CC BY
11
VII ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ С МЕЖДУНАРОДНЫМ УЧАСТИЕМ «ИНФЕКЦИИ И ИНФЕКЦИОННАЯ БЕЗОПАСНОСТЬ В ГЕМАТОЛОГИИ И СЛУЖБЕ КРОВИ»
троцитов производства ОАО «Синтез», устройство для стерильного соединения полимерных трубок TSCD ®-II Terumo. Морфофунк-циональное состояние ОРЭ после криоконсервирования оценивали с помощью комплекса общепринятых лабораторных методик, показателей, полученных с использованием газоанализатора RADIOMETER ABL800 FLEX и гематологического анализатора М10 Medonk M-Series, АТФ определяли хемилюминесцентным методом на флуориметре Bio Tek Flx800. Исследование острой токсичности разработанных растворов проводилось на крысах в соответствии с требованиями фармакопейной статьи «ОФС.1.2.4.0004.15.», пиро-генных свойств растворов - на кроликах («ОФС.1.2.4.0005.15. Пиро-генность»).
Результаты. Создание замкнутой («закрытой») системы при безаппаратном методе криоконсервирования эритроцитов (патент на полезную модель №180533 от 15.06.2018 г.), обеспечивающей герметичность на всех его этапах, создало предпосылки для разработки раствора для гипотермического хранения ОРЭ. Были разработаны композиции добавочных растворов, содержащие основные субстраты для поддержания энергетического потенциала отмытых размороженных эритроцитов, вещества, сохраняющие резистентность мембраны клеток и равновесие осмотического давления, ингредиенты, воздействующие на внутриклеточный рН, естественный антигипоксант.
По результатам исследований in vitro выбраны два варианта раствора оптимального состава, который по основным показателям морфофункциональной сохранности эритроцитов во взвеси (проценту гемолиза, содержанию свободного гемоглобина, АТФ, осмотически неустойчивых эритроцитов, р50, MCV) превосходит эритроконсервант SAG-M, широко использующийся для ОРЭ за рубежом.
Эффективность раствора показана в восьми сериях экспериментов по хранению отмытых размороженных эритроцитов, кри-оконсервированных аппаратным (с использованием аппарата Haemonetics ACP) и безаппаратным методами, при температурах -40°С и -80°С. Так, через 1 неделю хранения при +4°С взвесей отмытых размороженных эритроцитов, криоконсервированных при
-40°С, в экспериментальном растворе отмечены низкие процент гемолиза - 0,29±0,027 и содержание осмотически неустойчивых эритроцитов - 2,6±0,52%, высокие уровень АТФ - 5,5±0,20 мкмоль/г НЬ и морфологический индекс - 87,0±1,68. Содержание внеклеточного калия (6,8±0,46 ммоль/л) и лактата (8,7±0,42 ммоль/л) соответствуют их содержанию в нативной эритроцитной массе 2-х суток хранения. Показано минимальное снижение рН (до 6,90 ± 0,012) за счет оптимальной буферной системы раствора.
Исследование первичных биологических свойств вариантов нового добавочного раствора на двух видах лабораторных животных показало, что приготовление его по разработанной технологии позволяет получить стерильный, апирогенный, не обладающий острыми токсическими свойствами раствор.
Разработана технологическая инструкция по получению нового отечественного добавочного раствора для хранения размороженных и отмытых эритроцитов в учреждениях службы крови.
Выводы. Разработанная авторами модификация изделий для безаппаратного криоконсервирования и декриоконсервирования эритроцитов (полезная модель) обеспечивает стерильное соединение магистралей контейнеров с растворами и емкости для отмывания, что исключает возможность бактериальной контаминации взвеси отмытых размороженных эритроцитов и повышает ее инфекционную безопасность.
Применение нового добавочного раствора позволит увеличить срок хранения декриоконсервированных эритроцитов с 24-х часов до 7 суток (целевой срок хранения взвеси отмытых размороженных эритроцитов) и более. Включение в его состав естественного анти-гипоксанта (фумарата натрия) может оказывать положительное влияние не только на сохранность эритроцитов, но и на эффективность проводимой гемотерапии. Использование разработанного добавочного раствора будет способствовать повышению качества и доступности ареактогенного эритроцитного компонента крови для оказания трансфузиологической помощи населению, в том числе в труднодоступных и удаленных населенных пунктах Российской Федерации.
