CC BY
0
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XVIII, № 1, 2022
анализа (логистической регрессии) предикторами госпитальной летальности в основной группе явились: попадание пациента в ОРИТ, р=0.0001, наличие сепсиса, р=0.001, возраст >65, р=0.001.
Выводы. Коронавирусная инфекция при глубокой нейтропе-нии (вызванной опухолевой прогрессией и/или проведенной ПХТ)
является значимым неблагоприятным фактором внутригоспиталь-ной летальности у онкогематологических больных. Предикторами госпитальной летальности является возраст старше 60 лет, наличие сепсиса, пребывание в ОРИТ, отсутствие ремиссии заболевания.
Касьянов А.Д.1, Голованова И.С.1, Гришина Г.В.1, Киселева Е.А.1, Тарковская Л.Р.1, Семенова Н.Ю.1,
СтижакН.П.1, Абрамовский С.В.2
ИССЛЕДОВАНИЕ КАЧЕСТВА И БЕЗОПАСНОСТИ КОНЦЕНТРАТА ТРОМБОЦИТОВ ПРИ
ХОЛОДОВОМ ХРАНЕНИИ
гФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства России», Санкт-Петербург
2ФГБУ «Северо-западный окружной клинический центр им. Л.Г. Соколова Федерального медико-биологического агентства России», Санкт-Петербург
Введение. Концентраты тромбоцитов (КТ) относятся к наиболее востребованным компонентам крови. Главными проблемами при трансфузионной терапии КТ являются риски возникновения инфекционных осложнений, связанные с ограниченным сроком годности при температуре хранения 22 ± 2 °С, а также необходимость использования аппаратуры, обеспечивающей постоянное помешивание. Для решения этой проблемы в настоящее время изучаются альтернативные способы хранения, такие как криоконсер-вирование КТ или хранение при 4 °С.
Цель. Проведение сравнительного анализа показателей качества и безопасности КТ, заготовленного на плазме и добавочном растворе SSP+, на пролонгированных сроках хранения при пониженной температуре.
Материалы и методы. Объектом исследования являлись концентраты тромбоцитов, полученные методом афереза, хранящиеся при температуре 4 ± 2 X в течение 15 суток. В работе использованы гематологические, биохимические, морфофункциональные, бактериологические и статистические методы исследования.
Результаты. Проведенные исследования выявили достоверные различия в сохранности тромбоцитов в процессе их хранения в КТ-плазма и КТ^Р+. Уменьшение количества кровяных пластинок в течение срока хранения наблюдалось в обеих группах. Обращает внимание значимое (р < 0,05) уменьшение количества тромбоцитов в КТ-плазма на 5 день хранения до 69,7 % от исходного (100 %) с последующим постепенным снижением количества клеток на 10 день (67,4 %) и 15 день (62,4 %).
Анализ изменений показателей метаболизма также выявил в обеих группах однонаправленный характер изменений. Со дня заготовки до 15 дня хранения отмечено последовательное снижение значений рСО2 как в КТ-плазма (50,5 ^ 37,8 мм рт. ст.), так и в КТ-SSP+ (66,4 ^ 35,8 мм рт. ст.). Обращает на себя внимание стабильность содержания бикарбоната в КТ-плазма в течение всего срока наблюдения. При этом показано его значимое уменьшение в КТ-SSP+ (28,9 ± 2,7 ^ 17,8 ± 2,9, р < 0,01). Снижение в динамике уровня глюкозы сочеталось с нарастанием концентрации лактата. Концентрация лактата в КТ-плазма: 1,38 ± 0,23 ммоль/л ^ 6,06 ± 0,33
ммоль/л, р < 0,05; уровень лактата в КТ^Р+ 0,87 ± 0,14 ммоль/л ^ 4,80 ± 0,33 ммоль/л, р < 0,05). При этом потребление глюкозы и продукция лактата происходили в обеих группах, в целом, с одинаковой интенсивностью в течение всего срока хранения. Отмечено нарастание значений рН после первых суток хранения, что говорит об отсутствии дефицита буферных оснований. После 5 суток хранения значение рН в обеих группах оставалось стабильным. В КТ-плазма 7,31 ± 0,02 ^ 7,31 ± 0,03, в КТ^Р+ 7,29 ± 0,02 ^ 7,28 ± 0,02, что свидетельствует о достаточной мощности буферных систем сред хранения.
В обеих группах наблюдалось снижение агрегационных свойств тромбоцитов с индуктором АДФ, достигшее максимума к концу срока наблюдения. В то же время при хранении в добавочном растворе SSP+ наблюдалось менее интенсивное снижение агрегационной активности, к 15 дню наблюдения достигшее 48,3 % от исходного уровня.
