CC BY
17
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
49
которые обеспечивают оптимальные выходы конечных соединений: синтез из хинонов и диаминов, синтез с Cbz-монозащищенными диаминами, синтез на основе Cu-ка-тализируемой реакции азид-алкинового присоединения (CuAAC) и прямой синтез путем аминирования хинонов 2-тиоксо-тетрагидро-4Н-имидазол-4-онами. Для соединения-лидера проведены первичные in vivo испытания.
Заключение. В результате данной работы был разработан качественно новый класс координационных соединений одновалентной меди, стабилизированных в физиологических средах и проявляющих противоопухолевую активность. Исследована токсичность полученных соединений на клеточных линиях НЕК 293 и выявлено соединение-лидер.
Работа выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (РНФ № 16—33—60166).
С.Ю. Маклакова1, В.В. Топко1, А.В. Пугач1, О.С. Шубернецкая1, Е.К. Белоглазкина12, Н.В. Зык1, В.Э. Котелянский1, А.Г. Мажуга12 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ ЛИГАНДОВ ASGPR ДЛЯ СОЗДАНИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ НАПРАВЛЕННОГО ДЕЙСТВИЯ 1МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия; 2Национальный исследовательский технологический университет «МИСиС», Москва, Россия
Введение. Асиалогликопротеиновый рецептор (ASGPR) широко используется в качестве мишени для направленного транспорта терапевтических агентов в гепа-тоциты. Ранее нами был синтезирован ряд эффективных лигандов данного рецептора. Эта работа посвящена in vitro и in vivo исследованиям способности систем на основе лигандов ASGPR проникать в опухолевые клетки на примере конъюгатов с флуоресцентными красителями.
Цель исследования — синтез и биологическое тестирование конъюгатов лигандов ASGPR с флуоресцентными красителями.
Материалы и методы. Полученные вещества анализировали с помощью спектроскопии ЯМР 'H, масс-спектро-метрии высокого разрешения, ВЭЖХ-МС. В работе использовали клеточные линии HEK-293, Huh7 и HepG2, модель альвеолярного слизистого рака печени РС-1, трансплантированную подкожно крысам Wistar.
Результаты. Исследовано влияние добавления биотина и/или хлорида кальция в культуральную среду на уровень экспрессии ASGPR. Показано, что в обоих случаях количество рецепторов на поверхности клеток Huh7 и HepG2 значительно увеличивается. Использование данных добавок способствует проникновению лигандов ASGPR: после добавления лиганда к клеточным культурам в присутствии биотина и/или хлорида кальция, последующей обработки флуоресцентным красителем и фиксации наблюдалась индукция экспрессии рецептора в клеточных линиях Huh7 и HepG2 (в контрольном эксперименте на клеточной линии HEK-293 сигнал флуоресценции отсутствовал). В in vivo исследованиях использовали конъюгаты флуоресцентного красителя Sulfo-Cy5 c лигандами ASGPR на основе с #-ацетилгалактозамина и #-ацетилглюкозамина (контр-
ольное соединение). Животным внутривенно вводили водный раствор контрольного соединения или исследуемого. Спустя 24 ч после инъекции интенсивность флуоресценции в опухоли была выше в случае конъюгата, содержащего #-ацетилгалактозамин. Синтезированные конъюгаты не проявили токсичности: ни в одной из исследуемых групп не отмечено неспецифической гибели животных.
Заключение. В результате работы показано, что добавление биотина и/или хлорида кальция в среду клеточных линий способствует увеличению количества ASGPR на поверхности и, как следствие, ведет к повышенному проникновению лигандов внутрь клеток. Конъюгаты на основе #-ацетилгалактозамина проникают в клетки рака печени на порядок лучше в сравнении с производными #-ацети-лглюкозамина.
Работа выполнена при поддержке РНФ (грант № 14-34-00017) и РФФИ (грант № 16-33-60166).)
