balance in the blood and in heart was disturbed. Activity of MMP9, proMMP9/2 and level of IP1 increased in blood plasma of rats with EIM, but activities of ММР2, TLE were unchanged in this group. In the heart muscle the activity
ДЗ «Днтропетровська державна медична академiя МОЗ Украти», вул. Дзержинського, 9, Днтропетровськ, 49044, Украта SE "Dnipropetrovsk Medical Academy of the Health Ministry of Ukraine", Dzerzhinsky Str., 9, Dnipropetrovsk, 49044, Ukraine
Днтропетровський державний аграрно-економiчний утверситет, вул. Ворошилова, 25, Днтропетровськ, 49600, Украïна Dnipropetrovsk State Agrarian and Economic University, Voroshylova Str., 25, Dnipropetrovsk, 49600, Ukraine Tel.: +38-099-735-09-10. E-mail:[email protected], [email protected]
of MMP2 and level of IP1 increased. Administration of C resulted in the recovery of MMPs level, but disturbed the balance in the system TLE/IP1-a2-MG. Administration of D blocked the activity of MMP9, significantly reduced the activity of MMP2, which testifies the inhibitory effect of this drug on the activity of matrix metalloproteinases. Based on these results, we conclude that definition of protease-inhibitory balance in the blood plasma of patients with coronary artery disease is promising as an additional diagnostic complex and for monitoring of the effectiveness of therapy.
Keywords: epinephrine-induced myocardial ischemia; inhibitors of proteolysis; matrix metallopreoteinases; cardioprotectors
Вступ
1шемчна хвороба серця (1ХС) - серйозна проблема сучасносп. Незважаючи на досягнення у профшактищ та розробленн лжувальних заходв, 1ХС залишасться найпо-ширетшим захворюванням на планет1, лвдером за частотою ускладнень i сумно1 медично1 статистики. Для захис-ту мiокарда в умовах шеми застосовують фармаколопчт препарати, яю мають рiзноманiтнi точки да та ефекти впливу, об'еднат гад загальною назвою «кардюпротекто-ри». Серед препарата iз кард1опротекторною д1ею велику увагу привертають бiофлавоноïд кверцетин i антибютик доксициклш. Обидва препарати володють антиоксидант-ними, протизапальними та цитопротекторними властиво-стями (Malik et al., 2013), що сприяе зменшенню ушкод-жень кардiомiоцигiв за умов iшемiï та вщновленню ïх функцюнально1 активност тсля шфаркту мiокарда (Aljavi et al., 2012). У зв'язку з тим, що бiофлавоноïди впливають на структуру та сигнальт шляхи мiтохондрiй (органел, як1 постачають бшьшу частину енерги у клiтинах), штерес багатьох дослщниюв прикутий до по-шуку рацюнального та ефективного застосування цих препарата у лiкуваннi серцево-судинних захворювань (Testai, 2015). В експериментах iз дослвдження впливу рiзних кардюпротектор1в на стан серцевого м'яза гад час моделювання iшемiï або реперфузiï у шурш доведено по-зитивний ефект синерйчного використання бюфлавоно-]ду епiкатехiну разом iз доксициклшом (Ortiz-Vilchis et al., 2014). Як вважають автори цього дослвдження, зниження зони шфаркту за умов комплексного застосування зазна-чених препарата пов'язане зi швидшим вщновленням стану мiтохондрiй i постачанням енерги у зону ушкод-ження мюкарда.
