CC BY
32
Крысова A.B., Новоселова Е.В., Тройлова М.Е., Джалилова В.Д., Иванова Е.П., Каленчук Н.С., Сайтова О.В., Сысуева Е.А., Торопова А.Л.
СКОРОСТЬ ГЕМОЛИЗА ЭРИТРОЦИТОВ КАПИЛЛЯРНОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА В ДИСТИЛЛИРОВАННОЙ ВОДЕ И ВЛИЯНИЕ
НА НЕЕ АДРЕНЕРГИЧЕСКИХ СРЕДСТВ Кировская государственная медицинская академия, кафедра нормальной физиологии Зав. кафедрой: профессор В.И. Циркин Научный руководитель: профессор В. И. Циркин
В последние годы в связи с открытием аквапо-ринов во многих клетках, включая эритроциты (Agre Р. et al., 1994; Roudier N. et al.,1998; Yang В. et al., 2000; Титовец Э.П., 2007), возрос интерес к осмотической резистентности эритроцитов (ОРЭ), в том числе в связи с возможностью оценивать по ней адреноре-активность организма (Стркж Р.И., Длуссская И.Г., 2003; Адамян Л.В. и др., 2006; Тихомирова И.А., 2006). Однако до настоящего времени отсутствует общепринятый способ оценки ОРЭ. Цель данной работы - создать теоретическую базу метода оценки ОРЭ для его использования в клинической практике. Его принцип был предложен ранее в нашей лаборатории (Попова Е.А. и др., 2008). Для этого изучали сохранность эритроцитов, помещаемых при 18-22°С в дистиллированную воду (ДВ), содержащую 2,5 мМ СаС12, на 30, 45, 60, 90 и 120 с. Содержание эритроцитов определяли классическим методом (Кост Е.А., Смирнова Л.Г., 1964) с использованием микроскопа типа Биолам ЛОМО (Р-11) и счетной камеры Ал-ферова-Бюркера с сеткой Горяева, подсчитывая их в 80 малых квадратах. Влияние адреналина и адре-ноблокаторов (обзидана, атенолола и ницерголина) на ОРЭ оценивали путем помещения эритроцитов в ДВ, содержащую адренергические вещества в соответствующих концентрациях. Забор капиллярной крови (по 0,02 мл) у 38 девушек проводили микропипеткой гемометра Сали. Установили, что исходно число эритроцитов в 1 л крови составило 4,44+0,13 х1012 (М±ш) или 444±13 в 80 м. квадратах. После 30-секундной экспозиции в ДВ неразрушенными оставалось 315±16 эритроцитов в 80 м. квадратах, т.е. 72±4% от исходного уровня, а после 45-, 60-, 90- и 120-секундных экспозиций - соответственно 266-±25; 150+15; 31±8 и 8+4, или 59±5%, 35+4%, 7±2% и 2±1% от исходного уровня. Таким образом, каждые 30 с гемолизу подвергаются около 30% эритроцитов. Поэтому условно можно выделить три фракции (Ф) эритроцитов - с низкой (Ф30), средней (Ф60) и высокой (Ф90) устойчивостью к ДВ. Возможно, что ОРЭ зависит от «возраста» эритроцитов - чем он меньше, тем выше ОРЭ. Влияние адреналина (10 10, 10'9, 10'8, 10-7 и 10 б г/мл) на ОРЭ оценивали в двух сериях
- при 30- и 60- секундной экспозиции эритроцитов в ДВ, т.е. в отношении Ф30 и Ф60. В обеих сериях адреналин повышал ОРЭ, но зависимость этого эффекта
от концентрации адреналина оказалась разной. В 1-й серии (30 с) при действии адреналина (10'1°, 10'9, 10'8, 10 7 и 10‘6 г/мл) число эритроцитов, сохранившихся в ДВ, возросло соответственно до 107+11%, 118±9%, 131 ±12%*, 109±4%* и 113±8% от исходного 30-с контроля (^-различие с контролем достоверно, р<0,05, по критерию Стьюдента); во 2-й серии (60 с) эти значения составили соответственно 161+15%*, 130+13%*, 138±8%*, 130±12%* и 161±19%\ Таким образом, для фракции Ф30 максимальный эффект адреналин оказывал в концентрации 10‘8 г/мл, а для фракции Ф60
- в концентрациях 1010 и 10"6 г/мл (это указывает на неоднородность фракции). В целом, эти данные говорят об изменении адренореактивности эритроцитов с «возрастом». Полагаем, что адреналин влияет на ОРЭ за счет изменения состояния аквапоринов; при этом, судя по результатам опытов с адренобло-каторами, повышение ОРЭ адреналином, вероятно, обусловлено активацией альфа-адренорецепторов (АР) и бета1-АР; при активации же бета2-АР возможно и снижение ОРЭ.