Колесов А.А.1, Сидоркевич С.В.2
СОВРЕМЕННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ ОБЕСПЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИОННОЙ БЕЗОПАСНОСТИ
КОМПОНЕНТОВ КРОВИ
1ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр имени В.А. Алмазова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Санкт-Петербург
2ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», Санкт-Петербург
Введение. ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России (Центр Алмазова) ведущий медицинский исследовательский центр Российской Федерации, оказывающий многопрофильную специализированную, в том числе высокотехнологичную медицинскую помощь. Переливание компонентов крови - неотъемлемая часть повседневной работы учреждения. Использование гемокомпонен-тов, отвечающих требованиям качества, инфекционной и иммунологической безопасности, является обязательным условием.
Цель. Оценить качество и безопасность компонентов крови, получаемых на станции переливания крови Центра Алмазова (СПК Центра Алмазова).
Материалы и методы. Проведен анализ материалов годовых отчетов по производственной деятельности СПК Центра Алмазова.
Результаты. Создание системы обеспечения инфекционной безопасности гемокомпонентов подразумевает использование целого комплекса мер. Порядок обследования доноров включает проведение иммунологических и молекулярно-биологических методов выявления вируса иммунодефицита человека, гепатитов В и С. Значимость ПЦР-диагностики возрастает при обследовании регулярных доноров, которые могли заразиться в период между до-нациями.
Все больше онкогематологических пациентов нуждаются в
многократных трансфузиях на протяжении длительного времени, что увеличивает совокупный риск аллогенного воздействия и передачи инфекции. Интенсификация использования мультикомпо-нентного донорства для получения двух и более доз одного и того же компонента крови или двух и более доз различных компонентов от одного донора позволяет снизить эти риски. В 2021 году проведено около 300 процедур тройного тромбоцитафереза, доля двойного эритроцитафереза составила 5% от общего числа заготовленных эритроцитсодержащих компонентов (ЭСК).
На СПК Центра Алмазова 100% получаемого тромбоцитного концентрата (ТК), 97% ЭСК и 88% свежезамороженной плазмы (СЗП) подвергаются лейкоредукции, что позволяет уменьшить количество остаточных лейкоцитов и значительно снизить частоту посттрансфузионных реакций, включая фебрильные негемолитические трансфузионные реакции (ФНТР), ^А-иммунизацию, передачу цитомегаловируса, вируса герпеса.
Развитие посттрансфузионной реакции «трансплантат против хозяина» объясняется наличием донорских лимфоцитов в компонентах крови. Более 81% ЭСК и 80% ТК, получаемых в Центре Алмазова, подвергаются процедуре рентген-облучения. Жизнеспособность лимфоцитов угнетается, а сохранность других клеток не нарушается при таком воздействии.
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XVIII, № 1, 2022
Отмытые эритроциты — компонент, получаемый путем последовательного отмывания и ресуспендирования ЭСК в добавочном растворе. В результате удаляются белки плазмы, лейкоциты, тромбоциты, антикоагулянт, микроагрегаты и клетки, разрушенные при хранении. Применение такого компонента крови оправдано у требующих частых трансфузий пациентов с иммуносупрессией, пациентов детского возраста.
Технология карантинизации СЗП давно применяется в службе крови. Использование технологии криоконсервирования эритроцитов дает возможность проведения карантинизации эритроцит-ной взвеси, что также способствует повышению инфекционной безопасности. Стоит отметить, что в период пандемии наличие банка криоконсервированных эритроцитов позволило своевременно и в полном объеме обеспечивать потребность клинических подразделений Центра Алмазова в ЭСК в условиях снижения доступности донорского контингента.
Необходимость использования технологий патогенредукции определяется многими факторами, среди которых: ограниченное количество тестируемых инфекционных агентов, выявление новых патогенов, передающихся при гемотрансфузии, и высокая вероятность бактериального загрязнения. 25% ТК и 16,5% СЗП, заготовленных на СПК Центра Алмазова ТК проходит процедуру редукции патогенов.
Выводы. Внедрение и использование в повседневной производственной деятельности СПК Центра Алмазова современных технологий получения компонентов крови позволяет обеспечить высокий уровень инфекционной безопасности гемокомпонентной терапии, что безусловно способствует повышению уровня оказываемой медицинской помощи и снижению частоты развития пост-трансфузионных реакций.
Кравченко Д.В., НовикД.К.
