CC BY
43
XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС
ПОСТЕРЫ
ИНФЕКЦИИ
имеет большой потенциал в диагностике, прогнозе и последующем наблюдении за пациентами из-за низкой инвазивности и возможности быстро и без вреда для пациента проводить исследование.
Материалы и методы. Ранее нами был разработан биологический микрочип для анализа соматических мутаций в гене BRAF (V600E [c. 1799T>A], V600M, V600K, V600R, V600D, V600E [c. 1799_1800delTGinsAA]) в опухолевой ткани. В ходе данной работы он был адаптирован для анализа мутаций и в цоДНК. Для преимущественной амплификации мутант-ной ДНК на фоне избытка ДНК дикого типа использовали LNA-блокирующую ПЦР. Длина ПЦР-продукта составляла 74 п. о., что позволило успешно анализировать деградированную ДНК. Полученные ампликоны служили матрицей на втором этапе ПЦР, в результате которого получали одноцепочечный флуоресцентно-меченный ПЦР-продукт, который затем гибридизовали с аллель-специфичными олиногуклеотидами, иммобилизованными на биочипе. Метод был протестирован на 30 контрольных образцах ДНК, выделенных из опухолевой ткани, и 19 образцах цоДНК. Генотип контрольных образцов был предварительно определен секвенированием по Сенгеру. ЦоДНК была выделена из 2—5 мл плазмы, полученной от пациентов до хирургического вмешательства.
Результаты. Генотипы всех контрольных образцов были определены корректно. Также мы протестировали 19 образцов цоДНК у пациентов с метастатической меланомой с известным статусом BRAF: 12 опухолей были мутированы и 7 были WT. Мутации были обнаружены в 10/12 образцах цоДНК у пациентов, имеющих мутацию BRAF в опухоли, и ни в одном из 7 образцов цоДНК у BRAF WT пациентов. Метод позволяет детектировать мутацию, если ее доля в образце >0,2%. Заключение. Предложенный метод идентификации соматических мутаций в гене BRAF в цоДНК на основе технологии биочипов является эффективным и простым в применении. Работа выполнена при поддержке гранта президента Российской Федерации (# МК-2519.2017.4).
Изменение профиля экспрессии ключевых генов онкогенеза при различных стадиях колоректального рака
У. Станоевич',2, В. К. Боженко', М. В. Захаренко', И. Д. Тро-ценко2, Т. В. Крашихина2, В. А. Солодкий' Место работы: 'ФГБУ «Российский научный центр рент-генорадиологии» МЗ РФ, Москва, Россия; 2Кафедра онкологии и рентгенорадиологии медицинского факультета Российского университета дружбы народов, Москва, Россия e-mail: 8'5879'@gmail.com
Цель. Поиск молекулярно-генетических факторов прогноза клинического течения колоректального рака (КРР). Материалы и методы. Методом ПЦР в реальном времени проанализирован уровень экспрессии 64 генов, ответственных за пролиферацию, апоптоз, ангиогенез, адгезию, ремо-делирование межклеточного матрикса, маркеров и факторов врожденного и приобретенного иммунитета, рецепторов эстрогенов и прогестерона, ароматазы, в 261 образце ткани толстой кишки (132 образцах ткани опухоли и 129 образцах слизистой оболочки толстой кишки без морфологических признаков опухолевого роста (МНТ), полученных от тех же пациентов). Группы сравнения сформированы в зависимости от поставленной задачи: глубина инвазии первичной опухоли (Т1, Т2, Т3, Т4), наличие регионарных (N0, N+) и отдаленных
метастазов (М0, М+), прогрессирование заболевания. Средние сроки наблюдения — 31,4 ± 15,2 мес. Результаты. При определении уровня экспрессии изучаемых генов в зависимости от глубины инвазии не выявлено каких-либо достоверных изменений в группах Т1, Т2 и Т3 как в ткани опухоли, так и в МНТ, тогда как при уровне инвазии Т4 выявлено большое количество генов, достоверно (р<0,05) отличающих данную группу от остальных, как в ткани опухоли (CD56, ММР2, GNLY, 12, ВАХ, LIF, 17, CD45, ^4, SCUBE2, IL2Ra, 115, CD68, VEGFA165, 112а, LGALS1, 16, РАРРА, LIFR, CD69, СОХ-2), так и в МНТ ^СШЕ2, CD56, ВАХ, 115, РТЕ^ GNLY, LGALS1, LIF, 112а, РАРРА). При анализе экспрессии генов в сравниваемых образцах в зависимости от наличия пораженных лимфатических узлов обнаружена ассоциированность регионарных метастазов с повышением (р<0,05) экспрессии ССND1 и Р16 в ткани опухоли и повышением (р<0,05) К1 67 и снижением 16 в МНТ. Наличие отдаленных метастазов ассоциировалось с достоверным (р<0,05) изменением уровней экспрессии 12 из изученных 64 генов в ткани первичной опухоли (ВАХ, TGF-p, ^4, Р161, GNLY, GATA3, IGF1, 17, LIFR, CD45, 16, LIF) и Р14 и TGF-p в МНТ. Прогрессиро-
вание заболевания также характеризуется (р<0,05) изменением экспрессии большого количества генов в ткани опухоли (Р16, 17, 12, ВАХ, CD56, ММР11, 112а, ^4, CD45, GNLY, LIFR, 115, ММР2, ^а, CD69), а также МНТ (С^2, ССШ1, MYBL2, TERT, GREM1, CYP19A).
