CC BY
2
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
Чеботарев Д. И., Ковригина А. М., Меликян А. Л.
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕГАКАРИОЦИТАРНОГО РОСТКА, СТЕПЕНИ ФИБРОЗА СТРОМЫ И СОСТОЯНИЯ ТРАБЕКУЛЯРНОЙ КОСТИ ПРИ ПЕРВИЧНОМ МИЕЛОФИБРОЗЕ И ЭССЕНЦИАЛЬНОЙ ТРОМБОЦИТЕМИИ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Дифференциальная диагностика ранней стадии первичного миелофиброза (ПМФ) и эссенциальной тромбоците-мии (ЭТ) вызывает объективные трудности. ПЖФ характеризуется высоким риском прогрессии фиброза стромы и остеосклероза, что отличает его от ЭТ. В качестве одного из факторов, влияющих на потенциал и скорость прогрессии остеосклероза и миелофиброза, рассматривается трансформирующий фактор роста ТОР-(ЗР1. Характеристика экспрессии ТОР-вР1 клетками опухолевого клона и изучение роли атипичных клональных мегакариоцитов в формировании фиброза стромы и остеосклероза представляет несомненный интерес.
Цель работы. Сопоставить экспрессию ТОР-вР1 мегакариоци-тами и иммуногистоархитектонику мегакариоцитарного ростка со степенью фиброза стромы костного мозга и остеосклероза в трепанобиоптатах костного мозга пациентов с разными стадиями первичного миелофиброза и эссенциальной тромбоцитемией.
Материалы иметоды. В исследование включен материал тре-панобиоптатов костного мозга (КМ) трех ретроспективно сформированных групп пациентов с клиническим и патоморфологи-ческим диагнозом, удовлетворяющим критериям ВОЗ редакции 2017 года: пре-ПМФ (20 трепанобиоптатов), фиброзной стадии ПМФ (ф-ПМФ, 10 трепанобиоптатов), ЭТ (20 трепанобиоптатов). Проведены гистологическое, гистохимическое и иммуногисто-химическое исследования с использованием антител к ТОР-вР1, окрасок по Гомори и «Трихром по Массону».
Результаты и обсуждение. При реакции с антителами к ТОР-(ЗР1 в трепанобиоптатах КМ всех групп пациентов наблюдалась интенсивная цитоплазматическая реакция в части мегакариоцитов с атипичной морфологией. Доля МКЦ с экспрессией ТОР-рР1 составляла 1,7% у пациентов с ЭТ, 9,4% у пациентов с пре-ПМФ,
23,5% у пациентов с ф-ПМФ. В трепанобиоптатх КМ с наличием рыхлых и плотных кластеров МКЦ отмечался вариант экспрессии ТОРЬР1 лишь частью МКЦ в составе кластера. Результаты анализа степени миелофиброза и остеосклероза в трепанобиоптатах КМ исследуемых групп приведены в таблицах 1 и 2 соответственно. При проведении анализа корреляции количества МКЦ с экспрессией ТОР-рР1 и полуколичественных оценок степени миелофиброза и остеосклероза без учета нозологической принадлежности обнаружена достоверная умеренная корреляция: г=0,431, р<0,001 для степени миелофиброза, и достоверная умеренная корреляция г=0,499, р<0,001 для степени остеосклероза.
Заключение. Обнаружение взаимосвязи между количеством мегакариоцитов с экспрессией ТОР-вР1 и степенью миелофиброза и остеосклероза свидетельствует в пользу активирующего влияния атипичных клональных мегакариоцитов на процессы миелофиброза и остеосклероза при ЭТ и ПМФ.
Таблица 1. Сравнительная характеристика степени фиброза стромы в трепанобиоптатах КМ исследуемых групп
Количество трепанобиоптатов МР-0 МР-1 МР-2 МР-З
ЭТ 11/20 (55%) 9/20 (45%) 0 0
Пре-ПМФ 2/20 (10%) 18/20 (90%) 0 0
Ф-ПМФ 0 0 6/10 (60%) 4/10 (40%)
Таблица 2. Сравнительная характеристика степени остеосклероза в трепанобиоптатах КМ исследуемых групп
Количество трепанобиоптатов Grаde 0 Grade 1 Grade 2 Grade 3
ЭТ 20/20 (100%) 0 0 0
Пре-ПМФ 9/20 (45%) 11/20 (55%) 0 0
Ф-ПМФ 0 0 3/10 (30%) 7/10 (70%)
Чернецкая Д. М.1, Сурин В. Л.1, Саломашкина В. В.1, Пшеничникова О. С.1, Яковлева Е. В.1, Зозуля Н. И.1, Судариков А. Б.1, Лихачева Е. А.1, Перина Ф. Г.2, Шабанова Е. С.3, Андреев Н. В.1
СПЕКТР ПАТОГЕННЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНА VWF У РОССИЙСКИХ ПАЦИЕНТОВ С БОЛЕЗНЬЮ ВИЛЛЕБРАНДА
]ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, 2ГАУЗ СО «Центр детской онкологии и гематологии», 3ФГБОУ ВО «СЗГМУ им И.И. Мечникова» Минздрава России
Введение. Болезнь Виллебранда (БВ) — это наследственное моногенное аутосомное заболевание. Оно обусловлено патогенными изменениями в гене У^Р, расположенном на хромосоме 12. Различные типы БВ могут наследоваться как доминантно (типы 1, 2А, 2В, 2М), так и рецессивно (типы 3 и 2К). Ген У^Р состоит из 52 экзонов. Экзоны 23—34 и интроны между ними имеют соответствующую им копию — псевдоген нахромосоме 22.
