CC BY
37
УДК 612.111.44:615.373.34 DOI: 10.17238/issn2542-1298.2017.5.1.48
ФОНОВЫЕ и бав-вызванные изменения ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ у женщин КАК ИНДИКАТОРЫ УГРОЗЫ ПРЕЖДЕВРЕмЕННЫХ РОДОВ (часть 1)
B.И. Циркин*/** А.Д. Ноздрачев***, К.Ю. Анисимов****,
C.Л. Дмитриева*****, О.А. Братухина*****, С.В. Хлыбова******
*Казанский государственный медицинский университет (г. Казань) **Вятский государственный университет (г. Киров)
***Санкт-Петербургский государственный университет (Санкт-Петербург) ****Уральский государственный медицинский университет (г. Екатеринбург) *****Кировский областной клинический перинатальный центр (г. Киров) ******Кировский государственный медицинский университет (г. Киров)
Проанализированы данные литературы по 32 показателям, отражающим фоновое и вызванное биологически активными веществами (БАВ) функциональное состояние эритроцитов крови беременных (все триместры), рожениц (латентная фаза I периода родов) и женщин с угрозой преждевременных родов. При этом 11 показателей отражают агрегационные и седиментационные свойства эритроцитов (скорость оседания эритроцитов), 6 - осмотическую резистентность эритроцитов к гипотонической среде, 15 - агглютина-бельность эритроцитов, определяемую по времени начала их агглютинации. Все показатели рассматриваются с позиции их использования для диагностики угрозы преждевременных родов и оценки вероятности ее перехода в преждевременные роды. В части 1 рассмотрены первые две группы показателей. Анализ продемонстрировал перспективность исследования фоновой и БАВ-вызванной скорости оседания эритроцитов гепаринизированной венозной крови (СОЭгеп). Так, этим методом выявлено, что фоновая СОЭгеп становится максимальной при срочных родах или угрозе преждевременных родов. Показаны изменение характера ответа СОЭгеп при беременности, в родах и при угрозе преждевременных родов на адреналин, ацетилхолин, окситоцин, серотонин, дидрогестерон и эстрадиол, а также способность дидрогестерона модулировать ответы СОЭгеп на указанные БАВ. Методом СОЭгеп получены доказательства наличия в эритроцитах двух популяций окситоциновых рецепторов - атозибанчувствительных (дидрогестерон повышает эффективность их активации у женщин с угрозой преждевременных родов) и атозибаннечувствительных.
Ответственный за переписку: Циркин Виктор Иванович, адрес: 420012, г. Казань, ул. Бутлерова, д. 49 / 610000, г. Киров, ул. Московская, д. 36; e-mail: [email protected]
Для цитирования: Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Анисимов К.Ю., Дмитриева С.Л., Братухина О.А., Хлыбова С.В. Фоновые и БАВ-вызванные изменения функционального состояния эритроцитов у женщин как индикаторы угрозы преждевременных родов (часть 1) // Журн. мед.-биол. исследований. 2017. Т. 5, № 1. С. 48-62. DOI: 10.17238/issn2542-1298.2017.5.1.48
Описывается оригинальный метод оценки фоновой и БАВ-вызванной осмотической резистентности эритроцитов, основанный на кратковременной (30-120 с) экспозиции эритроцитов в дистиллированной воде, содержащей 2,5 мМ СаС12, а при исследовании ответа эритроцитов на адреналин или ацетилхолин - содержащей адренергические или холинергические вещества. Показаны рост фоновой осмотической резистентности эритроцитов при беременности (в т. ч. при угрозе преждевременных родов), достигающий максимума в родах, а также повышение эффективности активации бета-адренорецепторов эритроцитов при беременности и предродовое повышение эффективности активации альфа-адренорецепторов.
Ключевые слова: функциональное состояние эритроцитов, индикаторы угрозы преждевременных родов, скорость оседания эритроцитов, осмотическая резистентность эритроцитов, седиментация и агрегация эритроцитов, беременность, роды.
Преждевременные роды (ПР) - одна из проблем современного акушерства, требующая поиска оптимальных стратегии и тактики ведения женщин с угрозой преждевременных родов (УПР) и оценки вероятности перехода УПР в ПР. В этом аспекте заслуживают внимание методы оценки состояния эритроцитов венозной крови матери, т. к. они являются самой многочисленной популяцией клеток крови и, вероятно, могут отражать тончайшие изменения в организме матери. Как известно, эритроциты в условиях in vitro способны к агрегации, седиментации, деформации, сохранению жизнеспособности в гипотонической среде, а также к агглютинации, которая рассматривается как иммунологическая реакция. Поэтому агглютинация эритроцитов может отражать процесс формирования при беременности иммунологической толерантности матери к полуалло-генному плоду и индукцию родов как разрешение иммунного конфликта между матерью и плодом, протекающее по типу воспаления. Следовательно, эритроциты могут демонстрировать изменения иммунных процессов, происходящих при беременности и родах, а также реактивность клеток организма (в т. ч. миоци-тов матки) к катехоламинам, ацетилхолину, ок-ситоцину, серотонину, прогестерону, эстрогену и другим биологически активным веществам (БАВ). Это может быть важным при диагностике УПР и для оценки вероятности перехода УПР в ПР. Примечательно и то, что оценка
многих свойств эритроцитов в клинических условиях относительно несложна. В обзоре мы попытались провести анализ данных литературы [1-28], часть из которых [1, 3-10, 15, 18-28] получены в нашей лаборатории. Они касаются фоновых и БАВ-вызванных изменений функционального состояния эритроцитов у женщин при неосложненном течении беременности и родов, а также при наличии УПР. В части 1 обзора анализируются данные литературы, касающиеся фоновых и вызванных скорости оседания эритроцитов (СОЭ) [1-7] и осмотической резистентности эритроцитов (ОРЭ) к гипотонической среде [8-19], в части 2 - данные литературы, касающееся фоновой и вызванной способности эритроцитов к агглютинации, одним из показателей которой служит время начала агглютинации [20-28], а в части 3 дается классификация всех анализируемых показателей функционального состояния эритроцитов с позиций их информативности для диагностики УПР и оценки вероятности перехода УПР в ПР.
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)
Фоновая СОЭ цитратной венозной крови (СОЭцит). Хорошо известно, что при беременности определяемая в присутствии цитрата натрия СОЭцит постепенно возрастает, достигая максимальных значений в конце III триместра. У рожениц СОЭцит ниже, чем у беременных в III триместре, а у женщин с УПР она ниже, чем у женщин без УПР [1, 2]. Так, показано (№ 1
в таблице), что СОЭцит (среднее арифметическое) на 24-27-й, 28-32-й и 32-36-й неделях беременности составляет соответственно 31, 36 и 52 мм/ч, а у женщин с УПР - 40, 38 и 38 мм/ч [2].