Останшм часом з'явились публiкацiï, в яких обгово-рюсться здатнiсть препарата iз кардiопротекгорною дieю впливати на активтсть матриксних металопротешаз -ензимв, що беруть участь у дестабшзаци та руйнуваннi атеросклеротично1 бляшки та процесах ангюгенезу (Rodriguez-Granillo et al., 2011, Deleon-Pennell et al., 2015). Серед трьох десяткiв вiдомих ниш матриксних металопротешаз найбiльшу увагу в кардюлоги прид||ляють ММП2 та ММП9, або желатиназам А та В. Установлено 1'х патогенетичне та дагностичне значення у розрив1 по-кришки нестабiльноï атеросклеротично1 бляшки (Baggen et al., 2016) та процесах постшфарктного ремоделювання л1вого шлуночка (Munch et al., 2016). Пошук кардю-протекторних препарата, в осжга лжувально1 дИ" яких лежить регулювальний вплив на активнiсть матрикс-деградувальних фермента, уважають перспективним напрямом фармакокорекцiï серцево-судинних захворювань (Lizotte-Waniewski, 2015) i трансплантологи (Malik, 2013; Ozcinar, 2014). У деяких статтях показано зниження активност ММП за д]1 доксициклшу (Oliveira et al., 2016), але його вплив на загальний протеазно-шпбггорний потенц1ал кров1 та серцевого м'яза тсля випадку iшемiï
практично не висвплений. Що стосуеться корвiтину, то дат вщносно ролi цього бюфлавоногду у пiдIриманнi р1в-новаги в систгаш «протеолiз - антипротеолiз» суперечливi та потребують ретельно! перевiрки. Визначення балансу м1ж процесами протеолiзу та його гальмування за дЦ шпбпоив в умовах 1шемИ мiокарда може надати корисну 1нформац1ю стосовно бюх1мчних механ1зм1в ушкоджен-ня клiтин i рац1онального застосування кардiопротекIорiв.
Мета стат - визначити зм1ни функцiонального стану, активносп матрикс-деградувальних фермент1в та !х iнгiбi-торiв в умовах шеми м1окарда у шурiв, оц1нити вплив на зазначет показники корвiтину та доксициклшу.
Матерiал i методи дослщжень
1шем1ю мiокарда моделювали у шурiв лiнil Вiстар за схемою, запропонованою Л.Д. Хiдiровою (Hidirova, 2010), зпдно з якою адреналiн (0,2 мг/100 г маси) уводили тдптарно упродовж 10 дiб. Середня маса досл^дних тварин складала 195 ± 5 г. Щурiв подiлили на чотири групи: I група - контрольна (п = 8, шурам уводили фiзiологiчний розчин), II - шури з адреналiн-iндуко-ваною шемею мiокарда (А1М, п = 10), III група пiсля моделювання АХМ отримувала корвiтин (К) упродовж 5 дiб внутрiшньочеревинно за такою схемою: перша доба - 5,2 мг/100 г; друга та третя - по 3,5 мг/100 г, чет-верта та п'ята - по 1,8 мг/100 г ваги тварини. У IV грут шурiв застосовували доксициклiн (Д) пiсля моделювання АГМ, який уводили перорально у дозi 3,5 мг/кг. Тварин утримували у стандартних умовах вiварiю ДЗ «Днiпропетровська медична академiя^> (температура повпря 22 ± 2 °С, коливання свiтло / темрява - 12 / 12 годин). Упродовж експерименту тварин тричi зважували: на початку експерименту, пiсля набуто! АГМ та пiсля зак1нчення лшування. Наприкiнцi експерименту оц1ню-вали функцюнальний стан м1окарда за даними електро-кард1ограми (ЕКГ) у другому стандартному вщведенш за допомогою комп'ютерного електрокардiографiчного комплексу CardioLab 2000 (ХА!-Медика, Харшв). Виве-дення тварин з експерименту проводили ввдповщно до Закону Укра!ни № 3447-]V в!д 21.02.2006 р. «Про захист тварин в!д жорстокого поводження^>. Як знеболювальний препарат застосовували тюпентал натр1ю (40 мкг/кг).
Для бюммчного аналiзу використовували плазму та екстракт розчинних бiлкiв серцевого м'яза експеримен-тальних тварин, який готували за схемою, описаною ран1ше (РагоПк й а1., 2015). У дослвдних зразках визнача-ли активн1сть матриксних металопротешаз ММП2 та ММП9 методом желатин-зимографи в нашiй модиф1кац11, розраховуючи активн1сть проформ i зрiлих форм зазначе-них ензим1в в!дносно кшькосп б1лка у досл1джуваних зразках, яку визначали методом Бредфорд. Активн1сть трипсиноподбних ензим1в (ТПЕ) визначали за розшеп-ленням синтетичного безбарвного субстрату М-бензош-DL-арriнiн-4-паранiтроанiлiдгiдрохлориду з утворенням
п-нпроаншну жовтого кольору, реесгруючи сгупгнь за-барвлення на фотомеIрi (Human, Нмеччина) за довжини хвил 410 нм. Концентратю a1-iнгiбiтора протешаз (а1-1П) та a2-макроглобулiну (а2-МГ) визначали за мтро-варiантом методу Веремеенко (Veremeenko et al., 1988).