СПЕКТР ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ИНФЕКЦИОННЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ И ИХ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ У ПАЦИЕНТОВ С ОСТРЫМ ЛЕЙКОЗОМ
ГУ «Республиканский научно-практический центр радиационной медицины и экологии человека», г. Гомель, Беларусь
Введение. Особенностью пациентов с острыми лейкозами является угнетение иммунитета на фоне опухолевого процесса и проводимой химиотерапии, что создает благоприятную среду для развития инфекционных агентов, в том числе и условно патогенных. Нередко причиной их развития является собственная флора пациента, которая в условиях вторичного иммунодефицита начинает активно размножаться, приводя к развитию тяжелых осложнений. Помимо этого, в каждой больнице имеется своя собственная полирезистентная флора, которая требует назначения комбинации антибиотиков или антибиотиков «резерва». Инфекции, вызванные резистентными штаммами микроорганизмов, характеризуются более тяжелым течением, увеличивают продолжительность пребывания его в стационаре, предполагают применение комбинации антибиотиков с использованием резервных препаратов. Все это приводит к увеличению затрат на лечение, ухудшает прогноз для здоровья и жизни пациентов.
Цель: выполнить анализ спектра и чувствительности к проти-вомикробным лекарственным средствам возбудителей, вызывающих инфекционные осложнения у пациентов с острыми лейкозами.
Материалы и методы. Исследование выполнено на базе ГУ «РНПЦ радиационной медицины и экологии человека». Ретроспективно были изучены результаты бактериологических посевов и антибиотикограмм 177 пациентов с острым лейкозом с инфекционными осложнениями за период 2019-2021 гг. Предметом исследования были материал из дыхательных путей (мазок из зева и носа, мокрота, бронхиальный лаваж), кровь и моча испытуемых. Определение чувствительности выполнялось на анализаторе VITEK 2 Compact, применяя диагностические карты AST-Strept с использованием экспертной системы «Global European-based+EUCAST-based» или на стрипах ATB Strept 5 (bioMerieux, Франция). Для интерпретации результатов определения чувствительности руководствовались стандартом EUCAST.
Результаты. В2019 г. 34 (60%) случая инфекционных осложнений были вызваны 4 основными возбудителями: Klebsiella pneumonia (Kl.p) 12 (21%), Enterobacter faecalis 8 (14%), Staphylococcus aureus 7 (12%) и Acinetobacter baumanii 7 (12%). У остальных пациентов ифекционные осложнения были обусловлены присутствием других возбудителей. В 2020 г. 42 (75%) случая инфекционных осложнений вызвали 6 основных возбудителей: Kl.p 9 (16%), Staphylococcus haemolyticus 7 (12%), Stenotrophomonas maltophilia (St.m) 6 (11%), Staphylococcus hominis 6 (11%), Acinetobacter baumannii 6 (11%),
Pseudomonas aeruginosa 8 (14%). Остальные 14 (25%) распределились среди других инфекционных агентов. В 2021 г. 16 (30%) случаев инфекционных осложнений вызвали всего 2 возбудителя: Kl.p 7 (13%) и St.m 9 (17%). Остальные 38 (70%) неравномерно распределились среди других инфекционных агентов.
Таким образом, у пациентов с острыми лейкозами в гематологическом отделении наиболее часто встречалась грамотрицательная флора. Среди них стабильно преобладала Kl.p. В период 2020-2021 гг. с ней начал конкурировать St.m, который в последние годы все чаще становится возбудителем различных внутрибольничных инфекций, обладает высокой природной резистентностью, вызывает сложные для антибактериальной терапии гнойно-септические процессы с высокой смертностью пациентов.
Как показали результаты исследования чувствительности возбудителей к антибиотикам, в 2021 г. Kl.p показала значительную устойчивость к основным группам ß-лактамных антибиотиков: пенициллинам и цефалоспоринам, а также и к группам не ß-лактамных антибиотиков: фторхинолонам и аминогликозидам. Характерной особенностью изученного временного промежутка является прогрессивный рост резистентности Kl.p ко всем основным группам антибиотиков. На данный момент она сохраняет достоверную чувствительность только к группе карбапенемов. St.m начал выявляться только в 2020 г. и уже продемонстрировал свою устойчивость к большинству антибактериальных средств. В настоящий момент он проявляет чувствительность только по отношению к тикарциллину\клавуланату и триметоприму\сульфометак-сазолу.
Выводы. Современной эпидемиологической особенностью гематологического отделения у пациентов с острыми лейкозами является распространение грамотрицательных микроорганизмов, устойчивых к противомикробной терапии, эффективность которой при непрерывном использовании на протяжении нескольких лет прогрессивно снижается. Эта проблема усиливает потребность в новых современных антибиотиках, а микробиологический мониторинг выступает одним из наиболее важных компонентов в госпитальном контроле над внутрибольничными инфекциями. Локальный мониторинг этиологической структуры и устойчивости инфекционных агентов к антибактериальным средствам способствует назначению адекватной этиопатогенетической терапии возникающих инфекционных осложнений.
