CC BY
35
УДК 616-092-9:636.92:616.995.42:616.288
Боровжова C.I., астрантка, Юськав 1.Д., професор, д.вет.н. © Льв\вськый нацюнальныйутеерсытет ветерынарногмедыцыны i бютехнологт ш. С.З. Гжицъкого, м. Лъвгв, Украта
СТАН СИСТЕМИ АНТИОКСИДАНТНОГО ЗАХИСТУ КРОЛ1В ЗА УМОВ СПОНТАННОГО ПСОРОПТОЗУ В Л1ТН1Й ПЕРЮД РОКУ
Наведено результаты дослгджень стану антыоксыдантног системы (АОС) i показнытв перекисного окиснення лтд1в (ПОЛ) у здоровых i хворых спонтанно на псороптоз крол1в. Встановлено, що пры спонтанному ncoponmosi крол1в ултшы nepiod року розвываетъся оксыдатывныы стрес, що проявляетъся в\рог1дным тдвыщенням р1вня показнытв перекысного окыснення л\тд1в -малонового дгалъдеггду, дгеновых кон 'югат1в, ¿idponeperncie лтд1в пры одночасному зныженш актывност1 фермент1в антыоксыдантног сыстемы -супероксыддысмутазы i каталазы. Стутнъ ргзныцъ у актывност1 антыоксыдантных фермент1в та eMicmy продуктгв перекысного окыснення лтдгв дослгджуваных крол1в за псороптозу залежытъ eid вгку тварын.
Ключов1 слова: псороптоз, кролг, вушна короста, плазма кровг, оксыдатывныы стрес, антыоксыдантна сыстема, перекысне окыснення л\тд1в.
УДК 616-092-9: 636.92: 616.995.42: 616.288
Боровикова Е.И., аспирантка, Юскив И.Д., профессор, д.вет.н.
Лъвовскыы нацыоналъныыуныверсытет ветерынарноы медыцыны ы быотехнологыы им. С.З. Гжыцкого, м. Львов, Украына
СОСТОЯНИЕ СИСТЕМЫ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ КРОЛИКОВ ПРИ СПОНТАННЫХ ПСОРОПТОЗА В ЛЕТНИЙ ПЕРИОД ГОДА
Прыведены результаты ысследованыя состояныя антыоксыдантноы сыстемы (АОС) ы показателей перекысного окысленыя лыпыдов (ПОЛ) у здоровых ы больных спонтанно на псороптоз кролыков. Установлено, что пры спонтанном псороптозе кролыков в летный перыод года развывается оксыдатывный стресс, который проявляется достоверным повышеныем уровня показателей перекысного окысленыя лыпыдов - малонового дыалъдегыда, дыеновых конъюгатов, гыдроперекысей лыпыдов пры одновременном сныженыы актывносты ферментов антыоксыдантной сыстемы - супероксыддысмутазы ы каталазы. Степень разлычый в актывносты антыоксыдантных ферментов ы содержаныя продуктов перекысного окысленыя лыпыдов ысследуемых кролыков на псороптоз завысыт от возраста жывотных.
Ключевые слова: псороптоз, кролыкы, ушная чесотка, плазма кровы, оксыдатывный стресс, антыоксыдантная сыстема, перекысное окысленые лыпыдов.
© Боров1кова e.I., Юсьшв 1.Д., 2014
65
UDC 616-092-9: 636.92: 616.995.42: 616.288
Borovikova E., graduate student, Yuskiv I., Professor, d.vet.n.
Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnology named.
SZ Gzhytsky, Lviv, Ukraine
THE STATUS OF THE ANTIOXIDANT SYSTEM OF SPONTANEOUSLY SICK RABBITS ON PSOROPTES DURING SUMMER PERIOD
The results of research on the status of the antioxidant system (AOS) and lipid peroxidation (LPO) in healthy and spontaneously sick on Psoroptes rabbits. It was found that during spontaneous Psoroptes of rabbits in the summer period develops oxidative stress, which is manifested a significant increase of the level of lipid peroxidation - malondialdehyde, conjugated diene, lipid hydroperoxide, while reducing the activity of antioxidant enzymes - superoxide dismutase and catalase. Extent of the differences in the activity of antioxidant enzymes and the content of lipid peroxidation products of rabbits that where studied during Psoroptes depends on the age of the animals
Key words: psoroptoz, rabbits, ear mange, blood plasma, oxidative stress, antioxidant system, lipid peroxidation.