Данi аналiзували за допомогою програм Statistica та Sorbflil TLC. Враховуючи невелику кшьшсть щур1в у кожнiй грут, для статистично1 обробки результапв дослгдження застосовано непараметричний анал1з, в якому вiроr^дmсть рiзницi оц1нювали за критерiем Манна - Уггш. Вщмшносп мгж величинами в контрольнiй i дослвднш групах визнавали достовiрними за Р < 0,05.
Результата та ïx обговорення
За результатами моделювання адреналш-щдуковано1 iшемiï мiокарда встановлено, що тсля ш'екцш препарату упродовж 10 дб у тварин спостериали приrmiчення пове-дшкових реакций через попршення фiзичного стану (апа-тя, млявiсть, тахжарддя, занiмiння юнтвок п1сля iн'екцiй, дисфункцш сечового мiхура). Смертнiсть в експеримен-
500
зк зк зк
450 400 350 300 250 200 150 100 50 0
тальних групах тварин склала 18%. ЕлeкIpофiзiолоriчm параметри мiокарда у тварин nepeBipam наприюнц ек-сперименту за допомогою ЕКГ у другому стандартному ввдведент. У першш грут шуpiв показники ЕКГ вщпо-вдали значенням, наведеним у лiтepатуpi (Karkishhenko, 2010): вщсутнш зубець Q, зубець Р - позитивний, зубець S одразу переходив у Т, формуючи iнтepвал S-T. Ампль туда зубця R складала в середньому 0,61 ± 0,01 мВ, а зуб-ця Т - 0,25 ± 0,01 мВ. Частота серцевих скорочень (ЧСС) становила 349,4 ± 7,8 удара за хвилину (уд./хв) (рис. а).
За даними ЕКГ, у 60% експериментальних тварин пiсля закшчення iн'eкцiй адренатну зафшсовано набуту iшeмiю мюкарда про що сввдчить eлeвацiя сегмента ST вщносно iзолiнii (рис. б). У другш груп1 тварин спостертали щдвищення ЧСС на 20% вщносно групи контролю, змши ампллуди зубця R та елеващю сегмента ST вщносно iзолiнil на 1,90 ± 0,11 мм. Зубець S зливаеться з позитивним зубцем Т, розширюеться сегмент ST, що говорить про формування зони трансму-рального пошкодження м'язових волокон унаслвдок гострого порушення коронарного кровоплину.
а б
л
S
и
о M
И ш
Ё У-
m "" Ü- П Я >.
Р р
1 1 1 1 -У
.к wj H Jh —AJ| H-™/
1
J i. N-A f J 1л . h L 4 Ir k
M и i
1 i
■—к. К K-44"
1 i 1
-- JL H Л ,J l
V - 20 мм/мВ. [UBiijicicTb - 100 мм/с.
F 12 3 4
Групп експериментальних тварин
Рис. Частота серцевих скорочень (а) та електрокардюграми (б) експериментальних тварин:
1 - контрольна група, 2 - щури з адреналш-шдукованою imeHiero (AIM), 3 - щури з А1М тсля введення коpвiтину, 4 - введення доксициктну пiсля набуто1 AIM; *** - вipоriдна piзнищ поpiвняно з показниками контрольно1 групи за Р < 0,001, §§§ - вipогiдна piзниця вiдносно групи AIM за P < 0,001
Пюля лшування у тварин III та IV груп показники ЧСС повернулись до значень контрольно1 групи (вiдповiдно, 378 ± 13 та 398 ± 18 уд./хв). Огриманi результати узгоджуються з даними шших автс^в (Hushmatov et al., 2015), зпдно з якими антиоксиданти дають двофазний iонотропний ефект на скорочувальну активнiсть патляр-ного м'яза шур1в, зменшуючи частоту тахiкардiï. Такий ефект може бути пов'язаний з активацiею Р-адрено-рецептора, збiльшенням цАМФ i Са2+ у кардiомiоцитах. Антиаритмiчна дiя може бути пов'язана з модуляцiею функцюнально1 активносп натрiевих i кальц1евих канатв у кардiомiоцитах. Уведення корвiтину впродовж п'яти д1б зумовлювала вщновлення положення сегмента ST у третш грут, хоча амплiтуда зубця R не поверталась до контрольних значень, а штервал S-T був дещо розшире-ним. Отже, п1сля застосування корвпину показники електрично1 активност1 серця тварин полшшились, прямi ознаки iшемiï на ЕКГ були вiдсутнi, але зазначен вище супутнi змши ЕКГ свщчать про залишковi наслвдки гос-трого пошкодження мiокарда.