Фоновая СОЭ гепаринизированной венозной крови (СОЭгеп). Показано (№ 2 в таблице), что с увеличением срока беременности СОЭгеп возрастает, но достигает максимума не в III триместре, а в родах [3-5], при этом у жен-
щин с УПР она не ниже, чем у беременных без УПР [3, 5], а даже выше [4]. Так, по нашим данным [5], СОЭгеп (медиана) в 7-12, 13-24 и 25-36 нед. составляет соответственно 18, 25 и 44 мм/ч, у рожениц (I период) - 52 мм/ч, а при УПР (24-36 нед.) - 56 мм/ч. При этом у женщин с УПР и у рожениц СОЭгеп выше (р < 0,05), чем у беременных без УПР Таким образом, при исследовании эритроцитов гепаринизированной крови, т. е. при наличии в сре-
ПОКАЗАТЕЛИ, ОТРАЖАЮЩИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ЭРИТРОЦИТОВ У ЖЕНЩИН
Показатель Беременные (триместры) Роженицы Женщины с УПР Источник
I П Ш
1. Фоновая СОЭ цитратной крови (СОЭ ) А 4 цит' Максимум в III триместре Ниже, чем у беременных Ниже, чем у беременных [1, 2]
2. Фоновая СОЭ гепаринизированной крови (СОЭгеп) Постепенно возрастает, максимум - в родах Выше, чем у беременных [3-5]
3. Влияние адренергических веществ на СОЭ цит Ф Ф Ф Ф (но в меньшей степени, чем у беременных) Ф (но в меньшей степени, чем у беременных) [1, 2]
4. Влияние адреналина (10-6г/мл) на СОЭ геп — — — — — [3, 5]
5. Влияние ацетилхолина (10-6 г/мл) на СОЭ геп Ф — — ф — [3, 6]
6. Влияние окситоцина (10-6 МЕ/мл) на СОЭ геп Ф Ф Ф Ф Ф [3, 6]
7. Влияние окситоцина (10-2 МЕ/мл) на СОЭ геп — — — Ф — [3, 6]
8. Влияние дидрогестерона (10-6 г/мл) на эффективность активации атозибанчувстви-тельных ОР (по СОЭ ) геп — Не иссл. — Не иссл. Ф (т. е. повышает способность окситоцина (10-6-10-3 МЕ/мл) снижать СОЭ) [7]
9. Влияние дидрогестерона (10-9-10-6 г/мл) на СОЭ геп — ф (10-9 г/мл) — — Ф (10-8, 10-9 г/мл) [4, 6]
10. Влияние эстрадиола валера-та (10-9-10-6 г/мл) на СОЭ геп — — Ф (10-6 г/мл) Ф (10-9, 10-6 г/мл) Ф (10-8-10-6 г/мл) [4, 6]
Окончание таблицы
Показатель Беременные (триместры) Роженицы Женщины с УПР Источник
I II Ш
11. Фоновая ОРЭ ДВ (показатель Т50, с) 69,0 77,0 84,4 85,3 (как у беременных) 83,9 (как у беременных) [8-10]
12 ОРЭ (ОРЭ на фоне пропранолола) Не иссл. Не иссл. 20-90 усл. ед. [12] или (23,3±3,1) усл. ед. [13]; при беременности и в родах не меняется [13] Не иссл. [12-13]
13. Влияние пропранолола (10-8-10-5 г/мл) на ОРЭ37 Ф (как у небеременных) Не иссл. Ф (меньше, чем у беременных) [15]
14. Влияние адреналина (10-10-10-6 г/мл) на ОРЭ37 Ф (как у небеременных) Не иссл. Ф (меньше, чем у беременных) [15]
15. Влияние адреналина (10-10-10-5 г/мл) или гинипрала (10-10-10-5 г/мл) на ОРЭ37 ф Не иссл. ф (меньше, чем у беременных; усиливается милдронатом) [17]
16. Влияние адреналина (10-10-10-6 г/мл) на ОРЭДВ45 ф (10-10, 10-8, 10-7 г/мл) ф (10-10, 10-8, 10-7 г/мл) ф (10-9 г/мл) ф 10-7, 10-6 г/мл (как у беременных) (эффект ниже, чем у беременных) [9, 10, 18]
17. Влияние ацетилхолина (10-10-10-5) на ОРЭдв45 — — — — Не иссл. [19]
Примечание. Символы Ф, ф или — означают, что исследуемое вещество соответственно повышает, снижает или не влияет на указанный показатель.
де свободных ионов Са2+, вместо предродового снижения СОЭ и снижения СОЭ при УПР
цит цит г
выявлено повышение СОЭ при этих состоя-
геп г
ниях [3-5]. Это подтверждает представление о том, что срочные роды и ПР индуцируются воспалительным процессом [29, 30].
Влияние адреналина на СОЭцит. Адреналин (№ 3 в таблице), как и бета-адреномиметик ги-нипрал, снижает СОЭцит венозной крови беременных женщин и рожениц [1, 2]. Это объясняется активацией всех видов адренорецепторов (АР), в т. ч. альфа- и бета-АР [1, 2, 5]. Степень снижения СОЭ тем меньше, чем выше кон-
ттит 7
центрация адреналина, а у рожениц и женщин с УПР она меньше (р < 0,05), чем у беременных без УПР [1, 2]. Так, у женщин с УПР на 24-27-й, 28-32-й и 33-36-й неделях беременности адреналин (10-11 г/мл) снижал СОЭцит соответственно до 91,7; 88,1 и 85,2 % от исходного уровня, а у женщин без УПР - до 76,7; 73,0 и 56,1% [2].
Влияние адреналина на СОЭ . У беремен-
геп
ных женщин, рожениц и женщин с УПР СОЭгеп венозной крови не изменялась под влиянием адреналина (10-6 г/мл; № 4 в таблице) [3, 5]. Не исключено, что такой результат обусловлен
использованием адреналина в высокой концентрации.
Влияние ацетилхолина (10-6 г/мл) на СОЭ . Установлено [3, 6], что СОЭгеп в присутствии ацетилхолина (АХ, 10-6 г/мл; № 5 в таблице) у беременных (I, II и III триместры), рожениц и женщин с УПР составляет соответственно (медиана) 47,5*; 79,5; 93,0; 113,0* и 111,0 % от контроля (* - различие с контролем статистически значимо, по критерию Уилкоксона, р < 0,05). Это означает, что в I триместре беременности эритроциты чувствительны к АХ, во II и III триместрах - рефрактерны, а в родах восстанавливают чувствительность к АХ, но при этом направленность влияния иная: если в I триместре АХ снижает СОЭгеп, то в родах -повышает. При этом реакция эритроцитов на АХ у женщин с УПР такая же, как у женщин без УПР.
Влияние окситоцина на СОЭгеп. При оценке влияния окситоцина (10-6-10-2 МЕ/мл) на СОЭгеп беременных (I, II и Ш триместры), рожениц (I период родов) и женщин с УПР установлен (№ 68 в таблице) необычный феномен [3, 6]: низкие концентрации окситоцина (10-6 и 10-5 МЕ/мл) статистически значимо снижали СОЭ во всех
геп
исследованных группах, в частности в концентрации 10-6 МЕ/мл соответственно до 8*, 27*, 24*, 14* и 16* % от контроля, а в концентрации 10-5 МЕ/мл - соответственно до 12*, 31*, 87, 24* и 45* % от контроля (т. е. лишь у женщин в III триместре это снижение было статистически незначимо). В концентрациях 10-4 МЕ/мл и 10-2 МЕ/мл окситоцин ни в одной из 5 групп не изменял СОЭгеп, а в концентрации 10-3 МЕ/мл статистически значимо снижал СОЭ у роже-
геп
ниц (до 81* %), при этом не влияя на СОЭгеп в остальных группах, в т. ч. у женщин с УПР. Эти данные позволяют говорить о наличии в эритроцитах беременных женщин и рожениц как минимум двух популяций окситоциновых рецепторов (ОР). Одна популяция ОР проявляет высокую чувствительность к окситоци-ну. По-видимому, ее экспрессия в эритроцитах (или эффективность ее активации) не меняется
при беременности, в родах и при УПР. Вторая популяция ОР обладает более низкой чувствительностью к окситоцину, а ее экспрессия отсутствует у беременных женщин, в т. ч. у женщин с УПР, но выражена у рожениц. Позже было подтверждено [7], что у женщин с не-осложненным течением беременности (II триместр) окситоцин в низкой концентрации (10-7 МЕ/мл) статистически значимо снижает СОЭгеп (до 73* % от исходного уровня), а в остальных концентрациях (10-6-10-3 МЕ/мл) не влияет на нее. На фоне блокады ОР атозиба-ном (трактоцилом,10-6 г/мл) окситоцин в концентрации 10-7 МЕ/мл уже не снижал СОЭгеп, а в концентрациях10-6, 10-5, 10-4 и 10-3 МЕ/мл статистически значимо повышал ее соответственно (медиана) до 130*, 110*, 137* и 138* % от контроля. Эти данные позволили говорить о наличии в эритроцитах двух видов ОР: ато-зибанчувствительных, при активации которых СОЭ снижается, и атозибаннечувствитель-
геп ' J
ных, при активации которых СОЭгеп возрастает. В этой же работе [7] при исследовании гепари-низированной крови у 10 беременных женщин (I и III триместры неосложненной беременности) и 11 женщин с УПР (22-35 нед.) установлено, что исходно окситоцин (10-7-10-3 МЕ/мл) не влияет на СОЭгеп эритроцитов женщин без УПР, но снижает СОЭгеп у женщин с УПР в концентрации 10-6 МЕ/мл. Водорастворимый гестаген дидрогестерон (дюфастон) в концентрации 10-6 г/мл не влиял на фоновую СОЭгеп и реакцию эритроцитов на окситоцин (10-710-3 МЕ/мл) у женщин без УПР. Однако у женщин с УПР дидрогестерон не изменял фоновую СОЭгеп, но существенно повышал способность окситоцина снижать СОЭгеп: в концентрациях 10-7, 10-6, 10-5, 10-4 и 10-3 МЕ/мл окситоцин снижал СОЭгеп соответственно (медиана) до 22*, 22*, 37*, 18* и 58* % от исходного уровня. Это означает, что дидрогестерон, вероятно, за счет активации мембранных рецепторов прогестерона (mPRa, mPRß и mPRy), наличие которых доказано многими авторами [31], повышает эффективность активации ОР, в частности ато-
зибанчувствительных. Подчеркнем, что этот эффект дидрогестерон вызывает лишь у эритроцитов женщин с УПР и не влияет на эффективность активации ОР у женщин без УПР. Следовательно, изучение влияния окситоцина и особенно смеси окситоцина с дидрогестеро-ном на СОЭ может быть использовано для
геп
диагностики УПР.