И.А. Мамичев, Е.А. Пономаренко, С.А. Калюжный, Д.В. Новиков, Е.А. Дудко, А.Н. Гришанина, И.Г. Воробьева, М.М. Давыдов, Т.А. Богуш
КОЭКСПРЕССИЯ БЕЛКОВ ПРОМЕЖУТОЧНЫХ ФИЛАМЕНТОВ И БЕТА-Ш ТУБУЛИНА В ТКАНИ НЕМЕЛКОКЛЕТОЧНОГО РАКА ЛЕГКОГО
ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия
Введение. Молекулярная диагностика прогностических маркеров немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) — одно из интенсивно развивающихся направлений трансляционной медицины. Коэкспрессия белков промежуточных филаментов цитокератина и виментина (Цит/Вим), так называемый эпителиально-мезенхималь-ный переход опухолевых клеток эпителиального происхождения, считается неблагоприятным прогностическим признаком, свидетельствующим о повышенном риске ме-тастазирования. Бета-Ш тубулин (ТиВВЗ), изоформа белка микротрубочек бета-тубулина, также ассоциируют с неблагоприятным прогнозом заболевания, так как в литературе описана ассоциация ТиВВЗ с миграцией опухолевых клеток, инвазией и метастазированием.
Цель исследования — оценить корреляционную связь между коэкспрессией Цит/Вим и ТОВВЗ для того, чтобы ответить на вопрос, являются ли эти белки частью единого фенотипического комплекса, характеризующего метастатический потенциал НМРЛ.
Материалы и методы. Количественное иммунофлуо-ресцентное исследование коэкспрессии опухолевых маркеров в 23 хирургических образцах НМРЛ проведено методом проточной цитофлуориметрии (оценка экспрессии Цит/Вим — с использованием двойного окрашивания). В работе применены первичные и вторичные антитела: для ТиВВ — аЬ7751 и аЬ98729 (DyLight650); для Цит — М0821 ДОАКО) и аЬ98729 (DyLight650); для Вим — SP20 (BЮCARE) и аЬ98510 (DyLight650). Количественную обработку данных проводили с помощью программы FlowJo. Уровень экспрессии (количество специфически окрашенных клеток относительно показателя при инкубации с вторичными антителами) анализировали с помощью статистического критерия Колмогорова-Смирнова.
Спецвыпуск/ том 16 / 2017
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
50 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
Результаты Результаты. Наилучшие показатели получены при при- 1. Во всех образцах НМРЛ выявлена в разной степени менении методики СЗД (V25 сердце — 4,26 %, Dmean сер-выраженности коэкспрессия Цит/Вим и TUBB3. дце — 3,13 Гр, DmeanLAD — 13,8 Гр) по сравнению с мето- 2. Средняя доля клеток, экспрессирующих Цит/Вим, дикой ССД (V25 сердце — 9,49 %, Dmean сердце — 4,97 Гр, составила 29,8 ± 17,5 % (4-58 %), а средняя доля клеток, Dmean LAD — 19,55 Гр) и ЖСД-позицией (V25 сердце — экспрессирующих TUBB3, — 39,7 ± 22,3 % (10-72 %). ^V Dmean сердце — 9,06 Гр, Dmean LAD — 24,18 Гр) (V25 3. Корреляционный анализ выявил сильную прямую сердце: p = 0,00153, Dmean сердце: p = 0,000; Dmean LAD: p = корреляцию между уровнем экспрессии в опухоли 0,00088), при включении в объем МЖ и аксиллярных ЛУ. Цит/Вим (показатель уровня эпителиально-мезенхималь- Преимущества дозиметрических показателей ССД и СЗД ного перехода) и TUBB3 (коэффициент корреляции Спир- оставались неизменными при добавлении в объем облуче-мана 0,7; p < 0,00004). ния над- и подключичных ЛУ: методика СЗД (V25 сердце— Заключение. Полученные результаты свидетельствуют 3,49 %, Dmean сердце — 3,07 Гр, Dmean LAD — 13,88 Гр) о комплексном изменении цитоскелета в ткани НМРЛ, по сравнению с методикой ССД (V25 сердце — 7,91 %, Dmean включающем перестройку системы Цит/Вим и TUBB3. сердце — 4,99 Гр, Dmean LAD — 19,89 Гр) (V25 сердце: p = Учитывая прогностически неблагоприятный вклад эпите- 0,00205, Dmean сердце: p = 0,004; Dmean LAD: p = 0,03). лиально-мезенхимального перехода в процесс метастази- Заключение. Облучение в СЗД способствовало стати-рования, можно предположить, что TUBB3 также участву- стически значимому снижению объема сердца, получаюет в реализации метастатического потенциала НМРЛ. щего более 25 Гр, средней дозы на сердце, средней дозы Поддержано РФФИ (гранты №№ 15-04-06991-а, на LAD. Методика проведения ЛТ в ЖСД имела наихуд-16-34-01049-мол-a) и грантом Президента РФ МК- шие результаты по показателям дозо-объемного распреде-7709.2016.7. ления на сердце. Е.