Вступ. Обмш речовин i енерги e одшею з характерных особливостей живого оргашзму. 1нвазшш хвороби впливають на штенсившсть обмшу речовнн i енерги в оргашзм1 тварин [7, 10]. Проте, в останш роки велика увага придшяеться вивченню паразито-хазяшних вщносин [7, 10, 11, 12-16]. При исороитоз1 крол1в це питания не вивчене. Розшифрування взаемоди збудника псороптозу з живителем можна зробити тшьки на основ! сучасних комплексних 61ох1м1чних дослщжень. Одним з важливих мехашзм1в нормального розвитку оргашзму е стан антиоксидантного захисту (АОЗ) та пщтримання балансу процеав вшьнорадикального i иерекисного окиснення р1зних субстраив (ПОЛ). Кисень грае важливу роль у пщтриманш життед1яльност1 живих оргашзм1в та забезиечуе енергоутворююч1 мехашзми аеробних реакц1й та ферментативно-метабол1чну активац1ю Bcix функц1й. У динамщ цих реакц1й кисень иеретворюеться на активш форми - супероксид, перекис водню та г1дроксил-радикал, як1 називають в1льними радикалами. Надлишкове накопичення продукт1в перекисного окиснення л1п1д1в мае пошкоджуючу д1ю на кл1тинному piBHi. В1льн1 радикали взаемод1ють з молекулами жирних кислот, утворюючи високотоксичн1 гщроперекиси i новий в1льний радикал. Цей процес формуе HOBi ланцюги окиснення за участю первинних (д1енов1 кон'югати), пром1жних (малоновий д1альдег1д тощо) та юнцевих (основи Шиффа) продукт1в перекисного окиснення лшвдв, безперервне накопичення яких дестаб1л1зуе мембрани i викликае деструкцш кл1тин. Така практично ланцюгова реакщя може бути зупинена лише взаемод1ею з антиоксидантами. Останн1 посл1довно шпбують в1льн1 радикали на Bcix етапах !х утворення.
У нормальних ф1зюлопчних умовах життед1яльност1 орган1зму швидк1сть ПОЛ та актившсть АОС зр1вноважен1. Ця р1вновага рухома, трохи
66
змщена вправо - у напрямку АОС, але тд впливом патолопчних фактор1в, що призводять до законом1рного посилення процеав окиснення, виникають передумови для змщення р1вноваги вл1во - в бж посилення ПОЛ. Буферна емшсть антиоксидантно! системи достатньо велика, тому змщення р1вноваги вл1во виявляеться не одразу, а лише у м1ру виснаження антиоксидантних резерв1в. Зрушення р1вноваги у систем! бюлопчного окиснення в сторону активаци вшьнорадикального лшщопереокиснення з одночасним послаблениям резерв1в антиоксидантно! системи оргатзму отримав назву окисного стресу [1, 6].
У деяких наукових роботах продемонстровано, що клщ1 родини 8агсор1:Ыае можуть шдукувати оксидативний стрес у тварин [14, 16]. Однак наукових роб1т, присвячених оксидативному стресу, шдукованому клщем Р80Г0р1е8 сип!си1! I способам його усунення у крол1в, недостатньо [12, 13, 15, 16].
Мета дослщжень - вивчити вплив спонтанного псороптозу на стан антиоксидантно! системи I вмют показниюв перекисного окиснення л1п1д1в у крол1в р1зного в1ку в л1тнш пер1од року.
Матер1али 1 методи. Досл1дження проводили на баз1 в1варш та кафедри паразитолог!! та ¿хтюпатологи ЛНУВМ та БТ ¿мен! С.З. Гжицького протягом л!тнього пер!оду 2014 року. Об'ектом досл!дження були крол! кал!форн!йсько! породи в!ком 6-9 мюящв, а також 12 м!сяц!в ! старш! (здоров! та спонтанно хвор! на псороптоз), з яких було сформовано 4 групи аналог!в по 5 тварин у кожнш та яких утримували за загальними правилами.
Зб!р ! обробку кл!щ!в здшснювали за загальноприйнятими методиками [11]. У крол!в в!дбирали проби кров! з крайово! вушно! вени перед рашшньою год!влею. У ц!льн!й кров! визначали вм!ст супероксиддисмутази (СОД) [9], каталази (КТ) [3], а у плазм! - гщроперекиси л!п!д!в [4], малоновий д!альдегщ [2], д!енов! кон'югати [8]. Одержан! цифров! дан! опрацьовували статистично. Результата середшх значень вважали статистично в!рогщними при р < 0,05 -*, р < 0,01 - ** тар< 0,001 - ***.