Цель работы. Проанализировать ген У^Р для пациентов с диагнозом БВ и описать спектр его патогенных вариантов, характерный для отечественной популяции.
Материалы и методы. Было проанализировано 40 неродственных пациентов из Москвы, Екатеринбурга и Санкт-Петербурга.
Таблица. Распределение найденных патогенных вариантов по экзонам. Новые патогенные варианты выделены жирным шрифтом. Если не указано обратное, то подразумевается, что вариант найден в гетерозиготном состоянии
Экзон Найденные патогенные варианты Сколько раз найден патогенный вариант
7 |?273\У 2
10 К373Тегт 2
14 М5761 1
16 с.2099insG 1
18 Т791М 2
c.2435delC 3 в гомозиготном состоянии, 10 — в гетерозиготном
19 18^ 1
20 D853N 1
1(8540 1 развгомозиготном состоянии.
21 1(9240 1
Экзон Найденные патогенные варианты Сколько раз найден патогенный вариант
23 с2968-2 A>G 1
25 С11011 1
26 У1146С 2 раза в гомозиготном состоянии
27 11205Н 1
28 Р12661. 1
Y1271Stop 1
У12791 1
F1293S 1
R1306W 1
11308Р 1
11308С 1
У1316М 1
1(13410 1
11374С 2
R1399H 1
515061 2
У15651. 2
1(15970 1
в16091 1
К16595|ор 1
35 c.6029delC 1
37 c.6457insA 1
40 c.6970delG 1
44 c.7482delC 1
45 P2527H 1
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2022; ТОМ 67; №2 |
В гене были изучены функционально значимые участки
методом секвенирования по Сэнгеру с помощью специально разработанных систем праймеров. Чтобы подтвердить диагноз, было необходимо найти два патогенных варианта в случае рецессивно наследуемых типов БВ и один патогенный вариант — в случае доминантно наследуемых типов.
Результаты и обсуждение. Результаты представлены в таблице. Было обнаружено 35 разных патогенных вариантов. Среди них две инсерции, четыре делеции, одна мутация сплайсинга, 3 нонсенс-мутации и 25 миссенс-мутаций. У всех пациентов были обнаружены патогенные варианты в гене 'У'^К Из 35 выявленных
нарушений 11 не были описаны ранее в литературе и базах данных. Патогенность 4 новых миссенс-мутаций подтверждена анализом с использованием протеомных программ (PolyPhen-2 v2.2.2, PROVEAN v.1.1.5, SIFT v.6.2.1, MutationTaster). В основном нарушения были локализованы в экзоне 28 (16 разных мутаций) и в эк-зоне 18 (преимущественно делеция c.2435delC). В большинстве случаев тип БВ подтверждался в результате молекулярно-генети-ческого исследования.
Заключение. Распределение патогенных вариантов по гену VWF в отечественной популяции в целом согласуется с мировыми данными (Goodeve, 2010).
Черных Ю. Б., Митина Т. А., Контиевский И. Н.
ЭФФЕКТИВНОСТЬ И БЕЗОПАСНОСТЬ ДЛИТЕЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ РУКСОЛИТИНИБА В НЕСЕЛЕКТИВНОЙ ГРУППЕ АМБУЛАТОРНЫХ ПАЦИЕНТОВ С РЕЗИСТЕНТНЫМ ТЕЧЕНИЕМ РЬ-НЕГАТИВНЫХ МИЕЛОПРОЛИФЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского
Введение. В настоящее время достоверные сведения о заболеваемости и распространенности РК -негативных миелопролифера-тивных неоплазий (МПН) в Российской Федерации отсутствуют. Но, несмотря на невысокие цифры заболеваемости, по данным зарубежных регистров, пациенты данной нозологической группы составляют значимую когорту в рутинной практике врача-гематолога. Применение руксолитиниба для лечения резистентных к гидроксикарбамиду форм МПН показало эффективность и безопасность в клинических исследованиях. Однако опыт длительного применения препарата в рутинной практике гематологов только накапливается.