Заключение. Установлен профиль экспрессии генов, ассоциированный с глубиной инвазии, наличием регионарных и отдаленных метастазов и прогрессированием как в ткани самой первичной опухоли, так и в слизистой оболочке толстой кишки без морфологических признаков опухолевого роста больного КРР.
Стратегия лечения нозокомиальных инфекций, вызванных Enterococcus spp. (Enterococcus faecium и Enterococcus faecalis) у онкологических больных
В. В. Агинова'
Место работы: 'ГБПОУ ДЗМ «Медицинский колледж №'», г. Москва
e-mail: in. ter68@inbox.ru
Цель. Анализ резистентности энтерококков, вызывающих инфекционные осложнения у онкологических больных, к антибиотикам для определения стратегии их дальнейшего использования в клинике.
Материалы и методы. Проанализировано 1 419 штаммов энтерококков, выделенных от онкологических больных, имевших различные инфекционные осложнения в период 2014—2016 гг. Идентификация микроорганизмов и оценка их чувствительности к антибактериальным препаратам производилась с помощью современных автоматизированных систем: Vitek-2, WalkAway, MS MALDI TOF. Результаты. Общее количество E. faecalis и E. faecium снизилось с 489 штаммов в 2014 г. до 417 штаммов в 2016 г. (p<0,001). Число ампициллин-резистентных штаммов было минимальным для E. faecalis и составило 8%, что позволяет рассматривать аминопенициллины, в том числе ампицил-лин/сульбактам и амоксициллин/клавуланат, как препараты выбора для лечения инфекций, вызванных этим возбудителем. Напротив, почти все штаммы E. faecium были резистентны к ампициллину, за исключением 2016 г., когда их количество снизилось до 51,9%, оставаясь в целом
Злокачественные опухоли
www.malignanttumours.org
Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017
Malignant Tumours
www.malignanttumours.org
XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС
ПОСТЕРЫ
ИНФЕКЦИИ
высоким, что не позволяет использовать аминопеницил-лины в качестве препарата выбора для лечения инфекций, вызванных E. faecium. В отношении антибиотика из группы липопептидов-даптомицина сохраняется высокая чувствительность штаммов E. fecalis — только 2—5% резистентны, однако настораживает рост резистентности к E. faecium - c 10% до 36% (p<0,0001). Поэтому назначение даптоми-цина должно быть строго ограничено результатами анти-биотикограммы. Нерациональное применение ванкомицина индуцирует появление в клинике ванкомицин-резистент-ных штаммов (VRE). Количество VRE колебалось от 3 до 8% (p>0,05). Препаратом выбора для лечения VRE является линезолид. В 2014 г. появились первые линезолид-резистент-ные энтерококки (LRE), а в 2016 г. их было уже 15. Крайне низкое количество VRE позволяет продолжать использовать ванкомицин в клинике. Появление LRE требует строго ограничить назначение линезолида только инфекциями, вызванными VRE.
Заключение. Среди энтерококков не отмечено нарастания VRE и LRE, однако их общее количество за весь период наблюдения составило 67 штаммов VRE и 21 штамм LRE, хотя в целом относительное количество VRE было невелико (2—7%), что позволяет использовать ванкомицин для эмпирической терапии. Использование линезолида должно быть строго ограничено как антибиотика резерва для лечения инфекций, вызванных VRE. Ампициллин/сульбактам показал хорошую активность и отсутствие нарастания резистентности в отношении E. faecalis, поэтому может быть использован в первой линии терапии инфекций, вызванных этим возбудителем. Использование даптомицина также должно быть ограничено инфекциями, вызванными VRE. Число резистентных случаев к даптомицину составило до 5% для E. facalis и 36% для E. faecium в 2016 г.
Место инфекций, вызванных Candida spp, в онкологической клинике
И.Н. Петухова'
Место работы: 'ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н. Н. Блохина» МЗ РФ, г. Москва e-mail: in.ter68@inbox.ru
Цель. Определить место грибковых инфекций, вызванных Candida spp., в структуре нозокомиальных инфекций у онкологических больных.