Результата та обговорення. На рис.1 ! 2 представлен! результати досл!джень активност! фермент!в антиоксидантно! системи у кров! крол!в в!ком 6-9 м!сяц!в та 12 мюящв ! старших. Встановлено, що при псороптоз! крол!в знижуеться р!вень супероксиддисмутази (рис. 1) ! каталази (рис. 2). Разом з тим результати св!дчать про посилення явища оксидативного стресу у молодих крол!в 6-9-м!сячних в!ку пор!вняно з кролями 12 м!сяц!в ! старших. Так, тд д!ею кл!щ!в Р80Г0р1е8 сип!си1! в!рог!дно зменшуеться активн!сть ферменту супероксидисмутази у крол!в 6-9-м!сячному вжу, пор!вняно з контрольною групою в 1,26 раза (р<0,05), а каталази в 1,46 раза (р<0,05).
У 12-м!сячних крол!в ! старших р!знищ аналог!чних показник!в при псороптоз! виявлеш меншою м!рою. Зокрема, активн!сть супероксиддисмутази знизилася в 1,20 раза (р<0,05) пор!вняно з контрольною групою, а каталаза - в 1,31 раза (р<0,05).
67
Рис. 1. Актившсть супероксиддисмутази у кров! крол1в рпного вжу за псороптозу
Рис. 2. Актившсть каталази у кров1 крол1в рпного в1ку за псороптозу
На рис. 3-5 представлен! результата дослщжень вмюту показниюв перекисного окиснення лшвдв у плазм1 кров1 крол1в в ¿ком 6-9 мюящв та 12 мюящв I старших за спонтанного псороптозу. Так, при псороптоз! крол1в у 6-9-мкячному вшд вмкт малонового д1альдегщу (рис. 3) зростае в 2,10 раза (р<0,05) пор1вняно з контрольною групою, д1енових кон'югат1в (рис. 4), вщповщно, в 2,15 раза (р<0,01) та гщроперекиав лшвдв (рис. 5) - в 1,90 раза (р<0,05).
68
Рис.3. Вмкт малонового д!альдегвду у плазм! кров! крол!в р!зного вжу за псороптозу
Меншою м1рою аналопчш р1знищ у вмкт1 малонового д1альдегщу, д1енових кон'югат1в та гщроперекиав лшвдв виявлеш в крол1в 12-м1сячних \ старших при ураженш клщами Psoroptes cuniculi, пор1вняно з контрольною групою тварин. Зокрема, вмкт малонового д1альдегщу у плазм1 кров1 крол1в заражених клщами Psoroptes cuniculi, був вищий в 1,76 раза (р<0,05) пор1вняно з контрольною групою, д1енових кон'югаив, вщповщно, в 1,80 раза (р<0,05), гщроперекиав лшадв - в 1,84 раза (р<0,05).
Рис.4. Вм!ст д!снових кон'югат!в у плазм! кров! крол!в р!зного в!ку за псороптозу
Разом з тим, одержан! нами результата дослщжень свщчать про значно вищу штенсившсть перекисного окиснення лшвдв у дослщжуваних крол1в, уражених клщами Psoroptes cuniculi пор1вняно до незаражених крол1в та про вплив вжу на цей показник. 3 цих даних випливае, що токсичний вплив клщ1в Psoroptes cuniculi призводить до активаци юнцевих стадш перекисного окиснення лшвдв у кров1 крол1в.
69
Отже, шваз1я клщем Р80гор1е8 сишсиН спричиняе оксидативний стрес у оргашзм1 хворих крол1в, що проявляеться р1зким зростанням показниюв перекисного окиснення лшвдв при одночасному зниженш активное^ фермешгв антиоксидантно! системи (супероксиддисмутази \ каталази).
Рис.5. Вмкт гщроперекиыв лтЫв у плазм1 кров1 крол1в рпного вжу за псороптозу
Ймов1рио, високий р1веиь продукта перекисного окиснення е одним ¿з фактор1в, що пщштовхують оргашзм крол1в до заражения клщами Р80Г0р1е8 сишсиН.
Висновки. При спонтанному псороптоз1 крол1в у л1тнш перюд року знижуеться актившсть ферменив антиоксидантно! системи при цьому в1рогщно пщвищуеться вмют продукта перекисного окиснення лшдав - малонового д1альдегщу, д1енових кон'югата, гщроперекиЫв лшвдв. Стутнь р1зниць у активное^ антиоксидантних фермента та вмкту продукта перекисного окиснення лшщ1в дослщжуваних крол1в за псороптозу залежить вщ в1ку тварин.