У четвертш грут тварин, яю приймали доксицикшн, також була ввдсутня елеваця сегмента ST, спостериався розширений штервал S-T, але амплпуда зубця Т була нижчою за контрольн значення. Можливо, це пов'язано i3 частковою реполяр1затею внаслвдок залишково! дй' адренал1ну, тому й не вщбувалося повного вщновлення функцюнально! активност1 кардюмюципв. Слщ зауважити також, що в нашому дослщжент використано дози докси-циклшу, що вщповдають його антимжробнш дй, а, за даними лггерагури, саме низью дози цього препарату здш-снюють регулювальну дю на процеси ремоделювання л1вого шлуночка тсля шфаркту мюкарда (Cerisano, 2014).
За результатами визначення активносп ММП2 та ММП9 встановлено, що за адреналшово! шеми мюкарда у плазм кров1 шур1в достов1рно тдвишуеться вщносна актившсть ММП9 та спостерцаеться тенденцш до збшьшення проформ ММП9/2, хоча актившсть ММП2 залишаеться незмшною. У фракцц розчинних бшюв сер-цевого м'яза, навпаки, ММП9 не визначалась, а обида форми ММП2 достов1рно збшьшувались (табл. 1). Засто-
сування корвпину спричинило зниження активносп дослвджуваних ММП у плазмi, особливо проММП9, зна-чення яко! були навиь нижчими за гак1 у контрольнш rpyni. У серцевому м'язi збериалась висока актившсть
проММП2 та визначено доскгарне збшьшення активносп зршо1 форми цього ензиму. Слад зауважити, що в нашому експерименп у розчиннш фракцй бiлкiв серця ММП9 не визначалась у жoднiй i3 дослвджуваних груп.
Таблиця 1
Активтсть ММП2/9 (M ± m, ум. од./мг бшка) у naaîMÏ кров1 та фракцй' розчинних бшкзв серцевого м'язу щур1в
Показники Групи тварин
контроль А1М А1М + К А1М + Д
Плазма кpовi
проММП9 4,11 ± 0,87 5,60 ± 0,31 3,37 ± 0,06§§§ -
ММП9 4,49 ± 0,81 7,41 ± 0,58** 5,81 ± 0,54 -
проММП2 4,81 ± 0,49 6,10 ± 0,79 5,56 ± 1,51 8,31 ± 1,34*
ММП2 4,90 ± 0,41 4,98 ± 0,51 5,10 ± 0,46 5,26 ± 0,35
Екстракт розчинних биюв серцевого м'яза
проММП2 7,81 ± 0,22 13,02 ± 1,17*** 13,17 ± 1,09*** 8,38 ± 1,05§§
ММП2 9,31 ± 0,62 12,90 ± 0,68*** 15,79 ± 1,16***§ 11,91 ± 0,76*
Прим1тки: * - Р < 0,05, *** - Р < 0,001 в!ропдш р!зниця поршняно з показниками контрольно1 групи, § - P < 0,05, §§§ - P < 0,001 вiрoгiдна р!зниця вiднocнo групи з адреналшовою iшемiею мioкарда (А1М); А1М + К - застосування корвпину пicля моделювання А1М; А1М + Д - застосування доксициклшу тсля моделювання А1М.