Влияние дидрогестерона на СОЭ . Показа* геп
но (№ 9 в таблице), что водорастворимый ге-стаген дидрогестерон (дюфастон, 10-9-10-6 г/мл) не влияет на СОЭгеп венозной крови у женщин в I и III триместрах и рожениц, но повышает СОЭгеп (10-9 г/мл) у женщин во II триместре (до 116* % от контроля) и снижает ее у женщин с УПР (10-9 и 10-8 г/мл - соответственно до 64* и 59* % от контроля) [4, 6]. Косвенно эти данные говорят о наличии в эритроцитах беременных женщин и женщин с УПР мембранных рецепторов прогестерона (в частности, таких изо-форм, как mPRa mPRP mPRy и mPRS), а также позволяют предположить, что соотношение изоформ этих рецепторов при беременности меняется, в т. ч. при УПР. Вместе с указанными выше сведениями о том, что при УПР прогестерон повышает эффективность активации атозибанчувствительных ОР эритроцитов [7], эти данные косвенно указывают на то, что благодаря воздействию прогестерона на его ядерные рецепторы в миоцитах матки он может изменять соотношение отдельных изоформ мембранных рецепторов прогестерона (mPRa, mPRP, mPRy и mPRS) в этих клетках (отражением чего является изменение соотношений указанных изоформ и в эритроцитах). Все это может способствовать формированию УПР.
Влияние эстрадиола валерата на СОЭ .
геп
Водорастворимый эстрадиола валерат (про-гинова) в концентрациях 10-9-10-6 г/мл (№ 10 в таблице) не влияет на СОЭгеп у женщин в I и во II триместрах беременности, но снижает СОЭгеп у женщин в III триместре (10-6 г/ мл -до 85* % от контроля), рожениц (10-9 г/мл и 10-6 г/мл - соответственно до 37* и 85* %) и женщин с УПР (10-8, 10-7 и 10-6 г/мл - соответ-
ственно до 54*, 72* и 69* %) [4, 6]. Эти данные подтверждают представление о наличии в эритроцитах мембранных рецепторов эстрогенов типа mERa [32] и позволяют предположить, что в миоцитах матки перед родами возрастает экспрессия mERa; эта ситуация сохраняется в родах и наблюдается при УПР.
В заключение подчеркнем, что оценка СОЭгеп (а не СОЭцит) венозной крови позволяет оценивать эффективность активации многих эритро-цитарных мембранных рецепторов, ассоциированных с G-белком, т. к. ионы Са2+ являются необходимым участником передачи сигнала от G-белка к внутриэритроцитарным эффекторам.
Осмотическая резистентность эритроцитов (ОРЭ) к гипотонической среде
Фоновая ОРЭ. В связи с отсутствием общепринятого метода оценки ОРЭ, в частности по отношению к гипотоническим средам, мы предложили метод оценки фоновой ОРЭдв [810], основанный на учете числа негемолизиро-ванных эритроцитов (в процентах от исходного уровня) при их 30-, 45-, 60-, 90- и 120-секунд-ной экспозиции в дистиллированной воде (ДВ), содержащей 2,5 мМ СаС12. Одновременно было предложено количественно оценивать ОРЭдВ при помощи показателя Т50, т. е. длительности экспозиции эритроцитов (в секундах) в указанных условиях, при которой разрушаются 50 % из них [8-10]. С помощью этого метода выявлено (№ 11 в таблице), что фоновая ОРЭдВ при беременности возрастает, достигая максимума в латентную фазу I периода родов. Так, значения показателя Т50 у небеременных женщин составили (M±m): в фолликулярную фазу цикла (58,7±2,9) с, в лютеиновую фазу - (63,6±3,0) с (рфл > 0,1). Оба этих значения были ниже, чем у мужчин ((87,7±8,3) с; рфлм < 0,05). У женщин в I, II и III триместрах беременности значения Т50 составили соответственно (69,0±6,8), (77,0±8,7) и (84,4±8,1) с, в латентную фазу I периода родов - (85,3±6,1) с, а у женщин с УПР (21-36 нед.) - (83,9±7,5) с. При этом различия между беременными (III триместр), роженицами и женщинами с УПР по значениям Т были
статистически незначимы. Это говорит о том, что прогностическая ценность показателя Т50 для оценки срока предстоящих родов или вероятности перехода УПР в ПР оказалась невысокой. Однако, как будет показано ниже, этот метод может быть информативным при оценке ответа эритроцитов на воздействие БАВ.
Влияние адренергических средств на ОРЭ. Существуют разные методические подходы к изучению влияния адренергических средств на ОРЭ (№ 12-16 в таблице). Один из них заключается в фотоколориметрическом определении (по методу А. Раграй et а1. [14] в модификации Л.И. Идельсона [16]) изменения степени гемолиза эритроцитов при их 30-минутной экспозиции в 0,42 %-м растворе №С1 при 20 °С в присутствии пропранолола. В основу метода положено представление о том, что блокатор бета1-АР и бета2-АР пропранолол повышает ОРЭ к гипотонической среде, т. е. увеличивает жизнеспособность эритроцитов, и этот эффект тем выраженнее, чем выше эффективность активации бета-АР эритроцитов [11]. Мерой способности пропранолола повышать ОРЭ является так называемый (по Р. И. Стрюк и И.Г. Длусской [11]) показатель бета-адре-нореактивности мембран (Р-АРМ). Величина Р-АРМ численно равна проценту гемолизиро-ванных эритроцитов. Чем выше чувствительность эритроцитов к пропранололу, тем меньше значения Р-АРМ, т. е. тем меньше процент гемолизированных эритроцитов. У мужчин Р-АРМ составляет 2-20 условных единиц (усл. ед.) [11], т. е. в присутствии пропраноло-ла (№ 12 в таблице) в гипотонической среде (0,42 %-й раствор ШС1) разрушается не более 2-20 % эритроцитов. При стрессе у мужчин Р-АРМ возрастает как минимум до 40 усл. ед. [11], т. е. число эритроцитов, подвергнутых гемолизу в гипотонической среде, увеличивается до 40 %, несмотря на наличие в ней пропранолола. По данным Л.В. Адамян и соавторов [12], Р-АРМ эритроцитов женщин в конце доношенной беременности очень высокая и имеет большие индивидуальные коле-
бания (от 20 до 90 усл. ед.), что объясняется снижением чувствительности эритроцитов к пропранололу (как к фактору, повышающему ОРЭ) вследствие уменьшения числа бета-АР в эритроцитах под влиянием хронического стресса, каким, по мнению данных авторов, является беременность. Поэтому нормой для беременных женщин Л.В. Адамян и соавторы считают Р-АРМ, равную 65-80 усл. ед. (№ 12 в таблице). Однако по данным Л.Ю. Стасело-вич и соавторов [13], у женщин с неосложнен-ным течением беременности и родов Р-АРМ составляет (23,3±3,1) усл. ед. Сведений о величине Р-АРМ у женщин с УПР в литературе мы не нашли.
