CC BY
21
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 59
жет объясняться рецепторной функцией белка PRAME, Разобщенность кривых, принадлежащих к первому и вто-находящегося на поверхности опухолевой клетки. рому кластерам, свидетельствует о разобщенности процессов образования новых типов клеток и морфогенеза. Различ-А.А. Макашов, А. П. Козлов ные подклассы генов TSEEN принадлежат к описанному РАЗЛИЧНЫЕ КЛАССЫ нами выше 3-му кластеру. ОПУХОЛЕАССОЦИИРОВАННЫХ ГЕНОВ ЧЕЛОВЕКА ОБЛАДАЮТ РАЗЛИЧНОЙ ЭВОЛЮЦИОННОЙ С.Ю. Маклакова, В.В. Топко. Г.А. Шипулин, НОВИЗНОЙ Т. С. Зацепин, Е.К. Белоглазкина, Н.В. Зык, Биомедицинский центр, Санкт-Петербург; А.Т. Мажуга, В.Э. Котелянский ФТАОУВО СПбПУ, Санкт-Петербург СИНТЕЗ ЛИГАНДОВ АСИАЛОГЛИКОПРОТЕИНОВОГО Введение. Ранее мы показали, что человеческий геном РЕЦЕПТОРА ДЛЯ НАПРАВЛЕННОЙ ДОСТАВКИ содержит многие эволюционно новые гены и/или нукле- БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ отидные последовательности, которые экспрессируются В КЛЕТКИ ПЕЧЕНИ опухолеспецифически либо преимущественно в опухолях. ФТАОУВО «МТУ им. М.В. Ломоносова», Москва Цель исследования. В данной работе планировалось Введение. Паренхимными клетками печени в больших изучить эволюционную новизну различных классов опу- количествах (0,5—1 млн на 1 гепатоцит) экпрессируется холеассоциированных генов человека. асиалогликопротеиновый рецептор (ASGPR). Способность Материалы и методы. Были изучены следующие функ- ASGPR переносить через мембрану высокомолекулярные циональные классы генов человека: гены домашнего хозяй- структуры, его уникальное расположение исключительно ства; онкогены; дифференцировочные гены; гены опухоле- на поверхности гепатоцитов, высокая степень экспрессии, вых супрессоров; гены, ассоциированные с различными быстрый цикл регенерации делают его перспективной ми-опухолями; гены опухолевых антигенов, отобранных для шенью для адресной доставки биологически активных ве-создания противоопухолевой вакцины; гомеозисные гены; ществ в паренхимные клетки печени. Исходя из структур-гены, вовлеченные в апоптоз; гены раково-тестикулярных ных особенностей рецептора, ранее были предложены антигенов; белковые гены и гены некодирующих РНК молекулы-векторы разветвленного строения, содержащие с высокой опухолеспецифичностью, выявленные нами 3 остатка галактозы или N-ацетилгалактозамина. Такие с помощью метода глобального вычитания in silico (ГВ); все тривалентные лиганды продемонстрировали высокую аф-аннотированные белоккодирующие гены человека. Для финность по отношению к рецептору-мишени. определения эволюционной новизны вышеперечисленных Цель исследования — синтез тривалентных лигандов генов были применены программы HomoloGene. release68, ASGPr и исследование возможности получения конъюга-ProteinHistorian, BLAST и HMMER. тов на их основе с помощью медькатализируемой реакции Результаты. Для каждого функционального класса генов азид-алкинового циклоприсоединения. была построена кривая филогенетического распределения Материалы и методы. Состав и строение полученных их ортологов. Самое верхнее расположение на графике за- соединений подтверждали с помощью спектроскопии няла кривая, описывающая филогенетическое распреде- ядерного магнитного резонанса (ЯМР) и масс-спектроме-ление ортологов генов домашнего хозяйства. Ниже нее трии. ЯМР-спектры 1Н и 13С регистрировали на приборах расположились кривые филогенетического распределения Bruker DPX-300 и Agilent 400 MR с частотами 400 и 100 МГц. ортологов дифференцировочных генов, онкогенов, генов, Масс-спектры высокого разрешения регистрировали на при-ассоциированных с различными опухолями, и генов опухо- боре Bruker micrOTOF II методом электрораспылительной левых супрессоров. Эта группа кривых формирует первый ионизации (ESI). В работе использовали коммерческие ре-кластер. Промежуточное положение на графике занимает активы (Sigma-Aldrich) без дополнительной очистки. кривая распределения ортологов всех белоккодирующих Результаты. Нами оптимизирована общая методика генов человека. Под ней располагается второй кластер, получения тривалентных лигандов ASGPr, универсаль-включающий в себя кривые филогенетического распреде- ность которой была продемонстрирована на примере син-ления генов апоптоза, гомеозисных генов, опухолевых ан- теза структур, содержащих различные углеводные остатки тигенов и белковых генов, выявленных с помощью ГВ. (N-ацетилгалактозамин, N-ацетилглюкозамин и N-аце-Самое нижнее положение на графике занимает группа тилманнозамин). Использованный подход позволяет по-кривых таксономического распределения ортологов генов лучать лиганды с азидной группой, что открыло возмож-раково-тестикулярных антигенов (всех и расположенных ность конъюгирования данных соединений-векторов только на X-хромосоме), генов некодирующих РНК, вы- с модельным олигонуклеотидом dT20, содержащим терми-явленных ГВ. Эта группа является 3-м кластером, включа- нальную тройную связь, с помощью медькатализируемой ющим в себя эволюционно наиболее новые гены. реакции азид-алкинового циклоприсоединения. Заключение. Нами обнаружено, что различные классы Заключение. Лиганды, полученные в результате данной опухолеассоциированных генов обладают различной эво- работы, обладают высоким потенциалом как векторные люционной новизной. Мы подтвердили существование фрагменты для направленной доставки биологически ак-генов TSEEN (tumor specifically expressed, evolutionarily novel). тивных веществ в клетки печени. Введение азидной группы Параллельная эволюция онкогенов, генов опухолевых су- в структуру позволяет селективно и с высокими выходами прессоров и дифференцировочных генов свидетельствует получать конъюгаты с терапевтическими молекулами. о роли опухолей в происхождении новых клеточных типов. Работа выполена при поддержке РНФ (грант № 14-34-00017).
№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