Цель работы. Оценить эффективность и безопасность длительного применения руксолитиниба в неселективной группе амбулаторных пациентов с резистентным течением РК -негативных миелопролиферативных заболеваний в условиях одного центра Московской области.
Материалы и методы. Клинико-диагностический центр Московского областного научно-исследовательского клинического института за 12 месяцев (с марта 2020 по март 2021 г.) посетили 845 пациентов с наиболее распространенными формами МПН: истинной полицитемией (ИП) и постполицитемическим миелофиброзом — 351 пациент (42%), эссенциальной тромбоците-мией и посттромбоцитемическим миелофиброзом — 271 человек (32%), первичным миелофиброзом (ПМФ) — 223 (26%). Из них терапия руксолитинибом проводиласьу 68 пациентов с истинной полицитемией и миелофиброзом (первичным и в исходе ИП) — 8%. Длительное лечение руксолитинибом (более 24 месяцев) на момент анализа данных получал 31 пациент (характеристика пациентов представлена в таблице 1). Одному пациенту с ПМФ высокого риска руксолитиниб применялся в 1-й линии терапии. У 30 пациентов отмечено прогрессирование заболевания на фоне терапии гидроксикарбамидом и руксолитиниб применялся во 2-й линии у 17 (57%) пациентов, в 3-й линии у 10 пациентов (33%), у 3 пациентов (10%) руксолитиниб был назначен после 3 различных линий лечения.
Результаты и обсуждение. Через 2 года терапии руксолитинибом медиана показателей гемоглобина, тромбоцитов и лейкоцитов была ниже соответствующих показателей до начала лечения (табл. 2). Медиана пальпируемого размера селезенки ниже края левой реберной дуги также была меньше, чем показатель до начала лечения (12 см против 20 см). Не наблюдалось появлений
гематологической и негематологической токсичности 3—4-й степени. У 2 пациентов диагностирована новая коронавирусная инфекция без признаков дыхательной недостаточности. 14 пациентов из 31 (45%) в течение года контролировали самочувствие при помощи валидированой версии опросника МПН 10. За время наблюдения не отмечено отклонений индекса МПН более чем на 10 баллов от базового показателя — 20 баллов.
Заключение. Длительное лечение руксолитинибом показало приемлемую эффективность и безопасность в неселективной группе предлеченных пациентов с выраженной спленомегалией. Сокращение размеров селезенки, стабилизация самочувствия пациентов, отсутствие гематологических и негематологических осложнений 3—4-й степени позволяют широко применять препарат в рутинной амбулаторной практике гематолога.
Таблица 1. Характеристика пациентов, получающих длительную терапию руксолитинибом (п= 31)
Параметры Медиана (диапазон)/п, (%)
Возраст (годы) 64 (35-75)
Мужской пол 7 (23%)
ПМФ 15 (48%)
ПостИП-МФ 14 (46%)
ИП 2 (6%)
Длительность терапии руксолитинибом (месяцы) 24 (18-42)
Исследование наличия мутации гена Jak2Vól7F выполнено 19 (61%)
JAK2V617F + 16 (84%) из 19 пациентов
Гемоглобин (г/л) 115 (54-165)
Лейкоциты (х109/л) 8,15(2,6-3^4)
Тромбоциты (х109/п) 222 (56 -670)
Риск по DIPSS для 15 пациентов с ПМФ
Промежуточный -1 7 (47%)
Промежуточный -2 8 (53%)
Время от момента постановки диагноза до начала терапии руксолитинибом (годы) 7 (0-41)
Риск по MYSEC-PM для 14 пациентов с пост ИП-МФ
Низкий 9 (64%)
Промежуточный -1 4 (29%)
Промежуточный -2 1 (7%)
Время от момента верификации МФ до начала терапии руксолитинибом, годы 1 (0-3)
Пальпируемая спленомегалия для всех пациентов с фиброзом (см из-под края левой реберной дуги) 20 (0-32)
Таблица 2. Динамика показателей гемограммы после 24 месяцев терапии руксолитинибом
Медиана показателей До лечения 12 месяцев терапии 18 месяцев терапии 24 месяца терапии
Гемоглобин (г/л) 115(54-165) 115 (67-171) 115 (69-162) 107(72-132)
Лейкоциты (х109/п) 8,15(2,6-3^4) 7,17(2,0-27,7) 7,6(2,5-49,6) 5,2 (2,1-34,6)
Тромбоциты (х109/л) 222 (56-670) 219 (41-524) 259 (59-537) 183 (41-543)
Пальпируемая спленомегалия (см из-под края левой реберной дуги) 20 (0-32) 19 (0-30) 14 (0-28) 12 (0-31)