Модификацией метода Р.И. Стрюк и И.Г. Длусской [11] является метод, разработанный нами [15] и использованный И.С. Николаевой и соавторами [17]. Оценка ОРЭ37 также проводится фотоколориметрическим способом А. РаграГ: еt а1. [14] в модификации Л.И. Идельсона (1974) [16]: определяется процент эритроцитов, подвергнутых гемолизу при 30-минутной экспозиции при 37 °С в гипотонической среде (0,40 %-й раствор №С1) в присутствии пропранолола или других адренергических средств. Таким образом, отличие от метода Р.И. Стрюк и И.Г. Длусской [11] заключается в температурном режиме (37 °С вместо 20 °С) и арсенале адренергических средств. Этим методом показано [15], что и пропранолол, и адреналин (№ 13-14 в таблице) уменьшают процент гемо-лизированных эритроцитов, судя по снижению степени гемолиза, т. е. повышают ОРЭ37 Это характерно для эритроцитов небеременных и беременных женщин, в т. ч. женщин с УПР. При этом установлено, что степень повышения ОРЭ37 под влиянием пропранолола или адреналина у беременных была такой же, как и у небеременных, а у женщин с УПР она была ниже, чем у женщин без УПР. Авторы [15] заключили, что при неосложненном течении беременности эффективность активации бета2-АР эритроцитов не меняется, а эффективность активации
альфа-АР снижается; при этом у женщин с УПР эффективность активации бета-АР ниже, чем у женщин без УПР. Однако И.С. Николаева и соавторы [17] этим же методом установили, что при активации бета2-АР адреналином или гексопреналином (гинипралом) в концентрациях от 10-10 до 10-5 г/мл ОРЭ37 не возрастает, а, наоборот, снижается, а при активации альфа-АР - возрастает; при неосложненном течении беременности адреналин и гинипрал снижают ОРЭ37 (№ 15 в таблице). Эти данные подтверждают представление о доминировании в эритроцитах беременных женщин (и, вероятно, в миоцитах матки) популяции бета2-АР. Они также показали [17], что способность адреналина и гинипрала снижать ОРЭ37 усиливается мил-дронатом (триметилгидрозиния пропионатом), или мельдонием, который рассматривается нами [5, 6, 33] в качестве аналога эндогенного сенсибилизатора бета-АР (ЭСБАР). У женщин с УПР способность адреналина и гинипрала снижать ОРЭ оказалась ниже, чем у женщин без УПР. Это расценивается как следствие более низкой эффективности активации бета2-АР при УПР. Очевидно, что ее можно повысить (как и у женщин без УПР) милдронатом. Косвенно результаты исследования [17] указывают на перспективность использования аналогов ЭсБАР при терапии УПР (при условии официального разрешения их применения в акушерстве). Отметим, что, по данным И.С. Николаевой [34], эффективная доза гинипрала при лечении женщин с УПР может быть снижена в два раза, если одновременно с ним болюсно вводить милдронат в дозе 5 мг.
Третьим вариантом оценки влияния адреналина и других БАВ на ОРЭ является предложенный нами метод оценки ОРЭдВ45 [9, 10, 18]. Он основан на подсчете (например, в счетной камере Бюркера) числа негемолизированных эритроцитов (ЧНЭ) капиллярной или венозной крови после их 45-секундной экспозиции при 20 °С в ДВ с 2,5 мМ СаС12, в т. ч. при отсутствии в среде адренергических средств (экспозиционный контроль - ЭК45), либо в присут-
ствии адреналина (опыт-1), либо адреналина совместно с атенололом и ницерголином, т. е. в условиях блокады бета1-АР и альфа-АР (опыт-2). В специальных опытах с эритроцитами капиллярной крови небеременных женщин было показано [9, 10], что при селективной активации бета2-АР, т. е. при действии адреналина на фоне блокады альфа-АР и бета1-АР, значение ОРЭдВ45 снижается, т. е. уменьшается процент негемолизированных (устойчивых к гипотонии) эритроцитов, а при активации альфа1-АР (на фоне блокады бета1-АР и бета2-АР пропранололом) значение ОРЭДВ45 возрастает. В условиях блокады бета1-АР и альфа-АР (опыт-2) было установлено (№ 16 в таблице), что у женщин в фолликулярую фазу цикла адреналин (10-10, 10-9 и 10-8 г/мл) снижает ОРЭДВ45 соответственно до 84*, 87* и 88* % от ЭК45, а в лютеиновую фазу - не влияет на ОРЭдВ45. Адреналин снижает ОРЭДВ45 у беременных женщин, в т. ч. в I триместре (в концентрациях 10-10, 10-8 и 10-7 г/мл - соответственно до 82*, 85* и 83* % от ЭК45), во II триместре (10-10, 10-8 и 10-7 г/мл - соответственно до 78*, 85* и 88* % от ЭК45) и в III триместре (10-9 г/мл - до 85* %), а также у рожениц (10-7 и 10-6 г/мл - соответственно до 89* и 87* % от ЭК45), но не влияет на ОРЭДВ45 у женщин с УПР. Эти данные, с учетом характера влияния адреналина на ОРЭдв45 при наличии в среде атенолола и ницерголина, позволили заключить, что у женщин эффективность активации бета2-АР эритроцитов возрастает уже в I триместре беременности и сохраняется на этом уровне во II и III триместрах беременности и в родах, а эффективность активации альфа-АР сохраняется на низком уровне на протяжении почти всей беременности, но существенно повышается к ее концу (III триместр) и сохраняется высокой в родах. При УПР эффективность активации бета2-АР ниже, а эффективность активации альфа-АР и бета1-АР, наоборот, выше, чем у женщин без УПР.
Таким образом, все варианты методов исследования ОРЭ, несмотря на различную интерпретацию эффекта активации бета2-АР, а
именно повышение ОРЭ, по мнению одних [11-13, 15], или снижение ОРЭ при активации бета2-АР, по мнению других [9, 10, 17, 18], указывают на то, что при беременности эффективность активации бета2-АР эритроцитов возрастает, а перед родами она либо сохраняется такой же высокой, либо снижается, но одновременно перед родами возрастает эффективность активации альфа-АР. При УПР эффективность активации: бета2-АР - снижена, альфа-АР - повышена [9, 10, 15, 17, 18]. Все это свидетельствует о том, что определение адреналин-зависимой ОРЭ может быть использовано для диагно-
ДВ45
стики УПР и оценки вероятности перехода УПР в ПР. Очевидно, что применение современных методов подсчета эритроцитов позволит более широко использовать в клинических исследованиях предложенный нами метод.
Влияние ацетилхолина на ОРЭ^45. В опытах с эритроцитами мужчин показано [19], что при 45-секундной экспозиции эритроцитов в ДВ, содержащей 2,5 мМ СаС12, ацетилхолин (АХ, 10-10, 10-9, ..., 10-5 г/мл) незначительно, но статистически значимо (* - р < 0,05 по критерию Стьюдента) снижает ЧНЭ соответственно до 94,2*; 92,6*; 93,1*; 89,4*; 89,4* и 91,7* % от ЭК45, т. е. от ЧНЭ, наблюдаемого при 45-секундной экспозиции в ДВ в отсутствие АХ. Это означает, что АХ снижает ОРЭ у мужчин.
