Сравнительный анализ потенцирующего действия альфа-интерферона на индукцию апоптоза в перевиваемых линиях клеток U-937 и Jurkat Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Н.П. Ермакова, Н.Ю. Кульбачевская, О.И. Коняева, А.А. Сергеев, К.А. Сережин, В.М. Бухман ВЛИЯНИЕ ТЕРАФТАЛА НА ТОКСИЧНОСТЬ ДАКАРБАЗИНА (КОМПОНЕНТЫ СОНОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ)

ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

Цель исследования. Изучение «острой» токсичности дакарбазина (Біїс) в сочетании с терафталом (ТФ) для использования их в сочетанной химиосонодинамической терапии опухолей.

Материалы и методы. Исследования проведены на 120 здоровых мышах-самцах гибридах (СВАхС57В1/6.Т) Бь массой 20-23 г, полученных из питомника Столбовая. Дакарбазин медак Лиофилизат 100 мг (Гамбург, Германия), Терафтал-лио 0,05 г (ФГУП ГНЦ «НИОПИК»). Мс вводили животным в 1% концентрации внутрибрю-шинно, однократно в ранже доз от 200 до 400 мг/кг. Бйс в комбинации с ТФ применяли в тех же дозах. ТФ вводили внутривенно в виде 0,1% концентрации в одной дозе 20 мг/кг через 1 ч после Біїс. Доза ТФ 20 мг/кг является рекомендуемой терапевтической дозой равной 1/4МПД для мышей. Последовательность введения: первым вводили Бйс, затем вводили ТФ.

Результаты. Установлены расчетные токсические дозы Бйс: ЛД10 - 262,5мг/кг; ЛД50 - 363,8 (324,8^402,8) мг/кг и «Мс+ТФ»: ЛД10 - 242,6мг/кг; ЛД50 - 398,4 (343,5 -^453,4) мг/кг. Клиническая картина интоксикации на мышах после введения как одного Бйс, так и сочетания «Бйс +ТФ» после введения мышам в летальных дозах аналогична: уменьшение массы тела на 15-25% (перед гибелью), пилоэрекция, сужение глазных щелей, гиподинамия, диарея, анорексия. У мышей, получивших сочетание «Бйс +ТФ», моча в течение суток окрашена в синий цвет. Признаки макроскопических изменений внутренних органов павших животных на 4; 5; 12; 14 сутки после введения одного Бйс так и «Біїс +ТФ» аналогична: сукровичное содержимое в кишечнике стенки которого истончены, атрофия тимуса и селезенки. Наблюдались проявления местно раздражающего действия после внутрибрюшинного введения как одного Бйс так и «Бйс +ТФ» на 4; 5 сутки: отек почек, творожистый налет на жировой ткани, серый налет на печени со стороны брюшной полости, которые обратимы на 12-14 сутки. У мышей, получивших сочетание «Бйс +ТФ», наблюдалось окрашивания внутренних органов в синеватый цвет.

Выводы. В результате проведенных исследований установлено, что добавление ТФ в дозе 20 мг/кг к Бйс не усиливает токсичность одного Бйс. Бйс и сочетания «Біїс +ТФ» идентичны по показателям количественной и качественной токсичности на мышах-самцах гибридах (СВАхС57В1/6т) Бі.

М.П. Завелевич, А.А. Фильченков

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПОТЕНЦИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ АЛЬФА-ИНТЕРФЕРОНА НА ИНДУКЦИЮ АПОПТОЗА В ПЕРЕВИВАЕМЫХ ЛИНИЯХ КЛЕТОК U-937 И JURKAT

ИЭПОР им. Р. Е. Кавецкого НАН Украины, Киев

Введение. Известно, что интерфероны (ИФН) модулируют эффекты цитотоксических противоопухолевых препаратов в клетках солидных опухолей различного генеза. Подобные эффекты ИФН в отношении лейкозных клеток изучены недостаточно.

Цель исследования. Сравнительный анализ модуляции ИФН индукции апоптоза ингибитором ДНК-топоизомеразы II вепезидом в лейкозных клетках U-937 и Jurkat.

Материалы и методы. Исследования проводили на клетках Т-лимфобластного лейкоза Jurkat и миеломоноци-тарного лейкоза U-937. В работе использовали альфа 2Ь-ИФН человека (препарат Лаферобион «Биофарма», Украина). Кинетику роста и гибели культур анализировали подсчетом клеток после окрашивания трипановым синим. Содержание клеток с гиподиплоидной ДНК определяли с помощью цитофлуориметра FACSCalibur (“Becton Dickinson”, США) после окрашивания пропидия йодидом.

Результаты. ИФН при самостоятельном применении не вызывал заметного апоптоза в клетках Jurkat, в отличие от клеток U-937, где при кратковременной инкубации в дозе 15 тыс. МЕ/мл содержание гиподиплоидных клеток в популяции возрастало до 30%. Тем не менее, длительная инкубация клеток U-937 даже с высокими концентрациями ИФН не приводила к гибели популяции культуры, и спустя месяц инкубации при постоянном присутствии в культуральной среде ИФН содержание гиподиплоидных клеток было лишь немногим выше, чем в контроле. Клетки U-937, длительно инкубированные с ИФН, оказались более чувствительными к индукции апоптоза вепезидом. Так, при концентрации вепезида в 5 мкмоль/л процент гиподиплоидных клеток составил 15% в исходной культуре U-937 и 28% в культуре, проинкубированной 1 месяц с 5 тыс. МЕ/мл ИФН. Модулирующий эффект ИФН на индукцию апоптоза вепезидом в клетках Jurkat был лишь слабо выражен при кратковременной инкубации с ИФН и отсутствовал при длительной инкубации. Однако при индукции апоптоза в клетках Jurkat цисплати-ной стимулирующий эффект предшествующей обработки ИФН был довольно заметным.

Выводы. Показано, что ИФН повышает чувствительность к индукции апоптоза вепезидом в клетках U-937, отличающихся повышенной чувствительностью к апоптоз-индуцирующему действию ИФН при его самостоятельном применении, и лишь в слабой степени эффективен в этом отношении в клетках Jurkat, резистентных к индукции апоптоза при самостоятельном применении ИФН. Однако модулирующее действие ИФН на индукцию апоптоза различными химотерапевтическими средствами неодинаково.

№ 2/том 12/2013

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