Перспективи подальших дослщжень. Проанал1зувавши штенсившсть процеав у систем! антиоксидантного захисту залежно вщ пори року, ми отримуемо можливють розробляти способи зниження або недопущения розвитку окисного стресу у промислових крол1в, а отже сприяти пщвищенню захисних сил оргашзму та отрност1 до хвороб.
Л1тература
1. Киричек Л.Т. Молекулярные основы окислительного стресса и возможности его фармакологической регуляции. / Л.Т. Киричек, Е.О. Зубова // Международный медицинский журнал. — 2004. — № 1. — С. 144—148.
2. Коробейникова Э.Н. Модификация определения продуктов перекисного окисления липидов в реакции с тиобарбитуровой кислотой / Э. Н. Коробейникова // Лабораторное дело. — 1988. — № 7. — С. 8—9.
3. КоролюкМ.А. Метод определения активности каталазы / КоролюкМ.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е.// Лабораторное дело. — 1991. — №12. — С. 9—10.
70
4. Мирончик В.В. Способ определения гидроперекисей липидов в биологических тканях // Авторское свидетельство СССР №1084681 А.
5. Моим В. М. Простой и специфический метод определения глутатионпероксидазы в еритроцитах/ В.М. Моим // Лабораторное дело. — 1986. — № 12. — С.16—19.
6. Окислительный стресс в модуляции апоптоза нейтрофилов в патогенезе острых воспалительных заболеваний / Н.В. Рязанцева, Т.В. Жайворонок и др. // Бюллетень СО РАМН. — 2010. — № 5. — Т. 30. — С. 58— 63.
7. Перекисное окисление липидов как фактор эндогенной интоксикации при гельминтозах / О.В. Бякова, Л.В. Пилип, С.Н. Белозеров // Российский паразитологический журнал. — 2008. — № 2. — С. 29—33.
8. Стальная М.Д. Метод определения содержания диеновых конъюгатов / М.Д. Стальная // Современные методы в биохимии. — М.: Медицина. — 1977. — С. 63—64.
9. Чевари С. H. Определение антиоксидантних параметров крови и их диагностическое значение в пожилом возрасте / Чевари С. Н., Андян Т.А. Штренгер Я. И. // Лабораторное дело. — 1991. — № 10. — С. 9-13.
10. Шелякин И.Д. Состояние антиоксидантной защиты у крупного рогатого скота при фасциолезе / И.Д. Шелякин, В.Н. Кузьмичева, И.Ю. Кушнир // Теория и практика борьбы спаразитарными болезнями. — М., 2006. — С.447— 449.
11. Юсьюв 1.Д. Акаролопчт дослщження тварин та акарициди: [навчально-практичний поЫбник Затверд. Míhíct. агропромис. компл. Украши]. — Льв1в: Каменяр, 1998. — 95 с.
12. Hormonal and behavioral changes induced by acute and chronic experimental infestation with Psoroptes cuniculi in the domestic rabbit Oryctolagus cuni cuius / Hallal-Calleros C., Morales-Montor J. [and others]. — Parasites & Vectors. — 2013. — №6: 361. — Режим доступу до журн. : http://www.parasitesandvectors. com/content/6/1/361 .
13. Psoroptes cuniculi induced oxidative inbalance in rabbits and its alleviation by using vitamins A, D3, E and H as adjunctive remedial / Sh. K. Singh, U. Dimri [and others]. — Trop. Anim. Health Prod. — 2012. — № 7. — P. 43—48.
14. Psoroptic mange infestation increased oxidative stress and decreases antioxidant status in sheep / U. Dimri, M.C. Sharma [and others]. — Veterinary Parasitology. — 2010. — №168 (3-4). — P. 318—322.
15. The curative and antioxidative efficiency of doramectin and doramectin + vitamin AD3E treatment on Psoroptes cuniculi infestation in rabbits / M. Kanbur, O. Atalay [and others]. — Research in Vet. Science. — 2008. — № 85 — P. 291—293.
16. The oxidative status and inflammatory level of the peripheral blood of rabbits infected with Psoroptes cuniculi / X. Shang, D. Wang [and others]. — Parasites & Vectors. — 2014. — № 7. — Режим доступу до журн. : http://www. parasitesandvectors.com/content/7/1/124 .
Рецензент - к.с.-г..н., доцентр Лобойко Ю.В.
71