При этом снижение не зависело от концентрации АХ, сохранялось в опытах с эритроцитами, подвергнутыми трехкратной отмывке 0,85 %-м раствором №С1, не блокировалось атропином (10-6 г/мл), а также селективным блокатором М1-ХР гастроцепином (10-6 г/мл) и селективным блокатором М4-ХР тропикамидом (10-6 г/мл), но блокировалось антагонистом М3-ХР препаратом 4-ОАМР (4-дифенилацетокси-^метил-пиперидин метиодид). Это означает, что снижение ОРЭдВ45 под влиянием АХ, наблюдаемое у мужчин, происходит за счет активации М3-ХР. В этой же работе установлено (№ 17 в таблице) [19], что ОРЭДВ45 у небеременных и беременных женщин, а также у рожениц (латентная фаза I периода неосложненных родов) не изменяется под влиянием АХ (10-10—10-5 г/мл). Следовательно, эритроциты небеременных, беременных и рожающих женщин относительно рефрактерны к АХ. Это говорит об отсутствии перспективности исследования АХ-зависимой ОРЭдВ45 для диагностики УПР и оценки вероятности перехода УПР в ПР.
***
Анализ данных о фоновой и БАВ-вызванной способности эритроцитов беременных женщин, рожениц и женщин с УПР к агглютинации [20-28] представлен в части 2 обзора.
Список литературы
1. Колобова Е.В., Дворянский С.А., Ноздрачев А.Д., Циркин В.И. Оценка ß-адренореактивности эритроцитов по скорости их оседания на фоне адренергических средств // Докл. РАН. 1998. Т. 358, № 5. С. 695-698.
2. Николаева И.С., Помаскин И.Н. Адренозависимая СОЭ у небеременных женщин и в динамике развития неосложненной беременности // Вестн. Рос. гос. мед. ун-та. 2011. № 2 (спец. вып.). С. 28-31.
3. Бушкова Е.Н., Безмельцева О.М., Марьина А.В. Влияние окситоцина, ацетилхолина и адреналина на скорость оседания эритроцитов гепаринизированной венозной крови беременных женщин и рожениц // Вопросы фундаментальной и прикладной физиологии в исследованиях студентов вузов: материалы VII Всерос. молодеж. науч. конф. Киров, 2015. С. 23-27.
4. ФилимоноваМ.С., Безмельцева О.М. Способность прогестерона и эстрогенов изменять скорость оседания эритроцитов гепаринизированной венозной крови беременных женщин и рожениц // Вопросы фундаментальной и прикладной физиологии в исследованиях студентов вузов: материалы VII Всерос. молодеж. науч. конф. Киров, 2015. С. 155-159.
5. Циркин В.И., Анисимов К.Ю., Хлыбова С.В., Дмитриева С.Л., Братухина О.А., Попова В.С., Зайцева О.О., Худяков А.Н., Шушканова Е.Г. Эритроциты, тромбоциты как индикаторы течения беременности, родов и состояния бета-адренорецепторного ингибирующего механизма (обзор литературы) // Урал. мед. журн. 2015. № 5 (128). С. 15-25.
6. Циркин В.И., Анисимов К.Ю., Хлыбова С.В., Дмитриева С.Л., Братухина О.А., Попова В.С., Шушканова Е.Г. Хемореактивность эритроцитов как отражение течения беременности и родов (обзор литературы) // Вестн. урал. мед. акад. науки. 2015. № 4. С. 143-150.
7. Бушкова Е.Н., Душина Е.Э., Марьина А.В. Влияние окситоцина, прогестерона и атозибана (трактоцила) на скорость оседания эритроцитов гепаринизированной венозной крови беременных женщин и рожениц // Вопросы фундаментальной и прикладной физиологии в исследованиях студентов вузов: материалы VIII Всерос. молодеж. науч. конф. Киров, 2016. С. 34-39.
8. Способ оценки осмотической резистентности эритроцитов: пат. 2419792 Рос. Федерация: МПК G01N33/48 / В.И. Циркин, А.В. Крысова, А.А. Куншин; заявитель и патентообладатель Киров. гос. гуманитар. ун-т. Заявл. 07.12.2009, опубл. 27.05.2011, Бюл. № 15.
9. Крысова А.В., Циркин В.И., Куншин А.А., Хлыбова С.В., ТарлавинаМ.Г., Норина С.П. Адренореактивность и осмотическая резистентность эритроцитов женщин при физиологически протекающей беременности и при наличии угрозы преждевременных родов // Вят. мед. вестн. 2012. № 1. С. 19-26.
10. Крысова А.В., Ноздрачёв А.Д., Куншин А.А., Циркин В.И. Влияние блокаторов альфа- и бета-адренорецепторов на способность адреналина изменять осмотическую резистентность эритроцитов небеременных женщин // Вестн. С.-Петерб. ун-та. Сер. 3: Биология. 2013. № 1. С. 54-68.
11. Стрюк Р.И., Длусская И.Г. Адренореактивность и сердечно-сосудистая система. М., 2003. 160 с.
12. Адамян Л.В., Смольнова Т.Ю., Длусская И.Г., Стрюк Р.И., Ляшко Е.С., Бейлин А.Л., Мисхин С.В., Герасимов А.Н., Брагинская С.Г. Метод оценки адренореактивности организма (ß-АРМ) у беременных для прогнозирования течения родов // Проблемы репродукции. 2006. № 1. С. 91-97.
13. Стаселович Л.Ю., Лазуренко В.В., Мерцалова О.В. Роль некоторых иммунологических и гуморальных факторов в прогнозировании перенашивания беременности // Междунар. мед. журн. 2008. Т. 14, № 2. С. 65-69.
14. Parpart A.K., Lorenz P.B., Parpart E.R., Gregg J.R., Chase A.M. The Osmotic Resistance (Fragility) of Human Red Cells // J. Clin. Invest. 1947. Vol. 26, № 4. Р. 636-640.
15. Бабин А.П., Дворянский С.А., Циркин В.И., Трошкина Н.А., Гусева Е.В., Круть И.Ю., Костяев А.А. Изменение осмотической резистентности и адренореактивности эритроцитов у женщин при беременности // Гемореология в микро- и макроциркуляции: материалы междунар. конф. Ярославль, 2005. С. 196.
16. Лабораторные методы исследования в клинике / под ред. В.В. Меньшикова. М., 1987. 368 с.
17. Николаева И.С., Медведев Б.И., Помаскин И.Н. Изменение адренореактивности эритроцитов под действием милдроната // Вестн. Юж.-Урал. гос. ун-та. Сер.: Образование, здравоохранение, физ. культура. 2011. № 39(256). С. 113-116.
18. Способ оценки альфа и бета2-адренореактивности эритроцитов человека по изменению их осмотической резистентности под влиянием адреналина и адреноблокаторов: пат. 2493565 Рос. Федерация: МПК G01N33/49 / В.И. Циркин, А.И. Крысова; заявитель и патентообладатель Вят. гос. гуманитар. ун-т. Заявл. 12.08.2011, опубл. 20.09.2013, Бюл. № 26.
19. Данилов Ю.О., Циркин В.И. Влияние ацетилхолина на осмотическую резистентность эритроцитов человека // Микроциркуляция и гемореология: материалы IX Междунар. науч. конф. Ярославль, 2013. С. 37.
20. Володченко А.И., Циркин В.И., Хлыбова С.В., Дмитриева С.Л. Адренореактивность эритроцитов, определяемая по их адренозависимой агглютинации, у женщин на различных этапах репродуктивного процесса // Вят. мед. вестн. 2013. № 1. С. 25-31.
21. Володченко А.И., Циркин В.И., Хлыбова С.В., Дмитриева С.Л. Изменение скорости адренозависимой агглютинации эритроцитов у женщин на различных этапах репродуктивного процесса // Рос. вестн. акушера-гинеколога. 2013. Т. 13, № 6. С. 10-15.
22. Циркин В.И., Володченко А.И., Хлыбова С.В., Дмитриева С.Л., Братухина О.А. Адрено- и М-холинореактивность эритроцитов женщин на протяжении репродуктивного процесса // Вестн. Сев. (Арктич.) федер. ун-та. Сер.: Мед.-биол. науки. 2014. № 2. С. 78-90.
23. Безмельцева О.М., Махнева А.И., Шушканова Е.Г., Циркин В.И., Черепанова Т.В., Дмитриева С.Л., Попова В.С., Хлыбова С.В., КостяевА.А. Влияние окситоцина на скорость агглютинации эритроцитов человека, индуцированной изогемагглютинирующей сывороткой // Мед. альм. 2014. № 5(35). С. 71-74.