1нша реакцiя спостериалась за впливу дoкcициклiну : у плазмi крoвi ММП9 не визначалась, а рiвень активност1 обох форм ММП2 був щдвищений, у той час як у серцевому м'язi актившсть ММП2 знижувалась пор1вняно з II групою, а активнicть проформи цього ензиму зменшува-лась практично до нормальних значень (табл. 1). Отри-манi данi шдтверджують гшотезу про регулювальний вплив дослвджуваних препаратв на експресш та активтсть матриксних металопротешаз. За лiтературними да-ними, дoкcициклiн знижуе активнicть ММП2 i блокуе апоптоз кл1тин, активуючи протешкшазу В - продукт гетв Akt. Ця юназа шпбуе апоптоз, бере участь у регулювант клиинного циклу, iндукуе синтез бiлкiв i е ключовим бшком у регуляцц прoцеciв росту тканин i роз-витку м'язово1 дистрофй' (Ozcinar, 2014). Як було вказано вище, наслвдки да дoкcициклiну залежать вщ дози та тривалосп його застосування. У дoзi 100-200 мг/добу у
людей вш проявляе антимшробну, протизапальну дю, а за нижчих доз шпбуе ММП2 (Schulze, 2013; Horwitz, 2014). Вipогiдно, пpотиpiччя отриманих нами даних iз лiтеpагypними пов'язане з перевищенням дози цього препарату в наших дослгдженнях. Цкаво, що на тт збiльшення ММП2 активнiсть шшо! желатинази (ММП9) у груш щypiв, якi вживали доксициклш, зовсiм не визначалась. Отже, за великих доз цей антибютик шпбуе ММП9, а за низьких - ММП2, але для остаточного вис-новку слад провести додатковi дослгдження.
Результата визначення активносп трипсиноподабних ензим1в i неспецифiчних iнriбiтоpiв пpотеолiзy наведено у таблиц 2. У плазмi кpовi шур1в з А1М цi показники не змшюклъся, за винатком о2-макроглобулшу, кiлькiсгъ яко-го достовipно знижуеться у цш груш тварин. У тканит серця, навпаки, кiлъкiсть цього шпбиора не змшюеться, а кшькють a1-iнгiбiтоpа протешаз була збiлъшеною yдвiчi.
Таблиця 2
Активнiсть | римсимомод1<бми\ ензимш (ТПЕ), aльфa-1-iнгiбiторa проте1наз (1П1) та альфа-2-макроглобулшу (а2-МГ) в експериментальних тварин (M ± m)
Показники Групи тварин
контроль А1М А1М + К А1М + Д
ТПЕ у плазм! щурш, МЕ/мл 0,455 ± 0,044 0,439 ± 0,067 0,611 ± 0,063* 0,500 ± 0,065
ТПЕ у гомогенап серця щурш, МЕ/мг бшка 0,015 ± 0,005 0,020 ± 0,005 0,024 ± 0,005 0,030 ± 0,008
1П1 у плазм щур1в, мкмоль/л 339,1 ± 14,7 332,9 ± 15,9 322,1 ± 12,7 326,7 ± 12,3
1П1 у гомогенап серця щур1в, мкмоль/л/мг бика 9,8 ± 0,7 20,3 ± 1,4*** 18,1 ± 2,1*** 16,4 ± 2,6***
а2-МГ у плaзмi щур1в, мкмоль/л 9,4 ± 0,4 7,4 ± 0,2*** - 1,4 ± 0,1***
а2- МГ у гoмoгенaтi серця щур1в, мкмоль/л/мг бшка 0,207 ± 0,039 0,311 ± 0,029 0,312 ± 0,049 0,287 ± 0,049
Примiтки: див. табл. 1.
За умов застосування кардюпротегащив основт змши стосувались а2-макроглобулшу: його кшькють у плазмi крoвi рiзкo знижувалась за впливу доксициклшу, а за умов застосування корвпину взагал не визначалась. Отриманi даш сввдчать, що за адренал1ново1 шеми мioкарда порушуеться прoтеазнo-iнгiбiтoрний потенц1ал серцевого м'яза в першу чергу, за рахунок змiни сшввщношення основних шпбггорш серинових протеь наз (ИП1 та а2-МГ). Обидва iнгiбiтoри ввдграють знач-ну роль у пiдтриманнi гемостазу, впливаючи на актив-нicть ферменпв систем коагуляцй' та фiбринoлiзу.
Нещодавно з'явились публшаци, в яких доводиться безпосередня участь а2-МГ у розвитку шфаркту мюкарда (Velez et al., 2014) i пропонуеться включення цього показника в панель бiомаркерiв ушкоджень серця та перелiк фармакологiчних мшеней (Yang et al, 2015). Нашi результати також св1дчать про перспектившсть визначення протеазно-антипротеазного балансу у плазмi кровi хворих на 1ХС як додаткового дiагностичного комплексу та оцшки ефективностi терапевтичних засобiв.