Результаты морфологического исследования свидетельствуют об однонаправленности морфологических изменений при холодо-вом хранении в обеих группах. Хранение в добавочном растворе SSP+ и 100 % плазме показывают примерно одинаковую картину распределения тромбоцитов по содержанию разных морфологических форм на разных сроках хранения. Вместе с тем применение добавочного раствора SSP+ при холодовом хранении обеспечивает лучшую сохранность дискоцитов и меньшее образование дегенеративных форм. При бактериологическом исследовании, проводимом в конце срока хранения, рост микроорганизмов не обнаружен ни в одной пробе.
Выводы. Хранение аферезного концентрата тромбоцитов, заготовленного на плазме и добавочном растворе SSP+, на пролонгированных сроках (15 суток) хранения при температуре 4 ± 2 X, позволяет сохранять клеточный состав, уровень метаболизма и функциональный потенциал тромбоцитов на уровне, отвечающем требованиям нормативных документов. В условиях холодового режима (4 ± 2 X) использование добавочного раствора SSP+ обеспечивает лучшую сохранность КТ по сравнению с хранением в 100 % плазме.
Кирьянова Г.Ю., Гришина Г.В., Касьянов А.Д.
ГИПОТЕРМИЧЕСКОЕ ХРАНЕНИЕ ДЕКРИОКОНСЕРВИРОВАННЫХ ЭРИТРОЦИТОВ, ЗАГОТОВЛЕННЫХ В ЗАКРЫТОЙ СИСТЕМЕ
ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», Санкт-Петербург
Введение. Существенным препятствием для широкого использования в практике службы крови безаппаратных методов криоконсервирования эритроцитов является «открытая» система глицеринизации-деглицеринизации и связанный с этим короткий срок хранения отмытых размороженных эритроцитов (ОРЭ) при 4±2°С (24 часа).
Цель. Обеспечение пролонгированного хранения декриокон-сервированных эритроцитов за счет создания «закрытой» системы криоконсервирования и разработки нового отечественного добавочного раствора для ОРЭ.
Материалы и методы. Для исследования использовали модифицированные комплекты изделий для криоконсервирования эри-
VII ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ С МЕЖДУНАРОДНЫМ УЧАСТИЕМ «ИНФЕКЦИИ И ИНФЕКЦИОННАЯ БЕЗОПАСНОСТЬ В ГЕМАТОЛОГИИ И СЛУЖБЕ КРОВИ»
троцитов производства ОАО «Синтез», устройство для стерильного соединения полимерных трубок TSCD ®-II Terumo. Морфофунк-циональное состояние ОРЭ после криоконсервирования оценивали с помощью комплекса общепринятых лабораторных методик, показателей, полученных с использованием газоанализатора RADIOMETER ABL800 FLEX и гематологического анализатора М10 Medonk M-Series, АТФ определяли хемилюминесцентным методом на флуориметре Bio Tek Flx800. Исследование острой токсичности разработанных растворов проводилось на крысах в соответствии с требованиями фармакопейной статьи «ОФС.1.2.4.0004.15.», пиро-генных свойств растворов - на кроликах («ОФС.1.2.4.0005.15. Пиро-генность»).
Результаты. Создание замкнутой («закрытой») системы при безаппаратном методе криоконсервирования эритроцитов (патент на полезную модель №180533 от 15.06.2018 г.), обеспечивающей герметичность на всех его этапах, создало предпосылки для разработки раствора для гипотермического хранения ОРЭ. Были разработаны композиции добавочных растворов, содержащие основные субстраты для поддержания энергетического потенциала отмытых размороженных эритроцитов, вещества, сохраняющие резистентность мембраны клеток и равновесие осмотического давления, ингредиенты, воздействующие на внутриклеточный рН, естественный антигипоксант.
По результатам исследований in vitro выбраны два варианта раствора оптимального состава, который по основным показателям морфофункциональной сохранности эритроцитов во взвеси (проценту гемолиза, содержанию свободного гемоглобина, АТФ, осмотически неустойчивых эритроцитов, р50, MCV) превосходит эритроконсервант SAG-M, широко использующийся для ОРЭ за рубежом.