24. Безмельцева О.М., Циркин В.И., Дмитриева С.Л., Братухина О.А., Черепанова Т.В., КостяевА.А. Влияние серотонина на скорость агглютинации эритроцитов, индуцированной Анти-D IgM-реагентом, у беременных женщин, рожениц и женщин с угрозой преждевременных родов // Мед. альм. 2015. № 4(39). С. 55-58.
25. Марьина А.В. Время начала агглютинации эритроцитов человека, индуцированной изосероклоном™ -Анти-DIgM и фитогемагглютининами фасоли и гороха // Вопросы фундаментальной и прикладной физиологии в исследованиях студентов вузов: материалы VII Всерос. молодеж. науч. конф. Киров, 2015. С. 95-99.
26. Циркин В.И., Бышева М.В., Чистякова Л.В., Дмитриева С.Л., Черепанова Т.В., Братухина О.А., Костяев А.А., Марьина А.В. Влияние прогестерона и эстрогена на скорость агглютинации и адренореактивность эритроцитов беременных женщин и рожениц // Мед. альм. 2015. № 4(39). С. 52-55.
27. Марьина А.В. Время начала агглютинации эритроцитов человека в присутствии адреналина, адреноблокаторов и в зависимости от индукторов агглютинации // Вопросы фундаментальной и прикладной физиологии в исследованиях студентов вузов: материалы VIII Всерос. молодеж. науч. конф. Киров, 2016. С. 123-128.
28. Вырво А.В., Марьина А.В. Влияние эстрогена и прогестерона на скорость агглютинации эритроцитов человека, индуцированной анти-D IgM-реагентом // Вопросы фундаментальной и прикладной физиологии в исследованиях студентов вузов: материалы VIII Всерос. молодеж. науч. конф. Киров, 2016. С. 41-46.
29. Cordeaux Y., Tattersall M., Charnock-Jones D.S., Smith G.C. Effects of Medroxyprogesterone Acetate on Gene Expression in Myometrial Explants from Pregnant Women // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2010. Vol. 95, № 12. P. 437-447.
30. Tan H., Yi L., Rote N.S., Hurd W.W., Mesiano S. Progesterone Receptor-A and -B Have Opposite Effects on Proinflammatory Gene Expression in Human Myometrial Cells: Implications for Progesterone Actions in Human Pregnancy and Parturition // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2012. Vol. 97, № 5. P. 719-730.
31. WetendorfM., DeMayo F.J. Progesterone Receptor Signaling in the Initiation of Pregnancy and Preservation of a Healthy Uterus // Int. J. Dev. Biol. 2014. Vol. 58, № 2-4. Р. 95-106.
32. Prabhushankar R., Krueger C., Manrique C. Membrane Estrogen Receptors: Their Role in Blood Pressure Regulation and Cardiovascular Disease // Curr. Hypertens. Rep. 2014. Vol. 16, № 1. Art. 408.
33. Циркин В.И., Анисимов К.Ю., Хлыбова С.В. Бета-адренорецепторный ингибирующий механизм и его роль в регуляции сократительной деятельности матки беременных женщин и рожениц (обзор литературы) // Урал. мед. журн. 2014. № 4(118). С. 5-14.
34. Николаева И.С. Использование милдроната в терапии угрожающих преждевременных родов // Вестн. Юж.-Урал. гос. ун-та. Сер.: Образование, здравоохранение, физ. культура. 2012. № 8(267). С. 113-117.
References
1. Kolobova E.V., Dvoryanskiy S.A., Nozdrachev A.D., Tsirkin V.I. Otsenka P-adrenoreaktivnosti eritrotsitov po skorosti ikh osedaniya na fone adrenergicheskikh sredstv [Evaluation of Erythrocyte B-Adrenoreactivity by Their Sedimentation Rate Against the Background of Adrenergic Agents]. Doklady RAN, 1998, vol. 358, no. 5, pp. 695-698.
2. Nikolaeva I.S., Pomaskin I.N. Adrenozavisimaya SOE u neberemennykh zhenshchin i v dinamike razvitiya neoslozhnennoy beremennosti [Adrenalin-Dependent ESR in Non-Pregnant Women and in Uncomplicated Pregnancy Dynamics]. VestnikRossiyskogo gosudarstvennogo meditsinskogo universiteta, 2011, no. 2 (spec. iss.), pp. 28-31.
3. Bushkova E.N., Bezmel'tseva O.M., Mar'ina A.V. Vliyanie oksitotsina, atsetilkholina i adrenalina na skorost' osedaniya eritrotsitov geparinizirovannoy venoznoy krovi beremennykh zhenshchin i rozhenits [Effect of Oxytocin, Acetylcholine and Adrenalin on Erythrocyte Sedimentation Rate of Heparinized Venous Blood in Pregnant and Parturient Women]. Voprosy fundamental'noy i prikladnoy fiziologii v issledovaniyakh studentov vuzov: materialy VII Vseros. molodezh. nauch. konf. [Issues of Fundamental and Applied Physiology in the Research of University Students: Proc. 7th All-Russ. Youth Sci. Conf.]. Kirov, 2015, pp. 23-27.
4. Filimonova M.S., Bezmel'tseva O.M. Sposobnost' progesterona i estrogenov izmenyat' skorost' osedaniya eritrotsitov geparinizirovannoy venoznoy krovi beremennykh zhenshchin i rozhenits [The Ability of Estrogen and Progesterone to Change the Erythrocyte Sedimentation Rate of Heparinized Venous Blood in Pregnant and Parturient Women]. Voprosy fundamental'noy i prikladnoy fiziologii v issledovaniyakh studentov vuzov: materialy VII Vseros. molodezh. nauch. konf. [Issues of Fundamental and Applied Physiology in the Research of University Students: Proc. 7th All-Russ. Youth Sci. Conf.]. Kirov, 2015, pp. 155-159.
5. Tsirkin VI., Anisimov K.Yu., Khlybova S.V., Dmitrieva S.L., Bratukhina O.A., Popova VS., Zaytseva O.O., Khudyakov A.N., Shushkanova E.G. Eritrotsity, trombotsity kak indikatory techeniya beremennosti, rodov i sostoyaniya beta-adrenoretseptornogo ingibiruyushchego mekhanizma (Obzor literatury) [Erythrocytes and Platelets as Indicators of Pregnancy and Labor and Condition of Beta-Adrenergic Inhibitory Mechanism (Review)]. Ural'skiy meditsinskiy zhurnal, 2015, no. 5, pp. 15-25.
6. Tsirkin V.I., Anisimov K.Yu., Khlybova S.V., Dmitrieva S.L., Bratukhina O.A., Popova VS., Shushkanova E.G. Khemoreaktivnost' eritrotsitov kak otrazhenie techeniya beremennosti i rodov (obzor literatury) [Chemoreactivity of Erythrocytes as Indicators of Pregnancy and Labor (Review)]. Vestnik ural'skoy meditsinskoy akademicheskoy nauki, 2015, no. 4, pp. 143-150.
7. Bushkova E.N., Dushina E.E., Mar'ina A.V. Vliyanie oksitotsina, progesterona i atozibana (traktotsila) na skorost' osedaniya eritrotsitov geparinizirovannoy venoznoy krovi beremennykh zhenshchin i rozhenits [Effect of Oxytocin, Progesterone and Atosiban (Tractocile) on Erythrocyte Sedimentation Rate of Heparinized Venous Blood in Pregnant and Parturient Women]. Voprosy fundamental'noy i prikladnoy fiziologii v issledovaniyakh studentov vuzov: materialy VIII Vseros. molodezh. nauch. konf. [Issues of Fundamental and Applied Physiology in the Research of University Students: Proc. 8th All-Russ. Youth Sci. Conf.]. Kirov, 2016, pp. 34-39.
8. Tsirkin VI., Krysova A.V, Kunshin A.A. Sposob otsenki osmoticheskoy rezistentnosti eritrotsitov [A Method of Estimating Osmotic Resistance of Red Blood Cells]. Patent RF no. 2419792, 2011.