А. Маслюкова. Л.И. Корытова, А.В. Бондаренко, Е.А. Маслюкова. Л.И. Корытова, Н.Д. Олтаржевская. О.В. Корытов, А.Р. Ахтемзянов С.В. Одинцова, А.В. Бондаренко, О.В. Корытов ЛУЧЕВАЯ НАГРУЗКА НА СЕРДЦЕ ПРИ ОБЛУЧЕНИИ ПРИМЕНЕНИЕ ВЫСОКОСТРУКТУРИРОВАННЫХ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ГИДРОГЕЛЕЙ С ЦЕЛЬЮ ПРОФИЛАКТИКИ ФГБУ«Российский научный центр радиологии и хирургиче- ЛУЧЕВОГО ЭЗОФАГИТА У ПАЦИЕНТОВ С РАКОМ ских технологий», Санкт-Петербург, Россия МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ Введение. Доказано, что адъювантная лучевая терапия ФГБУ «Российский научный центр радиологии и хирургиче-(ЛТ) рака молочной железы (РМЖ) уменьшает частоту мест- ских технологий», Санкт-Петербург, Россия ных рецидивов и увеличивает показатели общей выживаемо- Введение. Лучевые реакции и осложнения на слизи-сти. При этом не исключено, что ЛТ РМЖ может стать при- стой оболочке пищевода признаны актуальной проблемой чиной развития сердечно-сосудистых заболеваний. Изучение с момента появления мегавольтной лучевой терапии (ЛТ), разных вариантов облучения и позиционирования пациентов которые впервые описаны в середине 50 годов прошлого с целью снижения дозы на органы риска и сравнения покры- века. тия мишени показало, что проведение ЛТ с управляемой Цель исследования — оценить роль многокомпонент-задержкой дыхания приводит к снижению лучевой нагрузки ного высокоструктурированного альгинатного геля в кана сердце, так как на вдохе происходит пространственное честве профилактики лучевого эзофагита. разобщение сердца и облучаемого объема мишени. Материалы и методы. В исследование включены 60 па-Цель исследования — проспективное сравнение 3 различ- циенток, получавшие ЛТ по поводу рака молочной железы ных вариантов полного облучения молочной железы (МЖ) (РМЖ), с включением в поля облучения молочной железы, с/без включения надключичных и подключичных лимфати- подмышечных, над- и подключичных лимфатических уз-ческих узлов (ЛУ): стандартное положение на спине на сво- лов. Облучение проводилось в режиме 3Д — конформная бодном дыхании (ССД), положение на спине с управляемой лучевая терапия на аппарате PRECISE (18 МэВ). Все боль-задержкой дыхания на высоте вдоха (СЗД) и положение ные рандомизированы на 2 группы: исследовательская, на животе (ЖСД). в которой для профилактики эзофагита применяли мно-Материалы и методы. В исследование вошли дозиме- гокомпонентный гель на основе альгината натрия с гидро-трические планы ЛТ 20 пациенток с РМЖ с левосторонней кортизона ацетатом, мексидолом, актовегином и димекси-локализацией. Для каждого случая были рассчитаны 8 до- дом; контрольная группа, в которой профилактика зиметрических планов на основе 3 серий КТ-сканов (РОД не проводилась. Каждой пациентке перед началом лечения 3 Гр, СОДфиз 42 Гр — на МЖ; СОДфиз 39 Гр — на зоны реги- выдан опросник визуально-аналоговой шкалы боли онарного лимфооттока) в положении лежа: 1. ССД, (ВАШ). Степень эзофагита оценивали в соответствии с/без включения в зону облучения над- и подключичных с критериями общей терминологии для неблагоприятных ЛУ (план 1/2); 2. ЖСД с использованием рrone-board событий (СТСАЕ) версии 4.0. с/без включения подмышечных ЛУ (план 3/4); 3. СЗД (пу- Результаты. Группы сопоставимы по возрасту, стадии, тем использования АВС-устройства), с/без включения гистологическому типу опухоли, дозообъемным параме-в зону облучения над- и подключичных ЛУ (ptv 1 см — трам пищевода: Dmean, Dmax, V10, V22, V28, V33. У пациенток план 5/6) и (ptv 0,5 см — план 7/8). Определены Dmean, V25 в контрольной группе боли в горле и нарушение акта гло-для сердца и Dmean для LAD. тания возникали в промежутке начиная с 6-го и до 9-го
Спецвыпуск / том 16 / 2017 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