Висновки
У хворих з адреналiновою шем1ею мюкарда пору-шуеться протеазно-шибиорний потенщал кров1 та серцевого м'яза: якщо у плазм п;двищуегься актившсть ММП9, проММП9/2 та рiвень аЫнпбггора протешаз на тл незмшно! активносп ММП2, трипсинопод1бних ензим1в та зниження р1вня а2-макроглобулшу, то у сер-цевому м'яз1, навпаки, збiльшуегься актившсть ММП2 та р1вень аЫнпбггору протешаз.
Застосування корвпину сприяе вщновленню функционального стану серця, р1вня ММП, але порушуе баланс у систем! трипсиноподабних ензимв та ix шпбггорш.
За впливу доксициклшу блокуеться актившсть ММП9, значно знижуеться актившсть ММП2, що сввдчить про шпбувальний вплив цього препарату на актившсть матриксних металопротешаз.
Бiблiографiчнi посилання
Aljavi, A.L., Kenzhaev, M.L., Haitov, S.S., Kenzhaev, S.R., 2012. Profilaktika diastolicheskoj disfunkcii levogo zhelu-dochka pri ostrom koronarnom syndrome s jelevaciej segmenta ST [Prevention of left ventricular diastolic dysfunction in acute coronary syndrome with ST segment elevation]. Ukr. Medichnij Chasopis 88, (in Ukrainian). Baggen,V.J., Eindhoven, J.A., van den Bosch, A.E., Witsen-burg, M., Cuypers, J.A., Langstraat, J.S., Boersma, E., Roos-Hesselink, J.W., 2016. Matrix metalloproteinases as candidate biomarkers in a dults with congenital heart disease. Biomarkers 17, 1-8. Cerisano, G., Buonamici, P., Valenti, R., Moschi, G., Taddeucci, E., Giurlani, L., Migliorini, A., Vergara, R., Parodi, G., Sciagra, R., Romito, R., Colonna, P., Antoniucci, D., 2014. Effects of a timely therapy with doxycycline on the left ventricular remodeling according to the pre-procedural TIMI flow grade in patients with ST-elevation acute myocardial infarction. Basic. Res. Cardiol. 109(4), 412. Deleon-Pennell, K.Y., Altara, R., Yabluchanskiy, A., Modesti, A., Lindsey, M.L. 2015. The circular relationship between matrix metalloproteinase-9 and inflammation following myocardial. IUBMB Life 67(8), 611-618. Hidirova, L.D., 2010. Izmenenie balansa mezhdu aktivnost'ju perekisnogo okislenija lipidov, antioksidantnoj zashhitoj i soderzhaniem zheleza u krys pri jeksperimental'nom infarkte miokarda [Change in balance between activity of lipid peroxidation, antioxidant system and ferrum content in rats with experimental myocardial infarction]. Racional'naja Farmakoterapija v Kardiologii 6(2), 216-219 (in Russian). Horwitz, V., Dachir, S., Cohen, M., Gutman, H., Cohen, L., Fishbine, E., Brandeis, R., Turetz, J., Amir, A., Gore, A., Kadar, T., 2014. The beneficial effects of doxycycline, an inhibitor of matrix metalloproteinases, on sulfur mustard-induced ocular pathologies depend on the injury stage. Curr. Eye. Res. 39(8), 803-812. Hushmatov, S.S., Mahmudov, R.R., Mavljanov, S.M., 2015. Sravnitel'noe izuchenie inotropnoj i antiaritmicheskoj aktiv-nosti flavonoidov - kvercetina, rutina i (+) - katehina [Comparison of inotropic and antiarrhythmic activity of fla-vonoids - quercetin, rutin and (+) - catechin]. Rossijskij Kardiologicheskij Zhurnal 11, 35-41 (in Russian). Karkischenko, N.N., Gracheva, S.V., 2010. Rukovodstvo po laboratornym zhivotnym i al'ternativnym modeljam v bio-medicinskih tehnologijah [The guidance for laboratory animals and alternative models in biomedical technology]. Alternatives of Biomedicine, Moscow (in Russian).
Lizotte-Waniewski, M., Brew, K., Hennekens, C.H., 2015. Hypothesis: Metalloproteinase inhibitors decrease risks of cardiovascular disease. J. Cardiovasc. Pharmacol. Ther. pii: 1074248415615237.
Malik, Y.S., Sheikh, M.A., Zhu, X., 2013. Doxycycline can stimulate cytoprotection in neural stem cells with oxygen-glucose deprivation-reoxygenation injury: A potential approach to enhance effectiveness of cell transplantation therapy. Biochem. Biophys. Res. Commun. 432(2), 355-358.