9. Krysova A.V, Tsirkin VI., Kunshin A.A., Khlybova S.V., Tarlavina M.G., Norina S.P. Adrenoreaktivnost' i osmoticheskaya rezistentnost' eritrotsitov zhenshchin pri fiziologicheski protekayushchey beremennosti i pri nalichii ugrozy prezhdevremennykh rodov [Adrenoreactivity and Osmotic Resistance of Erythrocytes at Normal Pregnancy and Threatened Preterm Labour]. Vyatskiy meditsinskiy vestnik, 2012, no. 1, pp. 19-26.
10. Krysova A.V., Nozdrachev A.D., Kunshin A.A., Tsirkin V.I. Vliyanie blokatorov al'fa- i beta-adrenoretseptorov na sposobnost' adrenalina izmenyat' osmoticheskuyu rezistentnost' eritrotsitov neberemennykh zhenshchin [The Effect of Alpha- and Beta-Adrenoblockers on the Ability of Adrenaline to Change the Osmotic Resistance of Erythrocytes of Nonpregnant Women]. Vestnik Sankt-Peterburgskogo unversiteta. Ser. 3: Biologiya, 2013, no. 1, pp. 54-68.
11. Stryuk R.I., Dlusskaya I.G. Adrenoreaktivnost' i serdechno-sosudistaya sistema [Adrenoreactivity and Cardiovascular System]. Moscow, 2003. 160 p.
12. Adamyan L.V, Smol'nova T.Yu., Dlusskaya I.G., Stryuk R.I., Lyashko E.S., Beylin A.L., Miskhin S.V., Gerasimov A.N., Braginskaya S.G. Metod otsenki adrenoreaktivnosti organizma (P-ARM) u beremennykh dlya prognozirovaniya techeniya rodov [Method of Estimating Body's Adrenoreactivity (P-APM) in Pregnant Women to Predict the Course of Labour]. Problemy reproduktsii, 2006, no. 1, pp. 91-97.
13. Staselovich L.Yu., Lazurenko V.V, Mertsalova O.V Rol' nekotorykh immunologicheskikh i gumoral'nykh faktorov v prognozirovanii perenashivaniya beremennosti [The Role of Some Immunological and Humoral Factors in Predicting Postterm Pregnancy]. Mezhdunarodnyy meditsinskiy zhurnal, 2008, vol. 14, no. 2, pp. 65-69.
14. Parpart A.K., Lorenz P.B., Parpart E.R., Gregg J.R., Chase A.M. The Osmotic Resistance (Fragility) of Human Red Cells. J. Clin. Invest., 1947, vol. 26, no. 4, pp. 636-640.
15. Babin A.P., Dvoryanskiy S.A., Tsirkin V.I., Troshkina N.A., Guseva E.V., Krut' I.Yu., Kostyaev A.A. Izmenenie osmoticheskoy rezistentnosti i adrenoreaktivnosti eritrotsitov u zhenshchin pri beremennosti [Changes in Erythrocyte Osmotic Resistance and Adrenoreactivity in Women During Pregnancy]. Gemoreologiya v mikro- i makrotsirkulyatsii: materialy mezhdunar. konf. [Hemorheology in Micro- and Macrocirculation: Proc. Int. Conf.]. Yaroslavl, 2005, p. 196.
16. Laboratornye metody issledovaniya v klinike [Laboratory Methods in a Clinic]. Ed. by VV. Men'shikov. Moscow, 1987. 368 p.
17. Nikolaeva I.S., Medvedev B.I., Pomaskin I.N. Izmenenie adrenoreaktivnosti eritrotsitov pod deystviem mildronata [Changes in Erythrocyte Adrenoreactivity Caused by Mildronate]. Vestnik Yuzhno-Urarskogo gosudarstvennogo universiteta. Ser.: Obrazovanie, zdravookhranenie, fizicheskaya kul'tura, 2011, no. 39, pp. 113-116.
18. Tsirkin V.I., Krysova A.I. Sposob otsenki al'fa i beta2-adrenoreaktivnosti eritrotsitov chelovekapo izmeneniyu ikh osmoticheskoy rezistentnosti pod vliyaniem adrenalina i adrenoblokatorov [Method of Estimating Alpha- and Beta2-Adrenoreactivity of Human Red Blood Cells by the Changes in Their Osmotic Resistance Under the Influence of Adrenaline and Adrenoblockers]. Patent RF no. 2493565, 2013.
19. Danilov Yu.O., Tsirkin VI. Vliyanie atsetilkholina na osmoticheskuyu rezistentnost' eritrotsitov cheloveka [Effect of Acetylcholine on the Osmotic Resistance of Human Erythrocytes]. Mikrotsirkulyatsiya i gemoreologiya: materialyIXMezhdunar. nauch. konf. [Microcirculation and Hemorheology: Proc. 9th Int. Sci. Conf.]. Yaroslavl, 2013, p. 37.
20. Volodchenko A.I., Tsirkin V.I., Khlybova S.V, Dmitrieva S.L. Adrenoreaktivnost' eritrotsitov, opredelyaemaya po ikh adrenozavisimoy agglyutinatsii, u zhenshchin na razlichnykh etapakh reproduktivnogo protsessa [Adrenoreactivity of Woman Erythrocytes at Various Stages of the Reproductive Process Defined by Their Adrenaline-Dependent Agglutination]. Vyatskiy meditsinskiy vestnik, 2013, no. 1, pp. 25-31.
21. Volodchenko A.I., Tsirkin VI., Khlybova S.V., Dmitrieva S.L. Izmenenie skorosti adrenozavisimoy agglyutinatsii eritrotsitov u zhenshchin na razlichnykh etapakh reproduktivnogo protsessa [Changes in the Rate of Adrenaline-Dependent Agglutination in the Red Blood Cells of Women at Various Stages of the Reproductive Process]. Rossiyskiy vestnik akushera-ginekologa, 2013, vol. 13, no. 6, pp. 10-15.
22. Tsirkin VI., Volodchenko A.I., Khlybova S.V, Dmitrieva S.L., Bratukhina O.A. Adreno- i M-kholinoreaktivnost' eritrotsitov zhenshchin na protyazhenii reproduktivnogo protsessa [90 Adreno- and M-Cholinergic Reactivity of Erythrocytes in Women Throughout Their Reproductive Process]. Vestnik Severnogo (Arkticheskogo) federal'nogo universiteta. Ser.: Mediko-biologicheskie nauki, 2014, no. 2, pp. 78-90.
23. Bezmel'tseva O.M., Makhneva A.I., Shushkanova E.G., Tsirkin VI., Cherepanova T.V., Dmitrieva S.L., Popova V.S., Khlybova S.V., Kostyaev A.A. Vliyanie oksitotsina na skorost' agglyutinatsii eritrotsitov cheloveka, indutsirovannoy izogemagglyutiniruyushchey syvorotkoy [Influence of Oxytocin on the Rate of Agglutination of Human Erythrocytes Induced by Isohemagglutinating Serum]. Meditsinskiy al'manakh, 2014, no. 5, pp. 71-74.
24. Bezmel'tseva O.M., Tsirkin V.I., Dmitrieva S.L., Bratukhina O.A., Cherepanova T.V., Kostyaev A.A. Vliyanie serotonina na skorost' agglyutinatsii eritrotsitov, indutsirovannoy Anti-D IgM-reagentom, u beremennykh zhenshchin, rozhenits i zhenshchin s ugrozoy prezhdevremennykh rodov [Influence of Serotonin on the Rate of Agglutination of Erythrocytes Induced by Anti-D IgM-Reagent in the Case of Pregnant Women, Birthing Mothers and Women Having the Danger of Premature Delivery]. Meditsinskiy al'manakh, 2015, no. 4, pp. 55-58.
25. Mar'ina A.V. Vremya nachala agglyutinatsii eritrotsitov cheloveka, indutsirovannoy izoseroklonomTM -Anti-DIgM i fitogemagglyutininami fasoli i gorokha [The Start Time of Human Erythrocyte Agglutination Induced by IsoserocloneTM - Anti-DIgM and Phytohemagglutinin of Beans and Peas]. Voprosy fundamental'noy i prikladnoy fiziologii v issledovaniyakh studentov vuzov: materialy VII Vseros. molodezh. nauch. konf. [Issues of Fundamental and Applied Physiology in the Research of University Students: Proc. 7th All-Russ. Youth Sci. Conf.]. Kirov, 2015, pp. 95-99.