Эффективность раствора показана в восьми сериях экспериментов по хранению отмытых размороженных эритроцитов, кри-оконсервированных аппаратным (с использованием аппарата Haemonetics ACP) и безаппаратным методами, при температурах -40°С и -80°С. Так, через 1 неделю хранения при +4°С взвесей отмытых размороженных эритроцитов, криоконсервированных при
-40°С, в экспериментальном растворе отмечены низкие процент гемолиза - 0,29±0,027 и содержание осмотически неустойчивых эритроцитов - 2,6±0,52%, высокие уровень АТФ - 5,5±0,20 мкмоль/г НЬ и морфологический индекс - 87,0±1,68. Содержание внеклеточного калия (6,8±0,46 ммоль/л) и лактата (8,7±0,42 ммоль/л) соответствуют их содержанию в нативной эритроцитной массе 2-х суток хранения. Показано минимальное снижение рН (до 6,90 ± 0,012) за счет оптимальной буферной системы раствора.
Исследование первичных биологических свойств вариантов нового добавочного раствора на двух видах лабораторных животных показало, что приготовление его по разработанной технологии позволяет получить стерильный, апирогенный, не обладающий острыми токсическими свойствами раствор.
Разработана технологическая инструкция по получению нового отечественного добавочного раствора для хранения размороженных и отмытых эритроцитов в учреждениях службы крови.
Выводы. Разработанная авторами модификация изделий для безаппаратного криоконсервирования и декриоконсервирования эритроцитов (полезная модель) обеспечивает стерильное соединение магистралей контейнеров с растворами и емкости для отмывания, что исключает возможность бактериальной контаминации взвеси отмытых размороженных эритроцитов и повышает ее инфекционную безопасность.
Применение нового добавочного раствора позволит увеличить срок хранения декриоконсервированных эритроцитов с 24-х часов до 7 суток (целевой срок хранения взвеси отмытых размороженных эритроцитов) и более. Включение в его состав естественного анти-гипоксанта (фумарата натрия) может оказывать положительное влияние не только на сохранность эритроцитов, но и на эффективность проводимой гемотерапии. Использование разработанного добавочного раствора будет способствовать повышению качества и доступности ареактогенного эритроцитного компонента крови для оказания трансфузиологической помощи населению, в том числе в труднодоступных и удаленных населенных пунктах Российской Федерации.
Колесов А.А.1, Сидоркевич С.В.2
СОВРЕМЕННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ ОБЕСПЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИОННОЙ БЕЗОПАСНОСТИ
КОМПОНЕНТОВ КРОВИ
1ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр имени В.А. Алмазова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Санкт-Петербург
2ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», Санкт-Петербург
Введение. ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России (Центр Алмазова) ведущий медицинский исследовательский центр Российской Федерации, оказывающий многопрофильную специализированную, в том числе высокотехнологичную медицинскую помощь. Переливание компонентов крови - неотъемлемая часть повседневной работы учреждения. Использование гемокомпонен-тов, отвечающих требованиям качества, инфекционной и иммунологической безопасности, является обязательным условием.
Цель. Оценить качество и безопасность компонентов крови, получаемых на станции переливания крови Центра Алмазова (СПК Центра Алмазова).
Материалы и методы. Проведен анализ материалов годовых отчетов по производственной деятельности СПК Центра Алмазова.
Результаты. Создание системы обеспечения инфекционной безопасности гемокомпонентов подразумевает использование целого комплекса мер. Порядок обследования доноров включает проведение иммунологических и молекулярно-биологических методов выявления вируса иммунодефицита человека, гепатитов В и С. Значимость ПЦР-диагностики возрастает при обследовании регулярных доноров, которые могли заразиться в период между до-нациями.
Все больше онкогематологических пациентов нуждаются в
многократных трансфузиях на протяжении длительного времени, что увеличивает совокупный риск аллогенного воздействия и передачи инфекции. Интенсификация использования мультикомпо-нентного донорства для получения двух и более доз одного и того же компонента крови или двух и более доз различных компонентов от одного донора позволяет снизить эти риски. В 2021 году проведено около 300 процедур тройного тромбоцитафереза, доля двойного эритроцитафереза составила 5% от общего числа заготовленных эритроцитсодержащих компонентов (ЭСК).
На СПК Центра Алмазова 100% получаемого тромбоцитного концентрата (ТК), 97% ЭСК и 88% свежезамороженной плазмы (СЗП) подвергаются лейкоредукции, что позволяет уменьшить количество остаточных лейкоцитов и значительно снизить частоту посттрансфузионных реакций, включая фебрильные негемолитические трансфузионные реакции (ФНТР), ^А-иммунизацию, передачу цитомегаловируса, вируса герпеса.
Развитие посттрансфузионной реакции «трансплантат против хозяина» объясняется наличием донорских лимфоцитов в компонентах крови. Более 81% ЭСК и 80% ТК, получаемых в Центре Алмазова, подвергаются процедуре рентген-облучения. Жизнеспособность лимфоцитов угнетается, а сохранность других клеток не нарушается при таком воздействии.