Münch, J., Avanesov, M., Bannas, P., Säring, D., Krämer, E., Mearini, G., Carrier, L., Suling, A., Lund, G., Patten, M., 2016. Serum matrix metalloproteinasesas quantitative bio-markers for myocardial fibrosis and sudden cardiac death risk stratification in patients with hypertrophic cardiomyopa-thy. J. Card. Fail. S1071-9164(16)00101-9.
Oliveira, H.L., Tedesco, T.K., Rodrigues-Filho, L.E., Soares, F.Z., Rocha, R.O., 2016. Doxycycline as a matrix metallo-proteinase inhibitor to prevent bond degradation: The effect of acid and neutral solutions on dentin bond strength. Gen. Dent. 64(2), 14-17.
Ortiz-Vilchis, P., Yamazaki, K.G., Rubio-Gayosso, I., Ramirez-Sanchez, I., Calzada, C., Romero-Perez, D., Ortiz, A., Mea-ney, E., Taub, P., Villarreal, F., Ceballos, G., 2014. Co-administration of the flavanol (-)-epicatechin with doxycy-cline synergistically reduces infarct size in a model of ischemia reperfusion injury by inhibition of mitochondrial swelling. Eur. J. Pharmacol. 744, 76-82.
Ozcinar, E., Okatan, E.N., Tuncay, E., Eryilmaz, S., Turan, B.,
2014. Improvement of functional recovery of donor heart following cold static storage with doxycycline cardioplegia. Cardiovasc. Toxicol. 14(1), 64-73.
Parhomenko, A.N., Kozhuhov, S.N., 2004. Kardioprotekcija pri ostrom infarkte miokarda: Teoreticheskie predposylki i vozmozhnye puti klinicheskogo reshenija problemy [Cardioprotection in acute myocardial infarction: Theoretical pre-requisites and possible ways of clinical solution of the problem]. Kardiologija 2, 6-11 (in Russian).
Paronik, V.A., Shaul's'ka, O.E., Zhylyuk, V.I., Shevtsova, A.I.,
2015. Activnist' antyoksydantnykh fermentiv ta zheltynaz za adrenalinovoyi ishemiyi miokarda u shchuriv [Activity of antioxidant enzymes and gelatinases in rats with epineph-rine-iduced myocardial ischemia]. Medychna ta Klinichna Biokhimiya 3, 71-75 (in Ukrainian).
Rodriguez-Granillo, G.A., Rodriguez-Granillo, A., Milei, J., 2011. Effect of doxycycline on atherosclerosis: From bench tobed-side. Recent Pat. Cardiovasc. Drug Discov. 6(1), 42-54.
Schulze, C.J., Castro, M.M., Kandasamy, A.D., Cena, J., Bry-den, C., Wang, S.H., Koshal, A., Tsuyuki, R.T., Finegan, B.A., Schulz, R., 2013. Doxycycline reduces cardiac matrix metalloproteinase-2 activity but does not ameliorate myo-cardial dysfunction during reperfusion in coronary artery bypass patients undergoing cardiopulmonary bypass. Crit. Care Med. 41(11), 2512-2520.
Testai, L., 2015. Flavonoids and mitochondrial pharmacology: A new paradigm for cardioprotection. Life Sci. 135, 68-76.
Velez, P., Parguina, A.F., Ocaranza-Sanchez, R., Grigorian-Shamagian, L., Rosa, I., Alonso-Orgaz, S., dela Cuesta, F., Guitian, E., Moreu, J., Barderas, M.G., Gonzalez-Juanatey, J.R., Garcia, A., 2014. Identification of a circulating mi-crovesicle protein network in volvedin ST-elevation myocardial infarction. Thromb. Haemost. 112(4), 716-726.
Veremeenko, K.N., Goloborod'ko, O.P., Kizim, A.I., 1988. Prote-oliz v norme i pri patologii. Zdorovja, Kiev (in Russian).
Yang, S., Chen, L., Sun, S., Shah, P., Yang, W., Zhang, B., Zhang, Z., Chan, D.W., Kass, D.A., van Eyk, J.E., Zhang, H., 2015. Glycoproteins identified from heart failure and treatment models. Proteomics 15, 567-579.
Hadiümna do редкоnегlí 29.01.2016