26. Tsirkin V.I., Bysheva M.V., Chistyakova L.V., Dmitrieva S.L., Cherepanova T.V., Bratukhina O.A., Kostyaev A.A., Mar'ina A.V. Vliyanie progesterona i estrogena na skorost' agglyutinatsii i adrenoreaktivnost' eritrotsitov beremennykh zhenshchin i rozhenits [Influence of Progesterone and Estrogen on the Rate of Agglutination and Adrenal Reactivity of Erythrocytes of Pregnant and Birthing Women]. Meditsinskiy al'manakh, 2015, no. 4, pp. 52-55.
27. Mar'ina A.V. Vremya nachala agglyutinatsii eritrotsitov cheloveka v prisutstvii adrenalina, adrenoblokatorov i v zavisimosti ot induktorov agglyutinatsii [The Start Time of Human Erythrocyte Agglutination in the Presence of Adrenaline, Adrenoblockers and Depending on Agglutination Inducers]. Voprosy fundamental'noy i prikladnoy fiziologii v issledovaniyakh studentov vuzov: materialy VIII Vseros. molodezh. nauch. konf. [Issues of Fundamental and Applied Physiology in the Research of University Students: Proc. 8th All-Russ. Youth Sci. Conf.]. Kirov, 2016, pp. 123-128.
28. Vyrvo A.V., Mar'ina A.V. Vliyanie estrogena i progesterona na skorost' agglyutinatsii eritrotsitov cheloveka, indutsirovannoy anti-D IgM-reagentom [Effect of Estrogen and Progesterone on the Rate of Human Erythrocyte Agglutination Induced by Anti-D IgM-Reagent]. Voprosy fundamental'noy i prikladnoy fiziologii v issledovaniyakh studentov vuzov: materialy VIII Vseros. molodezh. nauch. konf. [Issues of Fundamental and Applied Physiology in the Research of University Students: Proc. 8th All-Russ. Youth Sci. Conf.]. Kirov, 2016, pp. 41-46.
29. Cordeaux Y., Tattersall M., Charnock-Jones D.S., Smith G.C. Effects of Medroxyprogesterone Acetate on Gene Expression in Myometrial Explants from Pregnant Women. J. Clin. Endocrinol. Metab., 2010, vol. 95, no. 12, pp. 437-447.
30. Tan H., Yi L., Rote N.S., Hurd W.W., Mesiano S. Progesterone Receptor-A and -B Have Opposite Effects on Proinflammatory Gene Expression in Human Myometrial Cells: Implications for Progesterone Actions in Human Pregnancy and Parturition. J. Clin. Endocrinol. Metab., 2012, vol. 97, no. 5, pp. 719-730.
31. Wetendorf M., DeMayo F. J. Progesterone Receptor Signaling in the Initiation of Pregnancy and Preservation of a Healthy Uterus. Int. J. Dev. Biol., 2014, vol. 58, no. 2-4, pp. 95-106.
32. Prabhushankar R., Krueger C., Manrique C. Membrane Estrogen Receptors: Their Role in Blood Pressure Regulation and Cardiovascular Disease. Curr. Hypertens. Rep., 2014, vol. 16, no. 1. Art. 408.
33. Tsirkin V.I., Anisimov K.Yu., Khlybova S.V. Beta-adrenoretseptornyy ingibiruyushchiy mekhanizm i ego rol' v regulyatsii sokratitel'noy deyatel'nosti matki beremennykh zhenshchin i rozhenits (obzor literatury) [Beta-Adrenoceptor Inhibitory Mechanism and Its Role in the Regulation of Uterine Activity in Pregnant Women and Mothers (Review)]. Ural'skiy meditsinskiy zhurnal, 2014, no. 4, pp. 5-14.
34. Nikolaeva I.S. Ispol'zovanie mildronata v terapii ugrozhayushchikh prezhdevremennykh rodov [The Use of Mildronate in the Treatment of Threatened Preterm Labour]. Vestnik Yuzhno-Ural 'skogo gosudarstvennogo universiteta. Ser.: Obrazovanie, zdravookhranenie, fizicheskaya kul'tura, 2012, no. 8, pp. 113-117.
DOI: 10.17238/issn2542-1298.2017.5.1.48
Viktor I. Tsirkin*/**, Aleksandr D. Nozdrachev***, Konstantin Yu. Anisimov****, Svetlana L. Dmitrieva*****, Ol'ga A. Bratukhina*****, Svetlana V. Khlybova******
*Kazan State Medical University (Kazan, Russian Federation) **Vyatka State University (Kirov, Russian Federation) ***Saint Petersburg State University (St. Petersburg, Russian Federation) ****Ural State Medical University (Yekaterinburg, Russian Federation) *****Kirov Regional Clinical Perinatal Centre (Kirov, Russian Federation) ******Kirov State Medical University (Kirov, Russian Federation)
BACKGROUND AND BAS-INDUCED CHANGES IN ERYTHROCYTE FUNCTIONAL STATE AS INDICATORS OF THE THREAT OF PRETERM LABOUR IN WOMEN (Part 1)
This paper analyses literature by 32 indicators that reflect the background and induced by biologically active substances (BAS) functional state of erythrocytes in pregnant (all trimesters) and parturient (latent phase, stage 1 of labour) women and those with threatened preterm labour (TPL). Eleven indicators reflect the aggregation and sedimentation properties of erythrocytes (erythrocyte sedimentation rate, ESR), 6 - erythrocyte osmotic resistance (EOR) to hypotonic medium, and 15 - erythrocyte agglutinability determined by their agglutination start time (AST). All of the indicators are studied in terms of their use for the diagnosis of TPL and probability estimation of TPL transition to preterm labour (PL). Part 1 examines the first two groups of indicators. The analysis showed good prospects of further research
into the background and BAS-induced ESR of heparinized venous blood (ESRhep). For instance, this method revealed that background ESRhep reaches its response maximum at teHm labour and TPL. In addition, we describe the changes in the nature of ESRhep response during pregnancy, labour and at TPL to adrenaline, acetylcholine, oxytocin, serotonin, dydHog esterone and estradiol, as well as the ability of dydrogesterone to modulate ESRhep responses to these BAS. The method of ESRhep proved that erythrocytes contain two populations of oxytocin receptors (OR): atosiban-sensitive (dydrogesterone increases the efficiency of their activation in women with TPL) and atosiban-insensitive. Further, this article describes an original method of estimating background and BAS-induced EOR based on a short-term (30-120 sec) exposure of erythrocytes in distilled water containing 2.5 mM CaCl2; during the study of erythrocyte response to adrenaline and acetylcholine the water contained adrenergic and cholinergic agents, respectively. Moreover, the paper shows an increase in background EOR in pregnancy (including at TPL), peaking at labour, as well as a rising activation efficiency of erythrocyte beta-adrenoceptors during pregnancy and a prenatal increase in activation efficiency of alpha-adrenoceptors.
Keywords: erythrocyte functional state, indicators of the threat of preterm labour, erythrocyte sedimentation rate, erythrocyte osmotic resistance, erythrocyte sedimentation and aggregation, pregnancy, labour.
Поступила 03.10.2016 Received 3 October 2016
Corresponding author: Viktor Tsirkin, address: ul. Butlerova 49, Kazan, 420012, Russian Federation / ul. Moskovskaya 36, Kirov, 610000, Russian Federation; e-mail: [email protected]
For citation: Tsirkin VI., Nozdrachev A.D., Anisimov K.Yu., Dmitrieva S.L., Bratukhina O.A., Khlybova S.V Background and BAS-Induced Changes in Erythrocyte Functional State as Indicators of the Threat of Preterm Labour in Women (Part 1). Zhurnal mediko-biologicheskikh issledovaniy, 2017, vol. 5, no. 1, pp. 48-62. DOI: 10.17238/ issn2542-1298.2017.5.1.48