Материалы и методы. Были выделены 4 532 штамма (шт.) микроорганизмов из биоматериалов от онкологических больных в течение 12 месяцев (2016—2017). Место Candida spp. определено среди следующих микроорганизмов (включая мультирезистентные шт.): K. pneumoniae, E. coli, P. aeruginosa, A. baumannii, S. aureus, Enterococcus spp. Эти штаммы выделены из 993 биоматериалов, включая кровь (95 шт.), мочу (322 шт.), раневое отделяемое (304 шт.), мокроту и материал, полученный при бронхоскопии (271 шт.). Идентификацию шт. и определение чувствительности проводили на анализаторах: MS Maldi Tof, WalkAway, Vitek 2.
Результаты. K. pneumoniae была выделена в 15,3% (680/4 532), E. coli — 1,7% (81/4 532), P. aeruginosa — 8,0% (366/4 532), A. baumannii — 7,3% (331/4 532), S. aureus — 9,6% (433/4 532), Enterococcus spp. — 9,9% (452/4 532), Candida spp. — 9,0% (410/4 532), прочие — 39,2%. При инфекциях кровотока выделены: Candida spp. — в 16,8%, энтерококки — 15,6%, К. pneumoniae — 14,6%, P. aeruginosa —11,5%, А. baumannii — 9,3%, S. aureus — 9,3%. При раневых инфекциях Candida spp. выделена в 10,9%, А. baumannii — 11,5%,
К. pneumoniae — 24,0% и Enterococcus spp. — 28,2%. При мочевых инфекциях (ИМП) и инфекциях дыхательных путей (ИДП) Candida spp. выделялись в 30,7% и 29,5%, а гра-мотрицательные палочки — в 12—20%. Частота выделения Enterococcus spp., S. aureus и Candida spp. была практически одинакова (9,0—9,9%, p>0,05), и они заняли 2—4-е место после K. pneumoniae. Таксономическая структура Candida spp., выделенных из крови, была следующей: C. parapsilosis (51,1%), C. albicans (21,5%), C. guilliermondi (7,4%), C. krusei (3,5%), C. glabrata (3,2%) и C. tropicalis (2,6%). Другие виды Candida spp. встречались реже <1%. При ИДП Candida spp. чаще выделялись в ассоциациях с другими бактериями. Заключение. При анализе таксономической структуры инфекций у онкологических больных было выявлено, что Candida spp. занимает 2—4-е место наряду с энтерококками и золотистым стафилококком. При инфекциях кровотока Candida spp. (чаще всего C. parapsilosis) — на 1-м месте, что, вероятно, связано с большим количеством катетер-ассоциированных инфекций. При мочевых инфекциях и инфекциях дыхательных путей Candida spp. также выделялась наиболее часто. Эти данные необходимо учитывать при планировании эмпирической антибактериальной терапии у онкологических больных.
Лечение нозокомиальных инфекций, вызванных метициллин-резистентыми золотистыми стафилококками (MRSA), у онкологических больных
И.В. Терещенко'
Место работы: 'Лаборатория микробиологической диагностики и лечения инфекций в онкологии ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» МЗ РФ, г. Москва e-mail: in.ter68@inbox.ru
Цель. Анализ резистентности MRSA, вызывающих инфекционные осложнения у онкологических больных, к антибиотикам для определения стратегии их дальнейшего использования в клинике.
Материалы и методы. Исследованию подлежали 2 114 штаммов микроорганизмов, выделенные от онкологических больных, имеющих различные инфекционные осложнения в период 2014—2016 гг. В 38% случаев микроорганизмы были представлены ассоциациями грамположитель-ных и грамотрицательных микроорганизмов и анаэробами. Идентификация микроорганизмов, оценка чувствительности к антибактериальным препаратам производилась с помощью современных автоматизированных систем: Vitek-2, WalkAway, MS MALDI TOF.
Результаты. В течение периода наблюдения частота выделения золотистых стафилококков увеличилась в 2 раза: если в 2014 г. их количество составляло 160 штаммов, то в 2016 г. — 341 штамм. Все штаммы были устойчивы к ампициллину и в большинстве случаев сохраняли чувствительность к ампи-циллину/сульбактаму и амоксициллину/клавуланату. Отмечено нарастание устойчивости золотистых стафилококков к амоксициллину/клавуланату с 11,8% до 20,8% (p<0,01) соответственно, в то время как к ампициллину/сульбактаму количество устойчивых штаммов не изменялось, оставаясь на низком уровне 11,7—12,9% и количество резистентных штаммов к нему в 2016 г. было ниже (p<0,02), чем к амоксициллину/клавуланату. Наибольшие проблемы представляют штаммы, резистентные к метициллину/оксациллину-MRSA. Так, количество MRSA увеличилось к 2016 г. с 10,6% до 21,1% (p<0,02), в целом оставаясь на невысоком уровне. MRSA резистентны практически ко всем группам бета-лактамных
Злокачественные опухоли
www.malignanttumours.org
Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017
Malignant Tumours
www.malignanttumours.org
